灌注半胱胺对山羊瘤胃消化代谢的影响

选用装有永久性瘤胃瘘管的３只本地空怀母山羊进行自身对照试验,试验期从瘤胃瘘管灌注半胱胺（１００ｍｇ．ｋｇ＾－１ＢＷ）,分别于灌注前１ｄ（－１ｄ）和灌注后第１,３,５,７ｄ动态采集瘤胃液,测定瘤胃液ｐＨ,氨氮（ＮＨ３－Ｎ）总脱氢酶活性（ＴＤＨＡ）,原虫蛋白（Ｐ－Ｐ）和细菌蛋白（Ｂ－Ｐ）的含量。结果表明,ｐＨ于１ｄ明显升高,至７ｄ基本恢复正常;ＴＤＨＡ于３ｄ明显上升,１,２,３号羊分别由－１ｄ的（１．     

青蒿素对山羊瘤胃发酵和微生物氮素微循环的影响

【目的】青蒿素是天然青蒿属植物的提取物,它很早就在中国传统中药中被用作抗疟疾、抗肿瘤和驱虫等药物。为探讨青蒿素对反刍动物瘤胃发酵、瘤胃内环境及其瘤胃微生物蛋白质循环的影响,确定青蒿素的对瘤胃发酵调控的效果和适宜添加量,为青蒿素作为一种新的瘤胃调控剂在反刍动物生产中应用提供依据。【方法】采用4只带有瘤胃瘘管的徐淮白山羊为试验动物,饲喂以玉米、豆粕和羊草为主组成的基础日粮,在基础日粮中分别添加占日粮干物质0,0.2%,0.4%和0.6%的青蒿素,进行4×4拉丁方设计试验,研究对山羊瘤胃发酵参数、瘤胃微生物种群变化;采用DTAF荧光染料标记细菌（FLB）的一种新方法测定瘤胃原虫吞噬细菌速率和吞噬量的影响。【结果】山羊瘤胃液中pH值平均值的范围在6.85-7.16,在瘤胃的正常范围内;青蒿素能够降低NH₃-N浓度,其中0.4%和0.6%两个处理组的瘤胃液中NH₃-N浓度与对照组差异显著。青蒿素能够提高乙酸、丙酸及、总挥发性脂肪酸（TVFA）的摩尔浓度及丙酸的摩尔浓度百分比,能降低乙酸/丙酸比,各添加组的乙酸/丙酸比显著或极显著低于对照组(P＜0.05);随着青蒿素添加量的增加,细菌蛋白产量增加,其中,以0.6%添加组最高,与对照组差异极显著(P＜0.01);0.4%和0.6%添加组的原虫蛋白产量极显著低于对照组(P＜0.01);青蒿素对瘤胃液肽浓度的均值没有显著影响。同时,添加青蒿素后,瘤胃中细菌总数增加而原虫总数减少,使瘤胃原虫种属结构变化。添加青蒿素能显著影响原虫对细菌的吞噬速率,对照组和添加0.2%,0.4%和0.6%青蒿素处理组的吞噬速率分别为：320.11cells/（cell h）、313.94cells/（cell h）、305.00cells/（cell h）、278.14cells/（cell h）。【结论】添加青蒿素能显著影响瘤胃发酵类型,具有降低瘤胃中氨态氮浓度的趋势;同时可显著降低瘤胃中原虫密度,增加了细菌密度,改变瘤胃中原虫的种属构成比例;使瘤胃内毛虫比例显著降低,使双毛虫和等毛虫比例显著提高。添加0.6%青蒿素能显著降低山羊瘤胃内菌体蛋白的微循环,使山羊瘤胃原虫吞噬速率和微生物氮循环量减少而提高饲料蛋白质的潜在利用效率。     

