云南西双版纳辣木果腐病病原鉴定

[目的]明确辣木果腐病的病原菌种类,为该病的有效防控提供依据.[方法]采用常规组织分离法对采自云南西双版纳的辣木果腐病样品进行病原菌分离纯化;将分离物于PDA培养基上26℃恒温培养,观察其形态特征,在显微镜下观察其孢子形态,初步确定其种属;通过致病性测定、ITS序列分析等对病原菌种类进行鉴定.[结果]从感病的辣木果荚样品中分离纯化得到1株疑似致病真菌菌株YJiH-1,显微镜下观察菌株YJiH-1的菌丝、单孢子、孢子囊、孢子梗和孢囊孢子等与已报道的笄霉(Choanephora spp.)高度相似.离体条件下接种菌株YJiH-1后,辣木果荚产生腐烂症状,并在接种发病的果荚病斑上分离到该病菌,符合柯赫氏法则.病原菌rDNA-ITS序列的BLAST同源性比对结果,菌株YJiH-1的rDNA-ITS区序列与印度巴豆瓜笄霉C.8-18菌株(登录号KX462163)和印度CBS 178.86菌株(登录号JN943007)的rDNA-ITS区序列完全一致(相似性100%);与印度番木瓜瓜笄霉CP-5菌株(登录号KX790359)的相似性为99%,进一步确定该致病菌为瓜笄霉(C.cucurbitarum).[结论]引起云南西双版纳辣木果荚腐烂且表面有白色菌丝体的辣木果腐病病原菌为瓜笄霉(C.cucurbitarum).     

烟草钟器腐霉的分子鉴定与致病力测定

从河南省嵩县送检的烟草茎黑腐病样本上分离获得1株腐霉菌,为明确该菌的种类及对烟草的致病力,对所得菌株进行形态学鉴定、DNA序列分析和致病性测定。结果表明,菌株菌落呈放射状型,并逐渐变为花瓣型,菌丝无隔;孢子囊球形、梨形;藏卵器球形;雄器钟状或不规则;rDNA-ITS序列测定分析,该菌序列与GenBank上登录号KC014615.1和GU133597.1等的序列同源性大于99%,鉴定为钟器腐霉(Pythium vexans de Bary)。对培育到10叶期的‘中烟100’品种接种,7天后该菌的病情指数为48,对照瓜果腐霉(P. aphanidermatum)的病情指数为62.7,表明其对‘中烟100’的致病力不及瓜果腐霉。     

烟田瓜果腐霉的分离鉴定及其拮抗木霉菌株的筛选

采用诱捕法从烟田土壤中分离到1株腐霉(Pythium spp.),鉴定为瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum).接种试验结果表明该菌对烟草、黄瓜、辣椒具有致病性.采用对峙培养试验测定木霉菌(Trichodermaspp.)对瓜果腐霉的抑制作用,筛选出拮抗瓜果腐霉哈茨木霉(T.harzianum)菌株TGY040604,该菌株对瓜果腐霉的生长抑制率达到80%以上,其次生代谢产物对病原菌也具有一定的抑制效果.盆栽试验结果表明,该木霉菌菌株对烟草猝倒病的防效达65%,优于甲霜灵锰锌.     

核桃基腐病病菌越冬场所试验研究

通过采集病株茎基部土壤、腐烂病斑组织、病株上健康树皮、枝条、越冬芽,无病株主干树皮、枝条、越冬芽及落叶、落果等,利用大麻籽、黄瓜、土豆诱发土壤中病原菌,采用选择性培养基对疑似越冬器官组织进行病原菌的分离、培养、纯化及鉴定,并将分离物再接种.结果表明,病株根际土壤通过诱集分离出寡雄腐霉和镰孢霉,其中黄瓜片分离腐霉病菌的比率最高,达78.5%;从核桃腐烂病斑上分离到镰孢霉、链格孢菌及少量腐霉病菌;病株健康部位及无病株的树皮、枝条、越冬芽、落叶等器官均未分离到寡雄腐霉菌.对分离物的致病性测定结果表明,病田土壤是病原菌的主要越冬场所,其次也可在病组织中越冬存活.     

