贵州省烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗药性

为了明确贵州地区烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗药性水平, 从贵州省12个市、县采集黑胫病病株, 经分离纯化鉴定, 获得98株黑胫病菌株, 采用生长速率法测定其对甲霜灵的敏感性。结果表明, 采自不同地区的菌株对甲霜灵的敏感性差异较大, 各供试菌株的EC50 值分布范围为0.419 2～20.486 1 μg/mL; 各地区平均EC50 在0.551 9～10.986 0 μg/mL之间; 最低抗药性水平为1.00, 最高抗药性水平为48.87, 相差48.87倍, 各地区平均抗药性水平在1.32～26.21之间。遵义、兴仁、贵定、赫章和兴义有抗甲霜灵菌株出现, 除遵义部分菌株的抗性水平表现为高抗外, 其余菌株对甲霜灵产生的抗性均处于中抗水平。     

烟草黑胫病菌培养特性的研究

研究了云南烟草黑胫病菌在不同培养基、不同温度的生长情况及不同菌龄与不同诱导时间孢子囊的产生数量。结果表明,菌株在8种供试培养基中,以燕麦培养基和选择性培养基上菌落生长最好,其次为胡萝卜培养基,在番茄汁和马铃薯培养基上生长最差。同一菌株在不同培养基上产孢量不同、产生的孢子囊大小亦有所不同。05P226菌株在玉米培养基上产孢量最高;05P55菌株在燕麦培养基上产孢量最高,在番茄汁培养基上产生的孢子囊最大,而05P62菌株在燕麦培养基上产孢量最高,在烟叶汁培养基上产生的孢子囊最大。在30℃菌丝生长速率最高,其次为28℃,以35℃生长最差。供试3个菌株间生长差异显著,以05P226生长最好,05P55菌株次之,05P62生长最差。05P226、05P55菌株皆以培养14d、诱导72h产孢量最高,最适宜试验中产孢培养。     

贵州省烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性

为了明确烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性现状,从贵州省各地采集了47株烟草黑胫病菌株,分别测定了菌丝生长和游动孢子囊形成对烯酰吗啉的敏感性.结果表明,烯酰吗啉对烟草黑胫病菌菌丝生长和孢子囊形成的抑制基本一致,对菌丝EC50范围为0.792 6～4.232 7μg/mL,平均为2.476 8μg/mL;对孢子囊的抑制作用略强,EC50范围为0.394 5～4.625 3μg/mL,平均值为2.040 0 μg/mL.统计分析表明,烟草黑胫病菌47个菌株菌丝生长和孢子萌发对烯酰吗啉的敏感性符合正态分布,不同菌株对烯酰吗啉的敏感性有显著差异,而且菌株对烯酰吗啉的敏感性与其地理来源有一定的相关性.     

烯酰吗啉对我国烟草黑胫病菌的毒力研究

从山东和云南烟区采集分离了20个烟草黑胫病菌Phytophthora parasitica var. nicotianae菌株,采用菌丝生长速率法测定了烯酰吗啉对这些菌株的毒力。结果表明:20个田间菌 株的EC50值在0.60~1.28 μg/mL之间,与实验室保存的敏感菌株(S)的EC50 值(0.32 μg/mL) 相比,毒力倍数在1.87~4.00之间,均属于敏感菌株。烯酰吗啉对烟草黑胫病菌孢子囊的产生有明显的抑制作用,8.00 μg/mL的烯酰吗啉对孢子囊产生的抑制率为100％。通过烯酰吗啉对烟草黑胫病菌继代培养物的毒力比较证明,烟草黑胫病菌对烯酰吗啉存在抗性风险。     

