云南部分兰花病毒病的病害调查及病原鉴定*

 对云南部分兰花种植区的文心兰、蝴蝶兰、大花惠兰上发生的病毒病进行了调查与病原鉴定。兰花感染病毒后,主要以在叶片形成黑褐色的坏死斑为主。在文心兰不同品种中,T系列的病毒病发病率最高。经电子显微镜、血清学和RT-PCR等方法综合鉴定,确定危害云南兰花的主要病毒为建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV ) 和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV ),其中CyMV为优势种,有时出现CyMV 和ORSV复合侵染的情况。     

华南番木瓜病毒病及环斑病毒株系调查鉴定

根据田间调查、病毒粒子和内含体形态，血清反应，寄主范围和症状，昆虫介体，物理性质，潜育期等试验结果，认为华南４省区的番木瓜病毒病只有ＰＲＶ一种，根据在西葫芦上的症状特点，将ＰＲＶ初步区分为４个株系，即Ｙｓ，Ｖｂ，Ｓｍ和Ｌｃ。在３１３份标样中，它们单独所占比例分别为４０．５７％，１０．２２％，０．６４％，４．４７％Ｙｓ＋Ｖｂ（复合侵染）占４４．０８％这表明Ｙｓ为优势株系，Ｖｂ次之，Ｌｃ和Ｓｍ发生少分     

华南番木瓜病毒病及环斑病毒株系的调查鉴定

根据田间调查、病毒粒子和内含体形态、血清反应、寄主范围和症状、昆虫介体、物理性质、潜育期等试验结果、认为华南４省区的番木瓜病毒病只有ＰＲＶ一种。根据在西葫芦上的症状特点，将ＰＲＶ初步区分为４个株系，即Ｙｓ、Ｖｂ、Ｓｍ和Ｌｃ。在３１３份标样中，它们单独所占比例分别为４０．５７％，１０．２２％，０．６４％，４．４７％，Ｙｓ＋Ｖｂ（复合侵染）占４４．０８％，这表明Ｙｓ为优势株系，Ｖｂ次之，Ｌｃ和Ｓｍ发生少分布不广。研究结果还表明，以前有人报道的ＰＭａＬＶ实则是本研究的Ｖｂ，而不是一个新病毒。     

广西西瓜花叶病病原病毒鉴定

从广西各西瓜主产区采集到表现花叶症状的样品124份,经ELISA测定,所采样品均与西瓜花叶病毒二号(WMV-2)抗血清呈阳性反应,与黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)抗血清呈阴性反应.取典型样本摩擦接种西瓜、西葫芦、南瓜、黄瓜、毛节瓜、瓠瓜、罗汉果等葫芦科植物表现花叶症状;接种苋色藜产生局部坏死斑;接种番木瓜、普通烟、心叶烟、番茄、辣椒、豇豆等无任何症状反应.该病毒还可通过棉蚜和嫁接传染.病毒初提纯液经电子显微镜观察,发现许多大小为12nm×(600～800)nm的线状病毒.ELISA测定结果显示,该病毒与莴苣花叶病毒(LMV)、大豆花叶病毒(SMV)抗血清呈阳性反应,它们之间有密切的血清学关系.据此,广西西瓜花叶病的病原病毒应为西瓜花叶病毒二号(WMV-2).     

千金子花叶病的毒原鉴定

在陕西杨陵地区栽培的千金子花叶毒林上分离到一种病毒,经汁液磨擦接种三生烟及心叶烟产生环斑症状。其TIP为60℃,DEP为10~(-2)～10~(-3),L则为4～5天。能通过种子传播但不能通过蚜虫传播。该病毒与TRSV抗血清有明显的沉淀反应。在电镜下观察到直径30nm的球状粒子。该病毒被鉴定为TRSV。     

番木瓜的PRSV接种及其组培苗的RT-PCR检测

随着番木瓜环斑病毒病的加重,对番木瓜进行PRSV病毒接种,是有效防治PRSV和番木瓜抗PRSV重要措施之一.根据GenBank上已有的PRSV-CP基因序列,设计1对特异引物PRSVCP3/PRSVCP4,同时根据EF183499、HQ424465和美国夏威夷PRSV-CP序列设计保守区特异性引物PRSVCP1/PRS...     

