鳞翅目昆虫细胞株的建立与应用

通过建立鳞翅目昆虫细胞株 ,以昆虫杆状病毒为载体 ,可成功、高效地表达外源基因 ,生产具有重要药用价值具备天然活性的生物工程制品 ,同时对昆虫病理学以及生物杀虫剂的研制与生产具有巨大的应用价值     

黄连根腐病病原菌分离纯化及鉴定

对湖北省利川市的黄连样品上的病原进行分离、纯化培养,采用生物学、分子学等方法对病原进行鉴定。结果表明,样品上的病害为黄连根腐病,引起病害的病原为镰刀菌,为当地黄连病害的防治提供了理论依据。     

花菜病害病原菌分离纯化及鉴定

对湖北省荆州市江陵县普济镇采集的花菜样品上的病原进行分离、纯化培养,采用生物学方法对病原进行分子鉴定。结果表明,样品上的病害为花菜菌核病,引起病害的病原为核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),为当地花菜病害的防治提供了理论依据。     

几种茶园杂草生防菌的分离鉴定

为发掘具有防治茶园杂草潜力的生防菌,本研究从江苏、浙江和安徽3省共16个茶园采集感病杂草,采用组织分离法分离出病原菌,通过菌饼回接验证获得了44株具有致病力的植物病原菌,从中筛选出了10株致病性较强的优势菌株.利用柯赫氏法则验证优势菌株后,通过观察优势病原菌的形态特征,结合rDNA-ITS基因片段序列分析,确定10株优...     

新杀虫剂HNPC-A9908对几种鳞翅目昆虫的杀虫活性

采用农药生测标准操作程序 (SOP)测定了HNPC-A9908对几种鳞翅目昆虫的毒力及其作用方式。室内生测结果表明 ,HNPC-A990 8对粘虫具有良好的杀虫活性 ,其综合毒力LC₅₀、触杀毒力LD₅₀和胃毒毒力LC₅₀分别为7 71mg/L、400×10^-3μg/头和82.34mg/L ;对斜纹夜蛾的综合毒力为 280.57mg/L。田间小区试验结果表明 ,HNPC-A9908对菜青虫表现出良好的防治效果 ,有效用药量为 10、30、50g/667m² 时 ,药后 1、3、7、10d的防治效果分别为 88.18%～98.39%、100%、96.79%～100%和 88.16%～100%。此外 ,HNPC-A9908对甜菜夜蛾和棉铃虫也具有一定的防治效果     

鳞翅目昆虫迁飞相关基因的鉴定及进化分析

为明确迁飞性昆虫迁飞行为的分子调控机制,选取12种鳞翅目昆虫为研究对象,将其分为迁飞组和非迁飞昆虫组,采用PAML软件分析单拷贝直系同源基因在2个分组中的进化速率,从基因组水平对涉及生物钟调节、神经调节和内分泌调节3类迁飞相关基因进行注释和比较。结果表明,部分基因在迁飞昆虫和非迁飞昆虫中的进化速率存在显著差异,且这些基因富集在肌肉结构发育、复眼及光感细胞发育、能量代谢、腺体发育、醇酮类及脂蛋白合成代谢、磷酸化调节等生物过程中;与神经调节相关的基因在迁飞昆虫中有不同程度的显著扩增或收缩,而涉及生物钟调节的基因中仅ebony在迁飞组昆虫中的拷贝数显著多于非迁飞组的拷贝数,与内分泌调节相关的法尼醇脱氢酶编码基因在迁飞组和非迁飞组中呈现显著差异。表明迁飞和非迁飞2组昆虫在基因组水平上存在部分基因拷贝数增加或减少的规律,可能是迁飞昆虫或非迁飞昆虫的共同特征。     

应用斯氏线虫防治8种鳞翅目、鞘翅目昆虫的研究

1991—1993年在哈尔滨、牡丹江和阿城等地进行了应用斯氏线虫防治8种害虫的研究,其中鳞翅目5种:粘虫、甘蓝夜蛾、银纹夜蛾、向日葵螟、小菜蛾;鞘翅目3种:白星金龟子、马铃薯瓢虫和细胸金针虫。用3个种5个品系线虫测定的结果表明,除金针虫外,斯氏线虫对其它7种害虫均能侵染。室内试验表明,Beijing品系对粘虫、甘蓝夜蛾、向日葵螟和小菜蛾的致病力最强,害虫死亡率范围为79.3％—100.0％。田间试验表明,Beijing品系线虫对马铃薯二十八星瓢虫具有较好的防治效果。而NC32和Beijing品系在室内和田间对细胸金针虫均未表现出致病力。这些结果表明,斯氏线虫在本省具有广阔的应用前景。     

