茶皂素对豫南地区猪源细菌抑菌效果的研究

为研究茶皂素制剂的抑菌效果,将60%茶皂素配制成不同浓度的试剂,对豫南地区分离到的猪源大肠杆菌、链球菌、葡萄球菌、沙门氏杆菌进行抑菌效果的研究。药敏试验结果显示,60%茶皂素对大肠杆菌具有抑菌效果,对葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌抑菌效果不明显。     

皱纹盘鲍副肌球蛋白的分离纯化及初步性质研究

为了研究鲍鱼肌原纤维中副肌球蛋白(PM)的性质,以皱纹盘鲍为原料,采用硫酸铵盐析和羟基磷灰石柱层析相结合的方法,从肌肉中纯化得到PM。利用肽质量指纹图谱测定其内部肽片段氨基酸序列;采用双向电泳测定其等电点;用圆二色谱研究其二级结构特征,进一步利用红外光谱对其官能团进行表征。SDS-PAGE结果显示,PM分子量约为97.0 ku。肽质量指纹图谱分析获得36条肽段共403个氨基酸残基,与盘鲍和太平洋牡蛎PM的一致性分别为99.7%和72.0%,表明纯化蛋白确为PM。双向电泳测得PM等电点约为5.4,证明其为一种酸性蛋白。圆二色谱结果显示,PM溶液在192 nm处有一正吸收峰,在208和223 nm处各有一负吸收峰,具有典型α-螺旋结构的特征谱峰型;其热变性温度为58.1°C。红外光谱分析结果进一步证实,PM具有完整的α螺旋结构。对鲍鱼PM理化特性进行研究,可为鲍鱼质构相关研究及鲍鱼制品深加工提供一定的理论基础。     

茶皂素在刺参苗期对玻璃海鞘杀除效果的研究

为寻求刺参苗种生产期间清除玻璃海鞘的有效方法,以天然环保的茶皂素作为杀虫药物,研究了不同质量浓度的茶皂素溶液对玻璃海鞘的杀除效果及对参苗的影响.试验结果显示,茶皂素对玻璃海鞘具有致死作用,用质量浓度为5、10、20 mg/L的茶皂素溶液浸浴处理12 h,玻璃海鞘的杀除率分别为32.3％、67.7％、83.3％,用质量浓...     

茶皂素对部分常见淡水水生生物的毒性试验

茶皂素对淡水甲壳类养殖池塘中常见的野杂鱼 ,如麦穗鱼、鱼白鱼、鲫鱼等具有较强的毒性 ,在浓度 2 5mg/L时即可将其杀死 ;而对甲壳类的淡水青虾、罗氏沼虾和河蟹却很安全 ,即使浓度达 18mg/L其也能正常存活 ,对青虾的生长无不良影响。以茶皂素为主要成分的清塘剂 ,完全可以替代五氯酚钠来清除淡水甲壳类养殖池塘中的野杂鱼     

绿色合成纳米银材料的制备及其对水产病原菌的抗菌效果测定

近年来随着水产养殖规模不断扩大,渔药安全问题备受重视。为积极寻找抗生素替代品,本研究采用银杏叶提取物和硝酸银反应合成纳米银材料,并通过紫外-可见光全波段扫描、透射电镜以及X射线衍射对其结构表征进行鉴定。在此基础上,以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌,以及水产病原菌迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌为测试对象,采用杯碟法、常量肉汤稀释法以及抑菌动力学实验测定合成的纳米银抗菌效果。结果显示,在波长450 nm处有纳米银等离子共振体形成的吸收峰;透射电镜观察到纳米银颗粒平均直径小于10 nm;X射线衍射图谱验证了金属银的生成;本研究所合成的纳米银材料对4种病原菌均有良好的抗菌效果。研究表明,采用银杏叶绿色合成纳米银,不仅方便、快捷,而且成本低廉、环境友好,在水产病害防控中具有良好的前景。     

