中国对虾精子入卵过程的观察

利用光镜和电镜对中国对虾精子入卵过程进行了观察。结果表明，精子的核物质籍胞吐作用穿过卵黄膜到达卵膜，其余部分则留在卵黄膜外。只有在卵子激活前到达卵膜的精子才能参与受精作用，其余的精子将被卵子激活所形成的胶质层推离卵子。中国对虾精子激活过程，没有发现顶体丝的形成。精子的入卵开始于卵子的皮层反应后期，此时精卵的接触逐渐密切，首先接触部位的卵膜稍有突起，然后开始下陷，同时这一部位的卵膜变得粗糙不平，随后卵膜解体，精子由此进入卵子。中国对虾精子的入卵位置是随机的，有多精入卵的现象。     

中国对虾人工受精技术的研究

首次探讨了中国对虾人工受精的方法。干法、湿法、半湿法和滴管法都可获得一定比例的受精卵,其中滴管法的受精效果最佳,最高受精率为77.8％。受精卵经过培养,能够进行正常的卵裂和胚胎发育。通过对这几种方法受精效果的分析和比较,认为,在精卵未丧失受精能力的前提下,尽可能地使精卵充分混合,才能得到较高的受精率。还对这四种方法的人工受精和自然受精对受精率的影响进行了比较和分析。     

中国对虾孵子激活过程的形态学研究

报道了对中国对虾孵子激活反应的形态学研究。中国对虾孵了皮层中有由卵黄膜下陷形成的与卵表垂直的皮层囊,内有棒状结构称棒状周边体,其内物质为凝胶前体。对虾孵子的激活并不需要精子的发动,而是在卵子与海水接触后即开始进行。在孵了激活过程中,棒状周边体向外放出形成花冠状的凝胶层,然后从基部开始逐渐消失并向远端扩展,最后完全消失 ,同时卵子进行成熟分裂放出第一,第二极体,并举起受精膜,完成激活反应。还对中国对     

中国对虾卵子激活过程的形态学研究

报道了对中国对虾卵子激活反应的形态学研究。中国对虾卵子皮层中有由卵黄膜下陷形成的与卵表垂直的皮层囊,内有棒状结构称棒状周边体,其内物质为凝胶前体。对虾卵子的激活并不需要精子的发动,而是在卵子与海水接触后即开始进行。在卵子激活过程中,棒状周边体向外放出形成花冠状的凝胶层,然后从基部开始逐渐消失并向远端扩展,最后完全消失,同时卵子进行成熟分裂放出第一、第二极体,并举起受精膜,完成激活反应。还对中国对虾卵子激活的作用进行了讨论。     

胭脂鱼受精过程的细胞学观察

采用人工授精,组织学、超微结构技术等方法对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)受精卵进行细胞学观察。结果表明:胭脂鱼卵子动物极卵壳仅有一受精孔,属单精受精。精孔器为深凹陷,短孔道型。在17～18℃水温条件下,受精后3 s精子开始穿过精孔管,受精后5 s进入卵子;受精后10 s形成精子星光;受精后15 min,卵子处于第二次减数分裂后期;受精后20 min,第二极体形成;受精后90 min,雌雄原核融合;受精后140 min,受精卵进入第一次有丝分裂中期;受精后180 min,第一次有丝分裂结束,二细胞形成。研究发现:成熟卵子精孔器内无精孔细胞及其他物质,和其他大多数硬骨鱼相似,精孔管内径2.42μm,而精子头部直径与其接近;同时精孔器前庭内壁有许多嵴突,孔洞顺螺旋排列,这些结构特点提示其是造成胭脂鱼单精受精的原因之一。本研究旨在为胭脂鱼人工繁殖技术的研究及其保护管理提供基础资料。     

斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化

采用电镜和荧光显微镜技术,对斧文蛤精子超微结构与受精过程的细胞学变化进行了系统研究。电镜观察表明,斧文蛤精子为鞭毛型,全长45.2~47.7 μm,由头部、中段和尾部三部分组成。头部呈稍弯曲的狭茧形,长约2.5 μm,由顶体和细胞核组成,顶体呈圆锥形,内部中轴处有亚顶体腔;细胞核为长锥形,有核前窝和核后窝。中段由线粒体围绕中心粒复合体构成,5个近球形的线粒体呈单层梅花状排列;中心粒复合体由近端中心粒和远端中心粒组成,远端中心粒延伸出尾部的轴丝。尾部为细丝状鞭毛,内部的轴丝呈典型的“9+2”结构,外周有波浪状质膜包被。用荧光显微镜观察了斧文蛤受精及早期卵裂过程的细胞学变化,结果发现,斧文蛤成熟未受精卵呈圆球形,核相处于第一次成熟分裂中期;在水温27~28 ℃条件下受精,受精后6 min,精子入卵并膨胀成球形;受精后12~15 min、20~25 min受精卵排出第一、第二极体;30 min左右,精、卵核膨胀形成雄、雌原核;35 min,两性原核在卵子中央发生染色体联合;40~45 min,受精卵进行第一次卵裂,形成2个大小不等的分裂球;55~60 min,第二次卵裂结束,形成1大3小4个卵裂球,核相变化与第一次卵裂基本相同;75~80 min,第三次卵裂完成,自此次起开始进行螺旋分裂。另外,在斧文蛤受精过程中发现了约1%的多精入卵现象,其对成熟分裂和早期卵裂过程影响很大,常造成成熟分裂紊乱和第一次卵裂染色体分离异常。     

单环刺螠受精过程的细胞学观察

利用组织学和荧光显微镜对单环刺螠(Urechis unicinctus)受精过程中精子入卵以及核相变化进行了观察.结果表明:单环刺螠成熟卵呈卵圆形,核相处于生发泡尚未破裂的第1次成熟分裂前期.在(21±1)℃时,精卵混合后约5 min,精子由卵偏向植物极一侧入卵,受精膜开举起,继而精核发生第1次膨胀.直至受精后约25 min,受精膜完全举起;受精后10～50 min,卵核相继完成二次成熟分裂,分别形成第一极体和第二极体;受精后50～70 min,精核卵核分别膨胀,形成雄原核和雌原核,进而相向迁移,最后在卵的中央联合形成合子核.受精后70～90 min,受精卵完成第1次卵裂,形成2个大小相等的卵裂球.单环刺螠受精全过程历时约70 min,略长于多数海洋无脊椎动物的受精持续时间.本研究旨在为今后单环刺螠人工育苗和新品种的培育提供基础资料.     

中国对虾产卵前后卵巢的形态和结构变化

采用解剖和组织切片等方法研究了中国对虾产卵前后其卵巢的结构变化,排卵以及卵子遇海水后的激活情况。对虾卵巢可分为头前叶,侧叶和由腹部端向后延伸至尾节并于末端愈合的腹叶。     

大菱鲆受精过程的细胞学观察

采用人工授精和组织切片技术对大菱鲆（Scophthalmus maximus L．）受精过程进行细胞学观察。大菱鲆成熟卵处于第二次成熟分裂的中期。精子入卵后，卵子被激动，第二次成熟分裂继续进行，同时发生皮层反应；受精后15min出现精子星光；受精后20min雄原核早于雌原核形成，然后两性原核逐渐靠拢；受精后30min两原核相互靠拢，结合线清晰；受精后40min两原核结合线逐渐消失联合成合子核，之后合子核核膜消失；受精后50min合子核处于第一次有丝分裂中期；受精后60min第一次卵裂完成。[中国水产科学，2006，13（4）：555—560]     

泥蚶受精过程的细胞学荧光显微观察

采用荧光染色剂ＤＡＰＩ已固定的泥蚶成熟卵和受精卵进色染色的方法,在显微镜下观察泥蚶受精细胞学过程。通过ＤＡＰＩ的染色,在荧光显微镜下可清楚观察到,泥蚶的成熟未受精卵处于第一次成熟分裂的中期,精子入卵后分裂再次启动,释放出第一和第二极体,完成成熟分裂,部分受精卵的第一极体有极明显的分裂现象,精子入卵的部位是随机的,且自精子入卵至成熟分裂完成,入卵的精子在形态等方面将发生一系列变化,形成雄性原核。雌雄     

中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

中国对虾的组织培养

目前组织细胞培养研究迅速发展，已被应用于无脊椎动物和脊椎动物生物学的各个领域中．在鱼类组织培养方面的研究已逾三十余载，据Wolf和Mann统计，国外从冷水性鱼和温水性鱼获得细胞株(系)共61个。无脊椎动物组织培养研究工作进展则较为缓慢，自Grace从鳞翅目昆虫Antheraea eucalypti建立首株细胞后，昆虫组织培养才进一步活跃起来。     

中国对虾染色体的核型分析

对中国对虾的染色体进行了较深入的观察和研究。实验材料采用精巢、胚胎,无节幼体等,以气干法和压片法制片,吉姆萨染色,然后进行显微镜检查,选择分散良好的分裂相摄影。结果表明:中国对虾染色体数目为n=44,2n=88。并发现一对具有次缢痕的染色体。通过测量和计算,确定它的核型为2n=88=66M+16SM+6St。     