抗菌肽和几丁质酶基因提高烟草对黑胫病菌和赤星病菌的抗性研究

 通过农杆菌介导法将加信号肽修饰的人工合成杂合抗菌肽CEMA基因(SPCEMA),苜蓿防御素基因(AFP),苦瓜几丁质酶基因(CHI)以及SPCEMA-CHI、AFP-CHI、AFP-SPCEMA双价基因导入本明烟(Nicotiana benthamiana),并对转基因烟草T₀和T₁代进行了抗病性检测,比较了不同转基因植株的抗病效果。研究结果表明,转基因烟草对黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)、赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性均强于非转基因烟草,病情指数差异达极显著水平,其中转AFP-CHI双价基因烟草具有较强的抗性,与单价转基因烟草的抗性差异达显著水平。但各单价转基因以及双价转基因烟草之间对上述病菌并未表现出显著的抗病性差异。结果表明植物源的抗菌肽基因与几丁质酶基因在抗植物真菌病害中具有协同增效作用。     

烟草黑胫病菌对农田草本植物的寄主范围

烟草黑胫病是烟草生产中的重要病害,对烟草的产量和质量均影响极大[1-2]。烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae var.nicotianae（Breda deHaan）Tucker是引起烟草黑胫病的唯一病原菌,以往的研究均认为,     

甲霜灵对烟草黑胫病菌细胞膜透性的影响

为阐明烟草黑胫病菌抗甲霜灵的生理机制,研究了不同浓度甲霜灵处理540 min内敏感、低抗和高抗菌株相对渗率的变化情况,结果表明:甲霜灵能损害烟草黑胫病菌的细胞膜,使膜透性不断增大;其对敏感菌株ZC002和低抗菌株10M-006细胞膜透性的影响速度和程度比较接近,都随处理浓度(0.1~100.0 μg/mL)的提高而不断增加;对高抗菌株10M-004细胞膜透性的影响速度最慢,程度最低,且随处理浓度(50.0~100.0 μg/mL)的提高而增加。高抗菌株适应甲霜灵的能力明显强于敏感菌株和低抗菌株,该适应能力随甲霜灵浓度的提高而减弱。     

利用等电聚焦电泳研究黑颖病菌、白叶枯病菌的致病性分化

 细菌性黑颖病是一种世界性病害,孙福在等经过生物学测定后,将所测黑颖病菌划分成了个致病型和一个未定类群。     

烟草黑胫病菌对两种保护性杀菌剂的敏感性测定

采用菌落生长速率法测定了2005年从云南、贵州、山东烟区病株上分离到的38个烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae Breda de haan var.nicotianae Waterhouse 菌株对两种保护性杀菌剂的敏感性。结果表明:百菌清(B)对各参试菌株的EC50值在2.33~49.47 μg/mL之间,平均值为9.35(±2.77) μg/mL;代森锰锌(Z)对各参试菌株的EC50值在3.51~82.05 μg/mL之间,平均值为10.59(±4.06) μg/mL。B及Z对除XR001外的37个菌株的EC50值分别呈连续的双峰(主峰明显)和单峰频次分布;B对构成敏感性正态频次分布主峰的30个菌株的EC50均值5.99(±0.78) μg/mL 和Z对组成连续敏感性正态频次分布的37个菌株的EC50均值8.66(±1.09) μg/mL 可分别作为烟草黑胫病菌对B及Z的敏感性基线。     

贵州省烟草黑胫病菌遗传多样性分析

运用RAPD分子标记技术分析了采自贵州各个地区的38个烟草黑胫病菌株的遗传多样性,探索了贵州省主要烟草种植区间的烟草黑胫病病菌的遗传分化关系.结果表明,受试38个菌株共产生65条谱带.其中多态性为59条,占90.7％.说明贵州省主要烟草种植区的烟草黑胫病病菌具有丰富的遗传多样性,不同地点烟草黑胫病病菌的遗传结构之间都有一定的差异.根据引物扩增的指纹图谱,运用UPGMA分析法,以遗传相似系数0.74,将供试38个菌株划分为9个基因型,发现除少数地区的菌株被划分为同一基因型外,其他不同地理区域的菌株基因型的划分与地理来源没有直接的相关性.     