Ni^2+对钝顶螺旋藻生长及藻胆蛋白含量的影响

为研究Ni^2+对螺旋藻生长的影响,采用室内培养法,在培养液中添加不同质量浓度的Ni^2+,对螺旋藻的生长曲线、生物量、吸收光谱以及藻胆蛋白含量进行了测定和分析。试验结果显示,当Ni^2+质量浓度为0~0.5μg/mL时,随着质量浓度的增加,藻胆蛋白含量增加,螺旋藻生长加快,累积的螺旋藻生物量增加;0.5μg/mL的Ni^2+对螺旋藻生长、生物量累积和藻胆蛋白含量具有最大促进作用;0.5μg/mL的Ni^2+处理,导致螺旋藻叶绿素a在蓝紫光区的吸收光谱发生明显变化,440 nm的吸收峰消失,而在430 nm和450 nm处分别出现一个吸收峰;Ni^2+对藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的吸收光谱没有显著影响。当Ni^2+质量浓度达到1.0μg/mL时,螺旋藻仍能正常生长。试验结果表明,0.5μg/mL的微量Ni^2+通过改变螺旋藻叶绿素a在蓝紫光区的吸收光谱,提高藻胆蛋白含量,从而促进螺旋藻的生长和生物量的累积,是促进螺旋藻生长的最佳Ni^2+质量浓度,为降低螺旋藻生产成本,以及利用螺旋藻治理水体镍污染提供科学依据。     

紫菜藻胆蛋白质的提取纯化与抗病毒研究

用溶胀法和反复冻融法粗提取紫菜中的藻胆蛋白,并经羟基磷灰石（HA）柱用不同浓度的磷酸缓冲液梯度洗脱,分离纯化出藻胆蛋白,研究其对感染病毒小鼠的抗病毒活性。结果表明：当纯度（A558nm＋A616nm）/A280nm〉4时,洗脱液离子强度为200mmol／L,收集液在280nm处有明显的吸收峰;感染病毒的小鼠注射藻胆蛋白后活动量比未注射时频繁,体重增加较明显。     

刺参岩藻聚糖含量的研究

以木瓜蛋白酶水解比色法测定刺参中岩藻聚糖的含量。水解液经次甲基蓝染色,在560nm处有最大吸收波长。吸光度与刺参中岩藻聚糖含量成正比。测定的刺参酸性粘多糖回归方程:y=-0.0189 0.0345x;r=0.9991。并研究了6种不同产地的刺参中岩藻聚糖的含量。     

胰蛋白酶水解文蛤蛋白制备抗氧化小肽实验研究

采用胰蛋白酶水解文蛤蛋白以羟自由基清除率为指标制备抗氧化小分子肽。结果表明：胰蛋白酶解液G-15凝胶层析的分离组分在第3管有最大吸收峰,且在2个检测波长下,两者出现峰的位置基本一致。但不同洗脱峰对应的羟自由基清除率差异较大,最大羟自由基清除率为59%。可见最大洗脱峰与最大羟自由基清除率并无一致性。利用Tricine-SDS -PAGE聚丙烯凝胶电泳对各洗脱峰抗氧化小肽进行分离纯度检测表明第4管纯度佳,但其羟自由基清除率只有25%、分子量为460。     

鲢酶解物对羟自由基的清除作用

通过测定酶解物对Fenton体系产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和复合蛋白酶5种酶中，筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解鲢制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；用正交试验L9(3^4)对两种酶的水解条件进行了优化，并对最佳酶解条件下得到的酶解物进行Sephadex G-25凝胶柱分离，洗脱液分别在波长280nm处比色，测定酶解物中主要抗氧化活性肽的分子量分布。结果表明，木瓜蛋白酶在温度50℃、酶解时间15min、pH=6．5、酶质量分数1．50％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为88．2％；胰蛋白酶在温度55℃、酶解时间60min、pH=8．0、酶质量分数0．25％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为84．2％。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟自由基清除率峰，清除率为95．1％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为2．2kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟自由基清除率峰，其清除率为89．6％，该峰处活性肽的分子量为14．2kDa。     

油茶皂素鱼毒制剂对常见淡水鱼虾的毒性研究

采用水箱养殖方式,研究油茶皂素鱼毒制剂对常见淡水鱼虾的毒性作用。结果显示,油茶皂素鱼毒制剂对闽江流域常见淡水鱼类具有较强的毒性,并呈现出良好的剂量-药效和时间-药效关系。在投药浓度为2.5mg/L时,该制剂在24 h内即可将实验鱼全部杀死,LD50为1.60~1.75 mg/L,对泥鳅的LD50为3.0 mg/L。但是该制剂对南美白对虾和河蟹却很安全,在投药浓度达50 mg/L时,南美白对虾48 h存活率可达100%,河蟹48 h存活率可达90%以上。研究结果表明,油茶皂素鱼毒制剂对闽江流域常见淡水鱼类具有显著的的毒杀能力。     

