响应面法优化绿色木霉产孢子固体发酵培养基

为探讨绿色木霉固体发酵产孢子的最佳发酵培养基。运用响应面法设计试验,筛选出主要影响因子碳酸钙、硫酸铵及氯化锰,以孢子量为响应值建立二次回归方程,并借助Design Expert 8.0.6软件进行分析数据并确定优化条件。结果表明,在温度28℃,接种量15%,料水比1:0.70的培养条件下发酵7天,孢子量为8.505×109CFU/g。通过优化,最终确定最佳发酵配方为:麸皮(过40目筛)50%,稻壳粉(过20目筛)30%,玉米粉(过80目筛)20%,硫酸铵1.08%,黄豆饼粉2.00%,玉米浆干粉2.00%,碳酸钙0.55%,氯化锰0.37%,pH 6.0～7.0。该配方所用原料廉价易得,发酵水平高,为大规模工业化生产提供保障。     

绿色木霉菌株Tv04-2固体发酵条件研究

以产孢量为测定指标,通过单因子和正交试验对人参根部病害拮抗绿色木霉菌株Tv04-2固体发酵条件进行了筛选,获得了以玉米粉、麦麸等廉价农产品及其副产物为碳、氮源的最佳固体发酵培养基,其配方为:在250 mL三角瓶中装入20 g固体基质,其中玉米粉∶麦麸按1∶1比例混合,FeSO4含量0.1 g,水7 mL,接种量4 mL;最佳发酵条件为:25,20和28℃下依次发酵2 d。利用优化培养基及发酵条件进行发酵试验,可以获得高达4×109cfu/g的产孢量,为人参根部病害高拮抗活性木霉菌剂的生产和应用奠定了基础。     

木霉的孢子与土壤抑菌作用

木霉（Trichoderma spp.）是真菌类中最有潜力的生防菌株，可用来防治多种植物病害。木霉广泛存在于土壤、根围、叶片、种子和球茎等生态环境中，常见的木霉属种类有哈茨木霉（T.harzianum）、哈氏木霉（T.hamatum）、多孢木霉（T.polysporum）、康氏木霉（T.koningii）、拟康氏木霉（T.pseudokoningii）、绿色木霉（T.viride）和长枝木霉（T.longibrachiatum）等。在众多种类中，     

长枝木霉TS-1的分离鉴定、拮抗作用及固体发酵条件初探

为筛选能有效抑制常见植物病害的生防真菌,从甘肃省景泰县马铃薯连作田植株根际土壤中分离获得一株木霉菌株TS-1。通过形态学特征和EF-1α序列分析,将其鉴定为长枝木霉Trichoderma longibrachiatum。采用对峙培养法测定TS-1对6种病原菌的抑制作用,并利用该菌株不同浓度的分生孢子悬浮液处理小麦种子,分析种子形态学指标的变化。以产孢量为指标,采用单因素实验进行发酵条件的初探。结果表明：长枝木霉菌株TS-1对茄病镰孢(Fusarium solani)、接骨木镰孢(F. sambucinum)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的抑菌率均在70%以上,抑菌效果较好。与对照相比,该菌株对小麦种子有一定的促生作用。通过对该菌株固体发酵条件初探,发现发酵培养基主要成分秸秆和麸皮的最佳配比为9:1、大麦添加量10%、碳氮源分别为乳糖和硫酸铵时产孢量最大。上述试验证明,长枝木霉TS-1具有较好的生防应用潜力,可进一步扩大培养。     

BBD-响应面法优化绿色木霉产胶霉菌素培养条件

旨在优化绿色木霉产胶霉菌素培养条件。实验取绿色木霉产胶霉菌素培养条件中的5个重要影响因子,设计5因素3水平的响应面分析实验,数据用Design-Expert 8.0分析得出预测模型,验证模型的可靠性后,得出绿色木霉产胶霉菌素最佳的培养条件为:培养温度29.42℃、培养基初始pH 6.35、接种量5.44%、培养时间54.5 h、菌龄44.5 h,且在最佳培养条件下胶霉菌素效价较优化前提高了15.08%。     