延胡索酸二钠对瘤胃微生物体外发酵的影响

采用体外批次培养,研究了不同浓度(0、4、7和10 mmol.L-1)延胡索酸二钠对山羊瘤胃微生物体外发酵高精料(玉米粉、豆粕粉及羊草粉,质量比为5∶2∶3)的影响,同时探讨了延胡索酸二钠对瘤胃微生物发酵的动态过程的影响。结果表明,与对照组相比,延胡索酸二钠可提高体外培养体系中总挥发性脂肪酸浓度(TVFA),显著提高总挥发性脂肪酸中丙酸的比例(P<0.05),但乙酸/丙酸值、乳酸及氨氮浓度显著降低(P<0.05),对各指标的影响程度未呈现出一致的剂量效应。动态研究表明,在整个发酵期间,延胡索酸二钠处理组的累计产气量均高于对照组,在12~24 h发酵期间,延胡索酸二钠处理组的pH值极显著高于对照组(P<0.01)。除8 h点外,在其他时间点,延胡索酸二钠处理组的乳酸浓度与对照组间无显著差异(P>0.05)。在8~24 h期间,延胡索酸二钠处理组的TVFA及丙酸比例均显著高于对照组(P<0.05)。发酵过程中,延胡索酸二钠处理组的羧甲基纤维素酶活性峰值显著高于对照组(P<0.05),而淀粉酶活性峰值显著低于对照组(P<0.05)。结果提示,延胡索酸二钠能提高发酵体系中的pH值,降低乳酸浓度,改变瘤胃发酵模式。     

银杏叶提取物对山羊瘤胃液体外发酵及微生物蛋白产量的影响

以3头安装永久性瘤胃瘘管的山羊为试验动物,以纯淀粉、纤维素和酪蛋白为底物,银杏叶提取物在瘤胃液发酵底物中的浓度设0(对照组)、0.25%、0.50%、0.75%、1.00% 5个水平,利用人工瘤胃体外培养法,通过测定瘤胃液氨态氮(NH3-N)浓度、pH值、微生物蛋白产量和纤维素降解率4个指标,探讨银杏叶提取物对瘤胃液发酵及瘤胃微生物蛋白产量的影响.结果表明: 银杏叶提取物对瘤胃液的pH值影响不大,可降低NH3-N浓度,增加微生物蛋白产量,降低纤维素降解率;银杏叶提取物的最佳添加量为0.50%.     

茶皂素和丝兰皂苷对山羊人工瘤胃发酵和瘤胃微生物的影响

 【目的】研究利用茶皂素和丝兰皂苷混合物对瘤胃发酵和瘤胃内纤维降解菌变化的影响。【方法】采用2×4因子体外培养试验设计,因子一为对照组（不添加皂苷）和添加皂苷组（添加0.3%茶皂素和0.03%丝兰皂苷的混合物）,因子二为不同精粗比水平（20﹕80、40﹕60、50﹕50及60﹕40）,研究不同精粗比以及皂苷条件下对瘤胃发酵和瘤胃微生物的影响。【结果】茶皂素和丝兰皂苷的混合物能降低瘤胃pH,且精粗比为20﹕80时差异极显著（P＜0.01）;能够增加乙酸、丙酸、丁酸以及TVFA的浓度,但从各成分所占比例来看,茶皂素和丝兰皂苷混合物的添加降低了乙酸和丁酸的摩尔百分比例,增加了丙酸的摩尔百分比例,因此降低了乙酸/丙酸;能够降低原虫真蛋白产量而细菌真蛋白产量提高,细菌与原虫的比值提高且差异极显著（P＜0.01）。同一精粗比条件下,添加皂苷组产琥珀酸拟杆菌的相对数量均比非添加组高,除精粗比为20﹕80时差异不显著外（P＞0.05）,其它精粗比状态下差异极显著（P＜0.01）;除精粗比为40﹕60时外,其它精粗比状态下添加皂苷组白色瘤胃球菌和黄化瘤胃球菌的相对数量均比非添加组高。【结论】添加皂苷有降低瘤胃液中原虫总数和pH的趋势,并能够降低原虫真蛋白产量而提高细菌真蛋白产量。茶皂素和丝兰皂苷混合物对瘤胃发酵模式和瘤胃内纤维降解菌变化有一定影响,其作用效果受培养底物精粗比的显著影响。     