中国对虾杆状病毒垂直传播途径的初步探讨

中国对虾杆状病毒垂直传播途径的研究对切断病毒的传播途径,培育健康的对虾种质资源,具有重要的理论和实践意义。本文利用电镜技术,对中国对虾亲虾的卵巢,卵细胞和无节幼体,溲状幼体,糠虾,仔虾,幼成虾进行病毒检测,结果发现卵巢和卵细胞中有似病毒粒子,无节幼体,糠虾,仔虾,幼成虾有杆状病毒感染,并初步探讨了中国对虾杆状病毒垂直传播的可能性。     

中国对虾（Penaeus chinensis）杆状病毒病的研究↑（*）

１９９３年养殖的中国对虾（ＰｅｎａｅｕｓＣｈｉｎｅｎｓｉｓ）发生了暴发性流行，经人工感染和电镜观察，证实是由杆状病毒引起的。病虾活力差。体色暗淡或微红，头胸甲上有浅黄色至白色的斑点，头胸甲与表皮下粘连，容易剥离，血淋巴混浊，淋巴器官和肝胰腺肿大，糜烂，在肝胰腺，淋巴器官，中肠，皮下组织和鳃等组织细胞的核内均发现有大量病毒粒子，病毒粒子杆状，无包涵体，具囊膜，平均长３５０ｎｍ，宽１５０ｎｍ，核衣壳体     

渤海对虾亲体与补充量（SRR）动态特性的研究↑（*）

８０年代以来，渤海对虾的补充量，特别是亲体数量大幅度下降。根据１９８３－１９９４年４月烟威外海对虾亲体资源量指数和渤海秋汛对虾渔获量，按Ｂｅｖｅｒｔｏｎ－Ｈｏｌｔ和Ｒｉｃｋｅｒ模式求得各项参数值，有Ｒ－１ｔ＝３．８６×１０－３＋１．１７×１０－２Ｓ－１ｔＲ２＝０．７４ｐ＜０．００１Ｒｔ＝９０．０５Ｓｔｅ－０．１６２１７ＳｔＲ２＝０．５１ｐ＜０．０１表明：当今渤海对虾亲体对补充量有决定影响，可是８０年代亲体数量的平均值只有６０年代和７０年代的３４．４％和４４．２％；而进入９０年代以来，亲体数量又较８０代下降了２０％。８０年代中期渤海沿岸产卵场的环境条件因对虾养殖业的迅速发展发生了较大变化，养殖面积和单位面积产量大幅度增加。这个新的环境因素对对虾补充量也有一定的影响。渤海对虾亲体数量严重短缺，是恢复和增加对虾补充量的主要限制因素     

中国对虾的精子介导外源基因转移的初步研究

用中国对虾的精子作载体,成功地将羊生长激素基因导入中国对虾的受精卵,并获得转基因虾个体。用两种不同的基因溶液处理,即30％的NaCl基因溶液和30％NaCl—40％PEG基因溶液。斑点杂交的结果表明,30％的NaCl基因溶液处理的精子,能够将羊生长激素基因导入中国对虾的卵子中,基因转移比率在1％以上。在另一实验组的个体中,用斑点杂交未检测到阳性信号。经比较,处理后的精子的受精能力未受影响。     

中国对虾蜕皮与附肢刚毛发生关系的研究

中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）的蜕皮周期具有独特的、可预报的变化之特性。利用这一特性可确定中国对虾的蜕皮分为４个阶段：（１）蜕皮后期（阶段Ａ、Ｂ）：刚蜕皮之后；（２）不蜕皮期（阶段Ｃ１－３）：组织生长和食物贮藏期；（３）蜕皮前期（阶段Ｄ０－３）：为下次蜕皮准备有效的形态和生理变化；（４）蜕皮期（阶段Ｅ）：旧表皮脱落期。     

对虾暴发性流行病病原的人工感染研究

用发生暴发性流行病的中国对虾对健康虾进行人工投喂感染。同时，从病虾中分高毒种，毒种液经滤纸、０．４５μｍ和０．２２μｍ滤膜过滤，各滤液对健康中国对虾进行注射、浸泡、和共居感染。结果显示，对虾暴发性流行病的病原可通过投喂和注射感染健康对虾。浸泡和共居的方法均不能感染健康对虾，说明对虾暴发性流行病的传播途径主要为对虾的摄食。病原体对乙醚和５６℃３０ｍｉｎ处理敏感，不易通过０．２２μｍ滤膜。人工感染试验结果证明，对虾暴发性流行病的病原为皮下及造血组织坏死杆状病毒。