细粒棘球蚴病诊断抗原研究进展

细粒棘球蚴病严重危害人畜健康,给畜牧业造成巨大经济损失。该病的早期诊断有很重要的意义。囊液抗原、原头节抗原和囊壁抗原等天然抗原是用于该病诊断的主要抗原,但存在敏感性差、特异性弱等缺点。近年来,人们合成了AgB、Ag5、EpC1、EgTPx等重组抗原,将其用于诊断,并获得了较高的敏感性和特异性。论文将用于诊断的天然抗原和重组抗原进行了综述。     

多头绦虫抗原特性的研究──应用IHA观察绵羊免疫及感染后的抗体消长规律

为了观察绵羊用多头蚴抗原免疫及感染后的抗体消长规律,为羊脑多头蚴病的免疫预防和免疫诊断提供依据,本试验应用多头蚴原头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原、囊液粗抗原致敏绵羊红细胞对绵羊免疫3次及虫卵攻击感染后的血清抗体进行间接血凝试验（IHA）检测。结果表明,原头节抗原免疫组、囊壁抗原免疫组、囊液抗原免疫组及原头节ES抗原免疫组在首次免疫后1周,抗体滴度迅速升高,第3次免疫后1周达到峰值,虫卵感染后开始下降,到感染后30周接近正常水平。多头蚴3种抗原对同种抗原免疫组血清检测敏感性、特异性优于其它抗原,原头节免疫组、囊壁免疫组、囊液免疫组抗体水平明显高于原头节ES抗原免疫组。     

猪囊尾蚴抗原成分及其诊断价值分析

猪囊尾蚴病是一种重要的人畜共患寄生虫病。囊尾蚴病的快速诊断是囊尾蚴病治疗和预防的前提,免疫学诊断方法是近年来的囊尾蚴病临床诊断中的重要辅助手段,高特异性诊断抗原的筛选为近年来的研究热点。囊尾蚴抗原组成复杂,包括囊液抗原、头节抗原、囊壁抗原、循环抗原和排泄分泌抗原等。其中的囊液抗原特异性较好,可用于免疫学诊断,而排泄分泌抗原诊断囊尾蚴的价值尚待进一步研究。     

猪囊尾蚴囊液抗原制备及ELISA检测条件的优化

本试验采用SephadexG-200层析技术纯化猪囊尾蚴（Cysticercus cellulosae）的囊液粗抗原。共获得两种（CF1、CF2）层析抗原，以酶联免疫吸附试验（ELISA）判定抗原的最适包被浓度以及抗体的最适稀释倍数，各阶段最适反应条件，结果证明CF1具有特异性强、敏感性高、稳定性好、重复性强的特点可以作为免疫诊断囊尾蚴病猪IgG。     

旋毛虫病免疫诊断抗原的筛选研究

本文报道了旋毛虫肌幼虫匀浆抗原(HO抗原),排泄-分泌物抗原(ES抗原),可溶性杆细胞颗粒相关抗原(S_3抗原),葡聚糖凝胶G200柱层第一峰(FP)和第二峰(SP)抗原,亲和层析提纯抗原(PAW)的制备及其用于ELISA和Dot-ELISA诊断旋毛虫病的价值。证实亲和层析堤纯抗原的特异性高、敏感性强,可用于旋毛虫病的免疫诊断和流行病学调查。     

Dot-ELISA检测牛副结核病抗体的研究

本文利用提纯的副结核分枝杆菌胞浆特异性抗原,建立了检测牛副结核抗体的Dot-ELISA方法。用该方法对粪便培养阳杜的32头份牛副结核病血清检测,检出27头,阳性检出率为84.4％,其敏感性与ELISA相似。与10头OT变态反应阳性牛血清检测,无交叉反应。M.phlci.M.fortuitum.M.kansasii人工高免血清经两次用M.phlci悬液吸收,用建立的Dot-ELISA方法也无交叉反应。表明设立的Dot-ELISA具良好的敏感性特异性。     

猪囊虫病快速免疫诊断技术的研究与应用

用纯化的猪囊尾蚴囊液蛋白作诊断抗原,吸附于硝酸纤维素膜片上,经４０％乙醇固定,以斑点酶联免疫吸附法检测猪囊虫病抗体。结果发现：在一抗,二抗和底液中加入１０ｍＭ ＥＤＴＡ,四甲基联苯胺作显色剂,１ｈ内即可完成诊断,并显著提高免疫诊断的灵敏性和特异性。     

