禽流感灭活疫苗（H5N2亚型，D7株）与同类产品对鸭和鸡免疫后血清学比较试验

为评价禽流感灭活疫苗（H5N2亚型,D7株）与同类产品对不同日龄鸭及SPF鸡的免疫效果,将该疫苗与国内两家禽流感生产企业的2批重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）分别免疫鸭和SPF鸡,免疫后14、21、28、42 d采血测定各免疫组的HI抗体效价。禽流感灭活疫苗（D7株）以0.25 mL剂量免疫鸭后14 d,所有免疫组鸭的HI抗体几何平均滴度（GMT）即能达到6㏒2以上,28 d HI抗体GMT达到峰值9.1㏒2,而两批重组禽流感灭活疫苗以0.5 mL剂量免疫鸭21 d后HI抗体GMT均没有达到6㏒2;两种疫苗分别免疫21日龄SPF鸡21 d后各免疫组的HI抗体GMT基本相似。试验结果表明,禽流感灭活疫苗（D7株）对鸭的免疫效果要明显优于重组禽流感灭活疫苗(Re-5株),而对鸡的免疫效果相似。     

不同厂家生产的禽流感H5亚型灭活疫苗防疫效果对比试验

本试验利用A公司（H5Re-4＋-5株）、B公司（H5Re-4＋-5株）及C公司（H5Re-4株、H5Re-5株）生产的H5亚型油乳剂灭活疫苗对不同日龄的鸡群进行免疫,通过HI试验检测其抗体水平,并从中筛选出防疫效果较好的疫苗。结果表明,A公司和C公司生产的禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗的免疫效果较好,抗体滴度比较差异不显著（P〉0.05）,B公司生产的禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗的免疫效果较差,抗体滴度比较与A公司、C公司差异显著（P〈0.05）。     

重组禽流感灭活疫苗抗体消长规律分析

重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)3批,按重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)规程规定的检验方法免疫28日龄SPF鸡,免疫后定期采集血样,测定血清HI抗体效价,绘制各批疫苗免疫鸡HI效价消长曲线,结果表明,重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)能诱导SPF鸡产生高的抗体而且维持时间长 .     

重组禽流感病毒（H_5+H_7）三价灭活苗的免疫效果评估

为评估新型重组禽流感(H_5+H_7)三价灭活苗对父母代种鸡场的免疫效果,选择了五家公司的禽流感三价灭活苗产品,分别免疫9日龄的SPF鸡,并以厂家进行分组(分别是A、B、C、D、E组),对照组为F组;采集免疫前后血清,检测H_5N_1(Re-11、Re-12、Re-8)和H_7N_9(H_7-Re2、H_7-Re1)抗体效价,分析不同公司疫苗产品在鸡上抗体的消长规律。结果表明,对照组鸡血清H_5N_1(Re-11和Re-12)和H_7N_9(H7-Re2)的HI抗体均为0;免疫1周后所有免疫组鸡的禽流感抗体开始上升,4周左右抗体效价达到高峰;产生抗H_5N_1(Re-11)的HI抗体最好的是A组;产生抗H_5N_1(Re-12)的HI抗体最好的是D组;产生抗H_7N_9(H_7-Re2)的HI抗体最好的是E组;不同厂家禽流感三价苗产生禽流感抗体效价差异不显著。三价灭活苗同时可以产生抗H_5N_1(Re-8)和H_7N_9(H_7-Re1)的有效抗体。本研究对鸡场免疫禽流感三价灭活疫苗提供数据支持。     

重组鸡白细胞介素2对H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫增效作用研究

为研究重组鸡白细胞介素2对体液免疫的影响,将600只7日龄海兰褐蛋鸡随机分为2组,试验组在H9亚型禽流感灭活疫苗免疫同时使用重组鸡白细胞介素2注射液,对照组只进行H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫。试验组与对照组鸡群分别于免疫后0、7、14、21、28、35 d进行鸡H9亚型禽流感病毒HI抗体的检测,并统计分析各组抗体效价的差异性。结果表明:试验组HI抗体效价均高于对照组,且在免疫后7 d试验组与对照组HI抗体效价差异极显著(P0.01),免疫后14 d、21 d试验组与对照组HI抗体效价差异显著(P0.05),试验组保护性抗体提前一周产生且抗体高峰提前一周到达。     

樱桃谷肉鸭H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)免疫程序研究

选取1日龄健康无免疫的樱桃谷肉鸭600只,随机分成A、B、C、D 4组,每组150只。B、C和D组在7日龄分别免疫H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)0.5、0.6和0.8 m L/只。A组为非免疫对照组。采用HI方法检测其母源抗体和免疫抗体水平,根据母源抗体和免疫抗体消长规律探讨樱桃谷鸭H5NI亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)的合理免疫程序。结果表明:樱桃谷鸭Re-6与Re-8母源抗体效价和抗体合格率在1日龄最高,分别为7.8log2和100%、7.6log2和100%,14日龄下降至3.93 log2和53.3%、3.78 log2和50.0%,21日龄之后几乎没有保护力;3个剂量试验组免疫抗体水平和抗体合格率在统计学上差异不显著(P0.05)。建议樱桃谷肉鸭在7日龄免疫,剂量为0.5m L/只。     

