细菌鞭毛染色法的改良

鞭毛是细菌的运动器官,根据其生长的部位、数量可鉴别细菌的种类,是细菌的重要特征之一。细菌鞭毛的直径非常小(10～20nm)．一般光学显微镜难以观察．必须通过特殊染色才能见到,鞭毛染色往往受诸多因素影响,染色效果常不理想。有关细菌鞭毛染色法的研究,文献已有报道,但从作者多年的实验室摸索试验,仍有改进之处,现将结果报道如下。     

红谷霉素对细菌芽孢的抑制机制

检测红谷霉素对2种供试革兰氏阳性芽孢杆菌的作用机制,通过试验发现红谷霉素对芽孢杆菌的作用机制包括对细菌休眠芽孢的抑制和对芽孢萌发的抑制,在高浓度时对细菌芽孢有很明显的杀死作用;在低浓度时对处于萌发状态的芽孢有较强的杀死作用。     

光合细菌和枯草芽孢杆菌在污水处理中的应用

分别利用光合细菌和枯草芽孢杆菌及它们的混合菌对污水进行处理,并通过各个指标比较各种处理对污水的净化修复情况,结果表明,试验组与对照组都能明显净化水质,试验组中,亚硝酸盐氮都有大幅度下降,其中混合菌效果最好,去除率达到71.96%;氨氮也有不同程度下降,混合菌效果最好,去除率为86.13%;活性磷酸盐也有下降,其中枯草芽孢杆菌降解效果最好,去除率为87.08%;化学需氧量(COD)也有不同程度下降,混合菌和枯草芽孢杆菌降解效果最好,去除率为58.73%;溶解氧有大幅度上升,其中混合菌的溶氧增加率为87.75%。     

产广谱细菌素芽孢菌筛选与鉴定

为筛选出可产抑菌肽的芽孢菌,采用稀释涂布、平板划线的方法从土壤、泡菜、湖泥等10种样品中分离纯化菌种,利用抑菌圈法筛选出有4株抑菌性的芽孢菌,对抑菌效果最好的菌株J11通过菌落形态、革兰氏染色、芽孢染色、生理生化试验以及16SrDNA测序鉴定,表明其为多粘类芽孢杆菌,并进一步测定J11的抑菌谱,结果表明其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、溶酪巨型球菌、戊糖片球菌、瑞士乳酸杆菌、乳酸链球菌均具有一定的抑菌性。尤其对溶酪巨型球菌的抑菌圈直径达30.13 mm,抑菌作用非常明显。J11具有良好的抑菌性,具有广谱抑菌效果,对常见的致病菌和腐败菌都有一定的抑菌性,在食品保藏中具有一定的应用价值。     

拮抗尖孢镰刀菌的芽孢细菌的筛选

通过80℃水浴加热20 min、系列梯度稀释和涂布平板法,从土样中分离不同菌落形态的芽孢细菌32株。通过十字划线法进行初筛,获得对尖孢镰刀菌有拮抗作用的菌株21株,其中13株拮抗作用显著。通过打孔法进行复筛,获得对尖孢镰刀菌有显著拮抗作用的菌株6株,其中ZH-15菌株拮抗作用最显著,为尖孢镰刀菌的生物防治打下基础。     

茄果类蔬菜内生芽孢细菌的筛选及初步评价

采用稀释涂平板法,从辣椒、黄瓜、豇豆及番茄植株体内分离到内生芽孢细菌187株,其中拮抗菌28株。室内平板对峙培养显示,5个菌株ha-1 a、ha-15、ha-21、X9、X10对生产上常见的10种病原真菌和2种病原细菌有强烈的拮抗作用;通过液体培养基摇床培养及平板-抑菌圈法,测定5个菌株分别在5种不同的培养基中抗菌物质的生成情况,结果表明ha-21菌株在5种培养基中都能产生抗菌物质,PN是最适培养基;硫酸铵分离表明ha-21产生的抗菌物质为复合物,有较好的温度稳定性,上清液中的抗菌物质经121℃高温处理活性不变,对番茄青枯病仍有强烈的抗生作用。盆栽试验表明:ha-21对黄瓜立枯病的防效为88%,使出苗时间提前3~4 d。     

光合细菌与芽孢杆菌协同净化养殖水体的研究

以光合细菌和芽孢杆菌在一定条件下降解水体CODMn(CODMn=15mg.L-1)的能力为标准,尝试运用响应面实验设计研究光合细菌和芽孢杆菌协同作用时的最佳配比和用量。结果显示,在CODMn=15mg.L-1时,单独使用光合细菌和芽孢杆菌的最佳用量分别是1.75×104和6×104CFU.mL-1,CODMn4d,降解率分别为36.25%和32.14%;2种菌混合时最佳配比用量为1.75×104CFU.mL-16∶.2×104CFU.mL-1,CODMn4d降解率为40.13%。同时,水质净化实验表明,光合细菌对NH4-N有明显降解效果,7d平均相对降解率为17.71%;芽孢杆菌对NO2-N有明显降解效果,7d平均相对降解率为49.88%。而2种细菌混合时对NH4-N和NO2-N的7d平均相对降解率分别达到35.38%和81.05%。这揭示了光合细菌和芽胞杆菌协同作用明显。     

