仔猪水肿病病原菌的分离鉴定

从江苏淮安某猪场具有典型水肿病临床症状和剖检变化的发病猪组织分离的菌株中挑选5株大肠杆菌,分别命名为JS0001、JS0002、JS0003、JS0004和JS0005。通过培养特性、菌体形态、染色特性、生化鉴定及血清学试验等一系列方法对其进行系统鉴定,并对这5株细菌进行抗药性、溶血性、Vero细胞毒性和小白鼠致病性等试验。试验结果表明,JS0001、JS0002、JS0004和JS0005表现β型溶血,腹腔接种小白鼠,JS0001、JS0002、JS0003、JS0004对其具有较高致病性;5株细菌药敏特性基本一致：对痢特灵（FR）、头孢噻肟（CTX）、阿米卡星（AN）敏感,对头孢曲松（CRO）敏感性最高,而对阿莫西林(AMX)、多西环素(DO)等药物具有耐药性。JS0002、JS0004能够分泌Vero细胞毒素,确定为产类志贺毒素大肠杆菌（SLTEC）。血清学试验结果表明,JS0002、JS0004的血清型为O₁₃₉,JS0001、JS0003为O₁₄₁。     

断奶仔猪腹泻病原菌的分离鉴定及药敏试验

为鉴定承德地区断奶仔猪腹泻病原菌并分析其耐药性,从承德地区不同养猪场采集腹泻断奶仔猪的肝脏、肛拭子、粪便等样品120份,试验采用细菌学鉴定法、K-B药敏纸片法进行细菌分离鉴定与药敏试验。结果显示,从采集的120份样品中分离得到了大肠杆菌42株、沙门菌23珠、志贺菌12株,42株大肠杆菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等7种药物耐药率在59.5%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星等4种药物耐药率为14.3%～31.0%;23株沙门菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等8种药物的耐药率在47.8%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星3种药物的耐药率为13.1%～34.8%;12株志贺菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等7种药物的耐药率在50.0%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星等4种药物耐药率为16.7%～33.3%。研究为该地区断奶仔猪细菌性腹泻的防控提供理论基础。     

仔猪腹泻病原菌分离及其防治

从腹泻仔猪的小肠内容物及粪便中分离出一株细菌,经16 S rRNA测序及生化特征试验确定为大肠杆菌.该菌具有溶血性及较强的致病性,感染小鼠3 d内死亡率达95％.该菌株的药敏试验及益生菌抑制试验结果表明,分离菌对左氟沙星、链霉素、四环素、青霉素G、氨苄青霉素和万古霉素表现出耐药性,对头孢克洛、头孢哌酮、头孢呋辛、氯霉素和庆大霉素表现为敏感,且对凝结芽孢杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌表现为高敏感.在小鼠治疗中使用复合乳酸菌的治疗效果与抗生素治疗效果差异不大,说明益生菌在防治仔猪腹泻、替代抗生素的使用过程中具有一定的价值.     

贵州地区紫云花猪腹泻病原菌的分离鉴定及耐药性分析

为了鉴定贵州地区紫云花猪腹泻病原菌,分析其耐药性,试验采用细菌学常规鉴定、16SrRNA基因测序、K-B药敏纸片法对从贵州地区不同养猪场采集的患腹泻紫云花猪肝脏、肛拭子、粪便等样品196份进行细菌分离鉴定,并分析其耐药性。结果显示,从采集的196份样品中分离得到了60株大肠杆菌、35株沙门菌、20株志贺菌,分离的60株大肠杆菌对庆大霉素、阿莫西林、强力霉素等5种药物的耐药率在70.0%以上,对其他药物耐药率在15.0%~40.0%之间,耐11、10种药物的菌株最多,分别占分离菌株31.7%、23.3%;分离的35株沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、氟苯尼考等5种药物的耐药率在58.3%以上,对其他药物耐药率在48.6%~17.1%之间,耐10、9种药物的菌株最多,分别占分离菌株25.7%、22.9%;分离的20株志贺菌对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等9种药物的耐药率在65.0%以上,对其他药物的药物耐药率在25%~35%之间,耐9、8种药物的菌株最多,分别占分离菌株30.0%、20.0%。本研究为该地区紫云花猪细菌性腹泻的防控提供研究基础。     

