牛人工授精技术

牛的人工授精技术分：冷冻颗粒精液制作工艺(引进良种公牛→采精→制成颗粒冻精→利用液氮在零下196℃的条件下保存)和人工授精操作流程(准备工作→保定母牛作发情鉴定→器械消毒→利用2.9％柠檬酸钠液解冻精液→镜检活力达0.35以上→对发情适期母牛输精)两个部分。(一)精液的解冻冷冻精液使用前必须使用解冻液解冻，方能进行人工授精。1.解冻液配制：解冻液一般使用2.9％的柠檬酸钠溶液和维生素B12(2毫升1支)。解冻液配制必须准确，浓度不可偏高偏低，pH为6，宜现配现用，也可用安瓶分装备用。维生素B12注意避光保存，防止购进伪劣产品，…     

双优解冻液

双优解冻液是牛羊冷冻精子的良好复苏剂,其解冻质量的各项指标均比其它解冻液高。我们用2.9％的柠檬酸钠、维生素B_(12)注射液和双优解冻液分别对牛羊颗粒冷冻精作了解冻效果比较,并用解冻精液对内蒙古乌盟冷冻站的奶牛进行了输精试验。结果,双优解冻液解冻的精液比用上述二种溶液解冻的精液精子活力提高26.4％(20％～     

牛人工授精操作过程中应注意的问题

1 冷冻精液的解冻 冷冻精液的解冻关键是“快取、快投、快融解”。 (1) 颗粒精液的解冻方法 先将1毫升解冻液注入无菌试管内,然后把解冻缸内水温调到41～42℃,再把试管放入,待管内解冻液温度恒温至40℃时,立刻从液氮罐内取一粒精液解冻。     

不同解冻程序对荣昌猪冷冻精液解冻效果的影响

为优化猪冷冻精液解冻程序,本研究使用3种解冻液(M、J和C)对荣昌猪冷冻精液进行解冻,检测冷冻精液在不同解冻温度(32、37、42、47、52℃)和不同解冻时间(10 s或20 s)解冻后的精子活率、精子活力、快速前进运动精子数和慢速前进运动精子数,并使用因子分析法评估不同解冻液最佳解冻程序。结果显示:解冻液M在保存指标和持续指标方面较优;解冻液J在即时指标和持续指标方面较优;解冻液C在持续指标方面较优。综合分析表明,解冻液M和解冻液J的最佳解冻程序为42℃水浴解冻20 s,解冻液C的最佳解冻程序为32℃水浴解冻20 s。     

不同解冻液对精子呼吸强度的影响

呼吸是精子重要的生命现象之一。当精液中有氧存在时精子就通过呼吸,氧化代谢精液中可以利用的营养物质。本试验测定了4种不同解冻液所解冻公牛冻精中精子的耗氧量,结果表明,不同解冻液对精子的呼吸强度有显著影响。一、材料与方法 (一)解冻液的组成见《中国奶牛》,1991年,第4期。 (二)精液山西省家畜精液冷冻中心HB63号公牛颗粒冻精。     

维生素B12解冻牛冷冻精液效果探析

用ＶＢ１２液在３５℃,４０℃,７０℃三种解冻温度下,解冻牛冷冻精液,并与Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠液作解冻效果比较。结果表明：三种解冻液解冻后精子的活力相近,经过保存后ＶＢ１２液显著高于２．９％柠檬酸钠液（Ｐ〈０．０５）。而与Ｔｒｉｓ－果糖液相近,不同解冻液解冻后的精液作精子上游法测定,在第２、第３段中所含精子数,Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠解冻液解冻的每段递减３０％￣９０％,而ＶＢ     

提高奶牛冷冻精液使用效果的措施

如何提高奶牛冷冻精液的使用效果，在奶牛繁殖中是人们一直追求的目标。根据多年的实际生产经验，在冷冻精液的冷冻方法、解冻液配方、解冻温度、解冻后的保存温度等方面进行了改进，取得了较好的效果。     