Eradication of predatory fishes in shrimp farms by utilization of Thai tea seed

The chief predatory fishes found in shrimp culture ponds in Thailand are Tilapia mossambica, Lates calcarifer, Scatophagus argus, Eluetheronema tetradactylum, Goviupterus chuno, Mystus sp., and other gobies. The eradication of predators, mostly fishes, is necessary for good management of any shrimp farm. Tea seed grown in northern Thailand has been used for this purpose. Quantitative analysis of crude saponin in the tea seed was conducted and some biological tests on the toxicity of crude saponin to fish were performed.The effective dosage of crude saponin for the eradication of predatory fishes was 1.1 ppm, but shrimp, crabs, copepoda, rotifers and brine shrimp (Crustacea) all survived this concentration. The lethal time for fishes increased in proportion to their body weight and the salinity of the pond. The toxicity of the saponin weakened with time.     

Screening for organic acids in fish tissues with special reference to the distribution of taurine inRutilus rutilus L.

A liquid chromatographic method for rapid profiling of some organic acids and other compounds of physiological interest in fish tissues is presented. The method provides the detection of -ketoglutaric, malic and pyruvic acid and is optimized for the quantitation of citric, phosphoric, succinic, lactic and fumaric acids, as well as glucose and especially taurine. These substances were separated in a single analytical run on a cation exchange column with dilute sulfuric acid as the elutant. The effluent was monitored by a refractive index or an UV detector at 208 nm wavelength. Resolution was satisfactory. No further treatment was found to be necessary when samples were deproteinized with perchloric acid. Taurine (2-aminoethansulfonic acid), not previously described in the roach (Rutilus rutilus L.), occurs in considerable amounts in red and white muscle and heart tissue. However, it is also present in all other tissues.     

暗纹东方鲀鱼精蛋白的提取工艺优化研究

以暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)精巢组织为原料,采用酸提法提取鱼精蛋白。以得率为指标,通过正交实验,确定了最佳的提取参数。结果显示,提取鱼精蛋白的影响因素重要性依次为：提取次数>硫酸用量>硫酸浓度>95%乙醇用量;最佳提取工艺条件：硫酸浓度为0.2 mol/L、硫酸用量为2.5倍、提取次数为2次、95%乙醇用量为2.5倍。在此工艺条件下,暗纹东方鲀鱼精蛋白的得率为3.82%,蛋白含量达89.01%。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)可知,提取的粗鱼精蛋白有2个条带,分子量分别在25和20 kDa附近。分析其氨酸酸组成发现,暗纹东方鲀鱼精蛋白属于双鱼精蛋白,其中,精氨酸和丙氨酸含量相对较高,分别占31.40%和17.39%。本研究对暗纹东方鲀鱼精蛋白更好地应用在食品和医药领域具有重要意义。     

凡纳滨对虾下脚料生产甲壳素过程中盐酸的循环利用

为减少甲壳素生产过程中废酸液对环境的污染,降低甲壳素的生产成本,试验以甲壳素生产过程中的废盐酸为研究对象,利用硫酸和氯化钙反应进行回收、循环利用盐酸溶液,通过单因素试验和正交试验对工艺条件进行优化。结果表明,脱钙废盐酸溶液最佳再生条件:反应温度为室温,硫酸质量分数为98%,硫酸与废盐酸中钙离子的摩尔比为2.3∶1,反应时间13 min,静置时间3.5 h,最佳条件下盐酸再生率为91.51%。利用最佳工艺条件对废盐酸进行再生处理,盐酸可循环重复利用5次,脱钙虾壳的碳酸钙残留量≤1.2%。     

