水稻纹枯病菌拮抗芽孢杆菌的筛选及鉴定

为充分发掘利用水稻田已有的有益微生物资源,获得水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)的拮抗芽孢杆菌菌株,从四川农业大学水稻试验田中采集根际土样,采用稀释平板法在LB培养基上分离得到96株芽孢杆菌菌株。采用平板对峙法,将水稻纹枯病菌标准菌株R.solani AG1 IA与待测芽孢杆菌菌株共培养,得到1株对R.solani AG1 IA具有强拮抗作用的芽孢杆菌菌株Q9-0-1,并以形态学特征、生理生化特性为基础,结合gyr B基因序列分析,将其鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。     

水稻纹枯病拮抗细菌的评价与利用

 从稻田土壤、纹枯菌菌核、病斑和水稻植株上共分离获得1437个细菌分离物。在离体条件下测定它们对水稻纹枯菌的拮抗能力。其中拮抗能力强的菌株61个,占4.8％;没有拮抗作用的菌株有486个,占38.1％;其余57％的菌株是略有拮抗作用。24个菌株对水稻纹枯病的防治效果的盆栽生物测定表明,其中有9个菌株的防效在60％以上。挑选了6个菌株在田间进一步测试其防效,结果证实了B916对水稻纹枯病的防治效果最好。1994～1997年连续4年在姜堰、吴江和句容3个基点示范推广使用B916发酵液防治水稻纹枯病,累计面积为2000 hm2以上。大田示范试验结果表明,拮抗菌B916发酵液能够有效地控制水稻纹枯病的为害,防效为50.0%～81.9%。     

拮抗细菌的分泌物拮抗素JK-91-b对水稻纹枯病菌抗生活性试验

拮抗细菌的分泌物拮抗素ＪＫ—９１—ｂ对水稻纹枯病菌抗生活性试验陈志谊，高先亭，陈毓苓，殷尚智（江苏省农业科学院，南京２１００１４；）（江苏农学院，扬州２２５００１）关键词拮抗素；抗生活性；水稻纹枯病ＡＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＥｘｕｄａｔｅｏｆＡｎｔｉｂｉ...     

玉米大斑病拮抗细菌的分离与筛选

采用土壤稀释法从玉米根际土壤中分离得到1 182株细菌菌株,从中筛选对玉米大斑病菌具有较强拮抗的菌株24个。对24株拮抗菌抗菌谱的测定结果表明,KD16-13、KJ2-01对水稻稻瘟病菌、马铃薯早疫病菌、水稻纹枯病菌、尖孢镰刀菌、禾谷镰刀菌、链格孢菌、番茄枯萎病菌具有较强的拮抗作用且抑菌效果明显。     

用木霉、类木霉对水稻纹枯病进行生物防治的研究

从腐烂稻草上分离到6个对水稻纹枯病菌有较强拮抗作用的菌株,经室内初步鉴定属于木霉、类木霉,经PDA平板拮抗试验表明,黄绿木霉的T3菌株抑菌率最大,为52.54%。纤维素酶活力测定试验表明,钩状木霉>黄绿木霉>绿粘帚霉,与抑菌试验结果并不同。田间试验结果表明它们对水稻纹枯病具有一定防效,以T1～T6混合菌喷施处理防效最好,可达32.25%,并对结实率和千粒重等产量因素有较大提高作用。     

枯草芽孢杆菌A30菌株产生的拮抗肽的分离纯化与理化性质研究

平皿测试表明Bacillus subtilis A30菌株对多种植物病原真菌,例如水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）等有强烈抑制作用。在小区试验中A30菌液对水稻纹枯病也表现出了较好的防治效果。A30菌株培养液经硫酸铵沉淀、FPLC疏水色谱、HPLC反相色谱后,纯化得到一种拮抗活性物质,命名为P1。P1对热稳定,对蛋白酶不敏感;茚三酮反应呈阴性,用酸水解后茚三酮反应和双缩脲反应呈阳性。经LC-ESI-MS分析初步判断P1的分子量为1476.7 Da。     

在水稻生态系统中纹枯病拮抗细菌的分布和种类

 通过对从菲律宾Laguna省水稻植株上分离获得的700个细菌菌株进行离体与生物测定发现,在水稻生态系统中,存在着大量格兰氏阴性、非致病性、对纹枯病有拮抗作用的细菌微生物。根据拮抗细菌分离来源分析结果表明,从病株和水稻生长后期能分离到比健株和生长前期更多的拮抗细菌。用Biolog的方法测定了195个细菌菌株的种类。在147个格兰氏阴性菌株中有13个属39个种,在48个格兰氏阳性菌株中有8个属13个种。在195个被测菌株中有20个菌株对纹枯病菌具有较强的拮抗作用,它们分别归属于7个属12个种。     

