重组白细胞介素2对固始鸡空肠黏膜免疫增强作用的研究

本试验旨在研究重组白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）对固始鸡空肠黏膜免疫的作用。 以父母代固始鸡为试验动物,用添加不同剂量的重组IL-2佐剂的鸡新城疫疫苗对试验鸡进行分组免疫,应用免疫组织化学技术,通过Qwin图像处理系统对鸡空肠内分泌型免疫球蛋白A（sIgA）阳性细胞及其分泌物分布和阳性面积量进行系统分析。结果表明,sIgA阳性细胞及其分泌物主要分布于肠绒毛的固有层和肠腺腔中。在新城疫疫苗组中添加重组IL-2能够提高sIgA细胞的分泌,从而提高动物体的免疫能力。重组IL-2对增强免疫性有一定的作用,且IL-2的添加剂量在50 μg时对增加新城疫疫苗的免疫性效果最佳。      

重组白细胞介素- 2对固始鸡免疫机能的影响

本试验旨在探讨重组白细胞介素- 2（IL- 2）对固始鸡免疫机能的影响。应用大体解剖技术和免疫技术,对重组IL- 2对固始鸡免疫机能的影响进行了研究。注射固始鸡IL- 2的各免疫组的抗体水平均高于鸡志贺氏菌苗组,明显高于空白对照组;各免疫组抗体水平在第2～3周达到最高水平,以后在4～7周内基本保持恒定水平;注射IL- 2的各免疫组的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数基本上均高于空白对照组和鸡志贺氏菌苗组。重组IL- 2可促进固始鸡免疫器官的生长发育和成熟,增强鸡的免疫机能,可抵抗各种病原微生物的感染。     

父母代固始鸡十二指肠的发育形态学观察

应用大体解剖学和组织切片技术,对0～20周龄父母代固始鸡的十二指肠进行了发育形态学研究.结果表明,十二指肠的长度、体质量、周长和肠绒毛的长度、肠腺隐窝的深度、肠腺宽度及各肌层厚度等指标随周龄的增加而增长;十二指肠相对生长率、肠腺密度和十二指肠指数则呈下降趋势;肠绒毛有分支现象;淋巴组织的发育比较缓慢,到6周龄后才出现有淋巴小结;通过建立Logistic方程模型模拟十二指肠重量的生长变化,得到其生长方程:♂:Y=9.72/(1 15.3le-0.33t),♀:Y=8.29/(1 12.50e-0.31t).     

重组鸡白细胞介素-2对禽流感灭活疫苗免疫增强作用的研究

为研究重组鸡白细胞介素-2(IL-2)对H5N1亚型禽流感灭活苗的免疫效果,将重组IL-2蛋白和禽流感灭活疫苗联合免疫14日龄SPF鸡,免疫后每周测定一次血清抗体效价﹑脾脏T淋巴细胞亚群,最后计算攻毒保护率。试验结果表明:重组IL-2蛋白具有增强禽流感疫苗免疫效果的作用,提高了血清中的抗体水平﹑增加了脾脏T淋巴细胞CD4+﹑CD8+亚群数量。     

鸡分泌型免疫球蛋白A相关研究进展

粘膜免疫已成为当前生物医药研究领域的又一热点。作为粘膜免疫主要防御因子的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)理所当然更加倍受研究人员的重视。近些年，随着家禽粘膜免疫的深入开展，围绕鸡SIgA的各类研究也逐渐开展起来了。家禽粘膜系统由家禽胃肠道、呼吸道及某些外分泌腺(如哈德氏腺、盲肠扁桃体)等与粘膜相关淋巴组织构成。家禽粘膜免疫主要通过SIgA来发挥作用。在     

糖萜素对固始鸡小肠黏膜结构的影响

本研究旨在探讨饲粮中添加不同水平糖萜素对固始鸡小肠黏膜结构的影响.将300只固始鸡公雏随机分成5组:对照组(饲喂基础饲粮)、300 mg/kg糖萜素组、500 mg/kg糖萜素组、700 mg/kg糖萜素组和金霉素(200 mg/kg)组,每组3个重复,每个重复20只鸡.在21、35、49日龄时,分别从各组随机选取6只...     

固始鸡免疫器官内细胞增殖动态变化

应用流式细胞术研究了固始鸡免疫器官内细胞增殖的动态变化。结果表明:(1)固始鸡不同免疫器官内细胞均以G1期细胞为主,少量细胞为S期和M期,无异倍体细胞。不同免疫器官细胞周期动态变化相似,部分发育阶段之间存在差异。(2)不同发育阶段固始鸡免疫器官细胞增值指数由大到小依次是脾脏、法氏囊和胸腺;在8周龄(胸腺)、或12周龄(脾脏和法氏囊)以前,免疫器官细胞增值指数处于上升阶段,而后逐渐下降,这一结果与固始鸡免疫器官生长发育的测定及其动态变化的分析基本一致。     

