鸡传染性支气管炎病毒抗原表位研究进展

鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)对全球养鸡业造成严重经济损失。由于IBV极易发生变异,血清型众多,且不同血清型间交叉保护性差,使其诊断和疫苗研制面临巨大挑战。抗原表位也称抗原决定簇,是抗原中引起免疫应答的最小单元,可分为B细胞表位和T细胞表位。筛选出免疫优势表位对于研发特异性诊断试剂、广谱交叉保护疫苗和疾病防控具有重要作用。文章就抗原表位种类、已鉴定的IBV抗原表位和IBV抗原表位应用的最新进展进行综述,为IBV抗原表位的深入研究和应用提供参考。     

鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞表位的鉴定

为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)B细胞抗原表位,本研究将IBV致弱株CK/CH/LDL97Ⅰ病毒与重组N蛋白作为免疫原,交叉免疫BALB/c小鼠,制备了1株抗IBV N蛋白的单克隆抗体(MAb)6D10。Westernblot结果表明该MAb可特异性的识别IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株和重组N蛋白。同时利用噬菌体展示技术对IBV N蛋白抗原表位进行筛选,获得11个阳性噬菌体克隆。序列分析表明,这11个克隆均展示有"FGPRTK"6个氨基酸的序列,对应于IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株N蛋白242位～247位氨基酸残基。同时,通过人工合成其编码序列并进行原核表达,利用MAb6D10对表达产物进行western blot分析,反应性良好。由此表明"FGPRTK"6肽为IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株的一个线性B细胞抗原表位。表位的保守性分析结果表明,本研究鉴定的表位在各种血清型IBV毒株中均高度保守。本研究结果为进一步研究IBV N蛋白抗原的结构和功能及诊断试剂的研发奠定了基础。     

禽传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体制备及其中和抗原表位的鉴定

为鉴定禽传染性支气管炎病毒(IBV)刺突(S1)蛋白的中和抗原表位，本研究通过IBV全病毒免疫BALB/c小鼠，经融合、亚克隆筛选获得了4株稳定分泌抗IBV S1蛋白抗体的杂交瘤细胞株4A11、1B11、5E5和7C9。经鉴定制备的单克隆抗体腹水抗体ELISA效价为10⁶以上，Western blot和间接免疫荧光试验分析显示该单克隆抗体反应性和特异性良好。随后用8种基于S1分型的IBV毒株为试验毒株，同实验室已有的8株IBV S1单抗(1E9、1H1、1E4、3C6、3C7、2F3、2E5、4F9)共12株单抗进行气管环中和活性检测，发现S1蛋白单抗与8种S1亚型的毒株均有不同程度的中和作用。随后，在抗原表位和Western blot分析的基础上，鉴定出单克隆抗体识别的抗原表位区域，获得了6个中和抗原表位，其中除⁴¹⁶IQTRTEP⁴²²表位，其他5个表位仍未有相关报道。本研究成功制备出4株特异性识别S1蛋白且具有中和活性的单克隆抗体，不仅丰富了IBV的单克隆抗体库，为今后研究IBV S1蛋白分子结构提供了关键生物材料...     

抗鸡传染性支气管炎病毒核蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定

为鉴定鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗原表位,本研究将IBV tl/CH/LDT3/03株免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆筛选,得到两株针对IBV核(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)6H3和6F9,其染色体数目分别为90条和102条,MAb亚类鉴定分别属于IgG1和IgG2b,轻链均为κ链。对MAb6H3和6F9的抗原表位进行初步鉴定,将N基因分成8个片段克隆于pGEX-6p-1载体中,转化BL21(DE3)内诱导表达。经western blot分析,MAb6H3表位的初步定位在aa80～aa99,而MAb6F9表位的初步定位在aa64～aa82。而且MAb6F9还能特异性识别其他5株IBV的天然N蛋白,推测它们含有一个相同的B细胞表位。     

鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因的遗传变异分析

对鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因进行了RT—PCR扩增、克隆和测序。结果表明，PSH株S基因由3504个核苷酸组成，编码1条由1167个氨基酸残基组成的多肽。S基因编码产物裂解后形成的S1和S2亚单位分别由541和626个氨基酸残基组成。PSH株S蛋白切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸（RRFRR），与多数鸡传染性支气管炎病毒（IBV）切割识别位点相似（RRF／SRR）。与GenBank中其他冠状病毒毒株S基因的推导氨基酸序列相比较，PSH株与IBV参考毒株的同源性为79．3％～99．6％，而与其他冠状病毒包括火鸡蓝冠病病毒和SARS病毒的同源性均小于37．8％。表明，鸽源冠状病毒PSH株属于第3抗原群冠状病毒，且与IBV亲缘关系较近。     

禽源冠状病毒监测简报

冠状病毒(Coronaviruses)在分类地位上属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)正冠状病毒亚科(Orthocoronavirinae),包括α、β、γ和δ等4个属,可感染包括人类在内的多种动物。其中,α冠状病毒属主要感染人和猪、犬、猫、蝙蝠等,β冠状病毒属主要感染人和牛、马、猪、鼠、蝙蝠等哺乳动物,γ冠状病毒属主要感染鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类,δ冠状病毒属主要感染野禽和猪。引起此次新型冠状病毒肺炎疫情的病毒(2019-nCoV)属于冠状病毒科β冠状病毒属。可感染禽类的冠状病毒主要来自γ冠状病毒属和δ冠状病毒属。鸡传染性支气管炎病毒(IBV)等家禽中分离到的冠状病毒均为γ冠状病毒属。家禽冠状病毒感染危害较大的是IBV。此外,鸭冠状病毒、鹅冠状病毒和鸽冠状病毒等在家禽中也有检出。一些野禽可感染δ属冠状病毒(如鹅口疮冠状病毒HKU12等)。2013年以来,中国动物卫生与流行病学中心对全国17省份共计5 249份家禽样品进行了禽源冠状病毒检测,共检测到IBV 446株,新型鸭冠状病毒和新型鸽冠状病毒等新型禽冠状病毒共277株,IBV、新型鸭冠状病毒、新型鸽冠状病毒的检出率分别为8.50%、2.04%、3.24%。对2019-nCoV与禽源冠状病毒的亲缘关系进行分析发现,2019-nCoV与已知的禽源冠状病毒核苷酸同源性较低;基于冠状病毒1ab基因保守区域的进化分析表明,2019-nCoV与禽源冠状病毒亲缘关系较远。基于上述分析,初步排除2019-nCoV来源于已知家禽冠状病毒的可能性。     

鸡传染性支气管炎病毒SC株mRNA5及mRNA6 cDNA分子特征

鸡传染性支气管炎病毒(In fectious bronch itisv irus,IBV)隶属于嵌套病毒目(尼多病毒目)(N i-dov irilaes),为冠状病毒科(Coronav irid ae)冠状病毒属(Coronav irus)代表种。在IBV基因组RNA转录过程中形成5种较短的游离mRNA(由小到大分别命名为mRNA 6、5、4、3、2)和基因组胞     

上海等4省市动物冠状病毒的流行病学调查

对上海、浙江、安徽和湖北4个地区感染鸡、鸭、猪、牛和犬的5种冠状病毒,即禽传染性支气管炎病毒(IBV)、猪传染性胃肠炎病毒(TEGV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)、牛冠状病毒(BCV)和犬冠状病毒(CCV)进行病原学和血清学抽查,共完成测试样品2 368份,包括566份拭子样品和1 802份血清样品。检出IBV抗原阳性4份。在血清学调查中,发现IBV抗体的阳性率为86.4%(鸡)和0.7%(鸭);猪TGEV阳性率为6.8%,PRCV阳性率为18.7%;牛BCV阳性率为5.4%;犬冠状病毒的阳性率为50%。     

近年鸡传染性支气管炎病毒流行状况

1病原 鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)为冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)第三群成员,为单股正链、不分节段的RNA病毒,基因组长约2 716 kb.病毒主要有磷酸化的核衣壳蛋白(N)、糖基化的膜蛋白(M)、小膜糖蛋白(E)和纤突蛋白(S)4种结构蛋白组成.S蛋白转译后裂解成N端的S1和C端的S2,其中S1为重要的抗原蛋白,能诱导机体产生中和抗体,也是决定IBV血清型特异性的主要蛋白,由于高度易变,其点突变、插入、缺失或重组是新血清型、亚型或变异株产生的主要原因.     

