水稻转bar基因恢复系选育初报

以恢复系密阳４６为轮回品种,采用回交法转育抗除草剂（ｂａｒ）基因,育成了一批对Ｂａｓｔａ具有稳定抗性的品系。用这些品系与珍汕９７Ｂ杂交,所配杂交组合不仅对Ｂａｓｔａ有稳定抗性,而且表现出农艺性状好,杂种优势明显。     

转bar基因水稻恢复系的生理性状和农艺性状

通过杂交将转bar基因水稻亲本（Gulfmont、Bengal Hu-10和Cypress PB-6）中的bar基因转发转移到恢复系测64、明恢63和特青中，培育出6个抗除草剂（Liberty）的同型恢复系测64－B（G）、测64－B(C)、特青－B（C）、明恢63－B（G）和明恢63－B（C）。抗除草剂同型恢复系的大部分生理性状和主要农艺性状与原恢复系接近。将同型恢复系与不育系杂交，选配出8个抗除草剂三系杂交组合和2个抗除草剂两系杂交组合，抗除草剂组合能保持或略高于原组合的产量水平，利用这项技术有望解决杂交稻制种过程中出现的纯度问题。     

利用共转化和花药培养技术快速获得无选择标记的三价转基因水稻

采用农杆菌介导的水稻转化体系,将包含选择标记潮霉素磷酸转移酶基因（hpt）和目的基因人乳铁蛋白(hLF)、高赖氨酸(SB401)、高甲硫氨酸(RZ10)基因的双T DNA表达载体p13HSR转化水稻。筛选潮霉素磷酸转移酶基因和目的基因都是阳性的转基因植株,按单株进行花药培养,快速得到无选择标记而目的基因阳性的转基因纯合植株,得率为987％。RT PCR检测结果显示外源基因已整合到转基因水稻基因组中并转录。同时观测到三价表达载体在转化过程中部分目的基因丢失。     

大田全生育期盐水灌溉胁迫筛选水稻耐盐恢复系

 2009-2010年在浙江省三门县沿海滩涂采用0.5%盐浓度海水进行全生育期灌溉的方法,以胁迫后植株存活率、单株结实率和单株粒重为指标对明恢86背景的49个回交导入系群体进行全生育期耐盐性评价。结果表明,不同群体的田间耐盐性存在很大差异,粳稻供体导入系群体的田间耐盐性总体好于籼稻供体的导入系群体,而且在同一亚种内不同供体品种的导入系群体的耐盐性差异明显。其中,沈农265、Y134、早籼14和Gayabyeo 为供体的4个导入系群体的耐盐株系的比率较高,分别为10.04%、6.98%、11.83%和7.9%。耐盐重复鉴定表明,大田全生育期耐盐性鉴定结果具有较高的可靠性。在常规栽培条件下对丰产性较好的耐盐恢复系与协青早A测交种进行鉴定,筛选出单株穗数、每穗总粒数和千粒重优势明显,单株产量比生产上对照组合显著增加的杂交组合6个。研究表明,利用大田全生育期盐胁迫筛选耐盐恢复系,不仅可以选育到在常规栽培条件下的高产组合,而且将为高产耐盐杂交新组合的选育创造有利条件。     

水稻除草剂敏感基因导入恢复系的研究

以农林８号ｍ为主体亲本与优良恢复系杂交,成功地将除草剂（苯达松）敏感基因转育到恢复系中,携带该基因的恢复系不但对苯达松敏感（抽穗期用１８００￣２７００ｍｌ／ｈｍ＾２苯达松喷施可使整穗或整株死亡）,而且所配组合具有较强的杂种优势。     

含白叶枯病抗性基因Xa23水稻恢复系的分子标记辅助选育

 通过常规杂交育种技术和分子标记辅助选择技术,对携有白叶枯病抗性基因Xa23的亲本材料CBB23进行回交转育和农艺性状改良。通过分子标记辅助选择检测目的基因,快速获得了12份具有Xa23基因的恢复系稳定材料。采用白叶枯病菌株的专化强毒菌系P6对该12份材料进行室内接种鉴定,筛选出1份高抗白叶枯病的抗性新恢复系材料。应用3个不同的不育系对该恢复系进行测交,结果表明该恢复系具有良好的恢复性及产量潜力。     

