影响牛卵母细胞孤雌激活胚胎发育的因素

卵母细胞体外成熟后孤雌激活发育是一个新兴的研究方向,影响牛卵母细胞孤雌激活发育因素很多,国内此方面的报道较少,文中就牛卵母细胞体外成熟后孤雌激活胚胎发育的影响因素进行总结。旨在为研究体外孤雌胚发育和孤雌胚胎的培养提供参考。     

绵羊卵母细胞的孤雌激活

本文探讨了不同激活方法对绵羊卵母细胞的孤雌激活和其后的发育。结果表明 ,电激活可以激活绵羊卵母细胞孤雌发育到囊胚 ;Ca2 + 载体A2 3187和CHX组合 ,Ionomycin和 6 DMAP组合可以激活绵羊卵母细胞 ,其卵裂率与电激活相比差异显著。 7%乙醇激活绵羊卵母细胞 7min效果较好。不同场强、不同脉冲次数对绵羊卵母细胞激活都有影响 ,以 1.2kV/cm ,间隔 30 μs和 3次脉冲效果较好。而电激活与化学激活联合可以更好的激活绵羊卵母细胞     

对牛卵母细胞孤雌激活条件优化的研究

本文探讨了HYA（透明质酸酶）的浓度和作用时间对牛体外成熟卵母细胞脱卵丘的影响,不同强度电脉冲＋乙醇＋6-DMAP对牛体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用以及和乙醇＋6-DMAP激活的比较。对电融合脉冲强度和脉冲次数进行了优化。结果表明：卵母细胞成熟培养22h,用0．20％HYA作用10min或0．50％HYA作用5min效果较好。在激活电压1．6kV/cm、20μs／次、间隔1s,脉冲次数为1次的条件下的激活效果较好,在此条件下与乙醇＋6-DMAP激活相比较,孤雌激活胚胎的囊胚率分别为19．6％和26．9％,差异不显著。     

牛卵母细胞的孤雌激活研究

本文探讨了透明质酸酶(HYA)的浓度和作用时间对牛体外成熟卵母细胞脱卵丘的影响,不同强度电脉冲 乙醇 6-DMAP对牛体外成熟卵母细胞的孤雌激活作用以及和乙醇 6-DMAP激活的比较。对电融合脉冲强度、脉冲次数进行了优化。结果表明:卵母细胞成熟培养22h,用0.20%HYA作用10min或0.50%HYA作用5min效果较好。在激活电压1.6kV/cm、20μs/次、间隔1s,脉冲次数为1次的条件下的激活效果较好,在此条件下与乙醇 6-DMAP激活相比较,孤雌激活胚胎的囊胚率分别为19.6%和26.9%,差异不显著。     

透明质酸酶对牛卵母细胞孤雌激活的研究

在37－39℃50mL/L CO2条件下，用含80mL/L发情牛血清及50mL/L犊牛血清的M199成熟培养液培养牛的A、B级卵丘－卵母细胞复合体（COCs)，18－22h后以无血清的TCM199培养液洗涤3次，用透明质酸酶消化吹打脱去卵丘细胞，以无血清的M199培养液洗涤3次，移回成熟培养液中培养。结果：卵细胞于成熟后第3d开始出现卵裂，第5d卵裂率达到37％，第9d囊胚率达5％－9％。表明透明质酸酶可以促使成熟的牛孤雌卵母细胞激活并发育至囊胚。     

NGF对牛体外受精和孤雌激活早期胚胎发育的影响

在牛胚胎培养液中分别添加5、10、15、20μg/L神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）,观察其对牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响。结果显示：培养液中添加10μg/L NGF,可显著提高牛卵母细胞体外受精囊胚率（35.0%vs 50.0%,0.010.05）。结果表明,10μg/L NGF可促进牛体外受精和孤雌激活早期的胚胎发育。     

绵羊磷脂酶C zeta基因对绵羊卵母细胞孤雌激活的初步研究

旨在应用绵羊磷脂酶C zeta(PLCζ)基因对绵羊卵母细胞进行激活,探究是否可以作为一种新的卵母细胞激活物质。本研究构建了pEGFP-N1-PLCζ重组质粒,并将质粒注入绵羊MⅡ期卵母细胞,观察及统计PLCζ对卵母细胞的激活效果和胚胎发育的影响。结果表明,pEGFP-N1-PLCζ重组质粒可在卵母细胞中表达,并可自发激活卵母细胞孤雌发育。     

