线粒体DNA由来的RAPD标记能鉴别水稻雄性不育和可育细胞质

以野败型细胞质的水稻雄性不育系珍汕97A及其保持系珍汕97B的总DNA为模板,从100个引物中筛选到OPA12对珍汕97A能扩增出一条1600 bp的特异带.用OPA12扩增野败型细胞质的龙特浦A及其保持系龙特浦B、矮败型细胞质的协青早A及其保持系协青早B、恢复系明恢63、珍汕97A/明恢63的F1和F2个体的总DNA,不育系、F1和F2所有调查个体都有16     

大白菜胞质雄性不育线粒体基因特异分子RAPD标记及克隆

用随机引物对大白菜细胞质雄性不育系及其保持系线粒体DNA的RAPD分析,在不育系与保持系的线粒体基因组间存在明显的差异,用引物S259在不育系中扩增并克隆得到特异片断(mt)S259~600bp,序列分析表明该片断与油菜线粒体基因NADH脱氢酶第四亚基序列有部分相似性,片段与雄性不育的关系还需进一步研究。     

YS型小麦温敏不育基因的RAPD标记

选取温敏小麦不育系A3314与Silverstar杂交组合的F2高可育和高不育单株构建基因池,利用500对随机引物对其进行多态性分析,同时对其反应体系和扩增条件进行优化。试验结果表明,在25μL反应体系中使用50 ng的模板DNA,2 mmol/L Mg2 ,0.2 mmol/L dNTPS,0.2μmol/L引物,1 UTaq酶;反应条件为94℃预变性5 min,然后进行94℃变性45 s,37℃结合45 s,72℃延伸90 s,40个循环后,再72℃延伸10 min,小麦RAPD扩增效果较好;S310750为小麦温敏不育基因的连锁标记。     

小麦质核互作型雄性不育系线粒体DNA变异性的RAPD分析(英文)

在杂交小麦选育中,为了更好地利用细胞质雄性不育性,研究与不断挖掘新的不育细胞质类型及其对应育性恢复基因以改良现有不育资源至关重要.基于这一目的,本文对具有山羊草属细胞质的四类不育系线粒体DNA(mtDNA)进行了RAPD分析,分别比较了具有同一细胞质背景的山羊草、雄性不育系,以及该类不育系与恢复系组配的可育杂种F1的mtDNA的变异性.结果显示,供试山羊草与其对应细胞质雄性不育系在mtDNA上存在明显多态性,表明不育系在质核互作的影响下很可能已导致mtDNA发生变异:而不育系与对应的可育杂种F1在mtDNA上也存在多态性,同样表明育性恢复核基因对不育系进行育性恢复的过程中亦可能引起mtDNA发生相应变异;mtDNA变异很可能涉及到不育系育性本质的改变.     

甜菜细胞质雄性不育系与其保持系线粒体DNA的RAPD分析

本文对甜菜线粒体DNA的提取方法进行了改进,在不需密度梯度离心条件下即可获得高纯度的DNA。优化了甜菜线粒体的RAPD的反应条件,对细胞质雄性不育甜菜的不育系及其保持系的线粒体DNA(mtDNA)进行了RAPD(随机扩增多态DNA,randomly amplified polymorphic DNA)分析,结果表明：甜菜细胞质雄性不育系和保持系线粒体DNA之间存在丰富的多态性。     

辣椒雄性不育RAPD体系优化及标记的筛选

本文以辣椒质核互作雄性不育为对象,进行RAPD体系优化及其标记的研究,结果表明在20 μl 的反应体系中,dNTP、 Mg2 、引物和模板DNA的浓度分别在0.3 mmol、2.5～2.75 mmol 、0.2～0.4 mmol和30～60 ng 同时添加1U Taq酶,退火温度控制在37.8～40.7℃,能够获得理想的扩增结果.利用该体系进行随机引物筛选获得不育系单显性标记5个,恢复系单显性标记7个,共显性标记2个.     

水稻类病变坏死突变基因的RAPD标记

中籼3037诱变得到新的类病变坏死突变体Sp1801,以粳稻品种02428为父本与其杂交构建分离群体，并利用RAPD技术对此突变相关基因进行了遗传连锁分析，引物OPI 11和OPL 03扩增的稳定的差异片段与突变性状紧密连锁，两标记与目的基因的遗传距离分别为0．6cM和5．6cM，并且两差异片段分别为556bp和944bp，因此OPI11－556和OPL03－944可以作为此突变基因的RAPD标记。序列同源性分析表明，OPI11－556与一个抗稻瘟病基因pib有高度同源性。     

亚麻显性雄性核不育基因的RAPD标记

应用252条10-mer随机引物对遗传背景相似的可育株和不育株亚麻进行了RAPD分子标记,在不育株与可育株之间寻找DNA的多态性差异带,结果发现,在252条随机引物中有2条引物(即S62和S135)可分别得到1个与显性核不育的雄性基因有关的RAPD分子标记为S62-500和S135-350。     

水稻野败不育系与保持系线粒体DNA限制酶酶切图谱分析

采用限制酶酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析广泛比较了水稻野败不育系及其籼型保持系线粒体ＤＮＡ酶切图谱。野败不育系与籼型保持系线粒体ＤＮＡ在组成上存在十分明显的差异。根据具有相同迁移位置与大小的片段比例判断，这２种不同细胞质线粒体ＤＮＡ顺序同源性约为３０％。分子杂交结果显示，编码功能蛋白的基因及其邻近顺序存在在相当程度的保守性。本文并对线粒体ＤＮＡ的组成变异与细胞质雄性不育的关系进行了分析与讨论。     