分子标记辅助选择创制抗白背飞虱水稻恢复系

 将分子标记辅助选择技术与传统育种的杂交、回交方法及白背飞虱频发区大田自然诱发抗虫鉴定相结合,创制了米质优、配合力好且具有水稻白背飞虱拒食抗性主效QTL位点qSI4 的新恢复系材料3份(R38、R46和R58)。室内抗性鉴定结果表明,新创制的恢复系材料的白背飞虱抗性与抗源春江06的抗性水平相当,具有较强的白背飞虱抗性。这些新恢复系通过与不同遗传背景的不育系进行杂交配组,经过田间测产和室内米质鉴定、评比,筛选出一批集抗性好、米质优、产量高等优良性状于一体的杂交水稻新组合。     

水稻的高光效分子育种

高光效株型和生理育种是水稻分子育种的一大方向.虽然,水稻干物质产量的90%～95%来自光合作用.但其光能利用率却只有1.5%～2.0%.而理论上,水稻理想的光能利用率应达到3.0%～5.0%.因此.通过提高水稻光能利用率来增加产量蕴藏着巨大的潜力,也是最经济有效的途径.本文综述了水稻高光效分子育种的原理和主要途径及水稻高光效遗传育种研究的国内外最新进展.     

利用分子标记辅助选择改良水稻恢复系的稻瘿蚊抗性

以含有华南4种稻瘿蚊生物型显性抗性基因Gm6的籼稻材料KG18为供体,三系优质恢复系广恢998为受体,通过杂交、多次回交和自交结合分子标记辅助选择技术,将Gm6基因导入广恢998中。综合目标基因的分子检测、田间农艺性状表现以及遗传背景的回复率,筛选获得6个株系。采用稻瘿蚊生物型1和生物型4对这些改良株系进行人工接虫鉴定,6个改良株系的标葱率为0,表现免疫,而对照标葱率均在98%以上,表现高感;由改良株系组配的杂种F1标葱率在10%～20%,表现中抗。农艺性状分析表明,除1个株系在千粒重方面与对照广恢998有显著差异外,其余改良株系性状与对照无显著差异。     

转抗虫基因优良灿型恢复系的获得及其外源基因的遗传稳定性研究

用基因枪法将雪花莲外源凝集素基因（gna)转移到优良籼型杂交稻恢复系蜀恢527中，通过PCR、PCR－Southern blotting和Southern blotting等分子方法检测证明，外源基因已稳定遗传到转基因第三代（T2）。转基因第一代植株（T0）在株高和结实率上与相应的组培、种子实生苗植株相比，发生明显的不可遗传的变异。随着繁殖代数的增加，转基因植株恢复到与对照植株一致。还讨论了DNA微量提取法在转基因后代筛选中的运用。     

不同转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻效率的比较

 为研究不同的转化方法培育无抗性选择标记转基因水稻的效果,以4个籼粳稻品种为受体材料,比较了用农杆菌介导的双菌双载体和双T DNA单载体两种共转化技术的共转化频率及随后获得的无抗性选择标记基因转化子的效率。结果表明,在双菌双载体介导的转化中,4个水稻品种的平均共转化频率为10.1%,其中55.6%的共转化植株自交后代中可筛选出无抗性选择标记的转基因水稻植株。在单载体双 T DNA介导的共转化中,平均共转化频率为45.0%,从其中600%的共转化植株自交后代中可获得无抗性选择标记的转基因植株,即双T DNA单载体法的去选择标记的效率（270%）要较双菌双载体法（5.6%）高。     

Efficiencies of Generating Selectable Marker-Free Transgenic Rice with Different Transformation Methods

To study the efficiency of generating selectable marker-free (SMF) transgenic rice, two transformation methods were employed for four rice varieties (Wuxiangjing 9, Longtefu, Xieqingzao and Zhenshan 97). One method is by using a single twin T-DNA binary vector pYH592 in one Agrobacterium strain, which is composed of two separate T-DNA regions (one carrying an antisense Wx gene and the other carrying a HPT gene). The other one, named as two-strain/ two-vector system, is by using two separate binary vectors in two separate Agrobacterium cultures. The results indicated that the average co-transformation frequencies of the antisense Wx gene and the HPT gene were 10.1% and 45.0%, respectively, for the four rice varieties. And the SMF transgenic plants selected from the offsprings of co-transformants were 55.6% and 60.0% in the two-strain/two-vector and twin T-DNA vector binary systems, respectively.     