云南蔗区甘蔗花叶病流行原因及控制对策*

 近几年云南蔗区甘蔗花叶病大发生流行，主要原因是存在复杂性病毒病原；田间多个主栽品种高度感病；气候异常、高温少雨天气较突出以及植期多样化、引种频繁、长期连作、宿根栽培和无性繁殖等不良气候和不适栽培条件。文中提出云南省今后甘蔗抗病育种目标和甘蔗花叶病的控制对策。     

华南地区番木瓜环斑病毒和畸型花叶病毒调查鉴定研究

调查鉴定了广州、南宁、厦门和福州市番木瓜病毒病病原种类，发现都是由番木瓜环斑病毒引起的，未发现番木瓜畸型花叶病毒。     

潢川县小麦黄色花叶病发病规律及病原鉴定

潢川县小麦黄色花叶病发病规律及病原鉴定孙谦徐宝忠邵军张守龙贺善学孙占军（潢川县植保站，潢川４６５１００）于嘉林蔡祝南李大伟（北京农业大学病毒室）７０年代初，潢川县发现由土壤真菌传播的小麦花叶病，因发生面积小未引起重视。８０年代以来该病呈逐渐蔓延之势，...     

茄子花叶病病原病毒鉴定

茄子花叶病是近年来山东分布较广的一种病害。发病植株表现斑驳、花叶、严重株叶片卷曲、矮化和畸形。从发病植株上分离到一病毒分离物(Smv—1)。可以通过汁液摩擦接种传播和由蚜虫非持久性传播。人工摩擦接种可侵染8科中的21种植物。系统侵染普通烟、心叶烟、黄瓜和番茄。局部侵染苋色藜、昆诺阿藜。此病毒的钝化温度为55～60℃10分钟,稀释限点为10~(-(?)～10~(-4)。体外存活期为5天(22C)。用差速离心法可以提纯该病毒,部分提纯的病毒最大紫外吸收峰为259nm,最小吸收峰为239nm,表现为典型的核蛋白吸收。A260/A280=1.68。SDS—不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒得到外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25000道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,Smv—1与黄瓜花叶病毒抗血清有阳性反应。用1.5%醋酸双氧铀负染。电镜观察部分提纯病毒粒子为球形(正二十面体)、直径为28～30nm。根据上述特征,Smv—1是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

云南香蕉细菌性软腐病病原鉴定

为了明确引起云南香蕉细菌性软腐病的病原菌,为该病害防控提供基础,在植蕉区采集香蕉细菌性软腐病病害标样,对病原菌进行分离、致病性测定、寄主范围测定、形态学观察、生理生化反应及16S rDNA序列分析。结果表明：分离获得的菌株均有致病性,病原菌形态特征、寄主范围、生理生化测定结果与Erwinia chrysanthemi相符。16S rDNA序列分析表明：代表性菌株的测序结果与E.chrysanthemi（序列登录号：GU811708）的同源性达到99%以上,系统发育树分析结果与之一致,表明引起云南香蕉细菌性软腐病的病原菌为菊欧氏杆菌（E.chrysanthemi）,该病害是近年来发生在云南植蕉区的一种新病害。     

云南省水稻细菌性基腐病病原的初步鉴定

 2000年从云南省楚雄市采到水稻细菌性基腐病标本,经病害症状观察,细菌分离培养,革兰氏染色,鞭毛染色,致病性测定及致死温度测定的结果,基本上与前人^［1］报道的相符,其病原菌初步鉴定为菊欧氏杆菌（Erwinia chrysanthemi)。     

甘蓝花叶病病毒种类鉴定及BrYV遗传变异分析

为了明确引起甘蓝花叶病的病毒种类,利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）高通量测序技术,并结合分子生物学方法查找甘蓝样品中的病毒序列,发现存在芜菁花叶病毒（turnip mosaic virus,TuMV）、黄瓜花叶病毒（cucumber mosaic virus,CMV）、蚕豆萎蔫病毒2（broad bean wilt virus2,BBWV2）、烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）和芸薹黄化病毒（brassica yellows virus,BrYV）等5种病毒。采用RT-PCR技术进行验证,结果显示样品检测到BrYV、TuMV和CMV共3种病毒。对获得的BrYV外壳蛋白基因（coat protein,cp）进行测序和系统进化分析,获得1条576 bp的BrYV cp基因全长序列,与GenBank中BrYV分离物cp基因核苷酸序列同源率为88.0%~96.4%,氨基酸序列同源率为90.1%~95.8%。基于cp基因序列构建系统发育树,BrYV-GL为BrYV-C基因型,与中国内蒙古油菜BrYV（GenBank登录号EF079907）分离物cp基因序列聚集在一起,亲缘关系较近。BrYV cp基因共检测到4个潜在重组事件,可为后续甘蓝花叶病的研究和防治提供参考。     

