龙眼胚性细胞系的建立与保持

本研究比较了生长调节剂、ＡｇＮＯ３、活性炭、碳源、基本培养基、光照度、胚发育时期以及基因型等对龙眼幼胚培养诱导愈伤组织的影响．从幼胚培养中，诱导出多种类型的愈伤组织，经继代培养并筛选，获得松散、生长旺盛、胚胎发生能力极强的松散型胚性愈伤组织．该类型胚性愈伤组织适宜建立悬浮细胞系和分离原生质体，并且转移至含体积分数为０．０５椰子汁的ＭＳ固体培养基上，形成大量的胚状体．采用在附加１ｍｇＬ－１２，４－Ｄ的ＭＳ培养基与附加１ｍｇＬ－１２，４－Ｄ、０．５ｍｇＬ－１ＫＴ和５ｍｇＬ－１ＡｇＮＯ３的ＭＳ培养基交替继代培养，该类型胚性愈伤组织可长期保持     

荞麦愈伤组织培养及其分化的研究

以荞麦的成熟胚，幼胚，下胚轴为外植体，在不同激素浓度配比，不同基本培养基质培养基上的组织培养研究表明：以成熟胚为外植体时，对愈伤组织诱导和生长最适培养基是２．４－Ｄ２．０，ＮＡＡ１．０，６－ＢＡ。０．５的Ｂ＿５培养基；以幼胚为外植体时，对愈伤组织的诱导和生长最适合的培养基是２．４－Ｄ２．０，ＮＡＡ１．０，６－ＢＡ０的ＭＳ培养基；以下胚轴为外植体时，Ｂ＿５和ＭＳ两种培养基均不适合愈伤组织的生长。２．４－０对荞麦愈伤组织根的分化有一定的促进作用。     

枸杞髓部细胞悬浮培养及胚状体发生

应用枸杞髓部组织进行离体培养，建立细胞系，诱导胚状体发生。结果在含不同激素的４种ＭＳ培养基上都诱导出了愈伤组织，诱导频率在５６．７％￣９５．７％，其中以ＭＳ＋６ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％培养基诱导出的愈伤组织颗粒小，分散性能好，此愈伤组织在２－３次继代培养后，转入液体培养基中进行振荡培养，２４ｈ后获得大量单细胞，经过多次继代培养，建立稳定的单细胞悬浮率。悬浮细胞在液体培养基     

红景天愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养

红景天的细胞培养是充分利用该树种优良特性的生物工程基础.试验以红景天的茎为外植体,研究愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系.结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS 1.0mg/L6-BA 0.2mg/L NAA 0.1 mg/L2,4-D,在此培养基上诱导的愈伤组织生长速度快、质地均一疏松;愈伤组织最佳生长培养基为MS-t0.6mg/L6-BA 0.1mg/LNAA 1.0mg/L2,4-D;且选择松散型愈伤组织和3.0×105个/ml的起始细胞浓度,25℃黑暗培养18d为红景天细胞最适悬浮培养体系.     

水稻花培愈伤组织在分化条件下超微结构变化

应用透射电子显微镜观察了生长含有２，４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ的Ｎ６诱导培养基上和生长在不含２，４－Ｄ而含有ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ分化培养基上的水稻花药培养的愈伤组织，生长在诱导培养基上的愈伤组织是异质性的，当愈务组织诱导培养基上转移到分化培养基上２天后，细胞超微结构有明显变化，随着器官分化的进程，有些愈务组织的细胞要经历一个质体，线粒体，内质网及核糖体大量增多的代谢活路期活跃期，为     

龙眼胚性细胞系的建立与保持

本研究比较了生长调节剂、ＡｇＮＯ３、活性炭、碳源、基本培养基、光照度、胚发育时期以及基因型等对龙眼幼胚培养诱导愈伤组织的影响。从幼胚培养中，诱导出多种类型的愈伤组织，经继代培养并筛选，获得松散、生长旺盛、胚胎发生能力极强的松散型胚性愈伤组织。该类型胚性愈伤组织适宜建立悬浮细胞系和分离原生质体，并且转移至含体积分数为０．０５椰子汁的ＭＳ固体培养基上，形成大量的胚状体。采用在附加１ｍｇ·Ｌ＾－１２，４     

脱毒甘薯组织快繁技术的研究

剥取脱毒甘薯只带一叶一心大小的茎尖分生组织接种在ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ固体培养基上,待其成活后,将其转管接种在ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ固体培养基上,进行胚性愈伤组织的诱导,挑选状态好的胚性愈伤组织转移到ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的液体中,进行振荡培养,建立胚性细胞悬浮培养系。经过一段时间的悬浮培养,选择其中较大的胚性愈伤组织接种在ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ固体培养基上进行胚性愈伤组织的增殖及体胚的诱导,４周后将体胚及愈伤组织转移到ＭＳ＋１．０ｍｇ／ＬＡＢＡ的固体培养基上,诱导形成丛生芽,继而形成小植株,将小植株切下转移到不加任何激素的ＭＳ固体培养基上诱导生根,生长发育成完整植株。通过悬浮培养方法可以在短时间内繁殖大量的脱毒试管苗。     