仔猪腹泻大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

从山西省甲种猪场于使用大肠杆菌前后和乙种猪场采集仔猪腹泻病料７０份，进行了大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验。结果分离出符合大肠杆菌生化特性的菌株４４株，其中确定血清型的３６株，未定血清型的８株，具有致病性的１６株；４４株大肠杆菌对所用抗菌药物的敏感率不同；血清型不同的大肠杆菌药敏试验结果不同，同时同场分离的血清型相同的大肠杆菌药敏试验结果相同或相近，非同时或同场分离的血清型相同的大肠杆菌药敏结果也有所不同。     

仔猪腹泻致病性大肠杆菌分型鉴定及耐药性分析

为了解贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌流行情况及耐药性变化,本研究运用凝集试验、PCR和药敏纸片琼脂扩散法等方法对分离的78株致病性大肠杆菌进行血清型、毒力基因及耐药性分析。结果显示,78株致病性大肠杆菌以O138、O87血清型为主,占定型菌株的60.8%;其中62株致病性大肠杆菌检出毒力基因,检出率为79.5%,可分为8种毒力基因类型,分属肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）和肠聚集性大肠杆菌（EAEC）,毒力基因eaeA、elt和escV检出率较高,分别为38.5%、28.2%和21.8%;分离到的致病性大肠杆菌对β-内酰胺类药物高度耐药,均为多重耐药株,耐药种类可达8种以上。结果表明,当前贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。本试验结果可为规模化养猪场防控仔猪腹泻提供基础资料及理论依据。     

水牛腹泻的主要病原菌分离及鉴定

通过对55头疑似细菌性腹泻症状的水牛进行粪便采样,然后进行革兰氏染色镜检,发现有大量的中等大小的革兰氏阴性短杆菌。用麦康凯选择培养基分离培养,发现该菌在培养皿内呈粉红色、边缘整齐、表面湿润光滑。大肠杆菌显色培养基鉴定结果呈现蓝绿色,证明为大肠杆菌阳性。再对分离菌进行生化管鉴定,结果与大肠杆菌的生化特性相一致。药敏试验发现环丙沙星和氧氟沙星对细菌的抑制作用最强,头孢呋辛次之,庆大霉素和链霉素无抑制作用。     

规模化养殖场仔猪腹泻的防治

仔猪腹泻作为一种常见、多发病,是近年来对仔猪健康危害最严重的疾病之一,为了有效防治仔猪腹泻,本文介绍了仔猪腹泻发生的原因:传染性腹泻,非传染性腹泻,寄生虫引发的腹泻;提出了仔猪腹泻的防治措施:给妊娠母猪免疫,给仔猪提前教槽,科学管理妊娠母猪,及时对症治疗,加强饲养管理。希望为生猪饲养者提供参考,从而提高规模化养猪场的养殖效益。     

引起驴驹腹泻的致病性大肠杆菌的分离鉴定

为了探究导致黑龙江省齐齐哈尔市某驴场驴驹暴发腹泻的原因,试验通过流行病学调查、临床检查、病理剖检及H.E.染色、病原菌分离培养及鉴定、16S rRNA PCR检测、小鼠致病力试验及抗生素敏感性测定等方法进行研究。结果表明：该驴场有100多头4月龄以下的驴驹表现严重腹泻,排黄色、水样粪便,其中有45头驴驹死亡,死亡率为32.14%,流行病学调查了解到该驴场更换了价格低廉、质量低劣的饲料且饮用水温度较低,仅为10℃;患病驴驹体温39.5℃,心律失常,心率加快,45次/min;腹腔内充满红色液体,各脏器组织均可见出血点、肿胀、易碎;脏器组织结构明显紊乱,可见大量炎性细胞浸润;在脑心浸液琼脂培养基上可观察到大量白色、潮湿菌落;病原菌16S rRNA PCR扩增得到大小约为160 bp的目的条带,分离菌与大肠杆菌序列的同源性为99.98%,将其命名为CEG-GZL20。CEG-GZL20可导致小鼠发生与腹泻病驴驹相似的临床症状和病理变化;CEG-GZL20具有较高耐药性,仅对青霉素和氨苄西林敏感。说明该驴场暴发的驴驹腹泻主要是由大肠杆菌CEG-GZL20感染所致,且该菌对多种抗生素耐药,可选择青...     

野猪源奇异变形杆菌的分离鉴定及致病性分析

为探究贵州省野猪携带病原菌情况,本试验对无菌采集自全省6个地区15头野猪肝脏样本的分离菌株进行培养观察、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因序列分析、药敏试验和小鼠致病性试验及病理组织切片,同时根据已报道的基因序列合成奇异变形杆菌的mrpA、rsbA、ureC、zapA、rsmA、hpmA、FIiL、ucaA、pm...     