高效液相色谱法测定水产品中ATP关联化合物

建立了水产品中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、次黄嘌呤核苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx)6种ATP关联化合物的高效液相色谱检测方法。样品中的ATP关联物经高氯酸提取并用氢氧化钠调节pH值至6.0-6.4后,以AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱为分析柱,0.02 mol/L KH2PO41-0.02 mol/L K2HPO4(V/V=1/1)的缓冲液为流动相进行洗脱,在254 nm波长下用高效液相色谱进行检测,外标法定量。研究表明,ATP、ADP、AMP、IMP和HxR线性范围为0.2-40.0μg/ml,Hx线性范围为0.1-20.0μg/ml,相关系数均大于0.999 0;ATP、ADP、AMP、IMP和HxR检出限为5.00 mg/kg,Hx检出限为2.5 mg/kg(S/N=3);对真鲷、鱼师鱼、鲑鱼、凡纳滨对虾和梭子蟹5种水产品进行3个浓度水平的加标实验,回收率在85.5%-105%之间,相对标准偏差(RSD)小于12.9%。实验结果表明,该方法简便、准确,适合于水产品中ATP关联物的测定。     

几种植物提取物对异育银鲫生长性能和血液生化指标的影响

用分别在基础日粮中添加了黄霉素(4 mg/kg)和3种植物提取物(皂树皂甙150 mg/kg、茶多酚50 mg/kg、水飞蓟素100 mg/kg)的饲料饲喂异育银鲫(Carassius auratus gibelio)56 d后,测定各组鱼生长性能,并于实验结束时尾静脉采血,测定血液生化指标。结果表明:与对照组和黄霉素组相比,3种植物提取物组间的增重率(WGR)和蛋白质效率(PER)无显著性差异(P>0.05);其中皂树皂甙能显著提高血清白蛋白(ALB)的含量(P<0.05);茶多酚能显著提高血清碱性磷酸酶(AKP)的含量(P<0.05),降低血清尿素氮(BUN)含量(P<0.05);水飞蓟素能显著提高血清碱性磷酸酶的含量(P<0.05),降低血清丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)。     

Influence of soya saponin, soya lectin, and cholyltaurine supplemented to a casein-based semipurified diet on intestinal morphology and biliary bile status in fingerling rainbow trout Oncorhynchus mykiss

To investigate the cause of the changes in intestinal morphology and biliary bile status of rainbow trout Oncorhynchus mykiss fed defatted soybean meal (SBM)-based diets, casein-based semipurified diets supplemented with soya saponin, soya lectin, and cholyltaurine were fed to rainbow trout for 6 weeks. An unsupplemented control diet and a SBM-based diet were also tested as references. Poor development of microvilli and pinocytotic vacuoles, and accumulation of large vacuoles in the epithelial cells were observed in the distal intestine of fish fed diets containing saponin but not cholyltaurine. Hyperplastic connective tissue in the mucosal folds of the distal intestine was observed in fish fed a diet containing both saponin and lectin but not cholyltaurine. However, intestinal histological features in fish fed diet supplemented with cholyltaurine and lectin and/or saponin were similar to those in the control diet group. Liver morphology and biliary bile status were not affected by saponin and lectin. These results suggest that the abnormal features of the distal intestine of rainbow trout fed SBM-based diets are caused by the combination of soya saponin and soya lectin, and that supplemental cholyltaurine plays certain roles in normalizing the intestinal abnormalities caused by the saponin and lectin.     

柱前衍生-高效液相色谱法测定浒苔多糖的组成

研究了浒苔多糖样品经三氟乙酸完全水解而无损失的最适条件,并且在优化流动相洗脱程序等色谱条件的基础上,建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生-高效液相色谱法分析浒苔多糖的单糖组成及含量的方法。该方法采用配备紫外检测器的高效液相色谱仪,在250 nm波长下进行测定,外标法定量。结果表明,在此条件下,8种单糖能够良好分离,各单糖在1-100μg/ml范围内具有良好的线性关系,相关系数r≥0.999,回收率在76.0%-108%之间,相对标准偏差RSD10%。采用该方法对浒苔多糖样品进行组成及含量分析,发现无论样品原料为何种浒苔,浒苔多糖均以鼠李糖为主,同时还含有葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖以及少量的甘露糖、半乳糖醛酸和岩藻糖。     

扇贝超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

采用加热,盐析及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析的方法,从扇贝内脏团中分离得到一种高等电点的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）该酶由２８１个氨基酸组成,等电点为８．３０。纯酶的比活为２６１６．４Ｕ／ｍｇ蛋白,最大紫外吸收峰２７０．５ｎｍ,为Ｃｕ．Ｚｎ－ＳＯＤ,由二个亚基组成,亚基分子量为１５０００Ｄｒ。此外还研究了该酶其他的理化性质。