植物蛋白发酵乳酸菌对模拟胃肠道环境的耐受性研究

通过模拟人体胃肠道环境,研究植物蛋白发酵乳酸菌植物乳杆菌FJAT-7926(Lactobacillus plantarum FJAT-7926)和干酪乳杆菌FJAT-7928(Lactobacillus casei FJAT-7928)在不同pH值人工胃液和不同胆盐浓度人工肠液下的存活情况。结果表明,pH3.0的人工胃液对2株菌的存活影响较小。经4h处理后,2株菌的存活数都在1×108cfu·mL-1以上,存活率分别为56.06%和55.65%。pH2.0的人工胃液对2株菌的影响较大,经2h处理后,2株菌的存活数降至1×105cfu·mL-1,4h后,2株菌存活数分别为3.67×102 cfu·mL-1和2.30×103cfu·mL-1。2株菌对不同胆盐浓度的人工肠液均有较好的耐受性。0.1%胆盐浓度的人工肠液对2株菌的存活基本没影响。随着胆盐浓度的升高,2株菌的存活率有所下降,但都与初始菌数维持在同一数量级上。在中高浓度胆盐(0.3%和0.5%)的人工肠液中处理4h后,植物乳杆菌FJAT-7926的存活率在70%以上,干酪乳杆菌FJAT-7928的存活率在40%以上。可见这2株菌均有较强的胃肠道环境耐受力,符合微生态制剂和乳酸菌发酵功能食品菌种耐受肠胃环境的要求,在植物乳酸菌发酵食品方面具有广阔的应用前景。     

嗜酸乳杆菌抗酸抗胆汁盐能力的研究

采用MRS培养基,模拟人体胃酸环境(pH1.5～4.5)和十二指肠高胆汁盐环境(1～4g/kg)对嗜酸乳杆菌的抗性进行了研究。结果表明,嗜酸乳杆菌在pH2.5～4.5时具有较强的生存能力,37℃培养6h活菌数仍达107mL-1以上,pH1.5条件下仍有部分存活。在1～3g/kg胆汁盐条件下培养4h,活菌数仍达106mL-1以上,且能在4g/kg胆汁盐中存活。回归分析的F检验值达极显著水平。     

藏灵菇酵母菌M3耐胃肠道逆环境特性及降胆固醇的实验研究

摘 要：利用从藏灵菇中筛选的马克斯克鲁维酵母M3菌株探讨胃肠道耐受性及体外降胆固醇功效。分别在pH1.5~4.5、胆盐浓度0.3%~3.0%、NaCl浓度3.0%~6.0%的模拟胃肠道环境下,采用活菌计数法检测M3菌株的耐胃肠道逆环境特性,以邻苯二甲醛法检测其降胆固醇效果。结果表明：在pH1.5~4.5作用4h活菌数可达106cfu/ml,0.3%~3.0%胆盐及3.0%~6.0%NaCl作用8h活菌数可达105~106cfu/ml,在pH1.5~3.0(4h)及胆盐浓度0.3%~3.0%的模拟人体胃肠道环境下降胆固醇率均在60%以上。显示M3菌株具有较强的耐胃肠道逆环境特性及良好的降胆固醇能力,为开发研制降胆固醇功能食品及微生态制剂提供了实验基础。     

一株猪源发酵乳杆菌的体外特性研究

采用全自动曲线分析仪测定了猪源发酵乳杆菌X6的不同接种量、不同初始pH的生长曲线;采用琼脂平板扩散法检测该菌的抑菌能力,探讨该菌在不同高温下的存活时间;在体外模拟了该菌对人工胃液和人工肠液的耐受性.结果表明:在接种量1%、初始pH 5.3的条件下,该菌的生长情况最佳;该菌能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的生长;该菌在50、55、60℃处理2min时,存活率分别为99.19%、91.94%、80.65%;该菌在人工肠液和pH 3.0的人工胃液中存在4h后活性几乎不受影响,活菌数在109 CFU/mL以上,说明该菌具备作为益生性饲料添加剂的基本条件.     

一种新型酵母菌制剂的耐受性分析

为研究以一种新型活性酵母为主要成分的微生态制剂在模拟动物胃肠道环境下的耐受情况,运用直接计数法对酵母菌在一定时间内的生长曲线、pH值变化以及凝聚性进行测定,分析该活性酵母的生长特性,同时测定其在模拟胃肠道的酸性环境及高渗环境和不同温度环境中的活力.结果表明,该酵母具有耐受酸性pH2、胆盐浓度1％、盐浓度22％等特殊环境的能力,且可在水温64℃短时间内的情况下生长,同时在规定的耐受范围内有较高存活率且符合益生菌制剂在肠道发挥益生功能所需的菌含量,为其以后的临床应用及规模化生产提供理论依据.     

