国土资源部公布《2002年中国国土资源公报》

国土资源部 2 0 0 3年 4月初公布的《2 0 0 2年中国国土资源公报》显示 :2 0 0 2年全国耕地为1 2 5 93万hm2 ,林地 2 30 72万hm2 ,牧草地 2 635 2万hm2 。年度内净减耕地 1 68.62万hm2 。据全国土地利用变化情况分析 ,2 0 0 2年土地利用变化的最大特点是生态退耕速度明显加快。据国土资源部统计 ,2 0 0 2年建设用地净增 40 .9万hm2 ,其中建设占用耕地 1 9.65万hm2 。生态退耕面积 1 42 .5 5万hm2 ,耕地调整为园地等农用地 34.90万hm2 ,自然灾害毁坏耕地 5 .64万hm2 。同时 ,通过土地整理复垦开发 ,2 0 0 2年共补充耕地 2 6.0 8万hm2 。补充…     

北京城市绿化重点工程超额完成任务

据北京市园林局消息 ,2 0 0 2年北京城市绿化、美化建设重点工程全面超额完成。据初步统计 ,2 0 0 2年完成绿化面积 2 1 46ｈｍ2 ,其中绿化隔离地区 1 666ｈｍ2 ,其他城市绿化 480ｈｍ2 ,完成计划的1 1 9% ;植树 2 2 0 5万株 ,完成计划的 1 1 0 % ;种草 2 2 9万ｈｍ2 ,完成计划的 2 2 9%。同时 ,2 0 0 2年是城市大绿地建设自 1 999年开展以来 ,绿地建设规模和水平最高的一年。目前 ,全市已完成城市大绿地建设 5 1处 ,共 2 1 4ｈｍ2 ;其中 2 0 0 2年就完成 1 6处 ,1 0 4ｈｍ2 。北京城八区今年共新增居住区绿地 1 0 3ｈｍ2 。在完成新建小区…     

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除Nrf2基因及Nrf2基因过表达载体的构建

构建核转录相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)敲除HepG2细胞系及Nrf2过表达载体。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,将Nrf2-sgRNA表达载体转入HepG2细胞,嘌呤霉素筛选基因敲除细胞,构建敲除Nrf2基因HepG2细胞系。Nrf2过表达载体的构建,从HepG2细胞提取总RNA,反转录为总cDNA,并以此为模板设计Nrf2引物扩增目的基因,连接,转化,挑取阳性克隆,PCR验证,测序进一步鉴定。结果表明,获得了稳定敲除Nrf2的HepG2细胞及在HepG2细胞中稳定表达的Nrf2过表达载体,为研究Nrf2基因在动物肝损伤中的作用提供了理论依据。     

6种金属离子对灵芝纤维素酶活性的研究

研究了Cu2 、Mn2 、Fe2 、Mg2 、Zn2 及K 6种金属离子对灵芝纤维素酶活性的影响,测定底物中分别添加6种金属离子及不同离子浓度梯度下,灵芝纤维素酶的CMC酶活.结果表明,Cu2 、Mn2 和Fe2 对灵芝纤维素酶有抑制作用,Cu2 和Mn2 在离子浓度较低时就具有很强的抑制作用,Fe2 浓度增加至1.2 mg/mL时,其对纤维素酶的抑制作用明显增大;Mg2 、Zn2 和K 对纤维素酶酶活都有促进作用,Mg2 和Zn2 在低浓度时就有较强的促进作用,K 在试验范围内的离子梯度下,促进作用不是很明显.从试验比较分析可知,金属离子可能对来源于不同菌种的纤维素酶有较大的影响.在这项试验范围内,Cu2 、Mn2 和Fe2 是灵芝纤维素酶的抑制剂,Mg2 和Zn2 是灵芝纤维素酶的激活剂.     

