侧柏胚性愈伤组织的诱导研究

以侧柏未成熟合子胚、胚根为试材,研究了基本培养基、不同外植体、植物激素、合子胚发育阶段等因素对侧柏愈伤组织诱导的影响.结果表明:未成熟合子胚、胚根在适宜的培养基上都能诱导出愈伤组织,DCR+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.5 g/L谷氨酰胺是未成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率高达96.67％.DCR+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA+0.5 g/L谷氨酰胺是胚根诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率高达93.33％.最佳采样时期为7月3日前后.     

西洋参体细胞胚成熟萌发研究

以西洋参种胚诱导愈伤组织上的体细胞胚(胚状体)为试材,采用离体培养方法,研究胚状体自身发育阶段及用于成熟、萌发生长的培养基的组成因子对其成熟萌发的影响,以期确定最佳的胚状体成熟培养基和萌发培养基。结果表明:发育阶段为鱼雷形的胚状体,是进行成熟培养的最佳材料;胚状体成熟的最佳培养基是0.5M+0.4mg/L 6-BA+2mg/L NAA+5mg/L GA3+1%AC;在此培养基上胚状体生长变大,子叶生长展开,胚芽、胚根肉眼可见;成熟培养基中植物生长调节物质在活性炭作用下缓慢释放并作用于胚状体,达到形成大量正常、健壮、同步胚状体的目的;胚状体萌发的最佳培养基是0.5MA+0.4mg/L 6-BA+2mg/L NAA+5mg/L GA3;在此培养基上胚状体萌发生长,胚芽伸长真叶展开。     

辣椒花药培养影响因素的研究

以6种基因型辣椒的花蕾为材料,比较了不同基因型辣椒花蕾的消毒效果,辣椒基因型及花药接种量对花药培养的影响。研究结果表明,本试验的消毒方法获得了较好的消毒效果,3个基因型材料均未受污染,其他最高的污染率为23.08%;50%的基因型能诱导出胚状体,出胚率1.18%～1.38%,小果型的辣椒不能诱导出胚状体;所有基因型均能诱导出愈伤组织,出愈率17.65%～69.44%;花药接种量对花药愈伤组织诱导有影响,增大接种量,出愈率上升0.77%～13.67%,但对胚状体诱导影响不明显;在愈伤组织的继代培养中,接种量对其生长的影响因基因型不同而不同,所有基因型的愈伤组织在第一次继代培养中均不能分化出胚状体或不定芽。     

香榧体细胞胚发生、发育的形态与细胞学观察

将香榧(Torreya grandis‘Merrillii’)的未成熟合子胚置于SH+0.1 mg·L-1 NAA+500 mg·L-1AC+3%蔗糖+0.5 g·L-1 Gln培养基上暗培养45 d,诱导产生半透明颗粒状胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转入SH+20 g·L-1 PEG+10 mg·L-1 ABA培养基中暗培养3个月诱导体细胞胚。采用碘—碘化钾染色和石蜡切片技术对体胚起源、形态发育与细胞组织学进行了观察。结果表明:胚性愈伤组织起源于合子胚胚轴表皮或皮层细胞的对称分裂。胚性愈伤组织含有两类细胞,一种是细胞质浓厚、细胞核大、体积小的圆形胚性细胞,另一种是高度液泡化拉长的细胞。胚性愈伤组织包含由这两种细胞构成的原胚团Ⅰ、原胚团Ⅱ和原胚团Ⅲ,以及一些游离细胞。原胚团Ⅲ在无植物生长调节剂的SH基本培养基上形成原胚,原胚接入成熟培养基,历经球形、棒状、心形、鱼雷形胚后发育成子叶胚。将子叶胚转入萌发培养基后胚根伸长,胚芽发育长出针叶,形成完整的再生植株。同时在离体培养中合子胚胚柄处退化的裂生多胚也能重新发育形成胚体。在初生体胚发育过程中表面常伴有次生体细胞胚的形成。     

珍稀濒危植物新疆沙冬青胚根愈伤组织诱导及植株再生

以珍稀濒危植物新疆沙冬青种子无菌苗为试材,MS为基本培养基,研究了不同的激素配比对新疆沙冬青胚根愈伤组织和丛芽诱导的影响,以期筛选最佳生根诱导培养基,建立植株再生体系。结果表明:诱导新疆沙冬青胚根形成愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,同时发现该培养基能够高效诱导丛芽的发生;在利用丛芽诱导生根时,筛选出诱导生根的最佳培养基为1/3MS+0.2mg/L IBA。     

