鲢鱼蛋白质酶水解最佳工艺条件的研究

以酸法提取的鲢鱼蛋白为原料,采用复合蛋白酶进行酶解,研究了底物浓度、酶解时间、酶解温度及反应pH对蛋白酶水解鲢鱼蛋白的影响,通过正交试验确定最佳酶解条件优化水解工艺。结果表明:复合蛋白酶水解鲢鱼蛋白的最适条件为:底物浓度2%,温度55℃,pH值7.5,酶解时间55 min,优化后的水解液蛋白质回收率约为50.88%。     

具有抗氧化活性的猪血浆蛋白酶解产物的制备及理化特性

为系统考察酶解时间、酶种类和酶加入的顺序对猪血浆蛋白酶解产物抗氧化性的影响,采用风味蛋白酶、碱性蛋白酶及双酶(风味蛋白酶,碱性蛋白酶不同的加入顺序)在各自最适条件下对猪血浆蛋白进行酶解,并研究酶解产物的功能特性。结果表明:0~120min内,随着酶解时间的延长,水解度升高,各酶解产物的抗氧化性均有所增强;60~180min内,双酶酶解产物的清除DPPH自由基的能力、亚铁离子螯合能力和还原力显著高于单酶酶解产物(P0.05);90~150min内,先加碱性蛋白酶后加入风味蛋白酶酶解的酶解产物的水解度、清除DPPH自由基能力和还原力显著高于先加风味蛋白酶酶解后加入碱性蛋白酶酶解的酶解产物(P0.05);具有较高抗氧化性的酶解产物在不同pH条件下均有较好的溶解性和热稳定性;溶解性均在90%以上。     

响应面试验设计优化鲢鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的制备条件

采用酶解法制备抗氧化活性肽,研究了鲢鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽制备的优化条件。以水解度(DH)、DPPH·、超氧阴离子(O-2·)和羟基(·OH)自由基清除率为指标,比较碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶对鲢鱼鳞胶原蛋白的酶解效果及酶解产物的抗氧化活性。结果表明:碱性蛋白酶酶解产物的抗氧化活性最强,对DPPH·、O-2·和·OH自由基的清除率分别为76.9%、43.1%和58.2%;采用响应面试验设计优化碱性蛋白酶制备鲢鱼鳞胶原蛋白抗氧化活性肽的条件,得到最优的制备条件为底物浓度5.47%,酶解时间4.24 h,酶添加量4 200 U/g,在此条件下,所得抗氧化肽对DPPH·、O-2·和·OH的清除率分别为79.6%、46.3%和63.5%。     

2种蛋白酶分步水解鲢鱼肉蛋白工艺及性质研究

以鲢鱼肉为原料,利用酶解位点和反应条件不同的碱性蛋白和风味蛋白酶对其进行水解,检测对水解度影响,用正交试验优化水解工艺。在2种酶的最适水解参数下,采用2种酶相结合的分步酶解方式:鱼肉∶水=1∶4将鱼蛋白打浆,先加入1 800 U/g(protein)的碱性蛋白,于起始p H值8.0、55℃下水解2 h,再加入1 800 U/g(protein)的风味蛋白酶继续水解2 h,其水解度达到35.05%,较碱性蛋白酶或复合蛋白酶单独使用有显著提升。通过本试验,水解度对酶解产物的溶解性、乳化性、起泡性能、泡沫稳定性、粘度等性质都有较大影响。     

蛋白酶底物特异性改变对白鲢鱼肉蛋白酶解效率和产物抗氧化性的影响

通过对比水产品加工蛋白酶及其底物特异性位点突变酶E156S、E156N和E156D对白鲢鱼肉蛋白水解能力及其酶解产物抗氧化性的差异,探讨底物特异性改变对酶的酶解效率和产物活性的影响.结果表明,突变酶E156D的终水解度最高(15.22%),其次为E156S(13.60%),远高于E156N与原酶的9.37%.原酶和突变酶E156S酶解白鲢鱼肉产物的抗氧化性无明显差异,分别为83.79%和84.05%.而突变酶E156N酶解白鲢鱼肉产物的抗氧化性为76.6%;E156D酶解白鲢鱼肉产物的抗氧化性最低(50.05%).说明枯草蛋白酶BPN底物特异性相关的156位点突变对蛋白酶水解鲢鱼蛋白能力和产物活性都具有重要影响.     