不同激活条件和培养基对兔卵母细胞孤雌激活和胚胎发育的影响

对新西兰兔成熟卵母细胞在不同方式激活后的发育潜能和孤雌胚胎在不同培养体系中的发育进行了研究。结果发现电击激活和化学激活单独使用不能很好的激活兔卵母细胞,两次电击和化学激活配合使用能够较好的激活兔卵母细胞。通过比较发现B2培养基支持兔孤雌胚胎发育的能力显著高于其他培养基。试验建立了和体内受精时间过程相似的卵母细胞活化和培养系统,为兔的核移植技术优化了条件。     

牛、羊卵母细胞孤雌激活的研究

本试验主要比较了离子霉素、电脉冲两种方法激活牛、羊体外成熟卵母细胞的效率。两种激活方法中。牛胚胎卵裂率无显著差异（90．61％对94．40％，P〉0．05），而离子霉素激活胚胎的囊胚发育率极显著高于电激活方法（12．3％对2．4％，P〈0．01）。两种方法对羊胚胎的研究中，羊胚胎卵裂率无显著差异（72．4％对77．4％，P〉0．05）。但是离子霉素激活胚胎的囊胚发育率显著高于电激活方法（3．67％对10．40％，P〈0．05）。本试验中还比较了用化学激活法（离子霉素）激活牛体外成熟卵母细胞后，用SOFaa体系培养，换液与不换液对孤雌激活胚胎体外发育的影响。结果表明：在第4天不换液的胚胎卵裂率和囊胚率极显著高于换液的胚胎（11．64％对3．49％。P〈0．01）。     

放线菌酮处理对猪孤雌激活及体细胞核移植胚胎发育的影响

为研究放线菌酮(CHX)在猪卵母细胞孤雌激活和体细胞核移植中的作用效果,并验证其对胚胎发育的促进作用,实验对比体外成熟的猪卵母细胞经电激活后结合6-二甲氨基嘌呤(6-D)、细胞松弛素B(CB)或CHX激活后的孤雌囊胚率,及3种激活药物对体细胞核移植重构胚的发育能力的影响;在孤雌激活前用CHX预处理卵母细胞5 min,研究其对孤雌激活后胚胎发育能力的影响。结果表明:在孤雌激活过程中,CHX在激活8 h条件下囊胚率为48.0%,而CB和6-D处理4 h即可达55.2%和63.3%。而在体细胞核移植重构胚的激活中,采用CHX进行激活囊胚率为19.6%,高于CB的10.5%和6-D的16.5%,各组间差异显著(P>0.05)。孤雌激活前,卵母细胞经CHX预处理15 min可以提高CB或CHX激活的孤雌囊胚率。结果说明,CHX在孤雌激活能力较差,但对胚胎发育具有一定保护和促进作用。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展

本文对哺乳动物卵母细胞孤雌激活机制、激活方法及激活效果的影响因素等作了浅要的综述和总结。     

孤雌激活的研究进展

研究哺乳动物卵母细胞的激活及其以后的孤雌胚发育,有利于探索卵母细胞的生理反应,分析理化激活和精子激活的特征,对阐明哺乳动物卵激活、受精与发育机理等,均有十分重要的意义。许多物理和化学方法可以人工激活卵母细胞。笔者对近年来孤雌激活的研究进行了综述,为寻找一种最佳的人工激活方法,进一步提高核移植技术的成功率,提供技术参考。     

序贯培养法对猪孤雌激活胚胎发育能力的影响

经体外成熟、孤雌激活和培养获得猪胚胎,研究了不同培养体系、共培养体细胞和序贯培养对猪孤雌激活胚胎发育的影响。试验表明:孤雌激活卵母细胞在SOF 10?S培养体系中分裂效果最好,添加胎牛血清的NCSU-23和颗粒细胞对胚胎发育有促进作用,培养6d后发育到桑囊胚的比率增加(P<0.05)。在序贯培养的前3d,SOF培养基(不含葡萄糖)和颗粒细胞对胚胎的发育有促进作用,分裂率(P<0.05)和突破4细胞阻滞的数目显著增加,在培养的后3d,添加胎牛血清的NCSU-23和输卵管上皮细胞能支持较多胚胎发育到桑囊胚,桑囊胚的发育率为(59.5±3.2)%(P<0.05)。结果表明,SOF培养基和颗粒细胞 添加胎牛血清的NCSU-23和输卵管上皮细胞的序贯培养系统能较好的促进胚胎的发育。     