山核桃间接体细胞胚发生和植株再生

 以山核桃（Carya cathayensis Sarg.）自然授粉后10周的幼胚为外植体,对影响胚性愈伤组织和体胚发生的主导因子（基本培养基、植物生长调节物质等）进行了比较分析;对影响体胚萌发的脱水处理时间进行了比较;并采用石蜡切片法对幼胚脱分化产生胚性愈伤组织及体胚发生发育过程进行了组织细胞学观察。结果表明,幼胚胚轴和子叶接种在基本培养基1/2 MS上,胚性愈伤组织诱导率显著高于其它处理,达45.3%。接种于基本培养基DW中的幼胚体细胞胚诱导率显著高于其它培养基处理,达16.7%。显微镜下可观察到球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚。培养基添加1.0 mg · L-1 6-BA和0.01 mg · L-1 picloram（氨氯吡啶酸）组合时,胚性愈伤组织诱导率最高,为48.6%;而1.0 mg · L-1 6-BA与0.001 mg · L-1 picloram组合,体胚诱导率最高,为23.6%。体细胞胚发生方式属于间接体胚发生。用饱和Ca(NO3)2 · 4H2O对体胚进行脱水处理,脱水处理3 d后萌发率为39.03%,显著高于对照及其余处理。将脱水处理后的体胚接种至WPM基本培养基中,光照条件下培养,10周后可长成具3 ~ 4片真叶的完整植株。     

白象牙杧幼胚愈伤组织诱导研究初报

以白象牙杧幼胚为外植体,研究不同植物生长调节剂配比培养基对其胚性愈伤组织的诱导。结果表明,2,4-D对白象牙杧幼胚愈伤组织诱导作用显著。诱导愈伤组织的最佳培养基为B5+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,出愈率达到75.00%。     

影响油桃叶片产生胚性愈伤组织的因素

以早熟油桃华光和曙光为试材,对影响早熟油桃叶片产生胚性愈伤的基本培养基、外源激素、碳源、环境(光照强度,温度,暗培养时间)等因素进行研究,结果表明:碳源对两种油桃叶片胚性愈伤的诱导影响不显著,其他影响因子对油桃叶片胚性愈伤的诱导均显著。其中华光和曙光在暗培养21d时,产生的有效愈伤较其他处理有极显著差异,有利于有效愈伤的产生;外源激素对诱导桃叶片产生胚性愈伤组织影响显著,NAA不是影响胚性愈伤产生的主效因子;基本培养基中,QL,1/2MS培养基有利于华光胚性愈伤的发育,QL,LP培养基有利于曙光胚性愈伤的发育;当温度在24￣27.5℃时,光照强度为2000lx,有利于胚性愈伤组织的诱导及生长;接种方式上,叶背横切,叶面贴于培养基表面的接种方法易产生胚性愈伤。实验中发现:叶背横切,叶面接于G+2.5mg/LBA+0.5mg/LIBA培养基上,暗培养21d,转入1/2MS+2.0mg/lTDZ+2.0mg/LBA+0.5mg/LNAA的培养基中,温度控制在24￣27.5℃,光照强度为2000lx时,愈伤组织发育良好,获得高频胚性愈伤,进一步分化产生8%的不定芽。     

淡水沙梨离体叶片愈伤组织诱导技术

以淡水沙梨离体叶片为外植体,以MS和White培养基为基本培养基,研究了不同浓度6-BA、NAA等植物生长调节剂及不同接种方式对淡水沙梨继代培养离体叶片的影响。结果表明:MS和White培养基中淡水沙梨的叶片愈伤组织诱导率分别为72.4%和30.9%,叶片最佳愈伤组织诱导配方为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1),20d叶龄叶片愈伤组织诱导率为100.0%,40d叶龄叶片愈伤组织诱导率为60.0%,叶片远轴面平贴愈伤组织诱导率为100.0%,叶片近轴面平贴、叶片直插时愈伤组织诱导率分别为78.3%和50.0%。淡水沙梨离体叶片培养中MS培养基较White利于愈伤组织诱导,叶龄较小进行培养愈伤组织诱导率较高,叶片远轴面平贴的接种方式更适合于叶片的离体培养。     

葡萄花器官体细胞胚的诱导和植株再生

通过探索感病葡萄体细胞胚发生途径建立再生体系,为葡萄抗病基因转化提供受体材料与理论依据。通过对小孢子显微观察确定最佳取样时期,取雌蕊、雄蕊和小花蕾作为外植体,用2种消毒方法消毒后,对比污染率,接种于4种不同的愈伤诱导培养基中,将诱导出的愈伤全部转移到体胚诱导培养基中,对体胚的不同发育时期进行观察,并比较4种不同培养基对...