上海地区猪源链球菌分离株的病原特性鉴定

1997－1999年从上海地区分离出15株猪源链球菌，结合培养特性、生化特性及血清定型等对其进行了鉴定。其形态、染色及培养特性基本符合链球菌的特点，大多具有α或β溶血，生化试验结果不稳定。用国际通用的链球菌A－G乳胶分型诊断液和猪链球菌1、2型标准阳性血清检测5株分离菌，4株为C群链球菌，1株为2型猪链球菌，1株为B群链球菌，1株为D群链球菌，1株与A群和C群有交叉反应，7株不在其检测范围。小鼠对15株分离菌的敏感性有所不同。本试验表明，上海地区猪链球菌病的病原已不再是单一的C群链球菌。对新出现的2型猪链球菌，应引起足够重视。     

乳房链球菌多位点序列分型和遗传进化特征分析

为探究中国不同地区来源的乳房链球菌（Streptococcus uberis，S.uberis）之间的多样性和遗传进化关系，本研究以部分地区分离到的38株乳房链球菌为研究对象，通过对其最小抑菌浓度（minimun inhibitory concentration，MIC）测定和全基因组框架测序，获取38株菌耐药性、耐药基因及毒力基因等相关信息；通过多位点序列分型技术（multilocus sequence typing，MLST）分析了7个管家基因的等位基因谱、序列型（sequence type，ST）和克隆复合体（clonal complexes，CCs），并构建系统进化树。MIC试验共采用15种抗生素，除头孢噻呋和氟苯尼考外，38株乳房链球菌对其中13种抗生素具有不同程度耐药，且江苏地区的耐药性明显强于新疆地区；耐药和毒力基因比对后发现，仅24株菌携带耐药基因，剩余14株则不携带耐药基因且属新疆地区分离株，与MIC试验结果相符；15种毒力基因中，除cfu、hasA/B和lbp外，余下12种毒力基因的携带率均高达100%。MLST结果表明，38株乳房链球菌共属于17个ST型，其中有15个ST型从未报道，仅supan01 1株菌属于ST-5 CCs。进化树结果揭示，38株分离株之间的亲缘性较远，分布呈地区依赖性，且中国部分地区当前流行的乳房链球菌与西方国家流行的菌株差异较大。本研究丰富了乳房链球菌的MLST分型数据库，为了解中国乳房链球菌遗传特性和分布特点提供了参考依据。     

猪源链球菌的分离与鉴定

从浙江地区98例发病样品猪猪体共分离到56(57％)株猪源链球菌，对12株典型分离株进行培养特性、生化特性及血清型的鉴定，多数具α或β溶血，其中C群链球菌8株。L群链球菌1株，2型猪链球菌2株。未定群1株。小鼠对12株分离株的敏感性有一定的差异。结果表明：浙江地区分离到的猪链球菌已不是单一的C群链球菌，且C群中也不是以往的马链球菌兽疫链球菌亚种。而是停乳链球菌似马亚种。并首次分离到猪链球菌2型。     

乳房链球菌对克林霉素耐药基因的定位

采用试管稀释法和纸片法测定9株乳房链球菌对克林霉素的耐药性，通过PCR反应检测克林霉素的耐药性基因，并进行测序比较。发现克林霉素对乳房链球菌的抗菌活力较强，克林霉素耐药基因同时存在于乳房链球菌的染色体和质粒上。     

猪链球菌2型JX分离株的生物学特性

从临床表现为脑膜炎、关节炎及败血症的发病猪分离到2株细菌，分别命名为JX02和JX03，经鉴定其形态、染色及培养特性均符合链球菌的特点，具α或β溶血，生化试验结果不稳定。用猪链球菌2型、1型和9型抗血清进行凝集试验，结果2株菌均能与猪链球2型抗血清凝集，其中1株菌对小鼠和家兔均有致病性，另1株菌只能致死家兔。PCR均能扩增2株菌的主要毒力因子基因。表明发病猪的病原不同于以往的C群链球菌，不是马链球菌兽疫亚种，而是属于R群的猪链球菌。     