驻马店地区小麦黄花叶病害病原鉴定与品种抗性评价

为了解驻马店地区小麦黄花叶病病毒分离物的类型及该地区主要推广小麦品种对小麦黄花叶病的抗性表现,对驻马店地区13个不同地点同一小麦品种上病毒分离物进行鉴定,并在同一田间试验条件下,对驻马店地区主要推广的12个小麦品种进行田间抗性评价。结果表明,随机选取的13个地点中有4个地点的样品中检测出小麦黄花叶病毒(WYMV),占总样品的30.8%,所有地点均未检测到中国小麦花叶病毒(CWMV)。在供试的12个小麦品种中,豫农416和衡观35表现为高抗,占供试品种的16.7%;泛麦8号和华育198表现为中抗或中感,占供试品种的16.7%;另外8个品种则表现为感病,占供试品种的66.6%。不同小麦品种在病圃区的产量及产量构成因素存在较大差异。以上结果表明,WYMV在驻马店地区有一定范围的分布,暂未检测到CWMV;该地区主推的小麦品种中豫农416和衡观35对小麦黄花叶病具有一定的抗性。     

云南蒙自石榴叶霉病病原菌鉴定

[目的]鉴定云南蒙自石榴（Phomopsis punicae Linn.）霉病病原菌,为进一步研究蒙自石榴叶霉病有效防治方法奠定基础。[方法]病原分离采用组织分离法,通过分生孢子悬浮液接种,用柯赫氏法则对其致病性进行验证。显微镜下观察菌丝形态及产孢结构,测量孢子大小,根据形态特征进行鉴定。[结果]显微镜下,分生孢子梗单生,直立,顶部微弯或曲膝状,深褐色,有隔膜,（129.3～352.5）μm×（3.5～4.7）μm;枝孢短链生,褐色,有或无隔膜,具油滴,（9.0～36.0）μm×（4.0～5.0）μm;分生孢子链生,椭圆形,近球形,褐色,无隔膜,具油滴,（4.0～8.0）μm×（3.0～4.0）μm。[结论]叶霉病发生在石榴生长后期,一般危害石榴老叶,形成近圆形或不规则形黑褐色病斑,病斑上长橄榄绿色霉层,为病原菌的子实体。造成石榴提早落叶。其病原菌鉴定为极细枝孢（Cladosporium tenuissimum Cooke）。     

云南木薯一种叶斑病病原的分离鉴定

2010年10月,在云南保山潞江坝木薯种植区发现了一种大面积发生的木薯叶斑病。笔者对这种叶斑病的病原菌进行了分离培养,经致病性鉴定、形态观察和ITS序列分析,将这种叶斑病的病原鉴定为狗尾草离蠕孢菌Bipolaris setariaeSawada。     

云南省唐菖蒲花叶病的鉴定研究

 对云南省的唐菖蒲花叶病进行调查和病样采集,通过鉴别寄主反应、电镜负染观察、免疫双扩散实验证实此病原为黄瓜花叶病毒CMV.     

云南甘蔗宿根矮化病病原检测*

 利用从澳大利亚引进的甘蔗宿根矮化病病原（RSD）的标准抗原抗体，建立了I-ELISA检测甘蔗宿根矮化病的方法。采用电镜负染法和I-ELISA法，对采自云南红河、开远、新平蔗区的42个样本进行RSD检测，结果表明：29个样本为阳性，13个样本为阴性，确认云南蔗区存在RSD。     

奇台窖藏马铃薯病害病原鉴定

【目的】研究引起新疆奇台窖藏马铃薯发生病害的病原种类,为新疆马铃薯窖藏病害的科学防治提供依据。【方法】2019年3月采集新疆奇台农场3个大窖病薯(大西洋品种)块茎。采用组织分离法、结合显微形态观察和柯赫氏法则、结合16S rDNA、ITS等鉴定方法,分离得到马铃薯窖藏病害的病原菌。【结果】从病薯中总计分离出12株菌株,其中致病菌有致病性尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、虱状赤霉(Gibberella pulicaris)、白地霉(Geotrichum candidum)。【结论】 致病性尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和虱状赤霉(Gibberella pulicaris)的致病性较强;由白地霉(Geotrichum candidum)引起的马铃薯病害在国内为首次报道。     

郁金香鳞茎腐烂病的病原鉴定

郁金香属百合科草本。是当今风行全球的一代名花 ,是非常高雅的盆栽和插花材料。荷兰人因栽种此花而致富 ,成为首屈一指的“郁金香大国”。因郁金香很难留种 ,我国大多靠从国外进口 ,近年来郁金香种植面积逐年增加 ,但种球鳞茎腐烂相当严重 ,影响郁金香品质和观赏价值 ,造成巨大的经济损失。近年来我们对云南省和江苏南京郁金香种植基地进行调查 ,对引起鳞茎腐烂的病原菌作了分离、鉴定 ,为防治该病提供理论依据。1　材料与方法1 1　材料郁金香鳞茎采自江苏省南京和云南省呈贡县种球种植基地。1 2　病原菌分离、纯化取湿腐症状的郁金香鳞…