果寡糖对固始鸡免疫功能的影响

试验旨在研究果寡糖对固始鸡免疫功能的影响,并确定果寡糖的最佳添加剂量。选用1日龄固始鸡公雏150只。分成5组,1组为对照组．其余的4组为试验纽,对照组不加果寡糖,其他4组的果寡糖添加水平分别为3mg／kg、5mg／kg、7mg／kg和9mg／kg。测定胸腺、脾脏、法氏囊重量和指数、血清新城疫（NDV）抗体效价、血清溶菌酶含量等指标。试验结果表明：①21日龄时,果寡糖（FOS）组的胸腺和法氏囊重量、指数显著高于对照组（P〈0．05）;42日龄时,果寡糖（FOS）组的法氏囊重量、指数显著高于对照组（P〈0．05）。②在二免7d和14d时,果寡糖（FOS）组的血清新城疫抗体效价显著高于对照组（P〈0．05）。③21和42日龄时,果寡糖（FOS）组的血清溶菌酶含量比对照组略高,但无显著性差异（P〉0．05）。④日粮中添加7mg／kg果寡糖（FOS）对提高固始鸡法氏囊重量和指数、血清新城疫抗体效价、血清溶菌酶含量具有最佳效果。这说明日粮中添加果寡糖能够提高固始鸡器官免疫、体液免疫免疫和非特异性免疫功能。     

固始鸡免疫器官指数的发育规律研究

为研究固始鸡免疫器官指数的发育规律,应用大体解剖学方法,经过SAS(6.12)软件对数据分析处理,结果表明,雄性和雌性固始鸡活体重、免疫器官重量和指数之间存在差异(P<0.01),但免疫器官生长发育规律相似;1周龄～20周龄内,前期固始鸡活体重和免疫器官重量均呈上升趋势,后期活体重仍增加,而免疫器官重量维持较平稳水平.随着固始鸡的生长发育,不同免疫器官指数总体而言均呈下降趋势,免疫器官生长速度小于增重速度.     

太子参多糖对环磷酰胺所致肠道黏膜损伤小鼠SIgA、IL-2、IL-6含量的影响

试验将36只18~22 g雄性昆明小鼠随机分为空白对照组、太子参多糖对照组(400 mg/kg体重)、环磷酰胺(CY)模型组、太子参多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg体重),上述各组分别灌喂蒸馏水和多糖,连续灌胃19 d,第20天,除空白对照组和太子参多糖对照组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射CY(100 mg/kg体重),24 h处死小鼠,取十二指肠和回肠,放免法测定分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,研究太子参多糖对CY所致肠道黏膜损伤小鼠中SIgA、IL-2、IL-6分泌的影响。结果显示,与CY模型组相比,太子参多糖高、中剂量组十二指肠SIgA含量显著升高(P<0.05),太子参多糖高剂量组回肠SIgA含量极显著升高(P<0.01);太子参多糖高剂量组中十二指肠和回肠IL-2含量显著升高(P<0.05),十二指肠IL-6含量极显著升高(P<0.01),回肠IL-6含量显著升高(P<0.05)。上述结果表明太子参多糖在一定程度上能颉颃CY所致的肠道黏膜免疫损伤。     

Effect of Pseudostellaria Polysaccharides on SIgA,IL-2 and IL-6 Contents of Intestinal Mucosal Injured Mice Caused by Cyclophosphamide

Effects of Pseudostellaria polysaccharides on the contents of intestinal mucosal SIgA, IL-2 and IL-6 in mice were reported in this paper.36 Kunming male mice with 18 to 22 g were randomly divided into six groups, blank control group, Pseudostellaria polysaccharides control group, cyclophosphamide (CY) model group, and Pseudostellaria polysaccharides low, middle, high dose groups.Each mouse in Pseudostellaria polysaccharides control group and Pseudostellaria polysaccharides low, middle, high dose groups was respectively treated with polysaccharides at the dose of 400, 100, 200 and 400 mg/kg body weight by intragastrical treatment for 19 continuous days, CY was given to each mouse in CY model group and Pseudostellaria polysaccharides low, middle, high dose groups by intraperitoneal injection with 100 mg/kg body weight in the 20th day, duodenum and ileum samples were collected from mice after 24 h, and SIgA, IL-2 and IL-6 contents were determined.The results showed that SIgA contents in duodenum were significantly increased (P<0.05) in Pseudostellaria polysaccharides middle and high dose groups compared to CY model group, SIgA contents in ileum were extremely significantly increased (P<0.01) in Pseudostellaria polysaccharides high dose group compared to CY model group.IL-2 contents in duodenum and ileum were significantly increased (P<0.05), IL-6 contents in duodenum were extremely significantly increased (P<0.01), IL-6 contents in ileum were significantly increased (P<0.05) in Pseudostellaria polysaccharides high dose group compared to CY model group.It was concluded that Pseudostellaria polysaccharide could antagonize intestinal mucosal injury caused by CY.     