日粮不同NFC/NDF比对山羊瘤胃发酵与瘤胃微生物区系结构的影响

【目的】探讨日粮中非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维（NFC/NDF）比对山羊瘤胃发酵、瘤胃细菌与瘤胃产乳酸菌菌群结构组成,以及瘤胃产乳酸菌、总细菌与大肠杆菌数量的影响。【方法】试验选用4只装有永久性瘤胃瘘管、健康阉割的长江珠三角白山羊,采用自身对照试验设计,共分3期进行,每期15 d,依次饲喂 NFC/NDF比值分别为0.42（Ⅰ期）、1.04（Ⅱ期）、2.73（Ⅲ期）的3期日粮,分别于第13、14和15天采集瘤胃内容物。采用PCR/DGGE（denaturing gradient gel electrophoresis）分析瘤胃微生物区系结构,采用real-time PCR定量瘤胃内容物中总菌、乳酸杆菌、牛链球菌与大肠杆菌数量。【结果】随日粮中NFC/NDF比值提高,瘤胃pH显著降低（P＜0.05）;瘤胃液中乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸和总挥发性脂肪酸（total violate fatty acid,TVFA）浓度均显著增加（P＜0.05）,而乙酸与丙酸比显著降低（P＜0.05）;DGGE图谱分析表明,来自NFC/NDF比值不同的瘤胃样品分别聚成一族;real-time PCR测定表明,随NFC/NDF比值提高,乳酸杆菌数量显著增加（P＜0.05）,总细菌数量显著下降（P＜0.05）,牛链球菌及大肠杆菌数量未发生显著变化（P＞0.05）。【结论】瘤胃发酵模式受日粮NFC/NDF比值的影响,随NFC/NDF比值增加,瘤胃发酵从乙酸型发酵转向丙酸型发酵;同时,瘤胃微生物区系组成发生改变,瘤胃细菌总量下降。     

特定氨基酸缺省底物对体外培养混合瘤胃微生物及其发酵的影响

 【目的】研究特定氨基酸在人工瘤胃体外培养条件下如何影响瘤胃微生物群系特征及其发酵。【方法】研究中以3只瘘管山羊作为瘤胃液供体,采用底物去除技术,底物设计分别为：全量必需氨基酸组（TEAA）,组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和支链氨基酸（BCAA）的缺省组。【结果】底物对培养液pH均值没有显著性影响,但各组pH值随时间的变化模式有所不同;培养液氨氮浓度较高,在10.99～30.51 mg/100 ml范围变动,各组氨氮浓度随时间的变化模式也有明显的不同;特定氨基酸缺省对微生物蛋白产量限制程度不同,以BCAA缺省对微生物蛋白产量的限制最大,相对于全量组混合微生物蛋白下降了44.52%。研究还发现底物对微生物区系也有一定的影响,原虫与细菌比值以赖氨酸缺省组最低（89.12%）,BCAA缺省组最高（127.60%）（P＜0.01）。另外,微生物的PCR-SSCP图谱显示微生物区系内的种属也因底物变化而发生了改变。【结论】底物氨基酸对瘤胃混合微生物群系及其发酵有一定的影响作用,支链氨基酸是瘤胃混合微生物生长所必需的氨基酸。     

不同碳水化合物结构日粮对山羊瘤胃发酵和 微生物氨基酸组成的影响

 【目的】研究日粮中不同碳水化合物结构对山羊瘤胃发酵和微生物氨基酸组成的影响,为回答“瘤胃微生物的氨基酸组成是否恒定？”这一国际学术界仍有争论的问题提供理论依据。【方法】选用4头装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采用4×4拉丁方试验设计,以玉米、豆粕、稻草为基础日粮,研究不同非结构性碳水化合物与结构性碳水化合物之比(NSC/SC)处理(A：0.33、B：0.63、C：1.17及D：2.18)对pH、NH3-N、VFA浓度及瘤胃微生物氨基酸组成的影响。【结果】随着日粮中NSC/SC的升高,瘤胃pH显著降低(P＜0.05),NH3-N浓度显著升高(P＜0.05),乙酸的摩尔百分比和乙酸/丙酸的比值随日粮中NSC/SC的升高而显著降低(P＜0.05)。不同NSC/SC的日粮下的细菌氨基酸含量中,天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸含量都存在显著差异或极显著差异(P＜0.05),原虫氨基酸中天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、脯氨酸产生了显著变化(P＜0.05)。【结论】瘤胃微生物氨基酸组成会受到日粮中NSC/SC比例的影响。     

