肾型传染性支气管炎病毒理化特性的鉴定

气管环组织培养（ＴＯＣ）是用于传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分离、鉴定和血清学检查的有效方法〔１〕。Ｊｏｈｎｓｏｎ（１９７５）应用ＴＯＣ中和试验将分离的ＩＢＶ分为１０个血清型〔２〕;吕化广（１９８９）采用ＴＯＣ、鸡胚接种增殖和血清学鉴定的联合方法诊断Ｉ...     

以免疫荧光染色法快速诊断鸡传染性支气管炎病毒

以免疫荧光染色法快速诊断鸡传染性支气管炎病毒利用鸡胚气管环培养（ＴＯＣ）是分离临诊材料中传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）最有效的方法。利用免疫荧光（ＩＦ）染色确定ＴＯＣ中的ＩＢＶ，以１９－２０日龄ＳＰＦ鸡胚气管切成６００μｍ厚的环，ＩＢＶ在ＴＯＣ传代多次...     

鸡传染性支气管炎可疑病料的病毒分离及初步鉴定

１９份鸡传染性支气管炎（ＩＢ）可疑病料通过ＳＰＦ鸡和鸡胚感染试验、血凝（ＨＡ）试验、气管环培养（ＴＯＣ）感染试验、单克隆抗体（Ｍａｂ）ＥＬＩＳＡ和电镜形态学观察，初步证明其中１３份病料含ＩＳ病毒（ＩＢＶ）．在用其中９份接种８～９周龄ＳＰＰ鸡进行的发病试验中，全部呈现临床症状，其中３份引起病死亡率（６０～８０％），接种后５周从存活鸡采血作ＩＢＶ血凝抑制（ＨＩ）试验，结果均为阳性．     

鸡胚气管环纤毛对不同类型AIBV毒株的敏感性

以鸡胚气管环纤毛运动作指示系统,应用鸡胚气管环组织培养不同血清型的７个标准ＡＩＢＶ毒株及５个不同致病型的分离毒株。采用５０ＣＤ５０病毒量ＩＢＶ毒株感染鸡胚气管环培养物,观察感染后不同时间气管环纤毛的存活率。结果表明,鸡胚气管环纤毛对不同血清类型的ＡＩＢＶ毒株敏感性各具特征。     

单抗介导的斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

用群特异性的单克隆抗体作第一抗体,用酶标兔抗体ＩＢＶＩｇＧ作第二抗体,建立夹心法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测鸡传染性支气管炎病毒抗原。试验表明,本程序检测ＩＢＶ抗原高度敏感性和特异性。最低抗原检出量为０．５μｇ,约１００个气管环半数感染量（１００ＴＯＣＩＤ５０）,阳性检出率为９６％。     

气管环组织培养中和试验及间接血凝试验检测鸡传染性支气管炎病毒…

本试验利用气管环组织培养中和试验和间接血凝试验检测鸡清中传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗体，同此确定７株ＩＢＶ之间的抗原交叉范围，从而比较两种检测方法之间的相关性，结果表明，在间接血凝血试验中７株ＩＢＶ之间的抗原相关性Ｒ值介于３．１３～１００之间，而气管环组织培养中和试验Ｒ值介于０．７８～１００之间，中和试验Ｒ值变化范围较血凝试验宽得多，两种检测方法相关关系Ｒ可达０．８５３。     

应用气管环组织培养鉴定鸡传染性鼻气管炎病毒

气管环组织培养 (ＴＯＣ)是用于鸡传染性鼻气管炎病毒 (ＴＲＴＶ)分离、鉴定和血清学检查的有效方法 ,Ｂｕｙ、ＭｃＤｏｎｇａｌｌ、Ｃｏｏｋ等应用ＴＯＣ已成功地分离到ＴＲＴＶ。我们曾用ＴＯＣ鸡胚成纤维细胞 (ＣＥＦ)、绿猴肾细胞 (ＶＥＲＯ)对可疑的鸡传染性鼻气管炎病鸡进行野毒株分离 ,证明ＴＯＣ比ＣＥＦ、ＶＥＲＯ细胞更适于ＴＲＴＶ的分离和鉴定。经过鸡胚传代、电镜观察和中和试验等初步鉴定为鸡传染性鼻气管炎病毒 ,并通过理化特性和病原学的特性作进一步研究。1　材料与方法1 .1　病毒及血清标准株 :ＮＬ 7784株。分离株 :上海…     