拟康氏木霉和黑根霉混合发酵对苹果链格孢的防治

研究黑根霉和拟康氏木霉混合发酵液对苹果链格孢菌的生物防治效果,探索开发为新型绿色环保生物防治剂。对2种生防微生物进行形态学鉴定和ITS鉴定;生长速率法测定混合发酵液的抑菌活性;在烟台莱阳进行田间实验对发病较为严重的果园进行为期一年的多次灌根与喷施处理,测定其防治效果并测定其对苹果叶片SOD、POD等防御相关酶的活性。研究结果表明,黑根霉和拟康氏木霉混合发酵可显著提高对病原微生物链格孢菌的抑菌能力。平板抑菌实验结果表明,混合发酵液对链格孢菌的抑菌效果达到了66.73%,显著高于黑根霉和拟康氏木霉单独发酵液的51.23%、17.28%;田间实验发现,混合发酵液处理后苹果斑点落叶病发病率与对照组相比显著下降,相对防效达到42.46%;对其叶片防御酶测定结果表明,混合发酵液处理后,苹果叶片的防御酶SOD、POD、PAL活性均有50%以上的提高。黑根霉和拟康氏木霉混合发酵液对苹果链格孢菌具有显著的抑制作用,能有效防治苹果斑点落叶病,提高苹果抗病能力,为新型生防制剂的开发提供了参考。     

木霉发酵产物对抗虫棉种子萌发及苗期生长的影响

将哈茨木霉RT-12在PDA培养基发酵产物稀释10、50、100倍,以PDA培养基作对照,分别处理抗虫棉种子及其幼苗。结果表明,木霉发酵产物对供试的抗虫棉种子活力具有提高作用,表现为提高种子的活力指数、萌发率,增加根鲜重和叶绿素含量,降低种子的相对电导率,同时增加了苗期根系的谷胱甘肽还原酶活性和抗坏血酸过氧化物酶活性,在各处理中,以稀释50倍的发酵液作用最为显著。因此,木霉发酵产物不仅能提高种子的活力,而且还有壮苗作用。     

木霉菌BTW41发酵条件的研究

木霉菌BTW41发酵条件的研究表明：以糖分为培养基主要成分,pH值5.1和25℃的条件下最有利于木霉菌BTW41发酵产生分生孢子。在温、湿度两种条件中,温度是决定木霉菌BTW41产孢水平的关键因素。     

米根霉L-乳酸摇瓶发酵工艺条件的优化

对米根霉AS3．819摇瓶发酵生产L-乳酸的工艺条件进行了初步研究，结果表明，采用80g／L葡萄糖、2g／L（NH4）2SO4、0．3g／L KH2PO4、0．05g／L ZnSO4·7H2O、0．3g／L MgSO4作为发酵培养基组分，在温度为34℃、摇床转速为160r／min的条件下，经72h发酵，L-乳酸浓度平均达到59g／L，对糖转化率接近75．00％。     

生防木霉菌Tr9701的鉴定及其生物学特性

对从土壤中分离、筛选出的生防木霉菌进行分类鉴定和生物学特性测定。结果表明,生防木霉菌属于半知菌类、丛梗孢目、木霉菌属,为绿色木霉(Trichoderma viride)。该菌以小麦粉和豆粉浸出液培养基生长最适,在小麦粉和PDA培养基上孢子生成最快、产生孢子量多,分生孢子在1%葡萄糖溶液中萌发效果最好;20~30℃为其菌落生长和分生孢子形成的适宜温度;木霉菌菌落生长和孢子可以耐受45℃的高温,致死温度为55℃持续15 min;适宜pH为5~8;短时间紫外线照射不会对生防木霉菌的生长和孢子着生产生影响。     