炭凝反应在诊断猪囊虫病上的改进

用炭凝反应法诊断猪囊虫病,在我省长春、白城两地已经试验并有报导。近两年来经过我们实践,作了某些改进,提高了检出率(81.9%),降低了错判率(1.11%)。这个方法已在通化地区十个市县生猪收购和调入验痘上全面推广。现将我们的做法报导如下:一、抗原制备(一)原料1.囊液:用检验呈强阳性反应的囊虫病猪,将肉切片,用生理盐水将痘洗下,再用生理盐水将痘反复冲洗至无血液和组织液粘附为止,用纱布过滤,将囊剪破,收集囊液,再以3000转/分,离心20分钟,取上清液,加万分之一 NaN_3,保存在1至3℃冰箱中备用。2.炭粉:取上海活性炭厂生产的767型针剂炭粉,经105℃干燥4小时,用360目/时标准筛,经振荡机筛选出的炭粉,保存在37—40℃恒温箱中备用。3.试剂:(1)p_H7.2磷酸盐缓冲     

猪囊尾蚴特异性单克隆抗体的制备及其识别抗原成分的鉴定

通过SDS-PAGE方法对猪囊尾蚴囊液抗原成分进行了分离鉴定,并分别分离纯化了其中的16 000和10 000特异性蛋白质成分;将16 000和10 000纯化蛋白质成分分别做成佛氏佐剂苗,分组免疫BALB/c小鼠,超免后,无菌取脾脏制备脾细胞,分别与NS0骨髓瘤细胞进行融合,经阳性筛选和特异性鉴定获得2株分泌猪囊尾蚴特异性单抗的杂交瘤细胞,命名为TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5。免疫学鉴定结果表明,单抗TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5与猪细颈囊尾蚴、旋毛虫、住肉孢子虫和蛔虫抗原间不存在交叉反应;单抗TSCF-1611H12B8识别囊液中16 000和10 000蛋白质抗原条带,而单抗TSCF-1012G5B5识别囊液中的10 000蛋白质条带。     

羊脑多头蚴抗原的等电聚集电泳分析

采用等电聚焦电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性怕、囊壁可溶抗原和囊液抗原进行了分析。ＩＥＦ电泳后,分别用考马斯蓝Ｒ－２５０法染蛋白质,ＰＡＳ法染多、醛酸α－萘酯－坚固蓝法染酯酶曲同工酶、Ｎｉｌｅ‘ｓ蓝法洒脂。蛋白质染一头节可溶性抗原显带４２条,等电点４．８９－８．７２;囊壁可溶性抗原显带５０条,ｐｌ４．８０－８．６８,囊液抗原显带３９第,ｐＩ４．８０－９．８８。要色后头节可溶     

ELISA 检测猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法的建立及血清流行病学调查

反复差速离心法提纯病毒，经ＴｒｉｔｏｎＸ－１００处理后作抗原，建立了检测血清中ＰＲＲＳＶ抗体的ＥＬＩＳＡ方法。该法不与猪瘟、伪狂犬病、乙脑、细小病毒及布氏杆菌等病阳性血清反应，与美国ＩＤＥＸＸＰＲＲＳＶ抗体检测试剂盒同时对１００份样品进行检测比较，二者符合率达９８％，说明具有很好的特异性和敏感性。     

3种犬细小病毒感染诊断方法比较

本研究应用犬细小病毒抗原快速检测试剂盒、血凝/血凝抑制试验和PCR方法对120份具有腹泻/呕吐症状的患犬粪便样本进行了犬细小病毒检测。结果显示,3种方法检测阳性份数分别为60,49,68。犬细小病毒抗原快速检测试剂盒与血凝/血凝抑制(HA/HI)试验相比较,敏感性、特异性及总符合率分别为100.0%,84.5%,90.8%;与PCR法相比较,敏感性、特异性及总符合率分别为85.3%,96.2%,90.0%。从试验结果看,HA/HI法具有较高的特异性,但敏感性较低;PCR具有高度敏感性和特异性,但不适合临床推广;细小病毒抗原快速检测试剂盒,在正确操作下结果可靠,是临床诊断犬细小病毒感染的首选方法。     