Breeding Rice Restorer Lines with High Resistance to Bacterial Blight by Using Molecular Marker-Assisted Selection

Rice bacterial blight, one of the major diseases of rice caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae, Xoo, jeopardizes rice diversely. It causes leaf wilting, affects photosynthesis and reduces 1000-grain weight and generally results in yield loss by 20-30 pe…     

利用分子标记辅助育种技术选育高抗白叶枯病恢复系

通过常规回交育种结合分子标记辅助选择技术,已将来自IRBB24的2个抗白叶枯病基因, Xa21和Xa4, 聚合到感病的杂交稻恢复系绵恢７２５中。通过分子标记检测目标基因和亲本遗传背景差异分析快速获得了4个高抗白叶枯病的恢复系姊妹系R207 1、R207 2、R207 3和R207 4。采用与目标抗性基因相应的菲律宾菌系P1、P6 和7个中国病原型代表菌系（CⅠ~CⅦ）对4个姊妹系及其杂交组合进行田间接种。结果表明,这些姊妹系及所配制的杂交组合抗病性强、抗谱广,其中杂交组合G46A/R207 2具有良好的产量潜力,将R207 2定名为蜀恢207。     

pCAAFP66表达载体的构建及其大豆遗传转化的研究

以pCAMBIA3301为载体骨架,afp为目的基因,构建了大小为9868 bp的大豆表达载体pCAAFP66,该载体带有抗冷冻蛋白基因afp和筛选标记基因bar.以大豆品种华春3号和华春6号的胚尖和子叶节为外植体,应用农杆菌介导法进行遗传转化,以草甘膦(PPT)为筛选底物.结果表明:在胚尖转化体系中,华春3号和华春6...     

利用遗传同质的近等基因对研究水稻抗稻瘟病基因的产物

 应用经典遗传学方法构建了多个只有抗感基因之差，其他遗传背景相似的抗稻瘟病近等基因对， 它们的形态性状比较和过氧化物酶同工酶、过氧化物酶等电聚焦电泳带模式以及蛋白质双向电泳的图谱模式都说明每一组近等基因对有很高的同质程度，近等基因对不接种病原菌的双向电泳图谱中，pI 7.5～8.5， 分子量30～45 kDa区域的蛋白质亚基和稻瘟病的发生发展关系甚密，称该区为稻瘟病有关的蛋白质特异区，接种病原菌5 d后，近等基因对的双向电泳图谱中，蛋白质亚基变化同样发生在该特异区内。     

转反义vp1基因水稻再生苗的获得及分子鉴定

应用超级双元载体和农杆菌介导转基因技术,试图将反义vp1基因引入到容易穗萌的保持系冈46B和容易诱导愈伤组织的籼稻品种R893与容易转化的粳稻品种粳16中,结果冈46B获得再生苗41株,R893获得再生苗43株,粳16获得再生苗26株.经PCR检测,仅粳16中有2株携带潮霉素抗性基因,其中1株携带反义vp1基因;冈46B和R893中未能获得转基因再生苗.     

高抗稻瘟病三系杂交稻恢复系泸恢37的选育及应用

泸恢37是四川省农业科学院水稻高粱研究所利用蜀恢527/多恢57的杂交后代F7优良株系与四川省农科院植保所提供的抗稻瘟病种质资源04R-1051杂交育成的籼型恢复系。泸恢37含有Pikm和Pik-1基因,具有高抗稻瘟病、恢复力和配合力强、制种产量高的特点。泸恢37于2012年8月通过四川省农作物品种审定委员会组织的专家技术鉴定。利用该恢复系配制的组合产量高、抗性强、适应性广,其中,川香优37于2013年通过四川省农作物品种审定委员会审定。