宁夏银川地区番茄猝倒病病原菌的鉴定

【目的】探明宁夏银川地区番茄猝倒病的病原菌,为该病的防治及抗病育种工作奠定基础。【方法】以番茄猝倒病病株为材料,通过常规组织分离法分离病原菌,从形态学、致病性测定和rDNA-ITS序列分析三方面对其进行鉴定。【结果】共分离出2种不同形态的病原菌,1号分离物孢子囊卵圆形或近球形,有乳突,孢子囊脱落具长柄,初步判断其为辣椒疫霉;2号分离物藏卵器为球形,柄较直,雄器侧生,宽棍棒状或近柠檬形,卵孢子球形,平滑,不满器,初步判断其为瓜果腐霉。在番茄子叶期分别接种两种病原菌后,番茄苗均发生猝倒,在接种部位出现暗褐色斑点和茎缢缩等与自然发病一致的病害症状,表明两种病原菌是引起番茄猝倒病的病原菌。利用两种分离物的ITS序列分别构建系统进化树,1号分离物与辣椒疫霉处于同一分支;2号分离物与瓜果腐霉处于同一分支。【结论】引起银川市番茄猝倒病的病原菌主要为辣椒疫霉和瓜果腐霉。     

绿豆根腐病病原菌分离和致病力鉴定

从采集自我国6个省(市)具有根腐症状的绿豆植株中分离得到73株分离菌株,进一步通过离体叶片接种检测获得54株致病菌株.通过形态学和保守序列分析共鉴定出14种致病病原菌,其中尖孢镰刀菌检出率最高,首次检测出群结腐霉可以侵染绿豆并引起根腐症状.对来自国内外12个绿豆品种进行群结腐霉接种试验,结果表明,群结腐霉对不同绿豆品种均表现出强致病力,病情指数在45～96之间;进一步分析表明,皖绿2号对群结腐霉表现出相对较强的抗性水平.     

广东花生果腐病病原菌鉴定及药剂筛选试验

【目的】鉴定广东花生果腐病病原菌类型并筛选有效的杀菌剂种类,为生产上防控该病害提供参 考。【方法】采用组织分离法从大田采集的患病花生果荚中分离获得果腐病的真菌纯培养物,回接验证分离菌 株的致病性后确认其病原,通过克隆菌株的 ITS 序列并进行系统发育分析鉴定病原菌种类。采用菌丝生长速率 法测定 40% 福美双水悬浮剂、98% 噁霉灵可溶性粉剂、24% 井冈霉素 A 水剂、10% 苯醚甲环唑水分散粒剂和 10% 多抗霉素可湿性粉剂对该病原菌的抑菌效果。【结果】 从韶关采集的花生果腐病样本中分离获得 2 株病原 真菌,回接后均可以引起花生果荚腐烂,严重时导致果仁腐烂。基于菌株 ITS 序列的系统发育分析显示病原菌 为尖孢镰刀菌（Fusarium oxyspourm）和茄病镰刀菌（Fusarium solani）。供试杀菌剂中 40% 福美双悬浮剂对 2 种病原真菌的抑菌效果最好,EC50 分别为 0.001 mg/L 和 0.021 mg/L,其次是噁霉灵,EC50 分别为 0.296 mg/L 和 0.217 mg/L,井冈霉素 A 的 EC50 分别为 20.575 mg/L 和 11.185 mg/L,苯醚甲环唑和多抗霉素对 2 株病原真菌没有抑菌 效果。【结论】广东韶关地区花生果腐病主要由镰刀菌复合感染引起,以茄病镰刀菌为主,病原菌对福美双和 噁霉灵敏感,生产上可以考虑使用这两种杀菌剂防控。     

北京地区一株葡萄酸腐病相关酵母菌的分离鉴定

近年来葡萄酸腐病在中国葡萄主要产区发生普遍而严重,已成为葡萄生产上的重要病害之一,但目前该病害的病原不明确且存在争议。采用组织分离法从北京地区采集的葡萄酸腐病病果上分离纯化出一株酵母菌sf-19,采用形态学特征观察、Biolog微生物自动分析系统和26SrDNA D1/D2区序列分析,将菌株sf-19鉴定为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)。致病性测定发现,酵母菌sf-19菌株可引起葡萄果实腐烂,且从接种腐烂的果实中又分离出葡萄汁有孢汉逊酵母。结果表明:葡萄汁有孢汉逊酵母是引起中国葡萄酸腐病的相关酵母菌之一。     