重组鸡IL-2的抗球虫作用

鸡白细胞介素2(Ch IL-2)是一种重要的细胞因子,对Ch IL-2的抗球虫作用做了初步研究,分别在14日龄和21日龄给实验雏鸡胸部肌肉注射不同剂量的重组Ch IL-2蛋白,28日龄口服接种1×105个活球虫卵囊,结果表明,重组Ch IL-2蛋白能降低相对卵囊产量、减少盲肠病变、提高相对增重。其中以注射250μg重组Ch IL-2蛋白的试验组抗球虫效果最好,相对卵囊产量为23.26%,盲肠病变记分分别为0.4,相对增重率为97.80%,综合抗球虫指数(AC I)达到192.8。抗球虫效果良好,明显的优于其他试验组。     

半胱胺对鸡十二指肠和脾脏中自细胞介素-2含量的影响

在口服2种剂量生长抑素耗竭剂半胱胺(CS-Ⅰ组、CS-Ⅱ组口服剂量分别为20、80mg／kg)的基础上，应用新城疫弱毒疫苗对鸡进行消化道粘膜免疫，采用放射性免疫分析法测定了鸡十二指肠和脾脏中白细胞介素-2(IL-2)的含量。结果表明，应用半胱胺首免后3周，CS-Ⅰ组十二指肠和脾脏中IL-2的含量比仅用新域疫弱毒疫苗免疫组显著增加(P＜0．05)；CS-Ⅰ组十二指肠中lL-2含量比仅用新城疫弱毒疫苗免疫组极显著增加(P＜0．01)；首免后4周，CS-Ⅰ组脾脏中IL-2含量比仅用新城疫弱毒疫苗免疫组显著增加(P＜0．05)；在十二指肠CS-Ⅰ组和CS-Ⅱ组IL-2含量比仅用新城疫弱毒疫苗免疫组均显著增加(P＜0．05)。由此可推测，生长抑素可抑制十二指肠和脾中IL-2的释放。应用生长抑素耗竭剂半胱胺可以促进十二指肠粘膜和脾脏中IL-2的释放，增强机体的粘膜免疫功能。     

鸡白细胞介素2分子单克隆抗体的研制

以含有鸡白细胞介素2（ChlL-2）基因的重组真核表达质粒pcDNA3．1-ChlL-2免疫6周龄BALB／c小鼠,末次加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2／0-Ag-14融合,应用间接ELISA筛选阳性克隆。共获得2株特异性分泌抗鸡IL-2分子的杂交瘤细胞株,分别命名为1H10和1E6,其腹水ELISA效价分别为1：6400和1：3200,亚类鉴定结果均为IgM。重组质粒pcDNA3．1-ChlL-2转染COS-7细胞,以上述单克隆抗体（mAb）检测表达产物,结果表明,2株mAb均能与表达产物反应;Western blot分析结果显示,2株mAb均与原核表达鸡IL-2蛋白发生特异性反应。本研究所制备的抗鸡IL-2分子mAb可为建立简单、快速的鸡IL-2检测方法提供可能,并为鸡IL-2生物学特性和禽类细胞免疫机理的研究提供材料。     

Intein融合表达鸡IL-2蛋白的多克隆抗体制备

鸡白介素-2(chIL-2)是一种对T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞复制与分化起重要作用的细胞因子,并在机体天然免疫和获得性免疫的发生与维持中发挥重要作用。本研究中,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366bp)克隆连接到pTYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362bp的Intein基因融合在同一开放阅读框内,编码相对分子质量约为71 000的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-intein融合蛋白,应用chitin-sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western blot分析抗体特异性。结果,应用纯化的chIL-2-intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。     

胸腺九肽对鸡脾淋巴细胞增殖转化及IL-2基因表达与分泌的影响

采用MTT比色法、相对半定量RT-PCR法和放射免疫测定（RIA）法研究了不同浓度的胸腺九肽对离体培养的鸡脾淋巴细胞增殖转化、IL-2基因表达与分泌的影响。结果表明，用10ng／mL和lng／mL胸腺九肽处理鸡脾淋巴细胞8h后，能显著增加由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化反应，显著提高IL-2基因的表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量（P〈0．05）；100ng／mL的胸腺九肽虽有增强脾淋巴细胞增殖转化反应以及提高IL-2基因表达和分泌能力的趋势，但与对照组无显著差异（P〉0．05）。提示，胸腺九肽能增强鸡脾淋巴细胞的增殖转化反应，并主要在基因转录水平上促进IL-2的合成与分泌，其作用与弃3量大小有关。     

木槟硝黄散及其不同组合对家兔离体肠管作用的试验研究

将木槟硝黄散组合成15组，采用离体肠管实验法，将家兔离体肠管置于38～38.5℃的通气台氏溶液的麦氏浴管中，向麦氏浴管中逐次加入不同组合的药物，采用DC—100离体器官分析仪自动描记肠管紧张度变化，观察其各组合药物对家兔离体肠管的蠕动性能的影响．并探讨其作用机理．结果表明．15个组合对离体肠管的收缩幅度均有不同程度的增强作用．其中木槟硝黄组的增强作用最明显．其波幅增长最高（95%）