鳞翅目昆虫性别决定机制研究进展

昆虫性别决定机制复杂多样, 研究昆虫性别决定机制既能加强对物种进化关系的理解, 也能为通过遗传调控控制害虫种群提供新方向。鳞翅目昆虫多为雌雄二型, 繁殖方式以两性生殖为主, 性染色体系统大多为ZW/ZZ系统, 雌性为ZW型, 雄性为ZZ型。昆虫性别决定是通过级联反应调控的, 在鳞翅目昆虫ZW/ZZ系统中, 位于W染色体上的性别决定初始信号沉默雄性化关键基因Masculinizer (Masc), 然后Doublesex(dsx)基因被雌性特异性剪接, 从而调控雌性偏向基因的表达; 而雄虫中Masc正常表达, 调控dsx进行雄性特异剪接, 实现雄性分化。本文对鳞翅目昆虫性别决定初始信号、Masc和dsx的研究现状, 以及基于基因编辑技术和性别决定机制在鳞翅目昆虫遗传调控中的应用进行了综述。相关研究为鳞翅目昆虫的性别筛选、不育昆虫释放技术(sterile insect technique, SIT)和释放携带雌性特异显性致死基因昆虫技术(female-specific release of insects carrying dominant lethal, fsRIDL)奠定理论基础。     

赤豆种内寄藏真菌的分离与鉴定

采用吸水纸法和琼脂平板法,从河北省6个赤豆品种中分离和鉴定出种内寄藏真菌6属,包括5个种和1个未定名种。对常见致病菌的侵入机理进行了初步分析探讨。     

淡水鱼类暴发性流行病的商原分离与鉴定

本文报告了1991年5－10月间对杭州地区淡水鱼类暴发性流行病进行的病原学研究及防治药物的筛选结果。从小濒死鱼（鲫鱼、鳊鱼、鲢鱼等）的实质脏器和腹水中分离到一种细菌，经形态特征、生长特性观察及生化鉴定，为气单胞菌属（Aeromonas)嗜水气单胞菌(A.hydrophila)。经腹腔注射、背肌注射及浸泡三种不同方法人互感染健康鱼，均出现与自然病例相同的症状并引起死亡，从回归死亡鱼中亦再次分离到同样的细菌，从而证实本菌为杭州市地区淡水鱼类暴发性流行病的主要病原。     

植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立

 本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的TaqMan探针实时荧光PCR方法,该方法根据植原体16S rDNA保守区设计了1个TaqMan广谱探针和3个植原体组间点突变特异性探针,并对9种植原体和5种细菌以及3个植物样本进行实时荧光PCR。结果表明,用广谱探针可检测到所有植原体产生荧光信号,而细菌不产生荧光信号。当用植原体组间特异性探针检测时,仅能检测到该组植原体产生荧光信号,检测的敏感性比常规的PCR-电泳检测高约100倍、检测速度有较大提高。由于PCR产物是荧光探针检测,本方法特异性强,并可以用组特异探针直接确定植原体种类。实验采用完全闭管检测,降低了污染机会。本研究为其它原核生物、特别是不能培养菌、难培养菌的检测鉴定和分类提供了新方法。     

华南番木瓜环斑病毒的鉴定、提纯与性质的初步研究

 为害华南番木瓜的病毒以番木瓜科(Caricaceae)和葫芦科(Cucurlitaceae)中若干植物为寄主,范围狭窄。病毒的稀释终点为10^-2~10^-3;热灭活点为50~55℃;体外存活期为8~16小时。病毒颗粒长约600~800nm、宽约10~15nm的略为弯曲的细丝。在感病番木瓜组织的细胞内,电镜观察到典型的风轮状内含体(pinwheel inclusion body)。病毒具有马铃薯Y病毒组成员的典型特征,可认为是国外报道的番木瓜环斑病毒的中国株系,初步命名为华南番木瓜环斑病毒。     

稻瘟菌侵染诱导性脂肪酸加氧酶的鉴定、纯化及其性状分析

 稻瘟菌侵染水稻后,诱导感染叶中脂肪酸加氧酶的活性上升,通过DEAE-Toyopearl和CM-Toyopearl柱层析,比较感染叶和健全叶中LOX的同功酶组成及活性变化,证明上述酶的活性上升主要源于CMlox2和CMlox3的诱导。     

大麦品种对白粉病抗病性鉴定及抗源筛选

通过田间初筛和病圃复筛,对6515份国内外大麦品种进行了白粉病抗性鉴定。重点材料结合苗期、分蘖期鉴定和异地鉴定,筛选出免疫或高抗材料52份,慢白粉病抗性材料59份,并发现具有Mla、Mla6单基因和Mla Mlat、Mla Mlh Mlp多基因组合的国外已知抗病基因品种,在浙江舟山和福建莆田表现抗病。统计分析表明,二棱大麦抗病性较多棱大麦强;抗病品种发病较感病品种迟;抗性材料大多来自国外,英、德、瑞典、叙利亚、澳大利亚、墨西哥等国品种,筛出率较高。     