从虎貉分离的新群链球菌的特性研究

从病死的东北虎肾脏和貉心肌分别分离出β溶血性链球菌各１株，两株细菌生理特性基本一致，但与兰氏２０个血清群的链球菌不同。用这两株细菌提取的ｃ抗原与自家菌制备的兔抗血清结合呈阳性反应；与兰氏２０个群的抗血清结合呈阴性反应。用虎、貉株的抗血清与２０个群的抗原结合也呈阴性反应，说明这两株细菌可能是兰氏２０个血清群以外的未知群别的链球菌。     

猪链球菌的分离鉴定

从豫北的安阳县、滑县等地猪场采集的病料中分离出了5株猪链球菌。经细菌分离培养、生化试验、兰氏分群A-G诊断试剂鉴定，其中E群链球菌2株，C群链球菌2株，D群链球菌1株。药敏试验结果表明，分离的链球菌对氨苄西林、头孢他啶和头孢曲松高度敏感，对青霉素、复方新诺明和土霉素等药物产生耐药性。     

猪链球菌的分离与鉴定

文章对分离的4株猪源链球菌进行了鉴定，其形态，染色、培养及生化特性均符合链球菌的特点。用链球菌乳胶分型诊断液检潮上述分离株，均不在其检测范围，即不属于链球菌兰氏分群的A-G群，但它们凝集猪链球菌2型抗血清。分离株对小鼠不致病，而对家兔则可致病。     

牦牛源副乳房链球菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

从青海省某养殖场牦牛肺脏中分离出3株细菌,通过生化试验、16S rDNA序列分析、小鼠致病性试验和药敏试验检测。结果发现,这3株细菌为革兰氏阳性链球菌,与副乳房链球菌(Spu)同源性为99%;分离株在TSA琼脂培养基上呈光滑圆形,半透明的菌落,在血琼脂上呈α溶血;其中Spu-1分离株对小鼠具致病性;药敏试验显示,分离菌株均对链霉素耐药,对红霉素、阿奇霉素、万古霉素和麦迪霉素敏感。研究结果为了解牦牛副乳房链球菌的流行情况提供了新资料。     

猪脑炎型链球菌的生物学特性初步研究

从广西不同猪场有神经症状的病猪脑分离到12株典型链球菌.采用链球菌乳胶凝集标准诊断试剂盒和ID 32 STREP链球菌生化试剂盒对分离株进行分群、生化特性鉴定,以及小白鼠的致病性试验、药敏试验等研究.结果表明:分离株有1株为C群,9株为D群,1株为D群但与G群有交叉反应,1株为未知群;生化反应特性不完全一致,有5株的生化特性差异性较大;12株菌均呈现β溶血;小白鼠对大部分分离株不敏感;分离株对氟苯尼考、阿莫西林、青霉素G敏感,对庆大霉素、氟派酸、卡那霉素完全耐药.     

链球菌Gapc基因检测及其序列分析

根据已发表的猪链球菌2型3-磷酸甘油醛脱氢酶(Gapc)基因保守区域设计并合成1对特异性引物,对10株不同来源链球菌Gapc基因进行PCR扩增,并选择PCR产物进行克隆并测序分析,结果在10株不同来源链球菌菌株中有8株可扩增出与预期大小(1011 bp)相一致的DNA片段;选取4株细菌PCR产物进行克隆测序,发现其片段大小为1009或1012 bp,与GenBank参考菌株Gapc基因序列的核苷酸同源性为85.3%~98.3%,氨基酸同源性为87.2%~99.4%;生物学软件分析结果显示Gapc基因在链球菌属细菌中相对保守,且具有较多的潜在抗原表位。本研究为链球菌检测技术和核酸疫苗的研究奠定了基础。     

8株奶牛乳房炎链球菌的分离鉴定与耐药性分析

对湖南地区某奶牛场隐性乳房炎发病牛病原菌感染和耐药情况进行分析.对该牛场连续5次送检的乳样进行分离纯化培养、16sRNA PCR测序、药敏试验以及耐药基因检测.结果显示:共分离出链球菌8株.基因测序鉴定显示乳房链球菌4株、停乳链球菌2株、A群链球菌2株;药敏试验显示8株链球菌对氨苄西林、头孢拉定、万古霉素高度敏感,对阿奇霉素、四环素中度敏感,对诺氟沙星、庆大霉素、链霉素不敏感;耐药基因检测显示大环内酯类耐药基因ermB、喹诺酮类耐药基因gyrA、ParC检出率最高,与细菌耐药谱相关性不强.     