商丘市鸡腺胃性传染性支气管炎发病初报

鸡传染性支气管炎 (IB)是由传染性支气管炎病毒引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。各种日龄、各种品种鸡均可发生。 　　传染性支气管炎病毒 (IBV)属冠状病毒科、冠状病毒属。 IBV的血清型很多,迄今为止已分离出 20多个血清型和更多的变异株,随着疫苗的使用,新的血清型不断出现, IBV对鸡的致病性也发生变化。根据临床症状和病理变化,将 IB分为 5个类型： (1)呼吸型; (2)肾型; (3)肠型; (4)生殖道型或产蛋异常型; (5)腺胃型。 　　1997年王玉东报道引起腺胃型病变的 IBV变异株。 1995年以来,在江苏、山东、山西、广…     

鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展

鸡传染性(IBV)支气管炎是由冠状病毒属传染性支气管炎病毒引起的高度接触性传染病。此病在世界各地均有发生,危害严重,给全球养禽业造成巨大的经济损失。IBV血清型较多且抗原易发生变异,肾型和肠型变异株的出现,给该病的诊断和防治造成了困难。近年来国内外学者对其研究不断深入,特别在病毒基因组的组成、病毒结构蛋白的功能、病毒的转录合成机制、病毒粒子的组装等方面取得了重要进展,所有这些成果为IBV预防与控制提供了科学依据。     

貉源阿留申病毒VP2和NS1蛋白的抗原性预测

旨在预测和分析貉源阿留申病毒(RFAV)VP2和NS1蛋白的抗原表位特征,筛选阿留申病毒属较保守的B、T细胞抗原表位。本研究对RFAV的近全长基因组进行克隆及测序,对其VP2和NS1基因编码蛋白的理化性质、二级结构、翻译后修饰位点和抗原表位进行预测,并将预测的修饰位点、抗原表位与其他阿留申病毒种的序列进行比较分析,筛选相对保守的修饰位点和抗原表位。结果显示,获得的RFAV基因组长4 327 bp,编码VP2蛋白的636个氨基酸,编码NS1蛋白的641个氨基酸。VP2和NS1蛋白均为亲水性蛋白,二级结构以无规则卷曲为主。在阿留申病毒属内,VP2蛋白有3个保守的B细胞抗原表位,3个保守的T细胞表位,8个保守的翻译后修饰位点;NS1蛋白有1个保守的B细胞抗原表位,2个保守的T细胞抗原表位和7个保守的翻译后修饰位点。本研究成功克隆了RFAV近全长基因组序列,全面对RFAV的VP2、NS1蛋白抗原表位、翻译后修饰位点进行预测,并分析其在阿留申病毒属内的保守和变异特征,为阿留申病毒免疫研究提供参考。     

鸡传染性支气管炎病毒N基因及其编码产物的分子生物学

鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)属冠状病毒科冠状病毒属代表种,引起鸡急性高度接触性传染病,使鸡群增重减少,产蛋率下降,饲料报酬降低,甚至引起死亡,给养禽业带来严重经济损失.由于IBV血清型众多,组织嗜性多变,新变异株不断涌现,经常造成IBV免疫失败,给诊断和防制带来一定困难,成为养禽业重大疫病之一[1～3].     

鸡肾型IBV引起输卵管病变的电镜观察

传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis uirus,IBV)属于冠状病毒科冠状病毒属,主要侵害鸡的呼吸系统、消化系统以及泌尿生殖系统.     

禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)的抗原表位,本研究将IBV ck/CH/LDL/091022株免疫6周龄～8周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经过有限稀释法克隆筛选,得到一株针对IBV核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)2F2,经鉴定其染色体数目为101条,MAb亚类鉴定其重链属于IgG1,轻链属于K链.用肽扫描方法将IBV ck/CH/LDL/091022株N基因截短为具有相互部分重叠的23段,表达带GST标签的重组蛋白,与MAb 2F2进行western blot和ELISA反应后,鉴定其表位为397INWGDSAL404.将表位序列进行Blast结果表明,本研究鉴定的表位在大部分IBV株中均为保守抗原表位,为进一步建立IBV的检测方法奠定了基础.     

鸡传染性支气管炎分离株S1基因的序列分析

传染性支气管炎病毒(IBV)为冠状病毒科冠状病毒属成员,基因组为单股正链RNA,长27.6 kb,带有poly ( A)尾.病毒粒子基因组编码6种蛋白,其中位于病毒囊膜表面的纤突蛋白(spike protein , S )是病毒主要的免疫原蛋白基因,IBV纤突蛋白是由2～3个拷贝的S1, S2亚单位组成.由于IBV的特殊的转录合成机制使得S1基因易发生点突变、插入、缺失和基因重组,使得IBV极易产生变异株.S1蛋白具有许多重要的生物学功能,是IBV主要的免疫原蛋白,它能刺激机体产生中和及血凝抑制抗体.因此,根据不同地区的分离毒株S1基因的差异,来确定流行IBV的血清型,研究其分子生物学特性,深入分析IBV的变异原因,进一步揭示IBV分离株的变异机制,对从根本上控制IB,具有重要意义.     

鸡传染性支气管炎的诊治

正鸡传染性支气管炎(IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引发的一种鸡的急性、高度接触性传染病毒性疾病。由于该病毒的血清型较多,如果免疫程序不当,将导致该病免疫失败,给养鸡业造成巨大损失,农业农村部将其列为二类动物疫病。1病原学传染性支气管炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属第三亚群的病毒。由于病毒核酸为正链单股RNA,血清型较多,     

貉源阿留申病毒VP2和NS1蛋白的抗原性预测

旨在预测和分析貉源阿留申病毒（RFAV） VP2和NS1蛋白的抗原表位特征，筛选阿留申病毒属较保守的B、T细胞抗原表位。本研究对RFAV的近全长基因组进行克隆及测序，对其VP2和NS1基因编码蛋白的理化性质、二级结构、翻译后修饰位点和抗原表位进行预测，并将预测的修饰位点、抗原表位与其他阿留申病毒种的序列进行比较分析，筛选相对保守的修饰位点和抗原表位。结果显示，获得的RFAV基因组长4 327 bp，编码VP2蛋白的636个氨基酸，编码NS1蛋白的641个氨基酸。VP2和NS1蛋白均为亲水性蛋白，二级结构以无规则卷曲为主。在阿留申病毒属内，VP2蛋白有3个保守的B细胞抗原表位，3个保守的T细胞表位，8个保守的翻译后修饰位点；NS1蛋白有1个保守的B细胞抗原表位，2个保守的T细胞抗原表位和7个保守的翻译后修饰位点。本研究成功克隆了RFAV近全长基因组序列，全面对RFAV的VP2、NS1蛋白抗原表位、翻译后修饰位点进行预测，并分析其在阿留申病毒属内的保守和变异特征，为阿留申病毒免疫研究提供参考。     

鸡传染性支气管炎病毒S蛋白的研究进展

鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性、病毒性传染病,主要侵害鸡的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等系统。鸡传染性支气管炎病毒为冠状病毒科冠状病毒属的代表种,含有完整的27~32kb的单股正链RNA。病毒粒子略呈球形,直径约为80~120nm,有时呈多形性。IBV有三个主要结     

鸡传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展

鸡传染性支气管炎(IB)是由冠状病毒属的冠状病毒引起的高度接触性传染病.是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一.鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有多血清型和多组织噬性,掌握IBV的分子生物学特点,对揭示IBV的致病机理和分子变异机制以有效防制IB具有重要意义,所以IBV的分子生物学研究成为热点,进展较快.