ELISA 检测猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法的建立及血清流行病学调查

反复差速离心法提纯病毒，经ＴｒｉｔｏｎＸ－１００处理后作抗原，建立了检测血清中ＰＲＲＳＶ抗体的ＥＬＩＳＡ方法，该法不与猪瘟，伪狂犬病，乙脑，细小病毒及布我杆菌等病阳性血清反应，与美国ＩＤＥＸＸＰＲＲＳＶ抗体检测试盒同时对１００份样品进行检测比较，二者符合率达９８％，说明具有很好的特异性和敏感性。     

纯化多糖血凝抗原诊断耕牛日本血吸虫病的研究

<正> 本文认为经SephadexG-200提纯的大分子糖蛋白的多糖部分是血凝抗原的主要活性物质。将此抗原制成的血凝抗原诊断耕牛日本血吸虫病时具有较高的特异性。Kagan用间接血凝法诊断血吸虫病     

猪囊尾蚴抗原的免疫化学研究

应用琼脂双扩散(DID),免疫电泳(IEP),聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对猪囊尾蚴的匀浆抗原和囊液抗原进行分析。结果表明,两种抗原间存在相同的抗原成份,囊液的免疫化学性质优于匀浆抗原,并从免疫学和生物化学角度初步探索了囊液抗原和匀浆抗原中蛋白质之间的相互关系及主要蛋白质组分。     

被动血凝(PHA)快速检测日本乙型脑炎抗体方法的建立

本文报道了快速检测日本乙型脑炎（乙脑）抗体的被动血凝方法。用PEG提纯乙脑BHK抗原致敏醛化绵羊红细胞可用于人、猪血清中乙脑抗体的检测．该方法具有较高的敏感性和特异性，实验结果表明：该方法与血凝抑制试验具有同等的敏感性，两者符合率为85．12％，与ELISA符合率为91．70％。     

牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用

为了研究牛结核病新型诊断试剂，提高诊断的特异性和敏感性，我们用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验（LAT）诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌而卡介苗BCG缺失的蛋白质，热稳定性好，用此蛋白建立的乳胶凝集方法具有良好的敏感性、特异性以及较长的保存期，检测70份临床奶牛血清，与皮内变态反应和间接血凝方法相比较分别具有71．4％和88．6％的符合率。该方法还可鉴别诊断自然感染和疫苗免疫接种。我们建立的牛型分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集试验诊断方法将分子生物学手段和经典试验方法有机结合，为临床快速检测牛结核病血清特异性抗体水平提供了行之有效的方法。     

利用溶血法测定抗原效价

近年来在开展“炭凝”反应检验猪囊虫病中,对第一天使用的抗原第二天继续使用,能否影响检出率的问题,曾试用溶血法对抗原进行了测定,结果证明,方法确实而简便,一般化验人员都可以操作。操作方法:在收购生猪现场化验呈现     

酶联免疫吸附试验诊断绵羊和黄牛棘球蚴病的研究

以兔抗正常绵羊血清的IgG与CNBr活化的Sepharose 4B交联作免疫吸附剂进行亲和层析,除去绵羊棘球蚴囊液(SHF)中的绵羊血清成分。用亲和层析纯化的SHF作抗原进行酶联免疫吸附试验(ELISA),对棘球蚴感染绵羊和黄牛的敏感性分别为92.16％和95.83％;健康绵羊和黄牛的特异性分别为95.63％和93.33％;细颈囊尾蚴感染绵羊有22.73％出现阳性反应。讨论了宿主抗原对ELISA结果的干扰,以及各种带科绦虫的中绦期幼虫之间的交叉反应问题。     

应用冻干纯锥虫粉制作间接血凝诊断液的诊断效果观察

多年来，许多学者应用间接血凝试验（简称ＩＨＡ）诊断锥虫病作了大量砍究工作［１－３］，初步认为是一种操作简便、敏感、特异的血清学诊断方法。但在抗原制作上，由于锥虫纯度不够，尚有一定的假阳性反应。为了提高抗原的特异性，减少假阳性反应，笔者在江西农大牧医系彭吉生、黎超士、项崇汉老师的指导下，采用省科学院用阴离子交换剂ＤＥＡＥ纤维素分离动物血液内纯净锥虫［４、５］，经冻干成粉用来制备ＩＨＡ诊断液（简称江液），进一步提高了抗原的特异性、敏感性和检出效果。１ 材料与方法１．１ 江液的制备１．１．１ 抗原浸出液…