不同解冻液对公牛冻精酶活力的影响

家畜精液中的酶类对精子的代谢和受精过程起着重要作用。本试验测定了4种不同解冻液所解冻的同一公牛冻精中GOT(谷草转氨酶)、LDH(乳酸脱氢酶)和LDH-X(乳酸脱氢酶-X)的变化。结果表明,不同解冻液对精液中上述3种酶活性有显著影响。笔者认为这是导致4种解冻液所解冻精液的受胎率不同的重要原因之一。     

鸡精液最佳冷冻时间和解冻温度的确定

以农大褐父母代蛋种鸡为材料，研究鸡精液的最佳冷冻时间和解冻温度表明，在冷冻保护液中保存3Omin的精子活力最高（0．38），冷冻精液解冻温度以30～40℃之间最好，解冻20min以内输精，方可获得较理想的受精率。     

VitB12和0.9%NaCl溶液替代牛冻精解冻液的试验报告

为了便于在农村开展牛冷冻精液人工授精工作，充分发挥现有技术设备的作用，加快黄牛品种改良的进程，提高情期受胎率。针对农村地区自制解冻液较为困难，依据国内外对VitB。和0．9％NaCI溶液可作替代牛冷冻精液的解冻液的报导，于1998年3月一1998年7月历时4个月开展了以医用＼TitBIZ和0．9％NaCI溶液作牛冷冻颗粒精液解冻液的试验，目的在于摸索农村地区安全、卫生、经济、简便而有效的解冻液应用技术，促进农村地区牛杂交改良工作的进展。州旧l。和0．9竹地问溶液在农村乡镇医院可购得，使用方便。将试验结果报告如下：l材料和方法1…     

牛细管冻精的解冻

细管冻精是将稀释后的精液平衡后灌装进无毒塑料细管中,经冻制而成的一种冷冻精液,与传统的颗粒型精液相比有不易受污染,解冻方便,不需另外配备解冻液等特点.     

猪精液冷冻保存技术研究

公猪精液浓稠部分按1:0.5～1比例稀释。精液稀释液主要由8％葡萄糖溶液77毫升、甘油3毫升、蛋黄20毫升组成。精液温度从室温20～30℃降至10～15℃,耗时3～4小时,然后从10～15℃降至7～9℃,耗时1～2分钟。降温平衡后,精液用铜筛网在液氮面上制成颗粒冷冻精液并放在液氮中保存。冷冻精液用“干解法”解冻,解冻温度50～60℃,解冻后精液与解冻液以1:0.5～1混合。解冻液主要由5％葡萄糖100毫升、10％胺钠加5毫升组成。每次输精输入已解冻的冷冻精液10～20毫升,内含活精子10～15亿。每发情期输精1次或2次,共配种682头母猪,产仔率73.75％。共有503头母猪产仔,平均每窝仔猪10.50头。其中7头母猪用保存了三年的冷冻精液配种,全部受胎。冷冻精液解冻后四小时内输精,受胎率差异不显著。     

猪冷冻附睾精子与体外成熟卵母细胞的体外受精

研究了不同解冻温度（39－41℃，58-60℃,69-71℃)和解冻方式（干解冻、湿解冻）对猪冷冻附睾精子解冻后的活力、存活指数以及受精能力的影响。结果表明，采用同一种解冻方式，经高温解冻的精液，虽然解冻后的活力较好，但活力却下降很快，精子的存活时间和存活指数均不如低温解冻的精液。采用同一种解冻温度，湿解冻所需的解冻时间相对短，解冻后精子活力相对低，但存活时间和存活指数相应优于对应的干解冻试验组。经低温解冻的精子，受精能力最强，精子的受精能力与解冻时间呈显著正相关（r=0.91613,P=0.0103).使用改良TCM199培养液，猪受精卵和颗粒细胞单层共培养能发育至早期桑椹胚。     

用含果糖成分的解冻液解冻牛颗粒冷冻精液的效果试验

目前、我区在牛的冷冻精液配种过程中,一般都使用2.9%柠檬酸三钠液作为解冻液,由于此液成分单纯,满足不了精子代谢的营养需要,使用这种解冻液一般只能现配现用,给生产应用带来了许多不便.为了进一步提高牛颗粒冷冻精液的解冻效果,我们在解冻液小加入能被精子直接利用的果糖成分,以期达到提高配种受胎率的目的,特进行本试验.     