深州蜜桃果实腐烂病病原菌鉴定及拮抗菌株的筛选

为了明确引起深州蜜桃果实腐烂的病原菌种类,从而进行针对性的综合防治,本研究采用组织分离法从发病的蜜桃样本中分离获得2种不同的病原真菌,共计6株,分别命名为H-1、H-2、H-3和T-1、T-2、T-3。根据柯赫氏法则回接验证6株菌株,致病症状与田间发病症状一致,表明6株菌株均为深州蜜桃果实腐烂病致病病原菌。进一步通过病原菌形态观察与多基因系统发育分析,明确引起深州蜜桃果实腐烂的病原菌为2种类型：病原菌H-1、H-2、H-3为美澳型核果链核盘菌（Monilinia fructicola）,引起桃果实褐腐病;病原菌T-1、T-2、T-3为暹罗炭疽菌（Colletotrichum simamense）,引起桃炭疽病。为了获得对深州蜜桃褐腐病和炭疽病病原菌具有抑菌效果的生防菌株,利用平板对峙实验筛选对2种病原菌具有良好抑制效果的拮抗菌株。结果发现,解淀粉芽孢杆菌JK-21对H-1、H-2、H-3和T-1、T-2、T-3的抑菌率分别为75.1%和70%;贝莱斯芽孢杆菌JK-47对H-1、H-2、H-3和T-1、T-2、T-3抑菌率分别为77.8%和59.7%。本研究为蜜桃果实腐烂病的识别与生物防...     

湖南永州奈李果实一种新病害的病原鉴定

[目的]明确危害湖南永州奈李果实新发生病害的病原物种类,为更好地识别并防控该病害提供理论依据.[方法]用常规分离方法对湖南永州奈李果园发病样品进行病原菌分离,通过形态学特征观察,ITS、TUB、CAL和ACT序列和系统发育进化树分析及致病性测定,对分离获得的病原菌进行鉴定.[结果]分离获得的病原菌形态学特征与大豆拟茎点霉(Phomopsis longicolla)一致;其ITS、TUB、CAL、ACT序列与P.longicolla同源性分别为98%、99%、99%和98%.室内人工接种病原菌3~5 d后果实形成椭圆形至不规则形褐色病斑、后转腐烂等症状,与田间果实危害症状一致.[结论]初步确定危害湖南永州奈李果实的病原菌为P.longicolla YZ.     

伽师甜瓜猝倒病生防放线菌的筛选

【目的】分离、鉴定引起伽师甜瓜(Cucumismelo L.)猝倒病的病原菌,筛选可用于甜瓜猝倒病生物防治的拮抗性放线菌。【方法】采用组织分离法分离伽师甜瓜猝倒病的病原菌,用琼脂块法和无菌发酵滤液抑菌性试验筛选拮抗瓜果腐霉的生防放线菌,搭片法观察生防放线菌菌丝与瓜果腐霉菌丝间的相互作用。【结果】伽师甜瓜猝倒病的病原菌为瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum);筛选出7株对瓜果腐霉具有显著拮抗性的生防放线菌,其中8号放线菌对瓜果腐霉的拮抗环宽度为13.3mm,其无菌发酵滤液对瓜果腐霉的抑菌率在培养120h时高达88.3%。【结论】7株生防放线菌对由瓜果腐霉引起的伽师甜瓜猝倒病均有显著抑制作用;7株生防菌可通过产生抗菌物质或缠绕、消解菌丝的方式抑制瓜果腐霉生长。     

植株残体对黄瓜苗病的影响研究初报

本文报道了植株残体对黄瓜苗病致病性影响的研究结果,明确了黄瓜苗病病原菌主要是瓜果腐霉菌,次为立枯丝核菌 AG5。黄瓜幼苗残体在土壤中腐烂后,促进了腐霉菌的腐生活动和侵染,加重苗病的发生。非寄主作物(玉米、大豆、高粱、大麦、棉花)成株根残体及几种杂草(红蓼、鸭跖草、苘麻、龙癸)的植株残体在土壤内腐烂后能明显抑制苗病的发生,促造幼苗的生长,为今后生物防治蔬菜苗病提供了新途径。     

无锡市阳山水蜜桃果腐病病原真菌的分离鉴定及高效杀菌剂筛选

为明确引起阳山水蜜桃果腐病病原菌的种类并筛选高效防治药剂,以阳山镇桃园采集的40个具有典型腐烂症状的‘晚湖景’水蜜桃果实为病样,对分离得到的51株真菌进行形态学、分子生物学鉴定和致病性测定,并分析了4种药剂对病原菌的抑菌效果。结果表明:1)结合形态学特征、rDNA-ITS序列分析以及病原菌的回接试验结果,确定48株菌株为白地霉(Geotrichum candidum,异名Galactomyces candidus),3株菌株为桃吉尔霉(Gilbertella persicaria);2)药剂筛选结果表明,喹啉铜及代森锰锌对白地霉菌丝的生长抑制效果最好,其中33.5%喹啉铜悬浮剂或80%代森锰锌可湿性粉剂的1 000倍液均完全抑制了白地霉菌丝的生长,而50%甲基硫菌灵悬浮剂和30%苯醚甲环唑悬浮剂1 000倍液的抑制效果则均低于65.0%;此外,33.5%喹啉铜悬浮剂对桃吉尔霉的抑制效果最好,其1 000倍液的药剂抑制率达86.4%,而其他3种药剂的抑制效果则均低于65.0%。综上,施用1 000倍液的喹啉铜悬浮剂能同时有效抑制白地霉和桃吉尔霉的生长,可用于预防阳山水蜜桃成熟期的腐烂。该研究结果可为阳山地区水蜜桃果腐病防治提供理论参考。     

贵州芒果畸形病病原菌的分离与鉴定

【目的】确定引起贵州兴义芒果畸形病的病原菌种类,为防治该病提供理论依据。【方法】以典型的芒果畸形病株花序为试验材料,采用组织分离法获得纯化菌株,通过离体接种和活体接种方法进行分离菌株的致病性测定、采用形态学结合r DNA-ITS序列的分子系统学方法鉴定病原菌的种类。【结果】分离真菌菌株MGXJB-1在离体条件下能侵染芒果果实,形成褐色的水渍状圆形病斑,在活体条件下能侵染芒果花序并引起畸形病害,根据培养特征和显微形态学特征结合r DNA-ITS序列的分子系统学鉴定该菌株为腐皮镰刀菌(Fusarium solani)。【结论】贵州兴义芒果畸形病的病原菌为腐皮镰刀菌(F.solani),是国内首次报道腐皮镰刀菌(F.solani)能够引起芒果畸形病害。     

栝楼果实腐烂病病原菌鉴定及防治药剂的筛选

【目的】明确引起栝楼果实腐烂病的病原菌种类并筛选其有效防治药剂。【方法】2019—2020年采集安徽省大别山区的栝楼果实腐烂病样品,采用组织分离法获得35株分离物,利用柯赫氏法则验证其致病性,依据菌株形态学特征和多基因序列分析确定病原菌种类;采用菌丝生长速率法测定7种杀菌剂的室内毒力。【结果】共分离纯化得到4种不同菌落形态特征的菌株,经柯赫氏法则验证均为栝楼果实腐烂病病原菌,经形态学观察和分子系统发育分析,确定引起栝楼果实腐烂病的病原菌分别为藤仓镰孢菌Fusarium fujikuroi、层出镰孢菌F.proliferatum、果生刺盘孢Colletotrichum fructicola和辽宁刺盘孢C.liaoningense,分离频率依次为31.4%、8.6%、20.0%和40.0%。室内毒力测定结果表明,咪鲜胺、咯菌腈、苯醚甲环唑、氰烯菌酯和百菌清对F.fujikuroi和F.proliferatum的抑制效果较好,EC₅₀为0.104 6～5.178 1μg/mL;咪鲜胺、苯醚甲环唑和咯菌腈对C.fructicola和C.liaoningense的抑制效果较...     