青鳞鱼蛋白酶解工艺及产物组分分析

以青鳞鱼鱼肉为原料,用风味蛋白酶对其进行水解处理制取水解蛋白质,通过单因素试验考察了酶解温度、加酶量、酶解时间、底物浓度、pH值等不同因素对青鳞鱼蛋白质水解物中游离氨基态氮含量和水解度的影响。在此基础上,采用Box-Behnken试验设计,优化了青鳞鱼水解蛋白质的制备工艺。结果表明:在水解温度50℃、pH值6.5、底物∶水=1.0∶1.9(质量比)、加酶量2 200 U/g、酶解时间300 min条件下,青鳞鱼蛋白质的水解度为14.82%,与理论预测值之间误差仅为0.29%,游离氨基态氮含量为1.946 mg/ml,表明采用响应面法优化得到的青鳞鱼蛋白质酶解工艺参数准确可靠。酶解产物主要由3～19肽构成,占总酶解产物的71.63%,其中2～4肽占总酶解产物的48.86%。表明青鳞鱼鱼肉经风味蛋白酶水解时主要生成聚合度为2～4的小分子寡肽,风味蛋白酶对青鳞鱼蛋白质具有较强水解作用。     

聚能式逆流脉冲超声预处理对玉米蛋白酶解的影响

为了研究聚能式逆流脉冲超声预处理对玉米蛋白酶解性能的改善,在单因素试验基础上,以水解度和酶解产物血管紧张素转换酶（angiotensin-I converting enzyme,ACE）抑制率为评价指标,进行正交设计优化试验,得到最优的超声预处理条件：超声工作频率40 kHz、液料初始温度30℃、超声处理时间15 min、单 位体积超声功率200 W/L、超声脉冲工作时间6 s和脉冲间歇时间3 s。玉米蛋白经最优超声工作条件预处理,其水解度和酶解产物的ACE抑制率分别达到24.22% 和70.97%,与未经超声预处理的玉米蛋白常规酶解相比较,分别提高了9.39%和11.08%。结果表明：超声预处理玉米蛋白,不仅促进其酶解,而且对其酶解产物 ACE抑制活性同样有显著提高的作用。     

西兰苔籽中硫代葡萄糖苷酶解条件的研究及产物的鉴定

[目的]研究西兰苔籽中硫代葡萄糖苷酶解的影响因素,确定硫苷酶解的最佳条件并分析和鉴定酶解产物。[方法]以西兰苔籽粉末为材料,研究不同的温度、pH以及时间对酶水解的影响,并且利用气相色谱-质谱连用技术分析鉴定了酶解产物。[结果]酶解时间为8h,水解温度为25℃,pH值为7是最佳酶解条件。利用气象色谱-质谱连用技术分析鉴定出5种化合物,占硫苷酶解产物中挥发性化合物总量的80%。[结论]确定了西兰苔籽中硫代葡萄糖苷酶解的最佳条件,并为西兰苔籽的抗癌活性研究提供了一定的理论基础。     

长牡蛎蛋白双酶水解工艺及其产物的抗氧化活性

使用中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解长牡蛎(Crasostrea gigas)蛋白,采用单因素试验分析了水解时间、pH和酶用量比对水解度的影响,并在此基础上设计正交试验优化酶解的工艺条件,并测定了酶解产物的还原能力和对DPPH自由基的清除能力.结果表明,中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解牡蛎蛋白的最佳工艺条件为酶解时间3h、pH 7、U中性蛋白酶∶U 胰蛋白酶=1∶3,此时水解度为27.09％;酶解产物具一定的还原能力并对DPPH自由基有较强的清除作用.     

不同降解工艺对螠蛏肉降解物活性的影响

用正交试验法对螠蛏组织的木瓜蛋白酶酶解工艺进行优选。以酶解液的生物活性为考察指标,研究酶解的温度、时间、pH和酶的用量对酶解产物生物活性的影响。得到用木瓜蛋白酶水解螠蛏组织的最佳条件为:pH 6,酶解温度60℃,酶加入量为底物的0.3%,水解6 h。在此条件下酶解产物的生物活性较高。