双孢蘑菇和姬松茸灭活原生质体融合育种研究

以双孢蘑菇和姬松茸为亲本菌株,通过灭活原生质体融合,经过初筛和复筛,1株新的稳定的双孢蘑菇和姬松茸杂交高产菌株被选育出来。双孢蘑菇原生质体被热灭活（65％,30rain）,姬松茸原生质体被紫外线灭活（30w,30cm,10min）,双亲存活率为3．1×10^-7～3．3×10^-8。在聚乙二醇诱导下融合继续生存,亲本原生质体融合被实现,重组频率为4．8×10^-5。     

侧耳属种间原生质体融合杂种选育的研究

用~(60)Co-γ射线辐射诱变佛罗里达侧耳孢子,得到抗NaN_3药物的突变体。突变体的原生质体经0.83%碘乙酰胺灭活处理,与姬菇单核菌丝释放的原生质体进行融合,然后涂布在1×10~(-6)NaN_3药物选择再生培养基上,得到一个融合子菌落。经酯酶同工酶分析表明:融合子的12条区带中,与双亲共有的区带5条,与佛罗里达侧耳亲本同者2条,与姬菇亲本同者3条,新菌株独具的区带2条,证实为双亲融合杂种。     

用原生质体融合进行冬菇育种的研究

用灭活的〔Flammulinasubnudus (Pr .)Sing〕双核菌株原生质体与〔Flammulinavelutipes (Fr.)Sing〕双核菌株原生质体融合 ,在 2 2℃的条件下筛选得融合子。融合频率为 0× 10 -5～ 4 1× 10 -5。融合子与双亲有明显的拮抗性。融合子的菌丝体形态 ,氨基酸含量 ,子实体的形态 ,以及酸性磷酸酶的测定都与双亲不同。     

灵芝与糙皮侧耳原生质体融合子基因组RAPD分析

以获得弱木栓质化灵芝菌株为目的 ,利用液体培养 4d的灵芝菌丝体和培养 3d的糙皮侧耳菌丝体为材料 ,在PEG Ca2 +系统中诱导原生质体融合 ,获融合子 19株 ,融合率为 1.9×10 -5。根据其生物学特性 ,选取F3、F8两融合子及两亲本菌株的基因进行RAPD分析。结果表明 ,两亲本的核物质在融合子中发生了重组 ,并影响了酶蛋白的表达 ,而融合子在DNA水平上更接近灵芝     

蛹虫草虫草素高产原生质体融合子鉴定与筛选

以蛹虫草(Cordyceps militaris)4号和8号菌株作为亲本,采用灭活原生质体融合技术获得228个再生菌株。酯酶同工酶与ISSR-PCR方法相结合鉴定融合子,以虫草素含量和子实体性状为筛选指标,经过初步的遗传稳定性测试,得到虫草素含量显著提高的5个稳定融合子——CM59、CM61、CM69、CM136和CM186 ,其虫草素含量分别为8号菌株的1 .17 ~1 .73倍。实验证明融合子菌丝中虫草素含量普遍提高。筛选得到的5个融合子经进一步遗传稳定性验证后可用于以获得虫草素为目的的菌丝体发酵培养。     

木耳营养缺陷型突变株的诱变与鉴定：兼答林芳灿先生提出的部分问题

营养缺陷型菌株是进行原生质体融合研究的重要材料。梁平彦等(1981)曾报道,以需要酵母膏的营养缺陷型单倍体菌株为融合亲本,成功地获得了产黄青霉菌的营养互补二倍体。我们参考这一技术路线,进行了木耳营养缺陷型菌株的诱变与鉴定。首先顺利的鉴定出黑木耳菌株(A.a—1)是天门冬氨酸缺陷型;毛木耳菌株(A.p—243)由于其突变的遗传背景复杂(后来鉴定为腺嘌呤、脯氨酸和尼克酸三缺陷型),短时间内未能确定其是几种化合物的缺陷。但是做为融合亲本,只要该菌株在基本培养基不生长就基本符合要求,因为融合研究的首要问题是对     

木耳原生质体融合新种特性研究

应用原生质体融合技术,将黑木耳河北6号和野生毛木耳杂交获得的8个融合株,从中筛选出具有黑木耳商品性状,表现有明显的杂交优势,遗传特性稳定的翼杂2号、3号两个新种,经在生产中示范推广,生产性能较好。现将其特性研究报告如下。一、生物学特性 (一)温度将菌株接种于未调pH的PDA培养基斜面试管中心,置于5、10、15、20、25、30、35、40℃温度下培养,6天后测量菌丝生长长度,取日长速平均值(mm/日)。结果表明,翼杂2号菌丝生长起始温度、适宜温度和最适温度分别为15℃、25～35℃和30℃,与亲本河北6号一致,翼杂3号菌丝生长起始温度为20℃,高于亲本株(表1)。     

金针菇与凤尾菇科间原生质体融合研究

金针菇与凤尾菇皆属四极生异宗结合食用菌,其双核异核体菌株都具有锁关联合遗传标记本研究以金针菇和凤尾菇的双核异核菌株为亲本,将热灭活的凤尾菇原生质体,以ＰＥＧ为融合剂,在高下,高ＰＨ值条件下,与金针菇原生质体融合,结果从１３２９个再生菌株中选择出６株双亲细胞质和细胞核都融合的无锁状联合菌株,经融合核分裂技术处理后,融合核分裂成为具有锁状联合的双核菌株。     

平菇灭活原生质体融合育种研究

干菇种间原生质体融合的成功,使得平菇的遗传育种工作出现了崭新的面貌。但是,在开展原生质体融合时,通常对亲本菌株加入一些遗传标记,以便融合后顺利地挑选融合子。在实践中人们又发现所加的遗传标记,往往会因为干扰了其正常的代谢途径,而降低了亲本菌株的生产能力,对育种的效果不利;同时,做遗传标记又会耗时、费工,消耗大量的人力、物力,增加育种工作的时间和成本。因此,自1977年以来,人们就开始了用灭活原生质体进行微生物融合育种的尝试。美味平菇A76和佛罗里达平菇A95是侧耳属两个不同的种,为了将它们的优良性状结合在一起,人工创造新品种,我们采用灭活原生质体融合技术,经过两年的研究,获得了美味平菇A76和佛罗里达平菇A95种间融合子。对融合子进行了多代选育,获得了性状稳定的高产优质新菌株。现将研究结果报道如下。     

灵芝原生质体融合子的SRAP分子标记鉴定

为验证新型SRAP分子标记技术用于灵芝(Ganoderma lucidum)原生质体融合子鉴定的可行性,通过亲本菌株赤芝05、06对153个SRAP引物组合进行筛选,应用经过初筛和复筛得到的4个清晰稳定、且含有两个亲本各自特异扩增条带的SRAP引物组合,对2个亲本菌株、2个只与亲本05有拮抗的融合子、2个只与亲本06有拮抗的融合子、30个与双亲均有拮抗的融合子进行SRAP扩增.结果表明,2个只与亲本05有拮抗的融合子仅扩增出06的特异条带,2个只与亲本06有拮抗的融合子仅扩增出05的特异条带,30个与双亲均有拮抗的融合子中,有7个融合子同时扩增出05和06的特异条带,证明此7个融合子应是05和06融合产生的菌株,也证明SRAP标记可以用于灵芝原生质体融合子的鉴定.     

木耳新品种‘吉黑 1 号’

 木耳新品种‘吉黑1 号’,菌丝体洁白浓密,菌落边缘整齐,气生菌丝发达呈绒毛状。子实 体单片簇生,单个耳片直径3.2 ~ 5.8 cm,厚0.11 ~ 0.13 cm,“小孔”栽培单片耳率最高可达90%以上。 为中晚熟品种,从接种到采收118 ~ 130 d。每100 kg 干料产鲜木耳79.8 kg。对绿色木霉等杂菌抗性较强。     

毛木耳新品种‘申耳2号’

毛木耳新品种‘申耳2号’是由2007年采集于内蒙古赤峰的野生资源经人工驯化育成,属于中高温品种。发菌周期短,抗杂菌能力强,易形成原基,适应性强,每袋产量770 g左右。子实体烘干后正面为深棕色,背部为灰白色,适合制干品销售。     

木耳新品种‘旗黑 1 号’

 木耳新品种‘旗黑1 号’,菌丝体洁白浓密,气生菌丝发达呈绒毛状,菌落边缘整齐。子实体单片簇生,黑色,单个耳片直径5 ~ 10 cm,厚0.10 ~ 0.13 cm。从接种到采收115 ~ 125 d。每100 kg 干料鲜耳产量为78.7 kg。抗绿霉等杂菌能力较强。     

木耳新品种‘丽黑1号’

木耳新品种‘丽黑1号’是从浙江丽水市白云山采集的野生黑木耳中分离、驯化选育而来。菌丝抗高温能力强,出耳早,优质耳比例高,产量稳定,适合袋料栽培,适合干销或鲜销。     

毛木耳新品种‘申耳1号’

‘申耳1号’毛木耳由2007年采集于内蒙古赤峰县的野生菌株经人工驯化而来。发菌周期短,原基数量多,朵形大小适中,类似耳状,产量高,生物转化率在90%以上,子实体弹性强,口感糯,表面光滑,适合鲜品销售。     

木耳属四个野生菌株的RAPD图谱分析

应用RAPD技术对木耳属四个野生菌株进行了DNA指纹图谱分析，综合10个随机引物的RAPD聚类分析结果表明，供试的四化上野生菌株与毛木耳（Auricularia polytricha)归为一类，四个野生菌株间存在一定的遗传差异，不是同一菌株，本研究揭示了木耳属四个野生菌株的类源关系及DNA同质性，为进一步界定其系统分类地位提供了较为重要的科学依据。     

市售不同品种木耳蛋白质和水溶性多糖含量的研究

以从市面上购买的不同木耳子实体为样品,经过组织前处理,利用二奎林甲酸(BCA)检测法和苯酚-硫酸法测定了子实体中的蛋白质和水溶性多糖含量,以期筛选出高蛋白高多糖含量的优势品种.结果表明:椴木黑木耳的蛋白含量占鲜重的0.615％,其水溶性多糖含量占干重的4.304％,是各种市售木耳中营养价值较高的品种.     

东北地区黑木耳生产菌株栽培特性研究

选用全光地摆的栽培模式在特定的栽培季节对东北地区主栽的27个黑木耳生产菌株进行栽培试验,以黑木耳子实体形态特征和出耳周期长短为依据鉴别黑木耳菌株。实验结果表明,以黑木耳子实体形态特征和出耳周期长短为依据可以鉴别黑木耳生产菌株,并以此为依据将供试的27个黑木耳菌株划分为三个组群。     

毛木耳新品种‘申耳4号’

‘申耳4号’是从毛木耳品种‘黄耳10号’中系统选育出的新品种。发菌周期短,一般35 d即可发满菌袋,耐高温,开袋后易于现耳,出菇整齐,转化率可达95%以上,子实体大小适中,表面光滑,暗红色,背部深棕色,烘干后正面暗棕色,背部灰白色,适合做干品或鲜品销售。     

木耳新品种‘吉黑3号’

木耳新品种‘吉黑3号’是采用朵型定向育种模型,以野生木耳菌株与地方品种为亲本杂交选育而成。生育期为95 ~ 105 d,属于中熟品种;经“小孔”栽培后,单片耳率高达92%;产量为每100 kg干料产鲜耳81.7 kg,适合东北地区短袋栽培。