羔羊产气荚膜梭菌感染的诊断

贵州某羊场羔羊突然发生急性腹泻和死亡,从病死羊的肠道内容物中分离得到病原菌,经对该病原菌进行病原形态、培养特性及分子生物学等鉴定,结果该病菌为产气荚膜梭菌,该病确诊为羔羊产气荚膜梭菌病.     

兔产气荚膜梭菌感染的诊治

兔产气荚膜梭菌病又称兔产气荚膜梭菌性肠炎．是由A型产气荚膜梭菌所产外毒素引起的肠毒血症。以急性腹泻、排黑色水样或带血的胶冻样粪便、盲肠浆膜出血斑和胃黏膜出血、溃疡为主要特征。发病率和死亡率均较高,如不及时诊治,会造成大批死亡．     

产气荚膜梭菌α毒素的研究进展

产气荚膜梭菌能引起人类食物中毒和出血性肠炎,严重时可导致死亡。α毒素是A型产气荚膜梭菌的主要致死性毒力因子和保护性抗原,从分子生物学角度对该毒素进行研究具有重要意义。对α毒素的分子生物学结构和致病机理进行了简要概述,并介绍了国内外对产气荚膜梭菌α毒素的检测方法和防治措施,以期为研究产气荚膜梭菌α毒素的致病机理以及预防和治疗动物气性坏疽、肠道出血症奠定基础。     

产气荚膜梭菌的分离鉴定

从山西省太原市、阳泉市、昔阳县、绛县、太谷、榆次等地的鹿场发生鹿出血性肠炎的病死鹿体内分离到21株产气荚膜梭菌,鉴定均为A型。对A型产气荚膜梭菌的培养条件进行了研究。结果表明:最佳培养基为厌氧肉肝胃酶消化汤,最佳产毒条件为35℃7h。     

复合酶制剂及植物精油对感染产气荚膜梭菌肉仔鸡抗氧化及免疫指标的影响

[目的]本研究旨在明确酶制剂、植物精油对产气荚膜梭菌感染肉鸡免疫及抗氧化性能的影响。[方法]试验选用648只1日龄肉鸡,采用小麦-豆粕型基础日粮,2×2×2因子设计,试验处理为植物精油(EO:0、60mg·kg~(-1))、复合酶制剂(CSM:0、500mg·kg~(-1))、细菌感染(产气荚膜梭菌:感染、未感染)及其交互作用。[结果]感染产气荚膜梭菌提高肉鸡21日龄时血清尿酸水平,提高28日龄时血清IL~(-1)β水平。日粮中添加复合酶制剂可提高21日龄时血清IL~(-1)β、IL~(-1)0及尿酸含量,降低28日龄时血清IL~(-1)β水平。日粮中复合酶制剂或植物精油的添加还可提高产气荚膜梭菌感染血清谷胱甘肽过氧化物酶活性。[结论]复合酶制剂或植物精油可提高产气荚膜梭菌感染仔鸡的免疫功能及抗氧化力。     

冷鲜鸡产气荚膜梭菌及其毒素的潜在危害分析

为调查广州市冷鲜鸡产气荚膜梭菌及其毒素危害,从广州市各大型超市随机采集鸡肉样品进行产气荚膜梭菌分离、鉴定和毒素分型,同时检测分离菌株对常用抗生素的抗药性,并采用Eric-PCR对分离出梭菌进行亚型分析。结果表明,从78个样本中分离出57株产气荚膜梭菌,所有菌株均为A型,其中,cpb2(Atypical)型40株,cpb2(consensus)型1株;含net B基因菌株1株;药敏结果显示,分离出的产气荚膜梭菌大部分对氟苯尼考、氨苄西林、青霉素敏感;值得注意的是产气荚膜梭菌分离株对仅可用于人的抗生素克林霉素、头孢氨卞的耐药率分别达73.68%和31.58%。Eric-PCR结果显示,相似性为80%时,57株梭菌可分为13个亚型,提示污染来源的多样性。     

牛肠毒素性产气荚膜梭菌的分离及鉴定

对黑龙江省3个地区牛场疫牛进行临床诊断，剖检结果为小肠出血性肠炎和心内外膜严重出血等症状，进行了细菌的分离培养、涂片镜检、生化试验和动物感染试验。结果表明：分离菌株均为革兰氏阳性粗短杆菌，严格厌氧，在血平板上具有双溶血环，能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和暴酵牛乳，肠毒素检测试验阳性，厌气肉肝汤培养物0．2mL小白鼠尾静脉注射，2～10h可使其致死。试验结果表明3个分离株均为产气荚膜梭菌。     

提取产气荚膜梭菌染色体DNA的新方法--氯化苄法

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,又名魏氏梭菌Clostridium welchii)是广泛分布于土壤、大气、天然水域和正常动物肠道的一类温和厌氧菌.     