苦瓜愈伤组织的诱导及悬浮培养体系的建立

以苦瓜子叶、上、下胚轴为外植体,在添加不同浓度激素组合的培养基上诱导和继代愈伤组织,比较愈伤组织的状态与生长情况,并对悬浮细胞培养条件进行了优化。结果表明,上下胚轴在添加2,4-D2.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1或NAA1.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1的MS培养基上均可诱导出状态良好的愈伤组织,愈伤组织在添加2,4-D0.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的继代培养基上能长势最好,添加30g·L-1蔗糖和3.0g·L-1活性炭的B5培养基有利于苦瓜悬浮细胞的快速增殖。     

柠条锦鸡儿愈伤组织的培养与分化

取柠条的子叶和胚轴切段作为外植体,接种于含不同激素的７种ＭＳ培养基上诱导愈伤组织发生,确定最佳愈伤组织培养基为ＭＳ＋６－－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ,２,４－－Ｄ２ｍｇ／Ｌ。在ＭＳ＋６－－Ｂ１ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ１０ｍｇ／Ｌ的培养基上生长的愈伤组织中,在距愈伤组织表面一定距离处常形成分生组织带,很像形成层带。分生组织带内部的细胞分化产生排列不规则的长形管状细胞,分生组织带两侧的细胞分裂产生正常的愈伤组织细胞。生长在ＭＳ＋６－－ＢＡ０．５／Ｌ,２,４－－Ｄ２ｍｇ／Ｌ的培养基上的愈伤组织中可分化出胚性细胞（团）,这样的愈伤组织转移至无激素培养基后,胚性细胞（团）可进一步分化出原胚、球形胚、心形胚、子叶胚和试管苗。     

香花槐愈伤组织的诱导与细胞悬浮培养技术

香花槐是集绿化、固土、饲料等于一体的多用途林木,其细胞培养则是充分利用该树种优良特性的生物工程技术基础.该文以香花槐叶片为外植体,研究愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系.结果表明,愈伤组织诱导最适培养基为MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L + 蔗糖30 g/L.愈伤组织生长符合S型曲线,在固体培养基上,培养7 d进入指数生长期,到28 d,愈伤组织鲜重从1.329 3 g增长到10.763 7 g.悬浮培养的细胞,最大生长量为鲜重8.496 g或干重0.474 g.S型生长曲线分析表明,细胞生长迟滞期为3-6 d,最大生长量为14.6 g.      

水曲柳松散型愈伤组织诱导及悬浮培养体系的优化

以水曲柳组培苗的叶片和叶柄为研究材料诱导愈伤组织,通过生长量、接种量、pH值,培养基中碳、氮、磷等因素优化悬浮细胞培养体系。结果表明:以WPM为基本培养基,添加6 mg/L TDZ+5 mg/L 6-BA时,对水曲柳叶柄的愈伤组织诱导率最高,达到90.91%;在只添加6 mg/L TDZ时,叶片的愈伤组织诱导率最高为87.5%。在WPM+0.3 mg/L TDZ+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA的培养基中,可以诱导出松散型的愈伤组织,悬浮培养时细胞的生长周期为18 d。在3%的蔗糖浓度下,细胞增长量最高,一个生长周期内鲜质量增加了400%。氮磷浓度超过正常水平不利于细胞的生长。最终获得了能够长期继代培养水曲柳单细胞和小细胞团的悬浮培养体系。     

影响草莓花药培养效率的若干因素

本试验结果表明，基本培养基的愈伤组织诱导率，Ｂ５明显地高于ＭＳ、Ｎ６、Ｅ１。〔ＮＯ３＾－〕／〔ＮＨ４＾＋〕值大，有利于愈伤组织的诱导。乳糖作为碳源，其诱导愈伤组织的效果明显优于蔗糖。花药愈伤组织诱导率的高低与基因型和培养基有关。ＭＳ＋ＢＡ２．０ｍｇ·Ｌ＾－１＋ＩＡＡ４．０ｍｇ·Ｌ＾－１＋ＺＴ２．０ｍｇ·Ｌ＾－１适于作不定芽的分化培养基，其分化率达４０．００％。     

肉苁蓉组织培养的研究

为了探讨用组织培养的方法生产肉苁蓉药用成分的可行性，以肉苁蓉的茎片段、花为外植体进行了组织培养试验。结果表明，茎片段、子房外植体在添加2，4－D的培养基上诱导的愈伤组织分别呈块状、颗粒状，都为白色；而在添加KT的培养基上诱导的愈伤组织都呈颗粒状，黄绿色，添加KT，NAA的MT培养基对肉苁蓉愈伤组织的诱导及其生长效果最好。愈伤组织在从外植体母体上分割继代培养前，使愈伤组织与培养基接触培养15d后，有利于愈伤组织的生长。     