联合肌注猪IL2真核质粒对PPV VP2-PCV2 ORF2核酸疫苗免疫效果的影响

将猪IL2基因和PPV VP2基因、PCV2 ORF2截短基因克隆至真核表达载体pCI-neo,构建了重组质粒pCI-ORF2-VP2和pCI-IL2,用脂质体介导法将pCI-ORF2-VP2质粒转染PK15细胞,采用间接免疫荧光法检测在体外的表达情况。并以小鼠为动物模型,将pCI-IL2和pCI-ORF2-VP2质粒联合肌注免疫小鼠,相同剂量免疫2次,间隔2周,同时设立pCI-ORF2-VP2、pCI空载体、猪细小灭活苗、圆环亚单位苗对照,检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞的转化功能,外周血T淋巴细胞亚群的动态变化及血清抗体的滴度。结果显示,pCI-ORF2-VP2在PK15细胞中能正常表达,联合免疫组在第28天能够检测到PPV和PCV2抗体,第21~42天诱导淋巴细胞转化和CD4+、CD8+细胞的数量高于或显著高于pCI-ORF2-VP2质粒组。结果表明,猪IL2质粒联合肌注可以提高VP2/ORF2核酸疫苗的免疫效果。     

猪IL2基因重组对PPV VP2-PCV2ORF2真核质粒免疫原性增强的研究

将猪IL2成熟肽基因、PPV VP2基因和PCV2 ORF2抗原多肤基因定向克隆至真核表达载体pCI-neo,构建重组质粒pCI-ORF2-VP2和pCI-IL2-ORV2-VP2,用脂质体介导法将其转染PK15细胞,采用RT-PCR法和间接免疫荧光法检测重组质粒在体外的表达情况.并以小鼠为动物模型,分别将pCI-IL2-ORF2-VP2质粒、pCI-ORF2-VP2质粒、pCI空载体、猪细小灭活苗和圆环亚单位苗通过肌注进行免疫,检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞转化功能,外周血T淋巴细胞亚群的动态变化及血清抗体效价.结果表明,重组质粒在体外能正常表达,pCI-IL2-ORF2-VP2免疫小鼠脾脏淋巴细胞转化功能,CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量和血清PPV/PCV2抗体的OD值在二免后均高于或显著高于pCi-ORF2-VP2对照组.结果表明,猪IL2基因重组能显著增强VP2/ORF2核酸疫苗诱导的免疫应答.     

猪胰高血糖素样肽2及其长效化物在大鼠体内的药代动力学研究

本试验旨在研究猪胰高血糖素样肽-2(p[Gly2]GLP-2)、聚乙二醇修饰猪胰高血糖素样肽2(PEG-p[Gly2]GLP-2)和p[Gly2]GLP-2微球在大鼠体内的药代动力学过程,为利用p[Gly2]GLP-2修复断奶仔猪肠道损伤提供参考依据。选取18只280 g左右的雄性SD大鼠,随机分为3组,分别单次皮下注射p[Gly2]GLP-2(5.64 nmol/kg)、PEG-p[Gly2]GLP-2(5.64 nmol/kg)和p[Gly2]GLP-2微球(15 mg/只),定点采血后,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定胰高血糖素样肽-2(GLP-2)的血药浓度。结果表明:1)PEG-p[Gly2]GLP-2的半衰期(t1/2)是p[Gly2]GLP-2的4倍,血药浓度-时间曲线下面积(AUC0-t)和平均滞留时间(MRT0-t)是p[Gly2]GLP-2的3倍,清除率(CL)是p[Gly2]GLP-2的1/2,两者的达峰浓度(Cm ax)相差不大,PEG-p[Gly2]GLP-2的达峰时间(Tm ax)滞后于p[Gly2]GLP-2。2)p[Gly2]GLP-2微球的达峰时间与p[Gly2]GLP-2、PEG-p[Gly2]GLP-2相差不大,但半衰期为(72.20±6.02)h,平均滞留时间为(90.66±7.41)h。结果提示,经聚乙二醇(PEG)修饰后p[Gly2]GLP-2的药代动力学行为发生了很大的改变,半衰期延长、达峰时间滞后、平均滞留时间延长、血浆清除减慢、生物利用度更高;p[Gly2]GLP-2微球半衰期更长,且持续稳定的释放,操作便利。     