H5亚型禽流感疫苗对蛋鸭免疫效果影响的研究

用H5亚型禽流感疫苗对58个养鸭场的150~450日龄产蛋鸭进行2次免疫后,21~180 d随机抽取有效血清674份进行HI抗体水平监测,分析其免疫效价。结果表明：处于产蛋高峰期的300日龄组蛋鸭免疫效果最佳,抗体有效率达到100%,抗体效价达到8.7 log2,除与250日龄组无显著差异（P>0.05）外,与其他各组比较差异显著（P<0.05）;蛋鸭在免疫后21~120 d内均能维持较高的HI抗体效价,并在61~90 d进入高峰期,此期抗体合格率达97.9%,抗体效价为7.7 log2,与免疫后121~150 d及151~180 d比较差异极显著（P<0.01）;同时,经与鸡的免疫效果相比,蛋鸭免疫后所产生的HI抗体效价显著高于鸡（P<0.05）。     

对重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株）对家禽免疫效果方面的调研

2006-2007年,通过检测免疫注射H5N1重组禽流感病毒灭活疫苗（Re-1株）后3-4周的444个鸡场、66个鸭场和28个鹅场共计16140份血清中H5亚型禽流感血凝抑制抗体水平,比较A、B、C、D、E5个不同厂家的疫苗对鸡、鸭、鹅免疫效果。结果显示：重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）对鸡的免疫效果明显好于鸭和鹅;不同厂家疫苗质量和免疫效果有差异,其中A厂疫苗质量和免疫效果最好。     

新流二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫产蛋鸡、肉鸡后的抗体水平监测

为探讨鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫商品蛋鸡与商品肉鸡后的抗体消长规律,试验选用商品蛋鸡与商品肉鸡各40只,商品蛋鸡随机分为A、B、C、D组,商品肉鸡随机分为E、F、G、H组,每组10只,A、E组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只;B、F组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,同时肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;C、G组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,于免疫后第7天肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;D、H组鸡不免疫,作为阴性对照组。各组鸡均于免疫前及免疫后的第2,6,10,14,21,28,35天采血检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:商品蛋鸡B、C组在免疫疫苗过程中配合注射禽流感抗体,禽流感的抗体效价呈先上升然后下降再上升的变化趋势,而A组未注射禽流感抗体的鸡,禽流感抗体效价则呈先下降然后上升的变化趋势;商品肉鸡各免疫组禽流感抗体效价均呈先下降然后上升的变化趋势,疫苗免疫后的前期注射禽流感抗体组的禽流感抗体效价相对高些。说明商品蛋鸡免疫新流二联灭活疫苗时配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体短期提升效果较明显,可提高禽流感疫苗的免疫效果;而在商品肉鸡上配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体提升效果不明显。     

重组鸡白细胞介素6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用的观察

为评价重组鸡白细胞介素6(rChIL-6)在商品鸡体内对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)免疫增强作用,将rChIL-6与重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)采用肌肉注射方式免疫57日龄麻鸡,分别在疫苗接种前和接种后第7、14、21、35、42天,检测H5N1亚型禽流感病毒(Re-6、Re-7)血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明:与灭活疫苗同时注射rChIL-6组比单一注射疫苗组的H5N1 Re-6抗体滴度可提高1.6 log2,Re-7抗体滴度可提高1.8 log2。提示rChIL-6对重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)有显著的免疫增强作用。     

禽流感灭活疫苗(H5N2,N28株)和重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫鸡和鸭后抗体消长规律的比较研究