广西猪源链球菌分离株的分群鉴定

从广西南宁、玉林、来宾、柳州、钦州等9个市29个猪场的送检材料中,分离出95株猪链球菌.使用链球菌乳胶凝集标准诊断试剂盒(有兰氏A-G群)对其中56株典型链球菌进行了培养特性、生化试验和血清分群鉴定.结果有32株为D群链球菌,9株为C群链球菌,1株为F群链球菌,5株为G群链球菌,1株与C群和D群有交叉反应,2株与D群和G群有交叉反应,6株未能定群.小白鼠对56株分离菌的敏感性有所不同.本试验结果表明,广西地区猪链球菌病的病原已不是单一血清群,同一猪场存在着多种血清群的链球菌.这为猪链球菌病的防制提供重要依据.     

重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎和子宫内膜炎常见病原菌的体外抑杀菌试验

从患乳房炎和子宫内膜炎奶牛的奶或子宫黏液中分离菌株后经鉴定选取金黄色葡萄球菌105株、表皮葡萄球菌20株、大肠埃希氏菌20株、链球菌38株（其中停乳链球菌8株，无乳链球菌30株）和牛多杀性巴氏杆菌5株。在体外用重组溶葡萄球菌酶、苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素按照微量肉汤稀释法进行抑杀菌实验。结果表明：重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎和子宫内膜炎分离的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌（包括耐药菌株和敏感菌株）具有良好抑杀效果，对链球菌（包括无乳链球菌和停乳链球菌）和牛多杀性巴氏杆菌具有一定的抑杀效果，对大肠杆菌作用较差；苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素都有一定量的耐药菌株产生，而重组溶葡萄球菌酶对苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素耐药菌株同样具有良好抑杀效果。     

致蓝狐肺炎的犬链球菌WF1株分离鉴定及药敏试验

为了有效控制蓝狐肺炎的发生,减少蓝狐肺炎的危害,试验采取现场观察、细菌的分离培养和16SrRNA基因序列测定与比对等方法,对潍坊一蓝狐养殖场发生的蓝狐肺炎进行了病原学检查。结果表明:从蓝狐肺部分离到一株犬链球菌,命名为犬链球菌WF1株。说明蓝狐在通风不良、严重热应激,昼夜温差较大等不利因素的刺激下,抵抗力下降,感染了犬链球菌,导致严重肺炎。通过对犬链球菌WF1株药敏试验,发现该菌耐药性较强,但对美罗培南较为敏感。这对于蓝狐肺炎的防控具有一定的指导意义。     

昆明地区奶牛临床型乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

奶牛乳房炎是奶牛常见病和多发病之一，给奶牛养殖业带来了巨大的经济损失。试验对昆明地区多个奶牛场的奶牛临床型乳房炎病原菌进行分离、鉴定，从114份乳样中共分离出13种305株细菌，经培养特性、染色镜检、生化鉴定等试验，鉴定出金黄色葡萄球菌63株，占20．66％；表皮葡萄球茵26株，占8．52％；无乳链球菌53株，占17．38％；停乳链球菌23株，占7．54％；乳房链球茵19株，占6．23％；乳链球菌14株，占4．59％；粪链球菌15株，占4．92％；化脓链球菌14株，占4．59％；大肠杆菌48株，占15．74％；真菌12株，占3．93％。分别对所有分离菌株进行17种药物的敏感性试验，结果表明：除真菌外所有菌株对庆大霉素、新霉素、环丙沙星、诺氟沙星、林可霉素、乳肿康均高度敏感，对临床常用的青霉素、链霉素、鱼腥草等具有较强的耐药性。     

