中国畜牧兽医2013年第40卷第2期犬流感(H3N2亚型)血清学调查

为了解广东地区犬流感(CI)流行情况,以期为犬流感的预防提供参考依据,本研究采用ELSIA方法及血凝抑制试验(HI),对广东省内6地市的1440份犬血清样品进行抗体检测。结果显示,1440份犬血清中犬流感抗体平均阳性率为7.92%(ELISA)和6.25%(HI)。其中广州、深圳和惠州地区的犬流感抗体阳性率较高。1～3岁犬的犬流感抗体阳性率高于其他年龄段犬,雄性犬犬流感抗体阳性率高于雌性。结果表明,H3N2亚型犬流感病毒在广东局部地区流行。鉴于当前在部分地区CIV阳性率较高,结合CIV在犬群中迅速传播的流行特点,要避免CIV暴发流行及对人类的健康造成威胁,对于CIV的防制应结合当地实际情况,制定切实有效的防制措施。     

犬流感(H3N2亚型)血清学调查

为了解广东地区犬流感(CI)流行情况,以期为犬流感的预防提供参考依据,本研究采用ELSIA方法及血凝抑制试验(HI),对广东省内6地市的1440份犬血清样品进行抗体检测。结果显示,1440份犬血清中犬流感抗体平均阳性率为7.92%(ELISA)和6.25%(HI)。其中广州、深圳和惠州地区的犬流感抗体阳性率较高。1～3岁犬的犬流感抗体阳性率高于其他年龄段犬,雄性犬犬流感抗体阳性率高于雌性。结果表明,H3N2亚型犬流感病毒在广东局部地区流行。鉴于当前在部分地区CIV阳性率较高,结合CIV在犬群中迅速传播的流行特点,要避免CIV暴发流行及对人类的健康造成威胁,对于CIV的防制应结合当地实际情况,制定切实有效的防制措施。     

H3N2亚型禽流感病毒及猪流感病毒感染人肺腺癌细胞后增殖的差异性变化

人肺腺癌细胞A549被H3N2亚型禽流感病毒和猪流感病毒感染后,探讨不同毒株跨种属感染人呼吸道组织的可能性和趋势性。通过观察病毒感染A549细胞后的细胞病变(CPE)、血凝试验(HA)和50%组织细胞感染量(TCID50)来比较不同毒株感染细胞后的复制差异和毒力改变,发现同一亚型不同来源的流感病毒对A549细胞感染和复制能力有较大差异,哺乳动物来源的病毒更有感染人呼吸道细胞的趋势,SW/GX/NS2783/2010有潜在的感染人细胞的能力。感染过程中的细胞因子变化和病毒基因组组成特点是进一步研究的方向,应重点关注具有跨种属感染趋势的流感病毒及其特殊分子决定簇的组成和特点。     

Natural history of influenza in swine in Hawaii: prevalence of infection with A/Hong Kong/68 (H3N2) subtype virus and its variants, 1974-1977

From September 1974 to January 1978, about 25% of 254 swine farms, studied on four of six Hawaiian islands, had swine with antibody to A/Hong Kong/68 (H3N2) subtype of influenza virus. Of 290 swine 2 to 5 years of age in a single herd, 72% had antibody. Antibody titers were consistently higher to A/England/42/72 and A/Port Chalmers/1/73 antigens than to A/Victoria/3/75 or A/Hong Kong/1/68 antigen. Few swine had antibody to the A/Hong Kong/68 antigen. Antibodies to H3N2 and Hsw1N1 subtype of virus persisted at high titer in the same animals for more than 3 years; however, titers to the Hsw1N1 subtype were considerably higher. The occurrence of H3N2 infection in swine appeared shortly after the occurrence of the same H3N2 variant in human population. To date there is no evidence that the H3N2 subtype has become established in swine in Hawaii.     

禽流感病毒A/Chicken/Yangzhou/N/2005(H9N2)HA基因的克隆及序列分析

根据GenBank公开发表的H9N2型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计1对引物,用RT-PCR方法成功扩增出H9N2型禽流感病毒分离株A/Chicken/Yangzhou/N/2005(H9N2)HA基因,凝胶电泳结果显示,扩增产物为1.7 kb的单一条带,与预期结果相符.将PCR扩增片段连接到pCR2.1-T载体上,重组质粒酶切鉴定正确.序列测定分析结果显示,所获序列与GenBank中收录的H9N2亚型分离株核苷酸同源性最高达99%,与原型毒株A/Furkey/Wisconsin/1/1966(H9N2)氨基酸同源性为89%.对HA裂解位点附近的氨基酸序列分析表明,此毒株为低致病力毒株.     

供港澳家禽高致病性禽流感及H7N9病毒监测与分析

采集供港澳家禽喉头、泄殖腔拭子进行禽流感病毒监测,建立一步法荧光RT-PCR检测A型和H5、H7、H9亚型及H7N9病毒,所用高通量核酸提取和基因扩增体系可适应活禽出口快速检测通关的要求。2006—2015年共检测约150万份拭子,结果 H5和H7亚型高致病性禽流感全部为阴性,H9亚型等A型流感病毒阳性率约0.035%,冬、春季节检出率较高,H9亚型病毒HA基因与H7N9病毒广东流行毒株具有亲缘关系。供港澳禽流感病毒监测体系快速高效、生物安全性好,结合抗体监测和临床检查,可保证出口家禽处于无禽流感状态。     

甲型H1N1流感病毒致病机理研究进展

本世纪首次暴发的甲型H1N1流感大流行,严重威胁了人和动物的健康,是其继1918年对全球进行疯狂肆虐之后的又一次严重打击.甲型H1N1流感病毒的主要蛋白结构包括血凝素蛋白(HA)、神经氨酸酶蛋白(NA)、聚合酶复合体(PB1、PB2和PA)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M1、M2)及非结构蛋白(NS1、NS2)等.目前研...     

禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)HA基因序列分析

采用RT_PCR技术,以A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)RNA为模板,扩增了1.73kb 的HA 全基因cDNA。将HAcDNA克隆后进行了序列测定,测序结果表明所扩增的1728 个核苷酸片段包含了完整的HA基因的开放阅读框架和上下游引物序列、蛋白质合成的起始密码子和终止密码子。核苷酸序列比较分析结果表明:A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1) 与A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)有11 个核苷酸差异,同源率99.4% ;与A/HongKong/156/97(H5N1) 有25 个核苷酸差异,同源率98.6 % ;与A/Chicken/HongKong/258/97 (H5N1) 有30 个核苷酸差异,同源率98.3% ;它们的氨基酸序列同源率依次分别为99 .2 % 、98.6% 和98.1% 。受体结合位点的氨基酸序列完全一致;HA裂解位点氨基酸序列也完全一致,各有5 个碱性氨基酸插入。这说明上述4 个流感病毒分离株可能来自同一个祖先,具有相同的毒力和相似的生物学特性。     

3种消毒剂对H5N1和H9N2亚型禽流感病毒灭活作用

采用悬浮灭活试验，以鸡胚感染法，研究奇露、卫可、泛福露益选3种消毒剂在一系列浓度下，分别与H5N1和H5N2亚型禽流感病毒作用5，10min，对禽流感病毒的灭活作用。结果表明：1：200、1：280、1：400、1：800、1：1000浓度的卫可，1：320、1：600、1：800、1：1000浓度的泛福露益，1：200、1：400、1：600浓度的奇露对四亚型禽流感病毒可完全灭活31：200、1：280、1：400、1：800浓度的卫可，1：320、1：600、1：800浓度的泛福露益，1：200、1：400浓度的奇露对比亚型禽流感病毒可完全灭活。     

一株鹅源H5N1亚型禽流感病毒人工感染鸡的病理学研究

鸡肌肉接种鹅源禽流感病毒A/goose/Guangdong/2/1996(H5N1)后,引起约70%发病率和60%死亡率,并表现出一些显微和超微病理学变化,主要为全身性充血、淤血、出血和血栓形成,多种器官的细胞变性、坏死、炎症,以及胰腺、肾脏、肝脏、心脏、肺脏、脑、肠、胸腺、脾脏、法氏囊等的细胞凋亡。     

1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定

为了解广东猪流感病毒(SIV)的流行变异情况,2010年11月从广东某规模猪场采集流感症状的猪鼻拭子60份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到1株猪流感病毒,通过流感分型RT-PCR和HI试验鉴定为H3N2亚型SIV,命名为A/swine/Guangdong/L22/2010(H3N2),进行全基因序列测定及相似性分析发现,该分离株有低致病性流感分子特征,该毒株的8个基因片段连同最近广东猪群流行的流感毒株与2000年前后H3N2人流感病毒有较高的同源性.系统遗传演化显示,该病毒分离株可能是由1999年人源H3N2流感病毒A/Moscow/10/99(H3N2)进化而来.     

甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定

构建pET表达载体,通过原核表达系统制备甲型H1N1流感病毒HA的截短表达蛋白,获得纯化蛋白,并分析HA蛋白的反应原性.人工合成A/California/04/2009 H1N1流感病毒HA基因,以其为模板,PCR扩增HA的一部分基因,去除HA蛋白信号肽、跨膜区、胞内区的基因序列,仅扩增HA1和HA2的基因.将扩增的基...     

猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型 RT-PCR方法的建立

根据GenBank中H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)和M基因保守序列,分别设计合成了5对特异性引物,利用RT-PCR技术对SIV的型和亚型进行鉴定。结果表明,该方法的型RT-PCR可以检测出10⁴ EID₅₀病毒量所提取的RNA;H1、H3、N1和N2的亚型RT-PCR均可以检测出10⁴ EID₅₀病毒量所提取的RNA。除每对特异性引物所对应的亚型外,对其他亚型及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的检测均为阴性,应用该方法对临床样品进行检测,其结果与病毒分离结果符合率为100%。结果表明,该方法特异性好、敏感性高,有望成为SIV的一种特异、敏感、快速的分型检测方法,为猪流感分子流行病学的调查奠定了良好的基础。     

甘肃省猪流感(H3N2)抗体的血清学调查

猪流感是世界上最常见的猪传染病之一,传播迅速,常引起急性呼吸道疾病暴发。为了解我省规模化猪场猪流感的防治工作实际情况和流行态势,笔者对全省14个市州规模化养猪场和个体养猪专业户送检的健康猪和患其它病猪血清进行了SIV(H3N2)感染抗体检测及检测结果分析。现报道如下: