猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗研究进展

猪传染性胸膜肺炎(PCP)是猪的一种严重的呼吸系统疾病。目前,对该病的预防主要使用几个致病血清型的胸膜肺炎放线杆菌(App)全菌体灭活苗,交叉保护力差。亚单位疫苗采用多个血清型共有的免疫保护性抗原外毒素(Apx)及外膜蛋白,具有很强的交叉免疫保护效果,使用前不必检测病原血清型,全世界通用,大大降低免疫副反应,应用空间广阔。论文阐述了猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研究进展,为猪传染性胸膜肺炎的预防和控制提供参考。     

猪传染性胸膜肺炎重组亚单位疫苗诱导小鼠免疫保护效果的观察

重组表达猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子基因:apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣ、apfa和omp,以重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP组合免疫小鼠作为试验I组,重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢr、OMPr、ApxⅣ和rApfa组合免疫小鼠作为试验Ⅱ组,PBS为对照组,分3次免疫小鼠,采用背部皮下多点注射,每次间隔2周,免疫剂量为0.2 mL/只,3免后1周分别以APP1型菌Shope 4074株(5×109cfu)和APP2型菌S1536株(5×1010cfu)进行攻毒试验。通过小鼠保护率与抗体效价的相关性研究、肺部病理变化及肺脏细菌的分布情况等指标进行综合评价。结果显示,试验Ⅰ组4种重组蛋白特异性抗体水平显著高于其他两组(P<0.05),对APP1型菌攻毒的保护率(9/10)明显高于试验Ⅱ组(5/10)和对照组(0/8),小鼠的免疫保护率与抗体效价之间存在显著正相关;且该组对APP2型菌攻毒的保护作用(无肺脏损伤)也明显优于其它两组(典型肺部损伤)。间接免疫荧光试验表明试验Ⅰ组对肺脏细菌的清除效果也明显优于其他两组。本试验揭示试验Ⅰ组对不同血清型APP攻击能够提供很好的交叉保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。     

增强猪传染性胸膜肺炎灭活苗对小鼠保护力的研究

为了提高猪传染性胸膜肺炎灭活苗的保护力,本研究利用基因重组技术表达了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要致病因子蛋白:rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ、rApxⅣ、rApfa和rOMP。设立试验Ⅰ组(灭活苗),试验Ⅱ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP),试验Ⅲ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rApxⅣ),试验Ⅳ组(灭活苗、rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rApfa)和空白对照组(PBS),每组26只BALB/c小鼠,分3次免疫,每次间隔2周,每周检测血清抗体水平,在免疫后第2周、第4周和第5周,MTT法检测脾脏T细胞增殖水平及ELISA法测定IFN-γ分泌水平。在第3次免疫后的第7 d,将每组剩余20只小鼠平均分成2组,分别以APP1型菌(5×10~9 CFU)和APP7型菌(1×10~(11) CFU)进行攻毒保护试验。结果表明,向灭活苗中添加重组亚单位成份可以提高机体的细胞免疫和体液免疫水平,并能提高灭活苗的交叉保护率;试验Ⅱ组的ApxⅠ和OMP抗体水平以及细胞免疫水平均显著高于其它各组(p<0.05),对于APP1和APP7型菌的攻毒也提供了明显优于其它各组的保护结果,试验Ⅲ、Ⅳ组的细胞、体液免疫水平及保护率较试验Ⅰ组也有所提高。结果显示出ApxⅠ、OMP抗体水平和细胞免疫水平与攻毒保护率之间存在着正相关性,向灭活苗中加入重组蛋白成份可以提高疫苗的交叉保护,试验Ⅱ组通过激活体液免疫和细胞免疫,对两个血清型APP的攻击提供了很好的保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。     

猪传染性胸膜肺炎的研究进展

猪传染性胸膜肺炎（porcine infectious pleuropneumonia）是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）引起的猪的一种高度致死性呼吸道传染病，世界各国均有发生，尤以欧、美洲各国流行严重。本病主要引起猪发生伴有胸膜炎的出血性、坏死性肺炎，多呈最急性或急性病程而迅速致死。该病可发生于任何年龄的猪只，尤其在集约化养猪场，一旦发生会造成重大的经济损失。近年来，世界各地均加强了对该病的研究，在病原学、诊断和免疫预防等方面均取得了较大的进展。     

猪传染性胸膜肺炎研究进展

猪传染性胸膜肺炎 ,又称猪胸膜肺炎放线杆菌感染 (Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ,ＡＰＰ) ,或猪胸膜肺炎嗜血杆菌感染 (Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｐｈｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ,ＨＰＰ) ,是猪的一种常见呼吸道传染病 ,其临诊表现与猪体免疫状态、环境应激及病原的毒力等因素密切相关 ( 1 )。不同龄期的猪都有易感性 ,尤以 4～5月龄猪的发病死亡较多 ,而最急性和急性病例则最多见于 2～ 5月龄育肥仔猪 ,且死亡率较高 ( 4 )。病原体亦可存在于无临床症状的猪群中 ( 1 ,1…     

