草坪草植株再生体系研究进展

对草坪草在愈伤组织培养、花药离体培养、悬浮细胞培养以及原生质体培养等方面的研究进展进行综述。分析目前该领域研究出现的问题,并展望了草坪草离体培养的发展趋势。     

高羊茅愈伤组织再生体系研究进展

高羊茅是温带地区一种重要的多年生冷季型草坪草,生物技术在其品质改良中具有很大的应用潜力。本文综述了影响高羊茅愈伤组织再生体系建立的各个方面及研究进展,分析了目前该领域研究中存在的问题,并对今后的研究提出了展望。     

高羊茅愈伤组织再生体系研究进展

高羊茅是温带地区一种重要的多年生冷季型草坪草,生物技术在其品质改良中具有很大的应用潜力.本文综述了影响高羊茅愈伤组织再生体系建立的各个方面及研究进展,分析了目前该领域研究中存在的问题,并对今后的研究提出了展望.     

草坪草再生体系研究进展

草种是草坪业的基础,但我国缺乏自己培育的草坪草品种,所用草坪草种主要依赖于进口,因此草坪草育种工作亟待加强。常规育种周期长、效率低且难以实现精准靶向育种,而现代生物技术为草坪草育种提供了新的有效途径,其中构建草坪草高效再生体系,加快繁殖速度,对拥有再生体系的草坪草种进行遗传转化是其关键。本文主要综述了近年来对部分冷季型和暖季型草坪草的再生体系研究,总结了影响再生过程的关键因素、存在问题等,同时对未来草坪草再生领域的发展进行了展望,以期对今后草坪草新品种的研发、推广和应用提供参考。     

两个高羊茅无性系的营养器官组织培养及再生体系的建立

以2个高羊茅无性系上农矮生高羊茅(SACD)和98-19的幼穗、叶尖、幼茎和幼节等营养器官作为外植体,在MS培养基上分别添加不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),探索其对愈伤组织的诱导、继代和分化的最佳浓度,以建立高羊茅无性系的高效再生体系。结果表明,幼穗是诱导愈伤组织的最好的营养器官外植体,出愈率最高达94%,而幼叶尖、幼茎、幼节则未能诱导出愈伤组织;不同浓度2,4-D诱导愈伤组织的出愈率存在显著差异,最佳诱导浓度范围为7～9 mg/L,出愈率可以达83%～94%;2个无性系愈伤诱导率间有显著差异,但与2,4-D浓度之间的互作不显著;继代培养基以MS加入2,4-D 4 mg/L的处理方案最好,胚性愈伤组织出愈率和绿色芽点诱导率最高,分别达到98%和78%,所得的胚性愈伤组织在MS+2,4-D 2 mg/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA )1 mg/L分化培养基中的绿苗分化率较高,为57%;生根培养基采用1/2 MS+α-萘乙酸(NAA) 0.5 mg/L,生根率达100%。     

蒙古冰草根尖高效组培再生体系的建立

以蒙古冰草根尖为外植体研究不同激素配比对蒙古冰草愈伤组织诱导及分化的影响,结果表明:蒙古冰草根尖最适愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+琼脂7.0g/L,诱导率为73.33％;最适分化培养基为MS+KT 3.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖20.0g/...     

两个高羊茅品种成熟种子再生体系的建立

以2个高羊茅品种(“Plantation”和“沪坪1号”)的成熟种子为外植体,在MS培养基上分别添加不同浓度的2种植物生长调节剂,探索其愈伤组织的诱导、继代和分化的最佳激素配比及其相互间的影响,以建立简便高效的再生体系。结果表明,完整高羊茅种子最佳的愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 3 mg/L,诱导率为71%;而把成熟种子进行纵切后得到的半粒种子的较优的愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 2.5 mg/L,诱导率占半粒种子外植体的60%,占完整种子(2个半粒种子)外植体的90%以上;在最优诱导培养基上产生的愈伤组织的最佳继代培养基为MS+2,4-D 3 mg/L,其胚性愈伤诱导率为70%,而添加6-BA则抑制2,4-D对胚性愈伤组织的诱导;不同品种的最优的分化培养基不同——“Plantation”的最优分化培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+6-BA 1 mg/L,而“沪坪1号”的最佳组合是MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,分化率分别达到50%和56%。生根培养基采用已报道的组合1/2MS+NAA 0.5 mg/L,生根率达100%。     

草地早熟禾再生体系建立的研究进展

在草地早熟禾再生体系建立的过程中,就其影响因素如外植体的选择、培养条件、基因型等方面综述了国内外草地早熟禾再生体系的研究进展.     