1例红颊竹鼠化脓性肺炎病原菌的分离鉴定

为确定南宁金陵镇某竹鼠养殖场发生竹鼠化脓性肺炎的原因,从发病竹鼠肺中分离得到可疑细菌,经形态观察、生理生化特性测定及16S rRNA序列分析,鉴定该分离菌为大肠杆菌,经小鼠回归试验证实该分离菌可致死小鼠。该菌16S rRNA与大肠杆菌(DQ337503,FJ418574,KR189581)同源性高达100%。药敏试验显示对头孢克肟、卡那霉素、大观霉素、奈替米星、氟苯尼考和米诺环素等药物高度敏感,对氨苄西林、阿莫西林、亚胺培南、头孢唑啉、头孢氨苄、四环素、红霉素和克拉霉素等药物有抗性。结果表明:大肠杆菌是南宁金陵镇某竹鼠养殖竹鼠致死的病原菌。该菌的分离鉴定为其感染引起的传染病防治提供了试验依据。     

动物园野生动物支气管败血波氏杆菌的分离鉴定与系统发育树的构建

采用Biolog和16SrRNA基因序列分析法对分离自北京动物园的8株支气管败血波氏杆菌进行了鉴定。菌株经纯化培养,用Biolog微生物鉴定系统进行了鉴定,结果表明,8株菌株为支气管败血波氏杆菌。菌株经纯化培养,采用菌落PCR方法进行16SrRNA基因序列扩增,扩增产物纯化后直接进行测序。序列经人工校对后用ClustalX1.83软件进行比对分析,最后用Mega3.1软件构建系统发育树,系统发育分析结果表明,8株菌株与支气管败血波氏杆菌DSM10303的同源性达到了99.9%,并在同一个分支内。     

猪肺疫多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

为了研究四川乐山某猪场爆发的保育猪严重呼吸道疾病的主要病原,试验采用病理剖检、病毒检测、细菌分离鉴定、生化鉴定、动物回归试验以及多杀性巴氏杆菌种特异性KMT基因的PCR检测对病原进行鉴定。结果表明:发病猪有严重肺炎症状,支气管内部有少量泡沫,腹股沟淋巴结出血、水肿,其他实质器官未见明显病理变化;病毒检测结果显示为蓝耳病病毒阳性,猪瘟病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒2型阴性;从病猪肺脏中分离获得大肠杆菌和1株蓝耳病病毒继发的高致病性多杀性巴氏杆菌;该分离菌株对多种药物均高度敏感。     

一规模化猪场断奶仔猪腹泻大肠杆菌毒力因子的检测

从疑似断奶仔猪腹泻的仔猪中分离、鉴定出15株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,11株为0131、4株未定型,所有O131血清型菌株呈β溶血。多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6、F41、F18)检测菌毛,O131菌株的毒素为STa、STb、SLT-2e,表达F18粘附素,未定型菌株的毒素为STa,共表达F6和F18粘附素。对15株大肠杆菌用16种抗生素进行药敏试验,结果表明:分离株对阿米卡星、痢特灵、新霉素敏感,而对多种抗生素产生了不同程度的耐药性。运用本场大肠杆菌分离株灭活苗免疫猪群,取得良好效果。     

1株猪葡萄球菌强毒株的分离鉴定及致病性试验

为确定广东省增城某猪场产房仔猪暴发渗出性皮炎的致病菌,从病猪心脏、肺脏、病变皮肤分离并纯化细菌,经形态学观察,镜检,生化特性及gap基因的序列分析,确定为猪葡萄球菌,命名为ZC-4株。药敏试验结果显示该菌株对头孢拉定、头孢唑啉、新生霉素高度敏感,对头孢噻肟、万古霉素、庆大霉素中度敏感,对青霉素、阿莫西林、磺胺类药物、链霉素、恩诺沙星等均耐药。对分离株毒素基因进行检测,结果显示,分离株携带ExhA毒素基因,测序结果表明,其编码区全长为822bp,编码274个氨基酸;氨基酸序列与丹麦分离株ExhA基因(AF515453)的同源性最高,为99.6%;遗传进化分析显示,分离株所携带的毒素基因与参考菌株猪葡萄球菌ExhA毒素基因聚类紧密,位于一个小的分支内。分离株致病性试验结果显示,分离株接种25日龄健康断奶仔猪后24h,病猪耳根、四肢内侧、背部、腹部、臀部、尾根等部位出现蜕皮并露出有液体渗出的鲜红创面,继而皮肤形成一层厚厚的结痂,说明该菌株具有较强的致病性。本试验为猪葡萄球菌疫苗的研制及致病机制研究提供了理论依据。     