猪传染性胸膜肺炎病的防治研究进展

猪传染性胸膜肺炎病是由胸膜肺炎放线杆菌引起的以出血性纤维素性胸膜肺炎为病理特征的一种严重呼吸道传染病。本病对养猪业危害较大,特别对规模化高密度的养猪场危害严重。为了加强对该病的防治,笔者参照有关文献及结合对本病的诊防实践,将本病的防治研究进展做以下综述。１　病原学１．１　病原命名猪胸膜肺炎放线杆菌最初叫副溶血嗜血杆菌,后因与感染人的副嗜血杆菌形态特征和生化特征不同,故将猪株命名为胸膜肺炎嗜血杆菌。最近,通过辅酶Ｉ（ＮＡＤ）同源学研究,与列里尔氏放线杆菌关系密切,则划入放线杆菌属中,称为胸膜肺炎放…     

猪传染性胸膜肺炎疫苗的研究进展

综述了近年来国内外在猪传染性胸膜肺炎的灭活疫苗、亚单位疫苗和基因工程疫苗(重组亚单位疫苗、重组核酸疫苗、活载体疫苗、基因缺失疫苗等)方面取得的研究进展,论述了不同疫苗的优缺点,旨在为猪传染性胸膜肺炎的防控和疫苗的研制提供思路。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

从柳州某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎病猪中分离到致病菌.通过对分离菌株的理化特性测定,鉴定为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,并用分离菌株制备了灭活疫苗,有效控制了菌株分离场的猪传染性胸膜肺炎病。     

猪传染性胸膜肺炎的防控进展

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的猪的一种严重的呼吸道传染病,导致养猪业严重的经济损失,该病在世界各地广泛分布,在我国的流行日益严重。该病主要经呼吸道传播发病,猪和带菌猪是主要传染源;病猪临床表现以呼吸道症状为主,分为急性型、亚急性型和慢性型3种;急性和亚急性病例以纤维素性出血性胸膜肺炎为特点,慢性病例以纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征和隐性感染。随着养猪业的规模化发展,该病造成的危害日益严重,因此如何有效防控该病的发生,以此减少经济损失非常重要。本文就近年来猪传染性胸膜肺炎的防控进展进行综述,为提高猪传染性胸膜肺炎的防控效果、减少经济损失提供理论参考。     

一种A型魏氏梭状芽孢杆菌氢氧化铝灭活疫苗及其控制猪“猝死症”的效果

Ａ型魏氏梭状芽孢杆菌ＸＰ５株分离自典型猝死症病猪，将其制成氢氧化铝灭活疫苗。疫苗０．６ｍｌ、２ｍｌ和４ｍｌ的剂量可以分别保护小鼠、兔和猪抵抗标准Ａ型魏氏梭状芽孢杆菌毒素１ＭＬＤ的攻击。在两个疫病流行区应用了疫苗，１２１５头接种疫苗猪中死于猝死症的有１２头，死亡率０．９９％，８１５２头未接种疫苗的对照猪中，死于猝死症的有２８４头，死亡率３．４８％，二者显著差异（Ｘ２＝１２．２３，Ｐ＜０．０１）。     

不同给药途径的姬松茸多糖对鼠急性肝损伤的保护效应及其抗氧化作用的研究

分别通过灌胃、皮下注射的方法,给予小鼠姬松茸多糖灭菌溶液,连续7d。然后经四氯化碳染毒12h后,采血并制备肝组织匀浆液进行GPT、GOT活性及SOD、MDA含量的检测。结果表明:用姬松茸多糖灌胃比皮下注射能更快、更有效的保护肝损伤;而SOD活性及MDA含量未见有统计学差异。     

Generation of transgenic corn-derived Actinobacillus pleuropneumoniae ApxIIA fused with the cholera toxin B subunit as a vaccine candidate

Corn, one of the most important forage crops worldwide, has proven to be a useful expression vehicle due to the availability of established transformation procedures for this well-studied plant. The exotoxin Apx, a major virulence factor, is recognized as a common antigen of Actinobacillus (A.) pleuropneumoniae, the causative agent of porcine pleuropneumonia. In this study, a cholera toxin B (CTB)-ApxIIA#5 fusion protein and full-size ApxIIA expressed in corn seed, as a subunit vaccine candidate, were observed to induce Apx-specific immune responses in mice. These results suggest that transgenic corn-derived ApxIIA and CTB-ApxIIA#5 proteins are potential vaccine candidates against A. pleuropneumoniae infection.     