多花黑麦草胚性悬浮系的建立及原生质培养

以多花原麦草（Ｌｏｌｉｕｍ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ Ｌａｍ．）幼穗为外植诱导愈伤组织,经高有机态氮培养基改造得到易碎型胚性愈伤组织,在１／２ＡＡ培养＋１／２ＭＳＤＬ培养基中得到了生长迅速、分散的胚性悬浮系。分离原生质体经培养后得到了再生白化苗。     

石刁柏体细胞胚的培养与植株再生研究

石刁柏的体植体在附加激素的ＭＳ固体培养基上诱导愈伤组织，在愈伤组织的分类选择中获得的胚性愈伤组织，转移到含２，４－Ｄ １￣１．５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中悬浮培养繁殖。在继代培养中，将颗粒大于１ｍｍ的愈伤组织，转移到无激素的ＭＳ培养基中诱导体细胞胚发生，提高培养基中琼脂的浓度，可减轻体细胞胚的玻璃化。     

真菌诱导子对白术悬浮细胞生长与次生代谢的影响

为探讨不同真菌诱导子对白术悬浮细胞生长和次生代谢的影响，于无菌状态下培养白术无菌苗，诱导愈伤组织，并构建悬浮细胞培养体系，记录悬浮细胞干质量，绘制生长曲线，添加不同内生真菌诱导子溶液后共培养，用高效液相色谱法测定悬浮细胞中白术内酯Ⅰ、白术内脂Ⅲ与苍术酮含量。结果表明，MS+6-BA(6-苄氨基嘌呤)1.0 mg/L+NAA(1-萘乙酸)0.5 mg/L是白术愈伤组织诱导的最适培养基，MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L是悬浮细胞增殖的最适培养基；白术悬浮细胞生长呈现S形曲线生长特征，对数生长期培养体系pH值稳定在4.8～5.0；真菌诱导子显著影响悬浮细胞生长与次生代谢，其中AM478真菌诱导子和AM393真菌诱导子对悬浮细胞生长具有显著促进作用，AM569真菌诱导子对白术内酯Ⅲ与苍术酮积累具有显著促进作用。综上，筛选得到的AM569菌诱导子可作为白术悬浮细胞生物转化的备选诱导子，以促进白术有效成分积累。     

荔枝体胚发生及成苗研究

以荔枝不同器官为外植体诱导出愈伤组织，在中２，４－Ｄ，１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋５％蔗糖的ＭＳ培养基上 细胚胚性愈伤组织系；胚性愈伤组织高浓度２，４－Ｄ（５－８ｍｇ／Ｌ）在黑暗中激发诱导培养后，转移到去除２，４－Ｄ，含低浓度ＮＡＡ和ＩＢＡ的ＭＳ培养基上，体胚发育成熟。     

凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织的制备研究

目的 研究凹叶厚朴适用于细胞悬浮培养的愈伤组织。方法 通过对基本培养基（B₅、MS和1/2MS）、外植体（茎段、顶芽和叶片）、激素浓度及组合进行筛选的方法进行厚朴愈伤组织诱导和继代研究。结果 B₅ 为最适合厚朴愈伤组织诱导的基本培养基;顶芽是最佳诱导愈伤组织的材料;最适合厚朴愈伤组织诱导的培养基为B₅+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA;最佳继代培养基为B₅+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,愈伤组织生长倍数达到2.87倍。结论 初步筛选出凹叶厚朴用于细胞悬浮培养的愈伤组织,为凹叶厚朴细胞培养奠定基础。     

裸燕麦胚性愈伤组织调控及悬浮细胞系的建立

对裸燕麦成熟胚进行离体培养,结果表明,基因型和不同激素组合对成熟胚愈伤组织诱导具有重要作用;晋燕８号愈伤组织诱导率高达８５．７％;２,４—Ｄ对愈伤组织诱导必不可少。采用循环培养法对愈伤组织进行调控,获得了易分散、颗粒状的胚性愈伤组织,缓减了愈伤组织生活力衰退的速度。将松脆愈伤组织置于液体培养基中进行悬浮培养,得到分散性好、生长快的悬浮细胞系。悬浮系经分化培养,获得了成活率在９５％以上的健壮再生植株。     

花生根瘤愈伤组织的诱导和分化

生长健壮的花生根瘤在CLS培养基上诱导出愈伤组织，形成愈伤组织的频率达到26．5－46．6％。瘤愈伤组织能多次继代，生长良好，在分化培养基D－57和D－59上已分化形成了根，其生根频率分别为56％和78％。显微观察表明，愈伤组织分化的具有正常根的解剖结构。