硫胺素和硫水平对山羊人工瘤胃代谢和微生物菌群的影响

【目的】探讨在不同硫水平条件下,添加硫胺素（维生素B1）对人工瘤胃内营养物质消化代谢的影响。【方法】按2×2因子试验设计,因子一为不同的氮硫比（高硫水平,即N﹕S=5﹕1;低硫水平即N﹕S=15﹕1）,因子二为不添加和添加硫胺素（0和60 mg•kg-1）进行人工瘤胃培养试验。【结果】 添加硫胺素对pH和NH3-N浓度的影响不显著;高硫水平能够抑制细菌蛋白的合成,显著提高了瘤胃培养液中原虫和细菌蛋白质的比值（P/WB）（P＜0.05）;在低硫水平下,添加硫胺素处理组TVFA的摩尔浓度和丁酸百分含量均高于不添加硫胺素组（P＜0.05）,而乙酸低于不添加硫胺素组。在高硫水平下,添加硫胺素处理组与不添加组之间总挥发性脂肪酸和单一脂肪酸的摩尔浓度无显著差异（P＞0.05）。高硫水平能够降低培养液中硫胺素的总量,而添加的硫胺素则增加了培养液中硫胺素的总量;高硫水平可以降低乳酸的浓度;同一氮硫水平下,添加硫胺素处理组的牛链球菌的相对数量比非添加组分别降低了5.90%（P＜0.05）和2.05%（P＜0.01）;添加不同水平的硫和硫胺素对溶纤维丁酸弧菌的相对数量的影响不显著（P＞0.05）。【结论】人工瘤胃中硫水平对瘤胃发酵有一定影响,高硫水平可显著降低培养液中的乳酸浓度,提高原虫蛋白质的合成量,而抑制细菌蛋白质的合成;无机硫和硫胺素在降低瘤胃内乳酸浓度和缓解瘤胃酸中毒中起重要作用,并且二者对乳酸浓度的影响存在互作效应。添加不同水平的硫和硫胺素能够降低瘤胃液中牛链球菌的相对数量,对瘤胃液中溶纤维丁酸弧菌的相对数量的影响不显著（P＜0.05）。     

棉酚对瘤胃真菌和细菌体外发酵稻草活力的影响

体外研究了不同质量浓度5、20、40 mg/L棉酚对瘤胃厌氧真菌和瘤胃细菌发酵稻草活力的影响。瘤胃真菌发酵试验中,各处理组的底物消失率均显著低于对照组(0)(P<0.05)。产气量结果表明,20、40 mg/L两试验组的发酵明显滞后于其它各组,且发酵24 h和48 h的累计产气量显著低于对照组及51、0 mg/L试验组(P<0.05),说明20 mg/L和40 mg/L的棉酚可显著抑制瘤胃真菌的发酵。在瘤胃细菌发酵试验中,51、0 mg/L棉酚处理组的底物消失率与对照组(0)无明显差异,而20和40 mg/L棉酚处理组的底物消失率显著低于对照组(P<0.05)。累计产气量结果表明,各浓度水平的棉酚对瘤胃细菌发酵无明显的滞后效应。因此,瘤胃真菌对棉酚较为敏感,而瘤胃细菌对棉酚有较强的耐受能力,但高浓度的棉酚对细菌发酵活力有一定的抑制作用。     

甘露寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能(体外)的影响

采用批次培养的方法,研究了体外条件下日粮添加甘露寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响。甘露寡糖的添加水平为0,0.20%,0.40%,0.60%,0.80%以及1.00%。结果表明,日粮添加甘露寡糖可以提高培养液中的挥发性脂肪酸(VFA)含量;可以提高培养液中的菌体蛋白(BCP)含量,并以0.60%的添加量效果最佳;添加量在0.80%以上时,可以显著降低(P<0.05)培养液中的NH3-N含量;对培养残渣中的中性洗涤纤维(NDF)含量没有显著影响(P>0.05)。研究初步证明,日粮添加甘露寡糖可以在一定程度上提高生长绵羊的瘤胃发酵功能。     