体外成熟对牛卵母细胞孤雌激活后发育潜力的影响

本试验在卵母细胞体外成熟的研究基础上,研究了培养用水、卵泡液和成熟时间对卵母细胞体外成熟及孤雌激活后发育潜力的影响.结果表明(1)将卵母细胞分别于蒸馏水和Milli-Q超纯水配制的成熟培养液中培养22～24 h, 孤雌激活后, 卵裂率无显著差异(P>0.05); 但孤雌卵在超纯水配制的胚胎培养液中培养,囊胚发育率为22.3%, 明显高于在蒸馏水配制的培养液中的囊胚发育率14.1%(P<0.05).(2)在成熟培养液中添加10%、20%卵泡液,成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(32.3%, 30.9%)明显高于添加5%和0%卵泡液组的囊胚发育率(21.8%, 22.7%,P<0.05).卵母细胞在添加20%卵泡液的培养液中成熟培养,孤雌激活后囊胚孵化率明显低于添加0、5%、10%卵泡液组的囊胚孵化率(P<0.05).(3)成熟28 h或30 h的卵母细胞孤雌激活后,其囊胚发育率(30.5%或29.4%)明显高于成熟24 h或26 h组的囊胚发育率(20.5%或22.1%,P<0.05).     

热激损伤对牛孤雌激活胚胎后续发育的影响

为了研究早期胚胎核与胞质对热激的应激反应,以及产生应激后二者之间的相互作用对胚胎体外发育、合子期激活基因的表达及胚胎细胞凋亡的影响。本研究将孤雌激活胚随机分为2组分别于38.5或41℃培养7h;随后将二者核进行置换,使用正常培养的胚胎与热激胚胎进行核置换,分别构建热激核-正常胞质重构胚以及热激胞质-正常核重构胚,检测了核质置换胚胎的体外发育率、合子激活基因的表达和胚胎凋亡情况。结果,当正常核移入41℃热激的卵胞质,重构胚的发育率显著下降;热激后的核质置换胚胎中存在合子基因激活不完全的现象,这种情况主要存在于热激胞质-正常核重构胚中;热激能诱导胚胎发生细胞凋亡,早期胚胎的胞质对热激更敏感,并在后期的诱导凋亡中起到主导作用。这些结果表明,虽然热激对核和胞质都有损伤,但胞质对热激损伤更为敏感。早期胚胎受到热激后导致发育能力降低的易感性主要是由胞质所引起的;早期胚胎受到热激可能会损伤到卵胞质中的母源因子,即使与正常核构成重构胚也依然会导致合子基因表达异常;并且胞质受到热激损伤会在热激诱导的凋亡机制中起到比核更大的作用。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究

研究哺乳动物卵母细胞的激活及孤雌胚发育,对了解哺乳动物早期胚胎发育、深入细致地研究核移植技术和动物克隆技术、建立生产孤雌哺乳动物品系及加速家畜育种进程等均具有重要意义。本文主要从卵母细胞孤雌激活的机制及影响因素、不同动物卵母细胞的激活、提高卵母细胞孤雌激活效果的技术途径以及对孤雌激活的研究意义和发展前景等方面作了详尽论述,为同类研究提供参考。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展

本文概述了卵母细胞孤雌激活的研究历程,并从激活机制、激活方法及影响因素等方面对孤雌激活的研究意义和发展前景进行了综述。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展

本文主要从卵母细胞孤雌激活机制、方法及影响因素,对孤雌激活的研究意义和发展前景等方面作一综述。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展

本文对哺乳动物卵母细胞孤雌激活机制、激活方法及激活效果的影响因素等作了浅要的综述和总结。     

小鼠卵母细胞孤雌激活试验

应用两种激活方法(乙醇和离子霉素 6-DMAP)激活和三种培养液(CZB，KSOM，M199)对90只小鼠卵母细胞进行了孤雌激活研究。结果显示，离子霉素结合6-DMAP的激活效果高于乙醇；三种培养液中，以CZB激活效果较为理想。在随后的卵母细胞发育率方面，CZB、KSOM和M199三者之间的差异极为明显，以CZB最高，KSOM次之，M199的发育率最低。