固态发酵麸皮和玉米芯生产拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii）孢子的实验研究

本研究以麸皮和玉米芯为主要原料,筛选孢子产量最大的拟康氏木霉固态发酵培养基。采用单因子试验对麸皮、玉米芯比例,培养基含水量,其他佐剂进行了优化。浅盘式固态发酵法进行了模拟发酵。结果表明最优培养基：麸皮、玉米芯按8:2比例混合,调整含水量至55%~60%,添加0.1% KNO3,1%CaSO4,1%蔗糖。在28℃,接种量10%的条件下,利用浅盘式发酵进行拟康氏木霉孢子生产,1千克干料,发酵产出470g分生孢子及菌丝,每克发酵产物含1.34×109孢子。本研究为大规模工业化固态发酵生产拟康氏木霉孢子制剂提供了理论依据。     

绿色木霉Tr9701对多种病原菌的抑制作用及其抑病机理

对筛选获得的绿色木霉菌株Tr9701（Tr／ehodemmviride）进行抑菌活性测定。结果表明,Tr9701对立枯病菌和灰霉病菌等多种病原菌具有较强抑菌活性。小区试验表明,Tr9701菌剂对黄瓜立枯病的防治效果在66．27％-73．46％间,对番茄灰霉病的防病效果在70：85％-80．06％间。并通过产几丁质酶活性等对其抗病机理进行了初探,结果表明绿色木霉菌Tr9701产生几丁质酶,且经诱导处理酶产量明显提高．其酶粗提液对立枯病菌、灰霉病菌有显著抑制作用。显微观察显示绿色木霉菌对立枯病菌具有较强的寄生能力。     

甜菜固态发酵生产酒精的条件优化

本文对甜菜发酵生产酒精的条件进行了研究,采用了固态发酵的方法,对发酵条件进行优化,实验结果表明编号为1308-1的南阳混合酿酒酵母菌菌种发酵效果最好。发酵的最佳条件是先对发酵的培养基灭菌,发酵液pH控制在5~5.5之间,接种量为15 ml,发酵时间为48 h,在此条件下,残糖含量最低,酒精浓度最高。     

盾壳霉固态发酵基质筛选和发酵条件优化

为了探索盾壳霉固体发酵的条件,提高其生防效果,比较了6种天然培养基对盾壳霉固体发酵的影响,测定了在不同发酵培养基、温度、初始湿度、接种比例条件下盾壳霉的产孢量。结果表明：盾壳霉在麦粒和谷粒培养基上产孢量最大;而在麸皮和棉籽培养基上生长和产孢也较好,且成本低,成为后续试验的发酵材料。在含麦麸、棉籽壳及无机盐的培养料作为基质时,采用温度为20℃,发酵料初始湿度为60%,接种比例为7%,最终孢子含量可达109个/g以上。同时对发酵的条件做了进一步优化,发现麦粒与谷粒的混合比例、光照条件、甘露糖和甘氨酸含量对盾壳霉产孢量的影响较大。     

混合菌剂固态发酵棉粕脱毒条件的优化

为找到一种脱毒较为彻底且稳定的棉粕脱毒方法,以复合芽孢杆菌为发酵剂,通过添加由木聚糖酶、纤维素酶和甘露聚糖酶组成的复合酶研究其协同微生物固体发酵棉粕脱毒的发酵过程参数。采用单因素试验确定了复合酶协同微生物发酵棉粕脱毒培养基及脱毒条件,在此试验结果的基础上,采用正交试验对发酵脱毒的主要因素进行研究,用SPSS17.0软件分析试验数据。确定了酶法协同微生物固体发酵脱毒工艺条件为：棉粕:麦麸=90:10,(NH4)2SO4 1%,复合酶40 U/g底物,发酵温度40℃,发酵初始pH 6.0,含水量50%,接种量6%（W/V）,装量为70 g/250 mL三角瓶,发酵时间为6天。在此条件下,游离棉酚的去除率达96.52%。