解冻液的筛选和应用

<正> 解冻液的优劣直接影响冷冻精液解冻后精子的一些生理、生化指标。目前国内所用的解冻液不尽一致,有柠檬酸钠液、维生素B_(12)及奶类等,应用效果有一定的差异。为了摸索出较理想的解冻液用于生产,南京农业大学公牛站通过试验配制了“新解冻液”。“新解冻液”在广泛用于生产之前,为鉴定其质量,曾对该液与柠檬酸钠、维生素B_(12)液进行多项指标效果的对比,并作了受胎率试验。1 材料与方法试验用的三种解冻液编     

山羊夏季精液品质分析及冷冻方法优化

用假阴道法采集山羊精液,进行品质分析,应用正交设计L(934),4因素为稀释液种类(A)、稀释比例(B)、平衡时间(C)和解冻液(D),每因素选择3个水平,分析解冻精液品质,构建其综合指数,优化夏季山羊精液冷冻-解冻方法。结果表明:乏情季节精液品质略有下降,但仍能满足制作冻精的需要。4因素影响解冻后精液综合指数的显著性顺序是A>C>D>B,其中稀释液种类对解冻后精液综合指数影响差异显著(P<0.05),稀释液Ⅱ优于稀释液Ⅲ和Ⅰ;精子稀释密度影响差异不显著(P>0.05),但稀释至108个/mL时综合指数高于稀释至5×108个/mL和2×108个/mL;平衡时间对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),平衡4h效果优于1h和2h;解冻液种类对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),维生素B12较TALP液和2.9%柠檬酸钠效果好。优选各因素最佳水平,确定夏季山羊精液冷冻-解冻方法为选用高卵黄稀释液Ⅱ,将精子密度稀释至108个/mL,平衡时间4h,以维生素B12作为解冻液40℃湿解冻。     

秦川牛颗粒冷冻精液解冻液配方的选择及适宜解冻速度

用不同配方的解冻液解冻秦川牛颗粒冷冻精液与2．9％柠檬酸钠对比，结果表明解冻后精子活力差异不显著，但在35℃条件下的存活时间和在5℃条件下保持受精能力的差异极显著；对用不同解冻速度解冻后精子的活力及5℃条件下保持受精能力时间的对比结果表明，75℃／s秒的解冻速度效果最好，组间差异极显著。     

使用不同解冻液对猪颗粒冻精的解冻结果

对颗粒冻精进行解冻时,先将其从液氮贮存器中取出,静置于泡沫聚苯乙烯容器中约三分钟,之后再放入50℃的解冻液中。作者对于经不同方法改良的解冻的精液,在精子存活率、精子代谢及顶体所受影响和受胎率几方面进行了研究和调查。经不同解冻液解冻的颗粒冻精液,在30℃下放置三小时后进行检查,结果如     

维生素 B_(12)注射液作为奶牛冻精颗粒解冻液的大群试验及使用效果观察

我国奶牛的人工授精六十年代已经普及,七十年代开始应用冷冻精液,并很快在全国推广、普及。运用冷冻精液进行人工授精,首先必须对冷冻颗粒进行解冻,用作冷冻颗粒解冻液的种类很多,在我国近年来应用较多的是2.9%的柠檬酸钠液和消毒牛奶。由于用消毒牛奶解冻,脂肪球影响观察精子活力,并且较麻烦,故并非优良的解冻液;而用标准的2.9%的柠檬酸钠液尽管效果较好,但在生产现场配制有一定困难。由于以上原因我们一直在寻找一种适合于生产单位运用的优良的解冻液。     

添加咖啡因对犬冷冻精液成活率的影响

在犬精液解冻液中添加咖啡因后,对冷冻精液进行解冻,添加浓度为0.5%的咖啡因,对增强精予活力的效果最佳,精子存活时间最长,提高了母犬受孕率.