不同光照强度对高羊茅形态和生理指标的影响

在南京地区自然光照(日最大光强1900μmol/m2.s左右)、轻度遮荫(日最大光强1100μmol/m2.s左右)和中度遮荫(日最大光强550μmol/m2.s左右)3种光照强度下对15个高羊茅品种的坪用特征和生理特性指标进行研究。结果表明,在轻度和中度遮荫条件下,各品种分蘖数显著低于自然光照下;在中度遮荫条件下,各供试品种的叶片宽度和比叶重比自然光照处理显著降低。南选4号高羊茅在中度遮荫条件下的分蘖数和可溶性蛋白含量显著高于其他供试品种,且在轻度遮荫和中度遮荫条件下,叶绿素含量和草坪质量均保持较高的水平,表现出较强的耐荫性。高羊茅草坪质量与叶片可溶性蛋白含量极显著正相关。     

修剪对高羊茅生长及草坪质量的影响

研究了不同修剪高度和修剪频率条件下,南京地区高羊茅的生长状况和草坪质量。方差分析表明,低剪（４ｃｍ）的生长量明显高于中剪（６ｖｍ）和高剪（９ｃｍ）,而草坪质量低于高、中剪;高频率修剪（１周２次）的生长量显著高于中频（１周１次）和低频（２周１次）,而草坪质量低于中、低频。因此,在管理上应适当采取高剪（６￣９ｃｍ）和低频（１￣２周１次）,既可以提高草坪质量,又可减轻管理强度。试验结果表明,南京地区高羊     

天蓝苜蓿组织培养及再生体系的研究

以野生天蓝苜蓿种子发育5～7d无菌苗的子叶、下胚轴和种子苗叶片为外植体,对其愈伤组织诱导及其分化的基本培养与外源激素组合和浓度配比进行试验。结果表明:对子叶、下胚轴和叶片愈伤组织诱导最适宜的基础培养基分别是MS、B5和SH;激素的种类及其浓度配比对于愈伤组织的诱导因不同的外植体有很大的差异。其中,子叶、下胚轴以MS+NAA(0.5～1.0 mg/L)+6-BA(0.7mg/L)效果较好,叶片以SH+NAA(0.5～1.0mg/L)+2,4-D(1.5～5 mg/L)+6-BA(0.7mg/L)较好,少量下胚轴在MS+NAA(0.5mg/L)+6-BA(0.7mg/L)和MS+NAA(0.5mg/L)+KT(0.5 mg/L)的培养基中直接分化出胚状体,并成功发育成植株。在培养基Whb5上,子叶、下胚轴和叶片的分化都得到了很好的效果,分化率分别为43%、57%、40%,15～30d后都能再生植株。     

美洲狼尾草组织培养再生体系的建立

构建美洲狼尾草(Pennisetum glaucum)的组织培养再生体系对于该物种的育种研究具有重要意义。以美洲狼尾草的种子、幼叶、幼穗和茎节作为外植体,研究这几种外植体的最佳消毒方式并挑选最合适的外植体进行组织培养,在组培体系中添加不同浓度的植物激素,研究其对愈伤组织诱导与分化的影响。结果表明:以种子作为外植体效果最好,5%NaClO消毒5 min后污染率为1.33%;诱导种子产生愈伤组织的最佳培养基为MS+3 mg·L^-1 2,4-D + 1 mg·L^-1 6-KT+0.1 mg·L^-1 6-BA,诱导率为93.3%;诱导胚性愈伤组织分化的最佳培养基为MS+3 mg·L^-1 6-BA+1 mg·L^-1 NAA,分化率为81.4%。     