不同底物下瘤胃真菌发酵特性及对粗料的附着

采用体外法研究了不同精粗比底物下(A组为全粗料,B组3∶7,C组5∶5,D组7∶3,E组为全精料)瘤胃真菌发酵特性及其对粗饲料(稻草秸)的附着情况。发酵试验结果表明:随底物精料比例的增加,同一时间点真菌数量呈上升趋势,A组到E组发酵96 h的累计产气量显著上升,分别为177.2 mL、198.2 mL、217.4 mL2、33.4 mL和251.5 mL,提示底物中精料比例的增加能促进瘤胃真菌的生长和发酵。此外,随底物精料比例的增加,羧甲基纤维素酶和α-淀粉酶酶活呈上升趋势,木聚糖酶酶活则呈下降趋势。稻草秸附着结果表明:不同发酵时期底物精粗比对附着于稻草秸的瘤胃真菌数量有很大影响。发酵前期(24 h),精料组(B组、C组和D组)附着于稻草秸表面的真菌孢子囊数显著高于粗料组(A组)。发酵后期(72 h),A组和B组附着于稻草秸表面和切缘的孢子囊数高于C组和D组,A组和B组附着于稻草秸表面和切缘的孢子囊数与48 h相比无显著变化,而C组和D组附着于稻草秸表面和切缘的孢子囊数显著下降。这种附着差异可能与不同精粗比底物提供的能量和附着位点不同有关。     

包膜半胱胺对水牛瘤胃消化代谢的影响

利用 3头装有长久性瘘管的雄性水牛 ,采用自身对照研究包膜半胱胺直接投入瘤胃对其消化代谢影响的动态变化。研究结果显示 ,与对照 (- 2d)相比投入半胱胺的当天 (0d)除干物质和粗纤维 2 4h消失率略有增加外 ,MCP ,NH3 N分别下降 5 .6 3% (P >0 .0 5 )和 33.88% (P <0 .0 1) ,TVFA降低 9.4 5 % (P >0 .0 5 ) ,其中A %下落 1.11个百分点 (P <0 .0 5 ) ,P %提高 2 .13个百分点 (P <0 .0 1) ,B %降低 1.0 2个百分点 (P <0 .0 1) ,A∶P由4 .6 0降到 3.99(P<0 .0 1) ;1d时各项测定指标均有所回升 ,MCP尚低 1.79% ,差异不显著 ,NH3 N仍显著低于对照 31.2 0 % (P <0 .0 5 )。TVFA升高 11.82 % (P >0 .0 5 ) ,A %变化不明显 ,P %提高 0 .6 8个百分点 (P <0 .0 5 ) ,B %下降 0 .87个百分点 (P <0 .0 5 ) ,A∶P回升到 4 .38,但仍显著低于对照 ;3d时 ,干物质和粗纤维 2 4h消失率分别增加 13.5 1% (P =0 .10 )和 15 .73% (P =0 .0 8)。MCP ,NH3 N分别升高 12 .2 5 %和 13.2 2 % ,但均未达到显著水平 (P >0 .0 5 )。TVFA极显著升高达 32 .0 3% (P <0 .0 1) ,A %仍低 0 .89个百分点 (P <0 .0 5 ) ,P %继续高于对照 (P <0 .0 5 ) ,B %已略高于对照 ,A∶P虽仍低于对照但差异已不显著。 6d时 ,干物质和粗纤维 2 4h消失     

不同水平大豆寡糖(SBOS)对生长绵羊瘤胃发酵的影响

采用体外批次培养法,研究在日粮中添加不同水平SBOS对绵羊瘤胃发酵功能的影响。SBOS的添加水平分别为基础日粮的0,0.4%,0.8%,1.2%,1.6%和2.0%等6个水平,即1个对照组(0水平组)5个试验组,每个组3个重复。结果表明:体外培养24 h,日粮中添加SBOS可以增加瘤胃液NH3-N、丙酸及总VFA、MCP浓度,提高培养底物NDF降解率,降低瘤胃液pH值、乙/丙比值,对瘤胃产气量、瘤胃液乙酸、丁酸浓度影响不显著。应用综合评定指标(MFAEI)对产气量、pH、MCP浓度、总VFA浓度、NH3-N浓度和NDF含量进行综合评定,得出添加量为1.2%的SBOS更有利于调控瘤胃发酵。     