烟草根黑腐病菌致病力分化及品种抗性差异研究

 烟草根黑腐病由根串珠霉（Thielaviopsis basicola (Berk.et Br.)Ferr.）引起,主要为害烟株的根部,可使根部组织呈特异性黑色坏死而导致烟苗死亡或地上部分生长不良。该病是世界性的烟草病害,在各产烟国家如美国、日本、加拿大等国普遍发生,在我国主要分布于河南、山东、安徽、云南等地     

温度对烟草黑胫病菌致病力及代谢表型的影响

为揭示温度对烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae致病力及代谢表型的影响,采用菌丝生长速率法和离体叶片法分别测定不同温度下烟草黑胫病菌的生长速率和致病力,同时采用Biolog代谢表型技术测定其在20、27、30和35℃下的渗透压和pH代谢表型。结果表明,烟草黑胫病菌在21~35℃范围内生长良好且具致病力,30℃时生长速率最快,为17.72 mm/d,30℃和35℃时致病力较强,叶片接种烟草黑胫病菌后24 h内便出现病斑,随温度升高病害的潜伏期缩短。温度影响烟草黑胫病菌的渗透压和pH适应性;27℃和30℃时烟草黑胫病菌的渗透压适应范围最广,其次为21℃,35℃时烟草黑胫病菌渗透压适应范围最窄;在20、27和30℃时,烟草黑胫病菌在pH 5.0~10.0范围内可正常代谢,在35℃时pH代谢范围为5.5~10.0。     

辣椒疫霉（Phytophthora capsici）对辣椒的致病力分化研究

 辣椒疫霉（Phytophthora capsici Leonian）是具有重大危害性的病原卵菌,其寄主范围较广,可引致辣椒、番茄、茄子、黄瓜、南瓜等多种重要蔬菜作物的疫病。由辣椒疫霉引起的辣椒疫病是一种毁灭性病害,在世界各地的辣椒种植区普遍发生,我国尤以江苏、浙江、安徽、上海等长江中下游地区发生严重。迄今国内关于辣椒疫霉致病力分化的研究较少,且存在分歧。有报道指出辣椒疫霉菌株对辣椒的致病力差异与菌株地区来源直接相关［1］;也有研究认为辣椒疫霉菌株对辣椒的致病力与地理来源不直接相关［2］。此外,辣椒疫霉菌株致病力分化和菌丝生长速率是否相关尚属未知。本文对采自安徽合肥、淮南、和县、潜山、岳西、江苏南京和四川邛崃7个县市的23个辣椒疫霉菌株对辣椒的致病力和菌丝生长速率进行了测定,旨在明确辣椒疫霉菌株对辣椒的致病力是否存在分化现象及致病力与菌株地区来源及菌丝生长速率之间的关系,为辣椒疫霉所致辣椒疫病的抗病育种和综合治理提供依据。     

棉田土壤中棉花黄萎病菌的致病力分化

为了明确同一棉田生态系中棉花黄萎病菌的群体组成和致病力分化特点,利用病害反应型及病情指数测定法,对来自同一棉田的43个棉花黄萎病分离菌株在5个鉴别寄主上进行了致病力测定。结果表明,43个菌株可划分为落叶型致病力强的Ⅰ型、混合型致病力中等的Ⅱ型和非落叶型致病力弱的Ⅲ型。其中Ⅰ型菌株19个,占44.2%,平均病情指数大于50;Ⅱ型菌株16个,占37.2%,平均病情指数在30～50之间;Ⅲ型菌株8个,占18.6%,平均病情指数小于30。由此证明,同一棉田棉花黄萎病存在落叶型和非落叶型两类病害表现类型,其病原菌存在强、中、弱三种不同致病类型的生理型,揭示出棉花黄萎病菌本身是一个易变异的混合基因型群体,群体中的不同个体组成的亚群体具有不同的致病性。     