光合细菌与芽孢杆菌协同净化养殖水体的研究

以光合细菌和芽孢杆菌在一定条件下降解水体CODMn(CODMn=15mg.L-1)的能力为标准,尝试运用响应面实验设计研究光合细菌和芽孢杆菌协同作用时的最佳配比和用量。结果显示,在CODMn=15mg.L-1时,单独使用光合细菌和芽孢杆菌的最佳用量分别是1.75×104和6×104CFU.mL-1,CODMn4d,降解率分别为36.25%和32.14%;2种菌混合时最佳配比用量为1.75×104CFU.mL-16∶.2×104CFU.mL-1,CODMn4d降解率为40.13%。同时,水质净化实验表明,光合细菌对NH4-N有明显降解效果,7d平均相对降解率为17.71%;芽孢杆菌对NO2-N有明显降解效果,7d平均相对降解率为49.88%。而2种细菌混合时对NH4-N和NO2-N的7d平均相对降解率分别达到35.38%和81.05%。这揭示了光合细菌和芽胞杆菌协同作用明显。     

几种细菌染色方法的改良建议

针对革兰染色法、抗酸染色法、鞭毛染色法、芽孢染色法、荚膜染色法5种传统染色方法的不同特点,结合多年的实践,对这些染色方法进行了改良,形成了一套适合不同需要的染色方法。改良后的染色方法不仅操作简便易学,而且镜检效果良好。     

黄菖蒲-枯草芽孢杆菌净化体系根际细菌多样性分析

[目的]探究黄菖蒲-枯草芽孢杆菌净化体系在河道底泥净化方面的作用,为水生植物-细菌联合修复河道提供技术支持.[方法]利用16SrDNA测序技术分析黄菖蒲-枯草芽孢杆菌净化体系根部细菌的多样性、丰富度和群落结构的变化,细菌组间差异物种和细菌群落的功能.[结果]黄菖蒲-枯草芽孢杆菌净化体系没有显著改变细菌聚类和物种分类数量、群落丰富度,但是有效改变底泥细菌群落多样性状况,使根部底泥中富集细菌的功能主要集中在还原硝酸盐、氧化铵硫化物、吸收氮元素和代谢硝酸盐.[结论]黄菖蒲-枯草芽孢杆菌净化体系能够有效改变河道底泥中的细菌多样性,增强净化水体的功能.     

地衣芽孢杆菌SCAU1602饲喂对鸡粪可培养细菌遗传多样性影响及有益细菌筛选

【目的】探明地衣芽孢杆菌SCAU1602饲喂蛋鸡后鸡粪中主要细菌类群数量变化,弄清可培养细菌遗传多样性和系统发育,筛选有益细菌。【方法】设置常规饲喂(对照,T1)和饲喂SCAU1602菌剂(≥1×10⁸ CFU/kg)(T2)两个处理,分别测定第0、7、14、30天和第90天鲜鸡粪中温型、耐高温细菌、大肠菌群和乳酸细菌数量;分析第90天鸡粪的可培养中温型细菌、耐高温细菌的遗传多样性和系统发育,代表菌株的蛋白酶、淀粉酶活性和产氨氮能力。【结果】饲喂SCAU1602显著降低了鸡粪中大肠菌群数量,增加了中温型细菌、耐高温细菌和乳酸菌数量。从第90天的鸡粪分离获得了133株细菌,其中,T1处理62株中温型和耐高温细菌,分属于11个种,优势中温型细菌为绿色气球菌,占比33.33%;耐高温优势细菌为枯草芽孢杆菌,占比46.15%;T2处理71株中温型和耐高温细菌,分属于13个种,中温型以乳酸肠球菌为优势群(19.05%),耐高温菌以地衣芽孢杆菌(41.38%)为优势群。与T1相比,T2处理鸡粪中产蛋白酶、淀粉酶细菌占比大幅上升了76.13%和45.57%,氨化能力强的菌株下降...     

硅酸盐细菌发酵条件研究

对硅酸盐细菌LNNZY-2菌株的发酵条件进行了研究,结果表明,温度为36℃,培养31h时发酵液中芽孢数可达17．6×10^7个·ml^-1,适宜提高发酵温度,可在短时间内增加芽孢数。摇床转数为240r／min时,发酵液产芽孢数最多,达25．6×10^7个·ml。     

芽孢杆菌与光合细菌对乌鳢养殖水的净化作用研究

选用一定量的光合细菌和芽孢杆菌,配置成8种不同比例的混合菌,并研究这8种不同比例的混合菌对乌鳢养殖水体的净化作用。结果表明,在光合细菌∶芽孢杆菌=3∶1时,对提高乌鳢养殖水的溶解氧效果最优;在光合细菌∶芽孢杆菌=1∶3时,对乌鳢养殖水的氨氮去除率和COD去除率最优;各种比例的混合菌均可以降低乌鳢养殖水的pH值,互相无明显差异。     