湖北省桑椹腐烂病病原菌鉴定

为明确引起桑椹腐烂病的病原菌种类,2017年从湖北省采集病果,采用常规组织分离法进行分离,用分离纯化的菌株进行菌丝块针刺和孢子液注射接种健康果均可致病,形态学鉴定发现其形态学特征与灰霉菌(Botrytis cinerea)一致。在GenBank进行Blast比对,该菌株的rDNA-ITS序列与Botrytis cinerea和Botrytis fabae相似率最高为99%,用区分Botrytis cinerea和Botrytis fabae的特异性引物进行检测,同时构建分子系统进化树进行分子生物学鉴定,进一步表明该菌为Botrytis cinerea。致病性测定、形态学及分子生物学鉴定结果表明,引起湖北省桑椹腐烂病的病原菌为Botrytis cinerea。     

新疆地区梨树与白杨树腐烂病病菌的交叉侵染

在新疆库尔勒地区,梨树腐烂病严重发生的梨园周围往往伴随有严重的白杨树腐烂病发生,推测这2种树木上的腐烂病病菌可能存在交叉侵染现象。为验证这一假设,从梨树样品上分离得到8株梨树腐烂病病菌(Valsa mali var. pyri),从白杨树样品上分离到11株白杨树腐烂病病菌(Valsa sordida)及9株柳树腐烂病病菌(Cytospora translucens)。将3种病原菌进行交叉接种,发现梨树腐烂病病菌对白杨树枝条的侵染成功率仅为8.9%,而白杨树及柳树腐烂病病菌对梨树枝条的侵染成功率分别为45.8%、63.0%。将3种病原菌分别接种到梨树的叶片和果实上,发现菌株的致病力表现为梨树腐烂病病菌柳树腐烂病病菌白杨树腐烂病病菌。将白杨树和柳树腐烂病病菌在梨树果实上继代接种3代后,2种病原菌的致病力均有所上升。因此,白杨树腐烂病病原菌对梨树具有较强的交叉侵染能力。     

哈密瓜生长期果实腐烂病病原菌的分离、回接与鉴定

进行了哈密瓜生长期果实腐烂病病原菌的分离与纯化以及病原菌的回接试验、哈密瓜苗期接种、哈密瓜接种试验.结果表明,筛选出的 7个菌株均可侵染哈密瓜幼苗和哈密瓜,回接后分离获得菌的培养形状与初次分离菌相同.通过病原菌细菌形态特征观察、致病性测定以及生理生化测定,确定哈密瓜生长期果实腐烂病病原菌种为:丁香假单孢菌黄瓜致病变种(Pseudomanas syringae pv.lachrymans),燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli Willems et al.),在KB培养基上培养不产生荧光,革兰氏染色为阴性,鞭毛极生3～4根.     

苹果果实褐腐病病原菌分离鉴定

为明确甘肃省静宁县苹果果实褐腐病病原菌种类,对采自该地区苹果果实褐腐病病原菌种类进行鉴定。通过组织分离法将菌株分离纯化后,采用柯赫氏法则进行致病性验证,结合形态学特征和内转录间隔区基因(Internal Transcribed Spacer,ITS)、β-微管蛋白基因(β-Tubulin, TUB2)和Laccase( Lcc2)多基因的系统发育分析以及常规PCR测定对分离菌株进行鉴定。结果表明,分离菌株为云南链核盘菌(Monilia yunnanensis),可同时侵染不同品种果实,致病性结果显示对‘秦冠’‘富士’‘新红星’有致病性,而对‘嘎啦’致病性较弱。     

冷藏蓝莓致腐霉菌的鉴定及其对果实软化的影响

以辽宁地区主栽的"蓝丰"蓝莓为研究对象,从已经软化霉腐的蓝莓果实表面分离纯化致腐菌株,通过形态学鉴定明确菌株种类,并采用人工回接方法,探讨其对果实软化的影响。试验分离纯化到了17株霉菌,通过形态学鉴定,确定它们为层出镰孢菌(Fusarium prolifertum)、总状毛霉菌(Mucor racemosus)、圆弧青霉(Penicillum cyclopium)、扩展青霉(Penicillium expansum)、黄曲霉菌(Aspergillus flavus)和赭曲霉菌(Aspergillus ochraceus)。人工接种鉴定表明,圆弧青霉(Penicillum cyclopium)、层出镰刀孢霉(Fusarium prolifertum)、黄曲霉(Aspergillus flavus)和赭曲霉(Aspergillus ochraceus)是导致冷藏蓝莓果实软化的主要侵染霉菌。