三河马运铁蛋白型的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对 2 5匹三河马血清样品进行了分析。发现 1 2个运铁蛋白表现型 ,即DD ,F2 F2 ,RR ,DF2 ,DH2 ,DR ,F1 R ,F2 H2 ,F2 O ,F2 R ,H2 R和OR。其中F2 F2 ,DF2 和OR所占的比例最高 ,分别为 32 % ,1 6 %和 1 2 % ,其他表现型的比例都小于 8%。运铁蛋白型由 6个共显性常染色体等位基因控制 ,即TfD,TfF1 ,TfF2 ,TfH2 ,TfO 和TfR,其基因频率分别为 0 1 6,0 0 2 ,0 48,0 0 6 ,0 1 0和 0 1 8。基因杂合度 (H)和亲权排除概率 (PE)分别为 0 70和 0 47。     

猪圆环病毒2a/2b亚型病毒株毒力分析

本研究对367份猪内脏样本进行PCV2检测,对阳性样本进行2a/2b鉴别诊断,并采用ORF2测序方法对部分阳性样本进行测序。在发病猪群中PCV2b阳性率远高于健康猪群,而健康猪群中PCV2a的阳性率高于发病猪群,从而在临床表型方面论证了PCV2b毒力强于PCV2a。通过比较12株PCV2 ORF2推导氨基酸序列的关键氨基酸位点,9株PCV2b毒株在ORF2氨基酸76位为I,131位为T;而3株PCV2a毒株在ORF2氨基酸76位为L,131位为P,据比对结果可知,PCV2b毒株为强毒株,PCV2a毒株为弱毒株。研究结果表明,PCV2的2种亚型2a/2b无论是临床表型还是ORF2基因型,毒力表现都是有差异的,且PCV2b毒力要强于PCV2a。     

生态建设促使北京空气质量明显好转

据国家林业局提供的监测数据表明 ,与 2 0 0 2年同期相比 ,2 0 0 3年 1 - 5月 ,北京市空气中可吸入颗粒物下降了 2 8.0 % ,总悬浮颗粒物下降了 48.9% ,空气质量明显好转。国家林业局副局长李育才介绍说 ,2 0 0 3年上半年 ,我国北方地区先后发生 7次沙尘天气 ,较2 0 0 1年的 1 8次和 2 0 0 2年的 1 2次明显减少 ,特别是京津地区 2 0 0 3春虽有大风天气过程 ,却没有大范围的沙尘暴发生。北京市的泥沙侵蚀状况也得到改善 ,据定位监测 ,密云水库 2 0 0 2年减少泥沙输入量 2 .5万t。北京市降尘量 2 0 0 2年就已比 2 0 0 1年下降了 1 3.2 %。李育…     

NO和H2O2在沙打旺抗黄矮根腐病反应中的互作

本研究以沙打旺(Astrgalus adsurgens)感病品种宁夏彭阳为试验材料,接种沙打旺埃里砖格孢(Embellisia astragali)后分别施加外源NO及H2O2清除剂抗坏血酸,测定H2O2含量和H2O2代谢酶SOD、POD和CAT活性,以此来探讨H2O2在由NO诱导的防御反应中发挥的作用。与对照相比,外源NO显著降低(P0.05)沙打旺发病率和病情指数,在开始阶段,外源NO可以诱导内源H2O2产生,在后期,当H2O2浓度相对较高,外源NO会延迟H2O2积累,但用NO和H2O2清除剂同时处理H2O2含量与对照并无显著差异(P0.05)。NO处理能够诱导SOD、POD和CAT活性增加,H2O2清除剂抑制了NO对3种酶的调控作用。施加外源NO能增强沙打旺抗病性,NO通过调控内源H2O2含量发挥作用。     

利用免疫共沉淀验证肌纤维形成相关蛋白CFL2与MEF2C的相互作用

利用免疫共沉淀技术验证丝切蛋白(CFL2)和肌细胞增强因子-2(MEF2C)之间的相互作用关系。构建带绿色荧光蛋白(GFP)的p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C重组载体,经双酶切鉴定正确后,分别将上述重组载体共转染至人宫颈癌细胞(Hela),利用免疫共沉淀方法验证CFL2和MEF2C之间的相互作用关系。结果表明,p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFPhis-MEF2C重组载体共转染Hela细胞,分别用抗CFL2和抗MEF2C抗体沉淀蛋白复合物,用MEF2C和CFL2抗体进行Western blot检测,检测到p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C和p EGFP-N1-CFL2的表达。本试验成功构建p EGFP-N1-CFL2和p Lenti6.3_MCS_IRES2-EGFP-his-MEF2C真核表达重组载体,在Hela细胞中表达后利用免疫共沉淀的方法证实了CFL2和MEF2C之间存在相互作用。     