H1亚型流感病毒通用疫苗的构建及其对小鼠免疫保护效力研究

本研究旨在为研制一种安全、有效并具有广泛保护作用的流感病毒通用疫苗进行初步的探索。从Gen-Bank上获得所有H1亚型经典猪源流感病毒和甲型流感病毒的HA基因序列,通过系统进化分析获得其共有序列,并对共有序列进行密码子优化(Optimized consensus,opti-CS),同时将H1亚型的A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)和重组甲型流感病毒rPan09(H1N1,其HA和NA来自A/Swine/California/04/09,其余6个片段来自PR8的重组病毒)的HA基因分别进行密码子优化(opti-G11,opti-r09),并将这3种片段与真核表达载体pCAGGS连接获得重组质粒pCA-opti-CS、pCA-opti-G11和pCA-opti-r09。将重组质粒瞬时转染293T细胞,检测HA基因在哺乳动物细胞中的表达情况。免疫6～8周雌性BALB/c小鼠,免疫3次,每次间隔3周,同时设立空载体pCAGGS对照。三免2周后从每个质粒免疫组中选取一半小鼠每只以50μL 103.87 EID50的剂量接种A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)病毒,另一半小鼠每只以50μL 107.45 EID50的剂量接种rPan09病毒。采集血清,对HA抗体水平、HI滴度、细胞因子产生情况、肺组织病毒含量进行检测,并对肺组织病理学变化进行观察。结果显示:重组质粒中HA基因均能够在哺乳动物细胞中有效的表达。pCA-opti-CS免疫后能够诱导小鼠产生较高的HA抗体水平,较高的HI滴度,并且能够诱导机体产生较高水平的IL-4和IFN-γ。肺组织病毒含量测定以及组织病理学观察结果显示:HA共有序列密码子优化的DNA疫苗pCA-opti-CS免疫后能够有效限制病毒A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)和rPan09HA在肺脏中的复制,减轻肺脏病理变化。结果提示:HA共有序列密码子优化的DNA疫苗pCA-opti-CS能够诱导小鼠产生较高水平的体液免疫和细胞免疫应答,并具有较好的交叉保护效力,能够保护小鼠抵抗异源流感病毒的攻击。本研究为流感通用疫苗的研究提供了有益的参考。     

马链球菌马亚种3种抗原蛋白对小鼠免疫的免疫原性分析

旨在对比研究马链球菌马亚种(Streptococcus equisubsp.equi,S.equi)3种不同抗原蛋白——分选酶A(sortase A,SrtA)、M蛋白(SeM)及IgG结合蛋白(EAG)的免疫原性及免疫保护效果,本研究以表达并纯化的Sr-tA、SeM及EAG 3种蛋白单独及联合免疫小鼠,免疫后检测了血...     

氟罗沙星对禽败血霉形体（Mycoplasma gallisepticum）病的药效研究

体外抑菌试验测得氟罗沙星（Ｆｌｅｒｏｘａｃｉｎ）对禽败血霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ）的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）为０．０１５ｍｇ／Ｌ。体内药效试验表明,氟罗沙星以２５、５０、１００ｍｇ／Ｌ饮水给药和以５、１０、１５ｍｇ／ｋｇ肌注给药（１次／ｄ）,连续用药５ｄ,对人工气囊接种禽败血霉形体培养液（０．２ｍＬ,约含１０８ｃｆｕ）的雏鸡,保护率均为１００％（３０／３０）,而感染不给药组雏鸡存活率为９３．３％（２８／３０）;相对增重率分别为９０．８％、９１．５％、９２．３％和９１．５％、９１．８％、９２．９％,显著高于感染不给药组（７３．２％）;气囊损伤分分别为２．９３、２．６２、０．９３和１．８、１．１、１．０,而感染不给药组为６．５７,差异显著（Ｐ＜０．０５）;血清玻板凝集试验阳性率分别为２０％（２／１０）、１０％（１／１０）、０（０／１０）和３０％（３／１０）、１０％（１／１０）、１０％（１／１０）,均极显著低于感染不给药组１００％（１０／１０）（Ｐ＜０．０１）。氟罗沙星不同给药途径及不同剂量间药效差异不显著。     

救鸡宝中药复方颗粒剂对大肠杆菌的体内外抑菌效果观察

体外抑茵实验证明救鸡宝液对O78血清型大肠杆菌的药敏抑菌圈直径为23.31±0.95 mm.以O78大肠杆菌感染14日龄艾维茵肉用雏鸡,分别用救鸡宝高、中、低剂量,环丙沙星混饮给药,以比较其疗效.通过临床观察、尸体剖解、细菌检验表明,试验药物组与感染对照组差异极显著(P＜0.01),即试验药物对鸡大肠杆菌病有良好的疗效;救鸡宝高、中剂量与环丙沙星疗效相当(P＞0.05),且不影响鸡只的正常增重(P＞0.05).     

免疫乳中特异性抗体对3种细菌所致小鼠腹泻的被动免疫保护作用

以9株人肠道病原茵(大肠杆茵3株、志贺氏茵3株、沙门氏茵3株)制备的混合抗原对孕牛进行系统免疫，以获得对人致病肠道杆茵具有特异性的牛乳抗体。其免疫初乳中针对9种致病肠道杆茵的特异性IgG效价为2^11-2^12，为非免疫初乳的128-256倍；免疫常乳中针对9种致病肠道杆茵的特异性IgG效价为2^6-2^8。为非免疫常乳的16-64倍。动物实验表明，免疫初乳及效价为1：64的免疫常乳对肠产毒性大肠杆茵、鼠伤寒沙门茵、福氏志贺茵所致小鼠腹泻均有保护作用，这是由免疫乳中特异性IgG所决定的。