野生黄花苜蓿组织培养及再生体系研究

以呼伦贝尔草原野生黄花苜蓿(Medicago falcata L.)无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,对其组织培养及再生体系进行系统的研究,以期为其下一步转基因试验提供良好的受体。结果表明:最佳愈伤诱导培养基为MS+1.5 mg·L^-1 2,4-D+0.4 mg·L^-1 6-BA+3%蔗糖+0.7%琼脂,下胚轴和子叶的最佳愈伤诱导率均可达到100%。最佳胚性愈伤形成培养基为MS+0.5 mg·L^-1 KT+0.1 mg·L^-1 NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂,胚性愈伤形成率为81.5%;最佳分化芽形成培养基为MS+0.25 mg·L^-1 KT+0.05 mg·L^-1 NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂,分化芽形成率为36.5%。最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.5%蔗糖+0.7%琼脂,生根率为93.3%。愈伤诱导结果显示,供试黄花苜蓿材料个体间组织培养再生性存在较大差异,在同一激素水平上有大约1/3植株的愈伤状态优于其他植株。     

高羊茅再生体系构建的基因型比较研究

高羊茅的品种资源丰富,研究高羊茅品种间的差异.选择合适的高羊茅品种是建立高效再生体系的前提.利用7个过渡性气候带常用的抗旱草坪型高羊茅品种进行再生体系研究,数据采用SAS 8.1统计软件分析后发现,品种间的出愈率和分化牢差异显著,两者不存在等级相关性,不同品种高羊茅的出愈率和分化率受基因型的影响显著.高羊茅种子发芽率对出愈率没有显著影响.RSR排序表明,'爱瑞Ⅲ'是出愈率和分化率都较好的品种,适宜作为农杆菌介导高羊茅转化系统的愈伤组织受体材料.     

高羊茅胚性愈伤组织诱导及植株再生

对高羊茅2个品种(新秀和夜明珠2号)的再生技术进行了研究,建立了高频再生体系,为遗传转化奠定了基础.该试验以成熟的种子为外植体,诱导胚性愈伤组织.结果表明,2品种胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D5.0mg/L+6-BA0.1 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基:新秀为MS+6-BA 2.0ms/L,夜明珠2号为MS+6-BA 1.0mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L.     

激素对高羊茅愈伤组织诱导及其分化的影响

用不同种类培养基及不同浓度2,4-D、BA对高羊茅种子进行愈伤诱导,结果表明培养基种类对愈伤诱导无明显效果;MS培养基下不同浓度2,4-D对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大,以9mg/l效果最佳,愈伤诱导率达66.7%左右;过高浓度的2,4-D、BA对萌芽和愈伤的形成均有负作用;愈伤组织分化以MS+BA2.0mg/l+NAA0.5mg/l为佳.     

青绿苔草(Care breviculmis)愈伤组织诱导与再生体系的建立

为建立青绿苔草高效的再生体系,本研究以青绿苔草的种子为外植体,探究不同植物激素配比对愈伤组织诱导、愈伤分化和生根的影响。结果表明：MS+1.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+2.0 mg·L^-1 2,4-D为诱导愈伤的最佳培养基,诱导率可以达到68.3%,愈伤表现为松散的黄色颗粒;MS+1.0 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA为最佳分化培养基,分化率为93.8%,不定芽数量达到40个,长势良好;不定芽在1/2 MS培养基中生根效果最好,其根长、株高和生根数量均显著高于其他处理。本研究建立了高效的青绿苔草再生体系,为研究青绿苔草的遗传转化及应用生物技术育种奠定了基础。     

不同组培基质对菊苣叶片再生的影响

以3个菊苣（Cichorium intybus L.）品种叶片为外置体,以MS,N6,B5,SH和N6B5MS为基本培养基,添加不同激素对其不定芽诱导及植株再生进行研究。结果表明：3个菊苣品种在5种培养基上的愈伤诱导率和分化率存在差异,其中以MS培养基添加2.0 mg·L^-16-BA和0.2 mg·L^-1 IBA再生和分化最好,平均愈伤诱导率和分化率分别为70.12%和72.07%。在不同生根培养基中,生根率和根长存在一定的差异,生根数量没有显著差异,其中以1/2MS培养基中添加0.1 mg·L^-1的NAA效果最显著,生根率、每个外植体的平均根数和根长分别达到97.07%,4.03个和6.51 cm。