水稻富含半胱氨酸类受体激酶家族基因对纹枯病菌和植物激素的响应特征分析

【目的】明确水稻富含半胱氨酸类受体激酶（Cysteine-rich receptor-like kinases,CRK）家族基因对纹枯病菌侵染和植物激素的响应特征,是解析CRK在水稻纹枯病抗性中的功能的重要前期工作。【方法】利用生物信息学方法构建了水稻45个CRK的系统发育树,并利用qPCR分析了它们对纹枯病菌和对植物激素乙烯（Ethylene,ET）、茉莉酸（Jasmonic acid,JA）、水杨酸（Salicylic acid,SA）和细胞分裂素（Cytokinin,CK）等的响应特征,以及在水稻不同组织中的表达模式。【结果】水稻CRK家族可分为4个组,在染色体上成簇或紧密分布的CRK大部分来自同一组或同一分支。41个CRK响应纹枯病菌侵染,其中17个响应强烈;结合组织表达模式,发现这17个CRK基因中,CRK15、CRK23、CRK24、CRK26、CRK27、CRK28、CRK29、CRK30、CRK31和CRK33等10个基因在叶鞘和叶片中表达较强,暗示这些基因可能参与了对纹枯病的抗性;大部分同一分支的两个同源性较高的CRK对纹枯病菌的响应特征类似, 表明这些CRK基因在调控纹枯病抗性上可能存在功能冗余。40个CRK对3种或4种植物激素均有响应,它们对不同激素的响应存在差异性,说明CRK可能广泛参与这些激素介导的防御信号途径;对JA和SA响应相反的有17个,对JA和SA、ET和JA、ET和SA响应类似的分别有21、21、23个。这不仅反映了ET、JA、SA信号途径间的协同和拮抗作用,也说明这些基因可能参与ET、JA和SA间的交互作用。【结论】鉴定到一些可能参与调控水稻纹枯病抗性的CRK基因,且它们可能在植物激素介导的防御途径中起作用。这为我们进一步探索CRK在调控水稻纹枯病抗性上的功能提供了科学线索。     

茶白星病拮抗放线菌的初步筛选

从茶园土壤分离到62株放线菌株,采用平板对峙培养法对茶白星病（Phyllosticta theafolia Hara）进行拮抗放线菌的筛选。结果表明,共获得拮抗放线菌菌株9株,编号分别为：F1、F2、F3、F5、F8、F11、F15、F57、F59,其中菌株F1、F2、F3、F5、F8抑菌活性强且抑菌谱广,对辣椒炭疽病菌 （Colletotrichum capsici ）,烟草黑胫病菌（Phytophthora var.nicotianae）,水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）、黄瓜腐霉病菌（Pythium aphanidermatum）亦有较好的拮抗作用。     

10％井·蜡芽菌悬浮剂防治水稻纹枯病试验初报

为贯彻落实“绿色植保”理念,研究生物农药对水稻纹枯病的防治效果,开展了10％井·蜡芽菌悬浮剂防治水稻纹枯病试验。结果表明,10％井·蜡芽菌悬浮剂（150ml／667m^2）破口前7d施药,防治水稻纹枯病效果优于30％苯醚甲环唑·丙环唑乳油（15ml／667m^2）和10％井·蜡芽菌悬浮剂（100ml／667m^2）。     

BT型杂交粳稻育性及其三系的若干蛋白质标记

 用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法，对粳稻BT 细胞质雄性不育系六千辛A，保持系六千辛B，恢复系六千辛R、77302-1，以及杂交组合六千辛A/77302-1的F1和F2 种子的胚乳贮藏蛋白进行了分析。结果表明，在谷蛋白α3区域，恢复系有两条带α3a 和α3b,而六千辛A和六千辛B只有一条带α3。 F2代具有α3的种子和具有α3a 加α3b的种子1∶1分离。谷蛋白α4带的移动速率，恢复系比六千辛A快。把较快的α4带记为α4f。 F2代具有α4的种子和具有α4 加α4f的种子也是1∶1分离，与配子体不育类型的F2代花粉育性恢复基因分离比一致。系谱分析表明六千辛R中α3a 和α3b来源于IR8。六千辛A比六千辛B容易提取醇溶蛋白。     

杂交粳稻同核异质不育系细胞质效应的研究

 以具有ChinsurahBoroⅡ（BT）、滇型（D）、野败型（WA）和野栽型（WC）4种不育细胞质的不育系南粳11A和南粳34A及其相应保持系与77302－1、宁恢3－2、C57和C堡4个恢复系配制的杂种F₁为材料,探讨了不育系细胞质对F₁代12个性状的遗传效应。不育系细胞质对F₁代的株高、穗颈长、每稳实粒数、结实率、收获指数和单株产量等性状有明显的负效应,而对稳数、每穗总粒数、千粒重和生物产量则有明显的正效应。不育系细胞质的这种遗传效应随细胞质来源的不同表现明显的差异,D型和BT型细胞质在多数性状上的表现优于WA型和WC型细胞质。此外,不育系细胞质与保持系细胞核和恢复系细胞核及三者之间的互作在多数性状上也有明显差异。     