A型产气荚膜梭菌的分离及鉴定

从山西各鹿场采集鹿出血性肠炎急性病死鹿病料39例,通过病原微生物分离培养,形态学观察和血清型鉴定,初步表明分离到的产气荚膜梭菌主要是A型,对PCR产物的序列分析表明经过PCR得到了特异性的α毒素基因片段,因而A型产气荚膜梭菌是引起山西鹿场发生鹿出血性肠炎的主要致病菌。为该疾病的防治和疫苗研制提供依据。     

杜泊肉用绵羊的品种特征

杜泊绵羊是南非科学家在特殊的生态环境和市场条件下,采用多个杂交组合选育培育成的世界肉用绵羊品种.该品种不仅具有随季节变化自动脱毛,对饲草无选择性,瘤胃发达,特别耐粗饲、适应性强的特点,而且具有早期生长发育快,适于肥羔生产,胴体瘦肉率高,肉质芳香、细嫩的特点,被国际市场誉为钻石级羊肉.此外,杜泊肉用绵羊板皮厚,面积大,质地柔软,是制作高档家具和豪华骄车内装饰的优等皮革原料.杜泊肉用绵羊的优良特性主要表现:     

产气荚膜梭菌α毒素基因的定点突变与表达

选择可能影响α毒素生物活性的氨基酸相关碱基位点进行定点突变,构建α毒素基因的突变体并在大肠杆菌中表达。利用PCR定点突变技术,进行第68位组氨酸→亮氨酸的定点突变,构建含α毒素突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)pLys(pXMCPA02)。结果表明,α毒素突变基因第287位核苷酸由A→T,经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pXMCPA02含有α毒素突变基因,且基因序列和阅读框架正确;重组菌株BL21(DE3)pLys(pXMCPA02)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的33.82%。因此,已成功构建了α毒素基因突变体,并实现了在重组大肠杆菌中的表达。     

产气荚膜梭菌青海分离株α毒素基因克隆与表达

用PCR技术,从一株田间分离的产气荚膜梭菌基因组中扩增出了1 194 bp的α毒素基因,经限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切处理后将其连接在经同样内切酶处理的载体pET\|28a(+)中的相应位点上,最后转化至受体菌BL21(DE3)中。经PCR、双酶切和核苷酸序列分析,证明重组质粒pET\|28a\|CPA含有产气荚膜梭菌α毒素基因,再将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,目的基因获得了良好表达。以羊抗α毒素多克隆血清进行Western blot分析,抗血清可与该融合蛋白发生特异性反应,表明目的蛋白具有较好的免疫原性。     

C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备及抗体效价研究

为制备具有高效保护力的C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗,利用C型产气荚膜梭菌标准菌株(NCTC 3180)所产外毒素经甲醛灭活并加入佐剂乳化后制备该疫苗。参照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》分别对疫苗进行了安全性检验、无菌检验和免疫效力检验。分别在分娩前30天和15天免疫接种怀孕母猪,通过间接ELISA和毒素中和试验评估母猪初乳和14日龄仔猪血液中抗体效价水平。结果显示,母猪初乳和仔猪血清中抗毒素效价分别为1∶3200和1∶1600,母猪初乳和仔猪血清中的中和效价均为1∶6。表明制备的类毒素疫苗效价高并安全可靠,免疫实验动物后能对母体和其所产幼畜起到一定的保护作用。     

RAPD技术在产气荚膜杆菌基因分型中的应用研究

采用随机扩增多态性ＤＮＡ技术对产气荚膜杆菌进行ＰＣＲ扩增。结果产气荚膜杆菌Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ４个型均可扩增出约４３０ｂｐ的条带，Ｂ，Ｃ型还扩增出约２１０ｂｐ条带，Ｂ，Ｄ型还扩增出约１２１０ｂｐ条带，Ａ型还扩增出约２４０ｂｐ和６９０ｂｐ条带，各型之间的条带差别明显，从而为产气荚膜杆菌的基因分型、ＰＣＲ快速诊断提供可靠的依据。     

B型产气荚膜梭菌三种主要毒素基因的PCR检测

为了对B型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type B)进行快速检测,依据NCBI登录的产气荚膜梭菌α、B及ε毒素基因序列设计引物,并对其进行PCR扩增.琼脂糖凝胶电泳结果显示3个毒素基因均被成功扩增,目标片段条带清晰,长度与预期相符.     

海兰褐蛋鸡产气荚膜梭菌的分离鉴定

近期山东省青岛市即墨区某蛋鸡场内350日龄的海兰褐蛋鸡出现了鸡只消瘦、精神沉郁、腹泻、便血等症状.根据其发病突然死亡快及刨检后肠管明显肿胀,肠壁变薄,肠道内容物为混有血液的褐色和黑色稀粪等特点确诊为鸡坏死性肠炎病.产气荚膜梭菌作为该病的主要病原菌,可导致蛋鸡死淘率增加,经济效益降低及产蛋率下降.为了探究产气荚膜梭菌的生...