一种酸性木聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达及体外活性评价研究

通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xynA串联双拷贝工程菌,提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中,双拷贝菌株发酵活力达3 574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃,最适反应pH为2.2~3.4,在pH 1.7的酸性缓冲液下保持100 min,酶活残留70%以上。重组木聚糖酶对胃蛋白酶和胰蛋白酶也具有较好的耐受性。该木聚糖酶在低pH条件下的高催化活性、耐酸性及蛋白酶耐受性,使之具有较好的应用前景。通过体外模拟猪胃肠道环境以快速评价重组酶的作用效果。试验以小麦型日粮作为基础日粮,设计4个处理组,重组酶的添加量分别为0 U/kg、2 000 U/kg、4 000 U/kg和6 000 U/kg,每个处理5个重复,使用SDS\|Ⅱ单胃动物仿生消化系统模拟猪的胃肠道环境消化试验日粮,消化后的残渣烘干后测定其总能、粗蛋白质、中性洗涤纤维含量以计算其消化率。结果表明,添加重组酸性木聚糖酶显著提高了总能、粗蛋白质（线性和二次;P<0.01）和中性洗涤纤维的消化率（线性和二次;P<0.05）。重组酶的最适宜添加量为4 000 U/kg。     

人体消化道高抗逆性双歧杆菌的筛选

双歧杆菌是人体肠道的一种微生态调节剂,对人体消化道环境的抗逆性是其发挥抗肠道感染作用的关键。分别利用激光共聚焦显微镜,测定五株分别来源于药物和婴儿粪便的双歧杆菌对结肠癌细胞Caeo-2的黏附性,再通过耐酸和耐胆汁盐初筛,模拟胃液和模拟肠液复筛,筛选出消化道高抗逆性双歧杆菌L-1,其对Caco-2的黏附数为166±21黏附菌数／细胞;在pH3．0模拟胃液中作用2h后的存活率为72％;在胆汁盐浓度为0．2％的模拟肠液中24h,其存活率为14％。结果表明,五株双歧杆菌肠道抗逆性有所不同,L-1菌株消化道抗逆性能力最好,可用做微生态制剂菌株。     

重组乳酸乳球菌对模拟胃肠道的耐受力研究

[目的]研究重组菌株在不同p H胃液和胆盐浓度肠液中的生存情况,验证重组菌株能否在肠道中发挥作用,为其制备基因工程活载体疫苗、新型免疫型微生态制剂及功能发酵食品提供理论依据。[方法]人工模拟人体胃肠道环境,研究表达金黄色葡萄球菌纤黏蛋白原凝集素A(Clf A)的重组乳酸乳球菌MG1363/p MG36c-clf A菌株在不同p H胃液和胆盐浓度的肠液中的耐受力。[结果]重组菌株在p H 3.0的人工胃液中处理2 h后,存活率约为88.6%;在0.3%胆盐浓度的人工肠液中处理2和4 h后,存活率约为83.6%和68.2%。[结论]重组菌株对胃肠道环境有较强的耐受力,适合制备基因工程活载体疫苗、新型免疫型微生态制剂及功能发酵食品。     

纳豆芽孢杆菌配伍发酵产中性蛋白酶的性质研究

为研究纳豆芽孢杆菌SH和B1配伍发酵产物中中性蛋白酶的性质,通过Folin-酚法测定中性蛋白酶的最适作用温度、最适作用pH值、pH稳定性、热稳定性和金属离子、表面活性剂、抑制剂、模拟胃肠道环境对酶活力的影响,绘制相对酶活力变化图。结果表明:该酶的最适作用温度为70℃,最适作用pH为11.0,其次是pH为7.0,40℃时热稳定性较好,在pH6～7时比较稳定,属中性蛋白酶。金属离子、抑制剂和模拟胃环境对酶有抑制作用,而10g/LTween-80和模拟肠道环境对酶有激活作用。     

蜜环菌培养影响因子的多因素分析

[目的]探讨蜜环菌人工培养方法。[方法]研究菌材营养和pH、光照、温度等环境条件下蜜环菌生长形态变化规律和生长量。[结果]pH 5.0浸泡液浸泡菌材、黑暗条件有利于蜜环菌生长;温度较高有利于气生菌丝生长,温度较低有利于菌索生长;用带有栎树、棉秸秆的混合材料作菌材培养蜜环菌,可实现发菌快、菌索多的目的。[结论]试验结果为提高蜜环菌人工培养技术水平提供了理论依据。