玉米杂交种穗粒腐病原鉴定

对来自我国不同地区的玉米杂交种穗粒腐病原分离鉴定的结果表明,镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）和蠕孢菌（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）是引起杂交种穗粒腐的优势菌群,分离频率较高的病原菌还有本霉菌（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、青霉菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、曲霉菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）等。种子产地来源地原菌的分离频率有很大影响,辽宁和山西玉米杂交种穗粒腐病原菌的优势种群是蠕孢菌,而山东和河南则以镰刀     

小麦抗赤霉病性田间自然鉴定与抗赤霉病育种中的问题

１９８４年以来,承接了全国小麦育种攻关中的小麦抗赤霉病性鉴定任务,对来自全国１０个麦区１２６４８份小麦育种材料料霉病性进行田间自然鉴定。结果表明,至今仍未发现免疫的小麦材料。长江中下游冬麦区,华南冬麦区及东北春麦区的供鉴小麦抗性较强,全国Ｒ级小麦材料均分布在这些赤病频繁流行的麦区;西南冬麦区,黄淮冬麦区及北部春麦区的供鉴小麦抗性最差。我国现有小麦材料的抗病性与丰产性仍存在较大矛盾,至今仍缺乏可应用     

玉米品种抗茎腐病鉴定

１９９１￣１９９５年采用自然发病和土壤接种方法鉴定了１５５０份玉米品种对茎腐病的抗病性,表现高抗的３９７份,中抗３０４份,中感３６４份,高感４８５份,经重复鉴定,筛选出７６份抗性稳定的自交系和杂交种。不同抗性品种用肿囊腐霉菌和串珠镰刀菌接种测定,抗性反应基本一致,人工接种比自然发病鉴定效果好,通过病圃自然发病初筛,人工土壤接处复选,可准确鉴定大量材料的抗病性。     

菜豆苗期抗锈性鉴定方法及种质资源的抗性筛选

多种环境因素影响病原菌的致病性和寄主的抗病性,从而对抗病性鉴定和筛选的准确性产生影响。苗期人工接种温度超过28℃,保湿时间少于6h,接种时连续光照等都影响菜豆锈病菌的萌发和侵入。接种浓度过低(<10~3个孢子/ml)或过高(>10~5个孢子/ml)、接种的苗龄过大(超过叶片展平期)及接种的不同部位(叶正、背面)也都对菜豆的抗性表现产生严重影响。菜豆锈病菌虽为专性寄生菌,但其保存方式简单(夏孢子保存于4℃冰箱内),且可较长时间保存(至少9个月)。作者根据这些影响因素提出了菜豆苗期抗锈性鉴定方法,并对我国260份菜豆种质资源进行了抗锈性筛选。结果表明,我国菜豆种质资源的抗锈性类型丰富,这一结果为菜豆的生产和抗病育种研究提供了可利用的品种或材料。     

A RAPID BIOASSAY FOR SIMULTANEOUS IDENTIFICATION AND QUANTITATJON OF PICLORAM IN AQUEOUS SOLUTION

Summary. When seeds of lettuce ( Lactuca sativa L.) were placed on small squares of filter paper moistened with solutions of picloram (4-amino-3,5,6-trichloropicolinic acid), the degree of inhibition on of root and hypocotyl elongation 72 hr later was related to picloram concentration. Inhibition was a useful parameter in determining quantities of picloram ranging from 0·03 to 7·2 μg. (Growth stimulation occurred from 0·00072 to 0·0072 μg. After paper chromatography of plant exudates containing ¹⁴C-labelled picloram, location and quantities of picloram on the chromatograms were determined by the lettuce bioassay and compared with determinations by the methods of ultraviolet light sensitivity, ¹⁴C 4π strip scanning and 14 C dilution calculations. R_f values determined lay all methods were identical, and the quantitative determination by the bioassay agreed closely with the calculations based on the amount of ¹⁴C detected by liquid scintillation counting.
Un essai biologique rapide d'idntification et de dosage de piclorame en solution aqueuse     

龙胆草斑枯病的发生与病原菌鉴定

通过对东北地区龙胆草斑枯病的调查,明确了斑枯病是龙胆草上发生最普遍,为为最重的病害之一。光学显微镜及电子显微镜观察,致病性及寄入范围的测定和可溶性蛋白质电泳图谱的测定结果表明,龙胆草斑枯病菌有ＳｅｐｔｏｒｉａｍｉｃｒｏｓｐｏｒａＳｐｅｇ．、Ｓ．ｇｅｎｔｉａｎａｅＴｈｕｍ．和Ｓ．ｇｅｎｔｉｎｉｃｏｌａＢａｕｄｙｓｅｔＰｉｃｂ．。其中Ｓ．ｍｉｃｒｏｐｓｏｒａ为害性最强,是主要病原菌,Ｓ．ｇｅｎｔｉａｎ