用蓝舌病病毒血清11型实验感染牛

用血清１１型蓝舌病病毒（ＢＴＶ－１１）接种１６头处于繁殖期或妊娠阶段的易感牛。这些牛不含蓝舌病病毒（ＢＴＶ）和流行性出血热病病毒（ＥＨＤＶ），病毒接种前无ＢＴＶ抗体。一组４头牛与１头牛可从精液中排ＢＴＶ－１１（ＣＯ７５Ｂ３００株）的公牛自然交配。以推测该公牛是否能通过交配使母牛感染ＢＴＶ－１１，继而经胎盘感染胎儿，并持续感染，产出先天性畸胎儿。有４头妊娠牛的两个组，接种昆虫介导的ＢＴＶ－１１（ＣＯ     

异源抗原在建立ELISA检测传染性法氏囊病毒抗体中的应用

本文报告采用ｖｅｒｏ细胞增殖的ＩＢＤＶ抗原建立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），用于定量检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗体。该法快速、敏感性高、特异性强、重复性好。同时，通过３０份血清样品ＥＬＩＳＡ效价（ＥＴ）的对数值（ｌｏｇＥＴ）与血清Ｐ／Ｎ值（待检血清ＯＤ值与阴性血清ＯＤ值之比）的线性回归分析，得直线方程ｙ＝３．０５８９＋０．０７３９ｘ（ｒ＝０．９１７４），从而血清样品的ＥＴ可通过血清单一稀释度的Ｐ／Ｎ值来计算。用不同来源抗原作ＥＬＩＳＡ表明，从ｖｅｒｏ细胞增殖的抗原比从鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞增殖的抗原可提高检测血清ＯＤ值近２０％，表现出异源抗原具有更高的特异性     

传染性法氏囊病强毒感染与鸡法氏囊植物凝集素受体的关系

用４种辣根过氧化物酶标记植物凝集素（ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＳＢＡ、ＲＣＡ）作探针，观察了接种传染性法氏囊病强毒（ＩＢＤＶ）和不接种毒组鸡肠、气管和法氏囊凝集素受体的变化．结果发现，接毒组法氏囊粘膜上皮存在ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ受体．滤泡细胞含有ＣＯＮＡ、ＷＧＡ．ＲＣＡ、ＳＢＡ受体；未接种毒组粘膜上皮存ＣＯＮＡ、ＳＢＡ受体，滤泡细胞仅有ＷＧＡ受体．接毒组或非接毒组肠和气管粘膜上皮均含有ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ受体．这些部分存在凝集素受体可能与ＩＢＤＶ感染有关．     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱

用鸡传染性支气管炎病毒标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｔ、Ｎ１１５、ＩＢＶ６２株及国内华中（ＨＺ）、华东（ＨＤ）、华南（ＨＮ）、华北（ＨＢ）、东北（ＤＢ）及西北（ＸＢ）等地方性分离株试验,研究ＩＢＶ血凝特性。结果表明,ＩＢＶ不直接凝集鸡、牛、兔、小白鼠、仓鼠、猪、鹅、马、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞;１％胰蛋白酶３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后,可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞;１０％乙醚３７℃作用ＩＢＶ２ｈ后,可凝集鸡、牛、小白鼠、仓鼠、鹅、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞;１％卵磷脂酶Ｃ３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后,可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞。     

山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒的抗体应答反应

用琼脂凝胶免疫扩散试验（ＡＧＩＤＴ）和免疫印迹试验（ＩＢＡ）对山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的抗体应答反应进行了研究。结果,用ＡＧＩＤＴ和ＩＢＡ都可在接毒山羊的血清中检测到ＯＰＰＶ的抗体。ＡＧＩＤＴ最早于接毒后１５ｄ检测到抗体;ＩＢＡ最早于接毒后４ｄ检测到抗ＯＰＰＶ的ｇｐ４４和ｐ２８的抗体,以后又陆续检测到抗ｐ９４、ｐ１４和ｇｐ１２５的抗体。由此看出,ＩＢＡ比ＡＧＩＤＴ更为敏感。本研究结果表明,ＯＰ－ＰＶ可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应,因此用ＯＰＰＶ通过山羊体传代的方法可能会得到具有良好抗原性的ＯＰＰＶ毒株。     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。     

用间接荧光抗体试验检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的研究

建立检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）其抗体感染作时间Ｉ抗以５０～６０ｍｉｎ，Ⅱ抗以３０～４０ｍｉｎ最佳。该法具有良好的特异性，可检测出人工感染鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ａｕｓｔ－Ｔ，ＨＮ９３０１，ＴＪ９３０１，ＢＪ９３０１毒株后的抗原；对自然发病病例检测结果，阳性符合率高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和气管环中和试验法。     

鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的应用

通过中和试验证明，Ｂ３４腹水单克隆抗体中和ＩＢＤＶ ＣＡ株和中和效价高达１：４２００００。经１０倍稀释后，能等量中和含毒量为１０＾６．６２５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞毒。利用Ｂ３４腹水单克隆抗体建立了ＭＡｂ－ＡＣ－ＥＬＩＳＡ，可用于测定ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞的病毒含量，与ＴＣＩＤ５０之间的相关系数为０．９４。     

受精用液种类对牛狼母细胞体外受精的影响

比较了应用改良Ｔｙｒｏｄｅ＇ｓ液与０．６％ＢＳＡ－ＴＣＭ１９９作为受精液（实验１）、这两种受精液的不同配比作为受精液（Ｔ：ＢＴ分别为３：１、１：１和１：３；Ｔ为对照组，实验２）和在不同精时间采用不同受精液（先用Ｔ，ＩＶＦ２４ｈ后改用ＢＴ或ＴＣＭ１９９＋１０％发情牛血清，实验３），对经体外成熟培养（ＩＶＭ）后的牛卵母细胞体外受精（ＩＶＦ）效果的影响，结果，应用成分复杂的ＢＴ作为受精液，可以提高受精卵     

传染性法氏囊病强毒感染与鸡法氏囊植物凝集素受体的关系

用４种辣根过氧化物酶标记植物凝集素（ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＳＢＡ、ＲＣＡ）作探针，观察了接种传染性法氏囊病强毒（ＩＢＤＶ）和不接种毒组鸡肠、气管和法氏囊凝集素受体的变化，结果发现，接毒组法氏囊粘膜上皮存在ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ受体。滤泡细胞含有ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ、ＳＢＡ受体；未接种毒组粘膜上皮存在ＣＯＮＡ、ＳＢＡ受体，滤泡细胞仅有ＷＧＡ受体。接毒组或非接毒组肠的气管粘粘膜上皮均含有ＣＯＮＡ、Ｗ     

牛传染性鼻气管炎病毒TK基因缺失株与野毒株PCR鉴别诊断方法的研究

根据已发表的牛传染性敢管炎病毒（ＩＢＲＶ）ＴＫ基因和ｇＢ基因序列，应用Ｏｌｉｇｏ４．１程序设计两对引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２及ＰＢ１和ＰＢ２，分别对已构建的ＴＫ基因缺失（ＴＫ）ＩＢＲＶ以及ＩＢＲＶＬＡ株、洛精、美精、ＢａｒｔｈａＮｕ／６７株、Ｂ７株、云南－１和云南－２分离株进行了ＰＣＲ扩增，结果显示７株ＩＢＲＶＤＮＡ用引物ＰＴＫ１和ＰＴＫ２扩增产生４５７ｂｐ的特异性片段，而ＴＫＩＢＲＶ只出现１１０ｂｐ     

DNA免疫防制鸡传染性支气管炎的探索研究

ＯＲＦ完整的ＩＢＶ类Ｍ４１株Ｓ１基因ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＣＩ ＣＭＶ启动子下游我隆位点，构成ｐＣＩＳ１用于１周龄ＳＰＦ雏鸡的ＤＮＡ免疫试验。试验鸡生疏腿部肌肉注射ｐＣＩＳ１ＤＮＡ１００ｇ，２周后加强免疫一次。二次免疫２周后，代感染ＩＢＶ Ｈ５２株。结果，ＩＢＶ人工感染后第４天气管－泄殖腔棉拭子鸡胚病毒分离阳性者，免疫试验组为１／６，而对照组为６／６，鸡胚病毒中和试验显示，二次免疫后临感染前及     

气管环中和试验对2株IBV定型研究

本试验将二个 Ｉ Ｂ Ｖ 地方分离株宜毒和１１８ 毒连同 Ｉ Ｂ Ｖ 呼吸型代表株 Ｍ４１和肾型代表株 Ｔ 株制备免疫血清后在气管环上作交叉中和试验，结果显示宜株与 Ｔ 株（ Ｒ＝ ０．１８）， Ｍ 株（ Ｒ＝ ０１３５）抗原性上相差甚远，可能是一株不同于 Ｔ 和 Ｍ株的独立血清型或变异株，而１１８ 株与 Ｔ株相差较远，与 Ｍ 株（ Ｒ＝ ０．７１）比较接近，可能是马萨诸塞血清型中的一个亚型或变异型，这结果对疫苗的研制有一定指导意义。