烟草黑胫病拮抗根际芽胞杆菌FB-16的筛选鉴定及其抑菌活性

为获得对烟草黑胫病有较强生防效果的拮抗细菌,从健康烟草根际采集30份土壤样品,分离纯化得到347株细菌,经病原真菌定向筛选后得到1株对烟草黑胫病菌等病原真菌拮抗活性较好的细菌FB-16,其对烟草黑胫病菌的抑菌带宽为23mm。采用菌丝生长速率法、作用机制试验、温室防病试验测定FB-16的抑菌作用,并通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定。结果显示,菌株FB-16发酵液对烟草黑胫病菌菌丝生长抑制率为95.96%;其代谢产物对烟草黑胫病菌菌丝有致畸作用;菌株FB-16为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliauefaciens(Gen-Bank登录号为JN245982);饱和度25%硫酸铵获得的抑菌物质对烟草黑胫病菌的抑菌活性较高,抑菌圈直径达42.00 mm;FB-16活性产物处理的烟草植株在接种烟草黑胫病菌7天后的防治效果为69.96%。表明菌株FB-16在烟草黑胫病生物防治中具有潜在的利用价值。     

Age-related resistance to Pseudomonas syringae pv. tomato is associated with the transition to flowering in Arabidopsis and is effective against Peronospora parasitica

As plants mature it has been observed that some become more resistant to normally virulent pathogens. The ability to manifest the Age-Related Resistance (ARR) response in Arabidopsis to Pseudomonas syringae pathovars tomato (Pst) coincided with the transition to flowering in plants both delayed and accelerated in the transition to flowering. ARR was also associated with a change in PR-1 gene expression, such that young plants expressed PR-1 abundantly at 3 days post inoculation (dpi) while mature plants expressed much less. The Arabidopsis ARR response requires SA accumulation via isochorismate synthase (ICS1) [24]. ICS1 was expressed one dpi with virulent and avirulent Pst in both young and mature plants. The ARR response was also effective versus avirulent Pst providing an additional 4-fold limitation in bacterial growth. Arabidopsis ARR was found to be ineffective against two necrotrophs, Erwinia carotovora subspecies carotovora (bacterium) and Botrytis cinerea (fungus) and one obligate biotroph, Erysiphe cichoracearum (fungus). However, mature wild type, SA-deficient sid2 and NahG plants supported little growth of the obligate biotrophic oomycete, Peronospora parasitica. Therefore ARR to P. parasitica appears to be SA-independent, however the level of ARR resistance was somewhat reduced in these mutants in some experiments. Thus, there may be numerous defence pathways that contribute to adult plant resistance in Arabidopsis.     

Pathogenicity and RAPD analysis of Phytophthora nicotianae pathogenic to pepper in Tunisia

Nine isolates of Phtophthora nicotianae were isolated from infected pepper plants. Their pathogenicity was studied in Capsicum annuum in comparison with P. nicotianae isolates from tomato and tobacco. The pathogenicity test showed that pepper isolates of P. nicotianae are adapted to their host. Banding patterns obtained by RAPD analysis with six oligonucleotide primers revealed polymorphism that grouped the isolates independently of the plant host. The polygenic dendrogram showed that pepper isolates were more similar to tomato isolates than to tobacco isolates. The RAPD bands of 1300 and 1500 bp, detected with primers OPD-01 and OPD-10, respectively, appeared specific to the most pathogenic pepper isolates. The OPK-08-1950 seems specific to the isolates of P. nicotianae from tomato. These results suggest that host specified might occur in P. nicotianae and that may be due to interspecific hybridization events resulting in novel pathogenic behavior.     

水杨酸和乙烯在烟草抗黑胫病中的作用

5mmol/L水杨酸或1g/L乙烯外源处理可诱导烟草对黑胫病的抗性，推迟植株死亡。不能积累水杨酸的转nahG基因植株和不表现乙烯应答反应的转etr1-1基因植株对黑胫病的抗性显著弱于野生型植株。组成性积累高水平水杨酸的转entC和pmsB基因植株对黑胫病的抗性明显强于野生型植株。这些结果说明水杨酸和乙烯增强烟草对黑胫病的抗性，减缓黑胫病的扩展。0．5mmol/L KCN连续浇灌植株4天或浸溃叶片2，4h均不能恢复转nahG基因植株丧失的对黑胫病的抗病性。此结果进一步支持关于KCN处理不能恢复转nahG基因植株丧失的对真菌病害抗病性的假说。