利用体外法研究功能性寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响

试验采用批次培养法研究了体外条件下日粮分别添加异麦芽寡糖、甘露寡糖及果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响。3种功能性寡糖的添加水平分别为0(对照组)、0.20%、0.40%、0.60%、0.80%以及1.00%。结果表明:(1)日粮添加异麦芽寡糖可以提高培养液中的VFA含量,降低培养液中的NH3-N含量和培养残渣中的NDF含量,对培养液中BCP含量的影响不确定。(2)日粮添加甘露寡糖可以提高培养液中的VFA含量;可以提高培养液中的BCP含量,并以0.60%的添加量效果最佳;添加量在0.80%以上时,可以显著降低(P<0.05)培养液中的NH3-N含量;对培养残渣中的NDF含量没有显著影响(P>0.05)。(3)日粮添加果寡糖可以显著(P<0.05)提高培养液中的VFA含量;当添加量在0.60%以上时,可以显著(P<0.05)提高培养液中的BCP含量,显著(P<0.05)降低培养液中的NH3-N含量和培养残渣中的NDF含量;在本试验所设添加范围内,1.00%的果寡糖对瘤胃发酵影响的综合表现最优。日粮添加异麦芽寡糖、甘露寡糖和果寡糖有助于提高生长绵羊的瘤胃发酵功能,其中果寡糖对提高瘤胃整体发酵功能的作用效果最佳。     

Effects of Limiting Amino Acids on Rumen Fermentation and Microbial Community In vitro

Three goats fitted with cannula were used to provide rumen liquor to investigate the effects of limiting amino acids on rumen fermentation and microbial community in vitro. The removal method was used in the current experiments. Treatments are total essential amino acid (TEAA), His-removal, Lys-removal, Met-removal, and branch chain amino acid (BCAA)-removal. Results indicated that, pH-value ranged between 5.9 and 6.8, with the highest mean value for the group with BCAA-removal (6.54) in the culture. Concentration of NH3-N ranged between 10.99 to 30.51 mg 100 mL-1, with the group of TEAA recording the highest average NH3-N concentration (17.85 mg 100 mL-1). Yields of microbial protein and limiting degree on microbial growth varied with treatments (P < 0.01), and the lowest accrued in treatment with BCAA-removal (0.1389, 0.1772, and 0.3161 mg mL-1 for bacteria, protozoa, and mixed microbes, respectively), compared to the group with TEAA, microbial production of mixed microbes decreased by 44.52%. As for micro-flora, protozoa to bacteria ratio was the lowe st for the group with Lys-removal (89.12%), while the h i ghe st for the group with B CAA-removal (127.60%) (P < 0.01). Furthermore, PCR-SSCP analysis revealed that, microbial profile subjected to substrates within bacteria and protozoa groups. It was therefore concluded that, dietary amino acid influenced both rumen fermentation and microbial characteristics.     

半胱胺及其复合制剂对绒山羊血液中胰岛素,T3及瘤胃总蛋白含量的影响

选取 3 头平均体重为 16 kg左右6 月龄的辽宁绒山羊,安装永久性瘤胃瘘管和盲肠瘘管.采用 3 × 3 拉丁方设计,分为半胱胺(Cysteamine,Cs)组、协同组和对照组,并分为 3期,每期 7 d,过渡期 10 d.结果表明半胱胺组和协同组的血浆中胰岛素浓度分别比对照组提高16.85%和11.18%,差异均为显著(P<0.05 );其血浆三碘甲腺原氨酸(3,5,3'-triiodothyronine,T3) 浓度也均高于对照组,分别比对照组提高28.44%和 27.64%,差异也均为显著(P<0.05);而瘤胃总蛋白浓度分别比对照组提高22.76%和15.15%(P＜0.05).