食用菌培养料细菌性污染的细菌种群特征

从细菌性污染的黑木耳及香菇袋中分离出分属枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、黄海芽孢杆菌等的5个细菌菌株,其中4个为芽孢杆菌.镜检观察表明,4种芽孢杆菌的菌体、芽孢形态均有一定差异,另1个菌株不能形成芽孢,说明引起香菇袋污染的细菌种类不同.非芽孢细菌在高压和常压下均可灭菌失活,污染袋中的非芽孢细菌污染可能是由于接种等操作污染引起的.在常压下灭菌,不同芽孢菌存活率不同,生产中常压灭菌后,就可能有部分芽孢存活下来,造成培养料细菌性污染.     

枯草芽孢杆菌和光合细菌对鹅场养殖污水净化效率的研究

鹅养殖污水中的有害细菌和内毒素可严重影响鹅的生产性能,甚至引起发病,导致死亡．为探索鹅场养殖污水的净化方法,本研究以枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）和光合细菌为试验菌种,探究枯草芽孢杆菌和光合细菌通过单独或协同作用对鹅场养殖污水中总细菌数量、大肠杆菌和沙门氏菌的抑制效果．结果表明,枯草芽孢杆菌和光合细菌能够有效的抑制水体中大肠杆菌和沙门氏菌的繁殖,且两者协同作用抑制效果更为明显．二者对污水中大肠杆菌和沙门氏菌的抑制作用具有一定的时间限制性,在处理后７ｄ内对大肠杆菌的抑制效果最佳．因此,添加枯草芽孢杆菌和光合细菌能够显著净化水禽养殖水质,有效改善养殖环境．     

微藻配施枯草芽孢杆菌对烟田土壤化学性质和细菌群落的影响

【目的】研究微藻与枯草芽孢杆菌的共生关系及其对土壤细菌群落的影响。【方法】设置微藻（M）、枯草芽孢杆菌（B）、微藻和枯草芽孢杆菌（MB）及空白对照（CK）4个处理,在室内连续恒温培养35 d,测定土壤化学性质,运用荧光定量PCR和Illumina Miseq测序等分子生物学技术,分析土壤细菌群落丰度和组成的演替规律,揭示微藻配施枯草芽孢杆菌对土壤化学性质和细菌群落的影响。【结果】与CK处理相比,微藻配施枯草芽孢杆菌显著提高土壤铵态氮、硝态氮、DOC含量和pH,在培养第35天分别增加11.93%、17.80%、5.58%和2.75%。微藻配施枯草芽孢杆菌显著增加土壤细菌群落丰富度和多样性,改善土壤细菌群落结构,显著增加变形菌门（Proteobacteria）、硝化螺旋菌属（Nitrospira）和芽孢杆菌属（Bacillus）的相对丰度。冗余分析（RDA）结果显示,土壤pH、有效磷和硝态氮含量是引起土壤细菌群落结构变化的主要环境因子。微藻配施枯草芽孢杆菌促进土壤细菌群落间的正向相互作用,显著增加网络拓扑参数节点数、边数、平均度,网络更加复杂。【结论】微藻配施枯草芽孢杆菌能有效改良土壤养分...     

响应面法优化解淀粉芽孢杆菌产细菌纤维素发酵条件

[目的]实现高效生产细菌纤维素(Bacterial cellulose,BC).[方法]以解淀粉芽孢杆菌ZF-7(Bacillus amyloliquefaciens ZF-7)为菌源,通过单因素试验和中心组合试验原理设计响应面法(CCRD)对其发酵生产BC的发酵条件进行优化.[结果]利用单因素试验确定了最适碳源与氮源分别为D-葡萄糖和酵母膏,并确定了D-葡萄糖、酵母膏及无水乙醇添加量对BC产量(干重)的影响.响应面法优化得到的最佳发酵条件为:葡萄糖56.1 g/L、酵母提取物9.9 g/L、乙醇17.2 ml/L.在此条件下,测得BC产量7.88 g/L,比初始产量提高了35.4％.[结论]研究可为解淀粉芽孢杆菌工业化应用提供参考.     

枯草芽孢杆菌所产细菌素的理化性质及抑菌谱的研究

试验研究了枯草芽孢杆菌Nxc6所产细菌素的理化性质及其抑菌谱。发现枯草芽孢杆菌Nxc6所产细菌素在硫酸铵质量分数为30%的条件下能得到较好的分离。以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性菌大肠杆菌为指示菌,采用牛津杯法检测细菌素的抑菌活性。结果表明,该细菌素最适pH为8.0,且有较广的pH作用范围和较好的热稳定性,但对蛋白酶的抗性较弱。抑菌谱试验结果表明,该细菌素对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有抑制作用,并且对部分真菌也有抑制作用。