屠宰生猪PCV-2感染的检测与基因型分析

为了解屠宰生猪中猪圆环病毒2型(PCV-2)的带毒状况及PCV-2的主要基因型,在分析PCV-2分离株基因序列的基础上分别设计了检测PCV-2、PCV2-A和PCV2-B的引物,建立了各自的PCR检测方法。结果表明,建立的PCV-2、PCV2-A、PCV2-B的PCR检测方法,特异性较好,可用于临床病料的检测;通过对临床采集的49分生猪血样的检测发现,PCV-2的阳性率为24.49%,均属于PCV2-B。检测结果表明,当地检测猪群中感染的PCV-2主要为PCV2-B毒株,在该病的防控方面应引起注意。     

黑白花奶牛静脉血血气分析

用IL 130 2型血气分析仪对 2 1头黑白花奶牛的静脉血血样进行血气分析。结果 :pH7 35± 0 0 3,Pco2 4 .82± 0 52kPa ,Po2 3 79± 0 57kPa ,O2 S % 50 6 1± 10 .0 8,HCO3- 2 0 12±2 .71mmol/L ,Tco2 2 1 18± 2 81mmol/L ,BE 5.0 2± 2 45mmol/L ,SBE 6 .14± 2 .82mmol/L ,SBC2 0 2 2± 2 0 5mmol/L     

兴凯湖梅花鹿血液蛋白多态性及其与产茸性状的相关分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对兴凯湖梅花鹿的14个血液蛋白位点进行遗传检测,分析其与茸性状之间的关系。结果表明：Ptf．Sag、Tf,Prt-1、Prt-2、Pa、Pr、Alb、Hb、Es、AMY1、AMY2、AMY3和CA分别出现2、2、2、2、2、2、2、1、2、3、1、2、1和2种表型,分别受一个基因位点上的2、2、2、2、2、2、2、1、2、2、1、2、1和2个等位基因控制。Hardy—Weinberg平衡状态分析表明：除Sag为平衡位点外,其他位点均偏离平衡状态。Pa的AA和AB型与主干围度、Sag的AB型与茸根围度、Ptf的AB型与冰枝长度和Prt2的AB型与眉二间距之间均存在显著相关。     

世界蜂蜜市场信息

20 0 2年世界蜂蜜市场价格上涨 1 3% ,每吨接近1 380美元 ,2 0 0 3年蜂蜜价格继续维持高价位。 2 0 0 2年世界蜂蜜产量下降 2 % ,约为 1 2 4万吨 ,原因是美国和阿根廷蜂蜜产量下降。尽管 2 0 0 3年产量增加 ,但也无法逆转世界蜂蜜市场价格。2 0 0 3年世界蜂蜜市场价格将保持高价位 ,超过2 0 0 2年的 1 380美元 /吨 ,2 0 0 1年为 1 2 2 1 .6 4美元 /吨。 2 0 0 2年是自 1 998年以来的最高价 ,1 998年为1 4 88美元 /吨 ,与 1 997年的最高价格 2 4 88美元 /吨相比下降了近一半 ,是因为当年阿根廷蜂蜜出口量锐减。表 1 :1 992年～ 2 0 0 2年世界…     