南瓜抗CMV基因的RAPD分子标记筛选

以抗病自交系K01和感病自交系K02杂交后自交所得的F2群体为材料,采用分离群体分析法筛选与南瓜抗CMV基因连锁的RAPD分子标记。通过520个随机引物和310组双引物的RAPD扩增分析,共找到了2个与南瓜抗CMV亲本K01中的抗病基因相连锁的分子标记S4391400和S19 S345600。这2个标记与K01的抗病基因的重组率分别为7.5%和11.8%,遗传距离分别为7.1和11.7 cM。     

与水稻K型细胞质雄性不育性特异的mtDNA片段的鉴定

水稻K型雄性不育材料是新发现的一类核质互作不育类型.本研究以水稻K型雄性不育的不育系(K17A)、保持系(K17B)以及杂交F1代(K优17)为研究对象.采用SDS法提取各水稻材料的线粒体DNA(mtDNA),mtDNA经纯化后利用EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ进行双酶切,并进行AFLP分析.利用AFLP分子标记技术从上述材料的mtDNA中找到了K17A、K优17所共有的特异片段,回收并纯化该片段.特异片段经克隆测序后,得知该特异片段序列为442 bp所组成.利用GenBank对其进行序列对比分析,表明该序列与水稻其他已知核质互作不育类型特异片段序列不相关,并且该序列与水稻的两种未知功能蛋白的表达相关.     

水稻马协胞质雄性不育恢复性的遗传分析

本文描述了水稻马协细胞雄性不育系马协A/明恢63F_2群体和F_3株系的花粉育性分布规律。在F_2中,可育株数、部分可育株数、部分不育株数和完全不育株数之比经卡平方测验符合9:3:3:1的理论比例。通过对各类型F_2单株的F_3株系育性表现的分析,推断出单株的基因型,并用马协B对单株进行测交,测交试验验证了上述结果。由此表明马协A不育恢复性由两对显性主基因控制,且一对恢复能力比另一对强。     

细胞质雄性不育棉花线粒体蛋白质和DNA的分析

以哈克尼西棉细胞质雄性不育系和保持系的花药及黄化苗为材料, 分别对线粒体蛋白质和DNA进行了SDS-PAGE、 RAPD和RFLP分析。 蛋白质SDS-PAGE分析表明, 在处于败育时期的不育系花药线粒体内缺少一种约31 kDa的多肽。 RAPD分析表明, 不育系与保持系的线粒体基因组之间存在着明显的差异。 以4个线粒体基因为探针进行的RFLP分     

玉米淀粉修饰基因du的RAPD标记研究

玉米淀粉修饰基因du是玉米品质改良的重要资源之一。本研究运用RAPD技术,以4种不同遗传背景的近等基因系(A632 Du/Du, A632 du/du; Mo17 Du/Du, Mo17 du/du; Oh43 Du/Du,Oh43 du/du; W64 Du/Du, W64 du/du)为筛选材料,采用(7922 Du/DuXMo17 du/du)和(HZ32 Du/Du XMo17 du/du)F:群体,研究du基因的分子标记。两个群体分别     

Screening and Identifying Two Specific Molecular Markers in Maintainer Line of Cytoplasmic Male Sterility Cauliflower （Brassica oleracea var. botrytis）

Cytoplasmic male sterility （CMS） is a maternally inherited trait that prevents the production of function pollen, but maintains female fertility. It has been widely used in breeding programs to product F1 hybrid seed in some crops （Hanson, 1991）. However, in some plants the CMS lines usually have some harmful characters such as plant dwarfness, etiolation in cauliflower. To obtain perfect CMS lines, a long time usually five to eight years is necessary. So how to fully utilize the obtained CMS lines for accelerating the development of new hybrid seed is very important. Here, in order to select high-quality paternal materials for cytoplasmic male sterility （CMS） cauliflower NKC-A in early stage, analyses of RAPD and ISSR were performed. Total 2 160 detectable bands were obtained by RAPD using 406 random primers. Among all these primers only the amplifications of primer S2121（5＇ GTGGCTCTCC 3＇） were polymorphic. A 934 bp band only existed in maintainer line. After cloning and sequencing, specific primers were designed to transform the RAPD marker into specific PCR marker, which was named S2121900. Furthermore, total of 30 ISSR primers were also analyzed which produced 306 detectable bands.     

大白菜线粒体DNA提取及细胞质雄性不育系RAPD分析

提取高质量线粒体DNA(mtDNA)是研究大白菜细胞质雄性不育系不育分子特性的前提。以大白菜绿色叶片为试验材料,应用一种省时、简便、操作步骤少的方法,快速获得3组11份大白菜的mtDNA(包括保持系、Ogu CMS、Pol CMS和CMS96细胞质雄性不育系)。试验中不需要加入DNase I酶消化核DNA,提取的mtDNA质量较好;同时,采用RAPD技术,对11份大白菜mtDNA进行多态性分析,获得了与大白菜Ogu CMS和CMS96不育系相关的差异片段10条,与大白菜Ogu CMS不育系相关的差异片段3条。初步证实:大白菜CMS96和大白菜Ogu CMS不育系既有相似性又存在差异性。     

RAPD Molecular Markers and Its Applications in Life Science

A DNA polymorphison assay, random amplified polymorphic DNA (RAPD), was developed in 1990 based on amplification by the polymerase chain reaction (PCR) of random DNA segments and single primers of arbitrary uncleotide sequnce. The major advantage of this assay, contrasting with the restriction fragment length polymorphism (RFLP), is that there is no requirement for any specific sequence information on the target genome, as well as rapidity and simplicity.It has been widespread applied in life science researches such as the creation of high density genetic mapping, molecular phylogenetic study and gene location.