受GA3诱导的一个水稻伸长相关基因的初步鉴定

 采用mRNA 差异显示技术对受GA₃ 诱导的水稻伸长相关基因进行了分离和鉴定。经100 个引物组合差异显示,在获得21 个受GA₃ 诱导表达的cDNA 片段的基础上, 对其中的GA 15b 片段克隆进行了序列测定。其序列经国际联网BLAST 查询表明GA 15b 为伸展蛋白类似蛋白的候选基因片段。定量PCR 进一步确证GA 15b 受GA₃ 所诱导。Southern 杂交表明GA 15b 以多拷贝形式存在。     

水稻高无机磷突变体的筛选和培育技术研究

 摘要: 以3份水稻诱变群体为材料，详细研究了M2~M5代高无机磷(high inorganic phosphorus, HIP)种子出现的频率和传递特征。这些材料来自含水量约13.5%的水稻干种子用300 Gy 60Co伽玛射线 （剂量率0.8 Gy/min）处理，或经250 Gy 处理后再对其萌动种子用1×10-3 mol/L的 NaN3 溶液常温下处理2 h所得M1的后代。在96 孔V型酶标板上， 设置5个用KH2PO4配制的标准P溶液，浓度相当于种子磷含量0.00、 0.15、 0.46、 0.93和1.39 mg/g。分析时每个单株分析8粒种子，无机P（iP）高于0.46 mg/g的籽粒称为高无机磷（HIP）种子，出现至少1粒HIP M3种子的M2单株称为HIP M2单株，M3及高代由此类推。研究发现，从HIP M2单株衍生的M3株系中，HIP株系数要少于HIP M2单株数。但是多数M3 HIP株系后代都获得了更高代的HIP株系。根据M3和M4 HIP株系数推算，水稻HIP突变的实际频率可达0.1%左右。已从籼稻协青早B和粳稻秀水110中各选得一个HIP纯合突变系HIPi1和HIPj1。对HIPi1糙米中各种磷素定量分析表明，突变体中植酸磷含量较对照下降约35%，无机磷含量上升约3.5倍，而总磷基本不变。最后提出了水稻HIP突变体诱发、筛选和选择的基本方法和程序。     

富含抗性淀粉水稻突变体的淀粉特性

 从杂交水稻优异恢复系R7954诱变筛选了1个富含抗性淀粉的突变体RS111。该突变体热米饭中抗性淀粉的含量高达7.0%，是其野生型的2.4倍。突变体的淀粉颗粒形态、DSC和多晶衍射的曲线和参数与野生型明显不同，表现为淀粉颗粒大小较为一致，圆形和卵形淀粉颗粒所占比率较高，溶晶起始温度(TO)、最高温度(TP)、回落温度(TC)、焓变(ΔHGEL)及结晶度更低。突变体的表观直链淀粉、粗脂肪和粗纤维的含量显著提高。     

Physical behavior of purified and crude wax obtained from Sunflower (Helianthus annuus) seed oil refineries and seed hulls

The sunflower seed waxes obtained from two sources (i) seed hull as astandard and (ii) crude wax from oil refineries were studied for theircrystallization, melting characteristics and morphology of crystals. Theresults of differential scanning calorimetry of wax obtained from seed hullsshowed the melting temperature range of 13.18 ^°C with the onsetat 62.32 ^°C, for purified wax, compared to the melting range of24.73 ^°C with the onset at 42.3 ^°C, for crude wax. Theenthalpy of fusion for both waxes were 57.55 mcal/mg and 7.63 mcal/mg,respectively. The DSC melt crystallization temperature range was15.79 ^°C with the onset of 64.58 ^°C for purified wax andtemperature range of 31.45 ^°C with an onset of 57.76 ^°C forcrude wax. A similar pattern was observed of wax obtained from thecrude wax of oil refineries. The enthalpy of crystallization was –64.27mcal/mg and –7.67 mcal/mg, respectively. The purified wax obtained fromthe two sources (i) and (ii) were comparable with completion temperaturesof 75.5 ^°C and 75.1 ^°C, respectively. The effect of inhibitor(lecithin) on crystallization of purified wax under light microscope andsurface structure by scanning electron microscope were observed. Lecithinat 0.2% inhibited the crystallization but nucleation was unaltered. Thewax crystal was inhibited to around 60% of the original size with 0.2%lecithin. It is concluded that the sunflower waxes studied were notcomparable in their crystal properties of crude and purified states.Lecithin inhibited the crystallization of sunflower seed wax.     