部分金属离子及EDTA对瘦肉型猪(PIC344)精液酸性磷酸酶活性与荧光光谱的影响

研究了K+、Mg2+、Ni2+、Zn2+、Mn2+、Fe2+、Cd2+、Ca2+、Cu2+9种金属离子及EDTA对瘦肉型猪(PIC344)精液酸性磷酸酶(ACPase)活力的影响,发现K+、Mg2+、Ca2+、Ni2+、Mn2+对ACPase有不同程度的激活作用。Cu2+、Cd2+、Fe2+、Zn2+对ACPase有不同程度的抑制作用。同一浓度范围内的金属离子对ACPase的激活作用强弱依次为Mg2+>Ni2+>Mn2+>K+>Ca2+,对ACPase的抑制作用强弱依次为Cu2+>Cd2+>Fe2+>Zn2+。利用双倒数作图法研究了Cu2+、Cd2+对酶的作用,结果表明这2种抑制剂对酶的抑制作用为非竞争性抑制,用Dixon作图法求得其抑制常数Ki值分别为0.58×103mol/L、9.44×103mol/L。研究了Mg2+、Ca2+、Cd2+、Cu2+对酶荧光光谱的影响,结果表明:Mg2+、Ca2+、Cd2+、Cu2+引起酶荧光发射光谱强度降低,最大发射波长不变,说明这些金属离子对酶的构象有不同程度的影响。     

红花散加减治疗马跛行

笔者在兽医临床实践中试用中药红花散加减治疗马属动物因使役或失步而造成的跛行 34例 ,治愈 30例 ,治愈率90 % ,疗效满意。1　方药该病多因筋膜、韧带等组织呈局限性损伤 ,血液、组织液瘀积 ,关节肌肉等失养 ,形成无菌性炎症。治宜活血化瘀 ,引气通络 ,消肿止痛。药用红花散加减 :红花 2 5 g,当归 2 5g,没药 2 2 g,血竭 2 2 g,乳香 2 2 g,乌药 2 5 g,牛膝 2 5 g,杜仲炭 2 5 g,巴戟天 2 5 g,元胡 2 2 g,续断 2 5 g,自然铜 2 0g。共为细末 ,开水冲 ,黄酒 2 0 0 ml为引 ,食后 1次灌服 ,1剂 /d。2　典型病例坡东村王某五岁辕马 ,因在重车拉运中…     

小鼠胚胎DNA氧化损伤模型的建立

为了研究胚胎DNA损伤修复机制,试验以H2O2为DNA损伤诱导剂,建立小鼠胚胎DNA氧化损伤模型,采用不同浓度H2O2培养小鼠受精卵,观察其对小鼠胚胎发育能力的影响;再通过免疫荧光方法检测γH2AX和ρATM蛋白的表达状况,以判断H2O2处理所导致的胚胎DNA损伤情况及较适宜的诱导条件。结果表明:1.5~2.4μmol/L H2O2处理对小鼠胚胎发育能力具有影响,与KOSM(-)对照组相比,H2O2处理组小鼠胚胎的分裂率、囊胚率呈下降趋势,其中1.8~2.4μmol/L H2O2处理组的胚胎分裂率、囊胚率呈显著下降趋势(P0.05)。免疫荧光法检测发现KOSM(-)对照组中,2-细胞期胚胎的γH2AX焦点数多于1-细胞期胚胎,ρATM在两个时期的胚胎中未检测到。γH2AX和ρATM在1.5,1.8μmol/L H2O2处理组的1-细胞期胚胎中均未检测到;2-细胞期胚胎表达γH2AX,未检测到ρATM。2.1,2.4μmol/L H2O2处理组的1-细胞和2-细胞期胚胎均有γH2AX和ρATM表达,其中2.4μmol/L H2O2处理组两个时期胚胎的γH2AX焦点数多于2.1μmol/L H2O2处理组。说明1.5~2.4μmol/L H2O2处理会影响小鼠胚胎体外发育能力,2.1,2.4μmol/L H2O2处理可诱导小鼠胚胎发生DNA双链断裂现象。     

PCV2d的出现给商品化PCV2疫苗(PCV2a和PCV2b)带来的新挑战

<正>近几年证实了业内PCV2b向2d的基因型变化,并且PCV2d成了主要流行基因型,甚至在临床PCV2阳性样本中占比高达73%。那么,目前的商品化疫苗集中在PCV2b和2a两个基因型,是否对PCV2d有很好的交叉保护?PCV2(猪圆环病毒2型Porcine circoviruse type 2,PCV2)在养猪业的感染已普遍存在,给养殖场造成