湖北地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳房炎的病原菌，鉴定细菌的耐药特征．为奶牛乳房炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份，经检测．其中3份为临床乳房炎样本，49份为隐性乳房炎。两地区隐性乳房炎的检出率分别为36．4％（20／55）与20％（29／145）。两地区乳房炎牛奶的细菌种类分布也各不同。其中武汉东西湖地区停乳链球菌的分离率最高，占33.3％（8／24）．而宜昌夷陵区以金黄色葡萄球菌分离率最高，占29％（9／31），其次为无乳链球菌，占25．8％（8／31）。从乳房炎牛奶中共分离到7种细菌共55株，其中金黄色葡萄球菌11株，表皮葡萄球菌10株，无乳链球菌10株，停乳链球菌14株，乳房链球菌2株，大肠埃希氏菌4株，克雷伯氏菌4株。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验，结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感．对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。     

东莞市屠宰厂环境及屠宰猪体内溶血性链球菌的分离与鉴定

为了解东莞市屠宰厂场地及屠宰猪的链球菌污染情况,从东莞市各镇街屠宰厂采集猪扁桃体样品共320份,污水水样共96份,环境空气样品共160份,屠宰用具、工作台、地板等涂抹拭子共96份,进行溶血性链球菌的分离与鉴定。结果共分离出溶血性链球菌276株,检出率为41.1%。其中停乳链球菌96株,阳性率14.3%;豕链球菌13株,阳性率1.9%;犬链球菌5株,阳性率0.7%;无乳链球菌13株,阳性率1.9%;猪链球菌1型43株,阳性率6.4%;猪链球菌2型106株,阳性率15.8%。扁桃体中溶血性链球菌的阳性率最高,为67.8%;其次是污水和器具的链球菌含量,为22.9%;而空气中溶血性链球菌的含量最低,为9.4%。结果表明东莞市屠宰猪及屠宰厂环境、污水中溶血性链球菌污染率较高,应当引起监管部门的重视。     

羊链球菌病灭活疫苗试制小结

根据《伯吉氏细菌鉴定手册》第八版分类第十四部分，将革兰氏阳性球菌分为微球菌、链球菌及消化球菌三科，其中链球菌属又根据抗原结构特性，分为群特异性抗原，型特异性抗原，核蛋白抗原三类，兽疫链球菌是其中之一，而我国又分离得到了一株兽疫链球菌的绵羊变种，命名为(Streptococcus Zooepidemicus Var.ovis）。现在我国制造羊链球疫苗所用菌株为该株培育的弱毒株F60株，用于制造羊链球菌病弱毒活疫苗或用该株培育的强毒株制造羊链球菌病灭活疫苗。该菌形态特征为革兰氏阳性，溶血，呈双球或短链（4－6个菌相连），很少单个存在，液体培养物中呈长链状，陈旧培养物中形成大小不一、不规则圆形、无运动性不形成芽胞和荚膜，兼性厌氧。在葡萄糖、胱氨酸鲜血琼脂斜面上培养10－20h呈灰色、半透明、湿润、粘稠菌苔，在血液琼脂上10－12h培养，为无色透明，露滴状菌落，有β型溶血环。在马丁肉汤中24h培养，呈中等浑浊，无菌膜，少量絮状沉淀，放置一周后上部澄清，在厌气肉汤和普通肉汤中生长不良，缓冲内汤中24h培养呈一致浑浊，不形成菌膜。     

健康鸡嗉囊和盲肠内容物正常菌群的分离与鉴定

用血琼脂平板和乳清琼脂平板，采用集性没食子酸厌氧培养法，从健康非免疫产蛋母鸡的嗉囊和盲肠内容物中分离出正常菌群，地其中２１株瘘性厌氧的无芽胞杆菌和球菌，从革兰氏染色特性、形态特性、需氧生长条件和生化反应等方面进行了初步鉴定。结果其中有类肠膜明串珠菌１株，肠膜明串珠菌１株，粪链球菌３株，屎锭球菌１株，鸡肠链球菌１少酸链力３株，乳链球菌１株，假长双歧杆菌１株，星状双歧杆菌１株，嗜酸乳杆菌１株，嗜粪乳杆