拮抗香蕉枯萎病菌的解淀粉芽孢杆菌LX1菌株的鉴定及其抗菌蛋白基因的克隆

收集海南不同盐碱地的土样进行拮抗香蕉枯萎病菌的微生物分离,对具有较强抑菌作用的菌株进行形态特征、生理生化和分子鉴定,并克隆其抗菌蛋白基因.结果分离到1株具有较强抑制香蕉枯萎病菌能力的细菌LXl,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).抑菌实验发现LX1菌株的发酵上清液中粗蛋白有一定的抑菌作用,经过Sephacryl S-200HR柱层析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化了其中抑菌作用最强的抗菌蛋白.质谱鉴定结果表明,抗菌蛋白与B.amyloliquefaciens FZB42内切葡聚糖酶同源性最高.根据质谱结果克隆了该抗菌蛋白的编码基因,该基因的核苷酸和氨基酸序列与B.amyloliquefaciens FZB42的内切葡聚糖酶的核苷酸和氨基酸序列同源性分别达99％和100％.拮抗香蕉枯萎病菌的芽孢杆菌LX1可作为潜在的防治香蕉枯萎病的的生防制剂,其抗菌蛋白基因也可通过遗传工程应用于香蕉枯萎病的防治.     

江苏省稻瘟病菌群体分布及优势小种的毒力研究

用中国7个统一鉴别品种对2000~2002年江苏省5大稻区采集的342个稻瘟病菌单孢分离菌株进行了小种鉴定。结果表明3年累计出现7群30个小种,其中ZG1为优势小种,3年的频率分别为65.00%、56.90%和60.38%,ZB群和ZC群生理小种也是重要的小种类型,有较高的出现频率。用130个ZG1小种的菌株对日本13个已知抗性基因品种进行毒力测定,出现42种类型毒力,其中30.77％的ZG1小种的菌株同时对品种新2号（Pita-k[sup]s[/sup],Pi-sh）、K1（Pi-ta）、Pi-4号（Pi-ta[sup]2[/sup],Pi-sh）致病,为优势毒力类型, 表明品种新2号（Pita-ks,Pi-sh）、K1（Pi-ta）、Pi-4号（Pi-ta[sup]2[/sup],Pi-sh)与江苏省稻瘟病菌有较高的适合度。品种K3（Pi-k[sup]h[/sup]）在江苏省有较好的抗性,其抗性频率为100%。用两种毒力类型的不同菌株2003-184(ZC[sub]5[/sub])和 2003-14-1(ZG[sub]1[/sub]) 混合接种13个日本已知抗性基因品种后,发现对上述两个单个菌株表现抗病的K3（Pi-k[sup]h[/sup]）品种表现为感病,提示不同毒力的菌株之间的相互作用导致菌株毒力的改变可能是品种抗性丧失的原因之一。     

杂交稻旗叶衰老过程中超氧自由基与超氧物岐化酶活性的变化

The O₂^- production, scavenging capacity, photooxidation, protein content, and SOD activity were studied in leaves of Yayou 2 (indica-japonica hybrid rice) and Shanyou 63 (indica hybrid rice) at filling stage. It was shown that protein content decreased gradually with days of heading in two varieties in natural condition, and the decrease in Shanyou 63 was more than that in Yayou 2. The rate of O₂^- production and SOD activity increased from heading to 20 days after heading, then decreases but still maintained certain levels until 30 days after heading in two varieties. O₂^- production rate in Shanyou 63 was more than that of Yayou 2, but SOD activity was contrary in two varieties. In addition, the change of O₂^- and SOD under photooxidation condition was consistent with the tendency above under natural condition. It was also shown that there was negative correlation between protein degradation and O₂^- / SOD in the process of senescence in flag leaves after 20 days of heading. It is suggested that O₂^-/SOD could be used as an index of scavenging ability for O₂^- during senescence in rice.     

籼粳杂交后代幼苗NH4＋吸收、同化的效率

 以籼稻广陆矮4号为母本与粳稻黄金光、笹锦为父本的杂交后代作试验材料。试验结果表明，籼粳杂交后代幼苗的生长大干它的亲本。杂交后代和它的亲本在NH4吸收速率上的差异为：母本（籼）>杂交后代>父本(粳)。杂交后代和母本在NH₄吸收速率上的差异小于和父本的差异．可能母本对杂交后代在NH₄吸收速率上的影响大于父本。NH₄吸收的Km杂交后代<父本<母本。Im是母本>杂交后代>父本，但母本与杂交后代之间的差异较小。杂交后代NH₄的吸收具有偏低的Km，偏高的Im，有较高的NH₄吸收效率。NH₄同化效率，杂交后代有杂种优势，比亲本高10%上下。