禽流感灭活疫苗（H5N2，N28株）和重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re-1株）各3批，以重组禽流感灭活疫苗（H5N1，Re．1株）推荐的免疫程序和剂量分组免疫5周龄SPF鸡和5周龄非免疫鸭。免疫后定期采集血样，测定血清HI抗体效价，分别计算各免疫组鸡和鸭HI抗体效价的几何平均数，绘制各批疫苗免疫鸡和鸭后HI效价消长曲线，并分别对两种疫苗免疫鸡和鸭后各时期的HI抗体效价进行t检验。结果为：①免疫后1周，各免疫组均未测到HI抗体；②鸡免疫后4～5周，HI抗体效价达到峰值1：2^6.0～1：2^7.0，随后2周下降相对较快，平均每周下降0．3—0．7个滴度，之后HI抗体效价缓慢下降，直到试验结束，平均每周下降0．04～0．17个滴度；③鸭首次免疫后第3周各免疫组HI抗体效价达到1：2^4.0～1：2^5.3，加强免疫（首次免疫后第3周）后，HI抗体效价迅速升高。加强免疫后第3周（首次免疫后第6周）HI抗体效价达到最高值1：2^10.6-1：2^11.7，且在峰值水平维持3周，之后1周下降相对较快，平均下降1．2～2．7个滴度，然后缓慢下降，到首免后24周平均每周下降0．28～0．39个滴度，24周除049H5N2批疫苗免疫组外，其他各批免疫鸡HI抗体效价均小于1：2^4.0；④免疫后3周内，两种疫苗刺激鸡产生的HI抗体效价均高于相应批次疫苗免疫鸭产生的HI抗体效价，免疫后第2周相差1．9—2．3个滴度，免疫后第3周相差1．6～2．0个滴度；⑤两种疫苗免疫鸡和鸭后，各时期HI抗体效价t检验差异均不显著（P〉0．05）。以上结果表明，两种疫苗免疫SPF鸡和非免疫鸭后，HI抗体效价消长规律一致，两种疫苗免疫后各个时期的HI抗体效价在统计学上差异均不显著（P〉0．05）。     

对重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1株）在家禽免疫效果方面的调研

2006-2007年,通过检测免疫注射H5N1重组禽流感病毒灭活疫苗（Re-1株）后3～4周的444个鸡场、66个鸭场和28个鹅场共计16140份血清中H5亚型禽流感血凝抑制抗体水平,比较A、B、c、D、E5个不同厂家的疫苗对鸡、鸭、鹅免疫效果。结果显示：重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）对鸡的免疫效果明显好于鸭和鹅;不同厂家疫苗质量和免疫效果有差异,其中A厂疫苗质量和免疫效果最好。     

蛋鸡卵黄与血清中H5N1亚型禽流感病毒Re-4株抗体效价相关性研究

用卵黄样本和血清样本监测H5N1亚型禽流感病毒Re-4株HI 抗体效价,对2种样本监测结果进行相关性研究。对115日龄蛋鸡群免疫重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-4株,禽用）,免疫后20～260 d对固定鸡群采样（血清样本和卵黄样本）,进行免疫抗体监测。结果表明,115日龄鸡群免疫后20～260 d卵黄和血清HI 抗体效价呈强相关,相差在1 log2以内的占绝大多数,均值t检验差异不显著。因此,用卵黄样本监测禽流感 HI 抗体效价是可行的。     

重组禽流感灭活苗和禽流感灭活苗对鸡免疫效果的观察

用重组禽流感灭活苗接种10日龄、14日龄和21日龄的SPF鸡,接种后HI抗体效价无显著差异。将H5N1和H5N2疫苗分别接种21日龄SPF鸡,结果表明,H5N1和H5N2均能刺激SPF鸡产生较高的HI抗体;分别接种三黄鸡,接种后21 d,H5N1能刺激三黄鸡产生较高的HI抗体;而H5N2不能刺激三黄鸡产生合格的HI抗体,与SPF鸡免疫组相比差异显著。经过二次接种,HI抗体平均为8.9 log2,与SPF鸡组接种后42 d的各组相比差异不显著,而与一免后21 d的各组HI抗体效价相比差异显著。表明应用禽流感灭活苗对三黄鸡免疫接种,必须进行二免方可达到理想免疫效果,而应用重组禽流感灭活苗对三黄鸡进行免疫接种,一次免疫即可获得较高的HI抗体效价。     

番鸭呼肠孤病毒感染对禽流感疫苗免疫抗体应答的影响

1日龄番鸭感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)后,应用MTT法测定番鸭血液、脾脏和胸腺的B淋巴细胞增殖功能,应用血凝抑制方法检测禽流感疫苗免疫后抗体变化规律,探讨MDRV对B淋巴细胞功能的影响。结果显示:免疫组番鸭禽流感疫苗二免后H5和H9 AIV-HI抗体效价上升,二免后14 d HI效价最高,随后抗体效价维持在7.5 log2以上。MDRV组番鸭二免后抗体缓慢上升,二免后21 d HI效价最高,随后抗体效价维持在6.0 log2以下,HI效价与对照组差异极显著(P0.05)。1日龄番鸭人工感染MDRV后,免疫后7 d外周血T淋巴细胞增殖指数与对照组相比明显下降(P0.05)。免疫后14~28 d与对照组相比显著下降,差异极显著(P0.01),表明MDRV感染抑制了B淋巴细胞增殖功能。以上结果表明MDRV感染能抑制抗体应答和番鸭外周血和免疫器官中B细胞的增殖功能作用,造成B细胞功能抑制。     