某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解某蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对抗菌药物的耐药情况,采集重庆市某蛋鸡场48份羽毛样品、123份肛拭子样品,将羽毛样品经MH高盐培养液增菌后划线接种于MH高盐平板,将肛拭子样品经沙门菌增菌液增菌后划线接种于S.S.平板。将疑似菌落接种LB液体培养基培养后提取基因组,PCR扩增金黄色葡萄球菌特异性nuc基因和沙门菌特异性invA基因片段。对分离鉴定的金黄色葡萄球菌和沙门菌进行药物敏感性试验。最终共分离鉴定出9株金黄色葡萄球菌、6株沙门菌。药敏试验结果表明,分离的金黄色葡萄球菌和沙门菌耐药严重,且存在多重耐药。本研究基本摸清了该蛋鸡场金黄色葡萄球菌和沙门菌对常见抗菌药物的敏感性,为该蛋鸡场的临床用药提供了参考。     

某规模猪场保育育肥猪猪瘟抗体检测与分析

采用阻断ELISA检测法,对猪瘟免疫程序为4、6周龄的猪只分别在4、6、8、16和30周龄采血检测猪瘟抗体,查看猪瘟免疫效果。结果表明,猪瘟抗体阳性率从4周龄的92.9%下降到6周龄的65.8%,继续下降到8周龄的50%,直到16周龄才升高到90%并持续到30周龄。     

泥鳅源霍乱弧菌的分离鉴定及药敏试验

为探究引起江苏某渔场泥鳅发病死亡的病原,本研究对其病变组织进行细菌分离,获得一株优势生长细菌;通过对该菌株的形态观察、生理生化特性检测、16S r RNA基因测序比对及系统发育树聚类,结果表明该分离株为霍乱弧菌(V.cholerae),将其命名为BH-1;回归试验证实该菌为致病菌,能够导致健康泥鳅死亡;药敏试验结果表明该分离菌株对氨曲南、强力霉素、庆大霉素等29种药物高度敏感,对头孢唑啉、青霉素G、乙酰螺旋霉素等6种药物中度敏感,对苯唑西林、万古霉素、林可霉素等8种药物已产生耐药性。本研究确定霍乱弧菌BH-1为引起该渔场泥鳅大量死亡的病原,本研究结果为该病防治提供实验依据。     

1株致病性兔无乳链球菌的分离、鉴定与系统发育分析

从患病家兔肝、肺、脑和心血中分离到1株链状革兰阳性球菌P110323,以1×106 CFU/mL菌液灌胃感染健康家兔后,表现出站立不稳、四肢划动、惊厥和呼吸障碍等症状,感染96 h后,死亡率为60％.解剖见肺淤血、出血;肝、脾和肾肿大,坏死;大脑肿胀,脑膜充血,脑回肿胀扁平,脑沟变浅.分离菌在BHI平板上形成湿润、边缘整齐的灰白色菌落;在5％的脱纤维羊血平板上形成透明的β溶血环;V-P试验、水解精氨酸与马脲酸等为阳性;水解七叶苷和利用甘露醇、山梨醇和乳糖产酸为阴性.16S rDNA系统发育分析显示分离菌与Streptococcus difficilis和Streptococcus agalactiae聚在一簇.gyrB基因系统发育分析表明分离菌属于无乳链球菌(S.agalactiae),结合细菌形态特点和生理生化特性鉴定该病原菌为无乳链球菌(S.agalactiae),多重PCR方法确定该菌荚膜多糖类型为Ia型.     

6株猪源绿色气球菌的分离鉴定及耐药性分析

从吉林省不同猪场病死猪肺脏组织中分离到6株优势菌群,通过细菌形态观察,生化试验及16SrDNA基因序列测定确定6株分离株为猪源绿色气球菌,将其命名为Aer-1~Are-6。动物致病性试验结果显示分离菌株对小鼠均有致病性。动物回归致病性试验表明,分离株对仔猪具有致病性。药敏试验结果显示,分离菌株具有多重耐药性,只对阿米卡星、氟苯尼考、环丙沙星及恩诺沙星较敏感。