不同生产工艺的重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对鸡的免疫效果对比试验

为评价不同生产工艺制备的重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)(简称"H5+H7二价灭活疫苗")对SPF鸡的免疫效果,将3批不同生产工艺制备的(H5+H7)二价灭活疫苗,分别为2017001批(试行规程组)、2017002批("生物工艺"组)和2017003批("生物工艺"+增强剂组),免疫21~28日龄的SPF鸡,免疫后14、21、28、35天采血测定各免疫组的HI抗体效价。在免疫后14~35天,3批不同生产工艺制备的H5+H7二价灭活疫苗组的HI抗体几何平均滴度(GMT)均高于规程要求的6 log_2,在免后14天HI抗体效价开始逐渐升高,在免疫后14~35天,可维持较高的HI抗体水平;2017002批的HI抗体几何平均滴度(GMT)居中,2017003批的HI抗体几何平均滴度最高。试验结果表明:不同生产工艺制备的重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗均符合产品的质量标准要求;用"生物工艺"制备的疫苗免疫效果优于按规程制备疫苗,说明该"生物工艺"可生产质量稳定、高效均一的(H5+H7)二价灭活疫苗;加入某公司增强剂后,免疫效果更好,说明该增强剂可提高疫苗免后的抗体水平。     

商品代AA肉鸡接种禽流感疫苗的免疫效力观察

分别应用不同禽流感疫苗接种不同批次的商品代AA肉鸡,通过血凝抑制试验测定免疫后不同时期的抗体水平,确定各种疫苗对商品代AA肉鸡的免疫效果。结果表明,在免疫20天后,禽流感（H5＋H9）二价灭活疫苗（H5N1 Re-1＋H9N2 Re-2株）刺激肉鸡群产生的HI抗体均高于禽流感灭活疫苗（H5亚型,N28株）、禽流感（H5N2＋H9N2）二价灭活疫苗（N28株＋SD696株）和禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）,与后三种疫苗接种商品代AA肉鸡的免疫抗体相比差异显著（P〈0.05）。     

不同种类禽流感疫苗对番鸭的免疫效果对比试验

为评价重组禽流感病毒灭活疫苗鸡胚源H5N1亚型Re-6株、鸡胚源H5N1亚型Re-6+Re-8株灭活疫苗、细胞源Re-6+Re-8株灭活疫苗及水禽专用H5N2亚型D7株灭活疫苗4个产品对番鸭的免疫效果,分别取四种疫苗分别免疫20日龄番鸭,125只/组,免后35日采血测定HI抗体效价。结果表明,4种疫苗免疫后用Re-6抗原检测抗体依次分别为8.1log2、9.3log2、8.9log2、7.0log2,用Re-8抗原检测抗体分别为1.5log2、9.9log2、8.7log2、7.5log2,用D7抗原检测抗体分别为0.3log2、7.6log2、5.6log2、6.5log2。四种疫苗免疫效果由高至低依次为:鸡胚源H5N1亚型Re-6+Re-8株灭活疫苗细胞源Re-6+Re-8株灭活疫苗H5N2亚型D7株灭活疫苗鸡胚源H5N1亚型Re-6株灭活疫苗。     

鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗对H9亚型禽流感灭活疫苗体液免疫应答影响的研究

将150只维扬麻鸡商品雏鸡随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ 5组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组对应免疫A、B、C 3种IBD活疫苗和同一种H9亚型AI灭活疫苗,Ⅳ组为免疫对照组,只免疫H9亚型AI灭活疫苗,Ⅴ组为空白对照组。IBD中等毒力活疫苗二免后,定期监测鸡群H9亚型AI灭活疫苗免疫后的HI抗体消长情况,以评价这3种IBD活疫苗对H9亚型AI灭活疫苗体液免疫应答的影响。结果发现,45日龄前（即IBD疫苗二免后23 d前、H9亚型AI灭活疫苗二免后20 d前）,Ⅰ组与Ⅳ组、Ⅱ组与Ⅳ组H9亚型AIV抗体水平均差异显著（P<0.05）,Ⅲ组与Ⅳ组间差异不显著（P>0.05）。在45日龄后（即H9亚型AI灭活疫苗二免20 d后）,试验鸡的H9亚型AIV HI抗体水平均无显著差异。     

重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫抗体监测试验

为了评估重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫效果以及对白羽肉鸡最佳免疫时间,试验选取3个厂家(a、b、c厂)重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)分别在1日龄和7日龄进行接种,于接种前(1,7日龄)、14,21,28,35,42日龄采血进行抗体检测,以了解不同厂家高致病禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果以及最佳免疫时间。结果表明:3个厂家高致病性禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果没有明显差异,在21日龄后H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9 Re-2抗体效价均在4 lb以上,各毒株抗体效价在28,35,42日龄时,1日龄抗体效价要高于7日龄,且a厂家疫苗产生的抗体效价要略高于b、c厂。说明1日龄免疫效果要好于7日龄,最佳免疫时间为1日龄。