长叶点地梅愈伤组织诱导和植株再生

以长叶点地梅（Androsace longifolia）的无菌实生苗的下胚轴和叶片为外植体,研究不同种类、不同浓度的激素组合培养对愈伤组织诱导、芽诱导和生根的影响。结果表明,诱导下胚轴基部愈伤组织的最佳培养基为MS+0.3 mg·L-1 6 BA+0.1 mg·L-1 NAA,诱导率达85%;诱导叶片愈伤的最佳培养基为MS+0.02 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 TDZ,诱导率为80%;下胚轴愈伤诱导芽的最佳培养基为MS+0.5 mg·L-1 6 BA+0.2 mg·L-1 NAA,分化率达92.5%;叶片愈伤诱导芽的最佳培养基为MS+1.0 mg·L-1 6 BA+0.2 mg·L-1 NAA,分化率达82.5%;最佳生根培养基为MS+1.0 mg·L-1 IBA,生根率达100%,移栽成活率达95%。     

地被菊‘紫妍’和‘纽9722’的再生体系建立

本研究以地被菊(Chrysanthemum morifolium)两个品种‘紫妍’和‘纽9722’带腋芽的无菌茎段为外植体,在基本培养基中添加不同浓度的6-BA和NAA诱导叶片分化、茎段增殖以及继代生根,进行两个品种的再生体系建立。结果表明,利用2%NaClO对‘紫妍’和‘纽9722’适宜消毒时间分别为6、8min;诱导‘紫妍’叶片不定芽再生的最适培养基是MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1,愈伤组织诱导率为100%,分化率为92.22%,出芽数为7.60;‘纽9722’叶片不定芽再生的最适培养基是MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1,愈伤组织诱导率为100%,但分化率仅为45.59%;‘纽9722’茎段增殖的最适培养基是MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1,增殖系数高达10.05;‘紫妍’生根的最适培养基是1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1,生根率为100%,生根系数为15.50;‘纽9722’生根的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.3mg·L-1,生根率为100%,生根系数为14.87,移栽成活率均为100%。     

百合属‘普瑞头’的组织培养和快速繁殖

以亚洲百合‘普瑞头’（Lilium asitic hybrids cv. Prato）鳞片为外植体,以MS为基本培养基,通过增加不同激素种类和浓度进行了组织培养快速繁殖技术的研究。结果表明,诱导不定芽的最适培养基为MS+0.5 mg·L-1 6 BA+0.1 mg·L-1 NAA,诱导率最高达85.0%,平均每块分化的芽数最多（3.6个）;再生小鳞茎鳞片诱导不定芽的最适培养基为MS+1.0 mg·L-1 6 BA;生根的最适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-1 IBA,生根率为86.7%;移栽后生长良好,成活率达到85.0%。     

猕猴桃‘翠香’再生体系的建立

取‘翠香’猕猴桃的幼嫩枝条为材料,利用不同激素及浓度诱导茎段腋芽、增殖、生根,并进行驯化移栽。结果表明：‘翠香’猕猴桃茎段腋芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg.L-16-BA+0.3 mg.L-1NAA,诱导率达88.89%;增殖培养最佳培养基为MS+5 mg.L-1 6-BA+0.4 mg.L-1 NAA,增殖系数为6.20,三代内增殖效果稳定;生根培养的最佳培养基为1/2MS+0.9 mg.L-1IBA,生根率为94.44%,根数为11.40,根长为2.94;驯化后移栽成活率达88.33%。     

垂花百合花器官离体培养

以垂花百合（Lilium cernum）的花器官(花瓣、花托、子房)为外植体进行组织培养,结果表明,3种花器官外植体的愈伤组织的诱导能力和分化能力各不相同,花瓣愈伤组织的诱导率及分化率最高,分别可达57.65%和81.12%;诱导愈伤组织由易到难依次为花瓣>花托>子房;花瓣外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6 BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,子房外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6 BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,花托外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6 BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;最适生根培养基为1/2 MS+IBA 1.0 mg·L-1+ NAA 0.3 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1。     

钝叶瓦松带芽叶片的组织培养和快速繁殖

以钝叶瓦松（Orostachys malacophyllus）带芽叶片为外植体,MS为基本培养基添加不同质量浓度的6 BA、NAA和2,4 D,探讨了不同植物生长调节剂对钝叶瓦松带芽叶片启动的影响,以期筛选出最佳培养基配方,建立钝叶瓦松组织培养再生体系。结果表明,叶片腋芽最佳启动培养基为MS+6 BA 3 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,腋芽增殖的最佳培养基为MS+6 BA 1.5 mg·L-1+2,4 D 0.2 mg·L-1,腋芽的增殖倍数为5.35。最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.3 mg·L-1,生根率为96.67%,移栽后成活率为76.67%。     

无刺1号刺梨快繁体系的建立

通过对无刺1号刺梨在初代培养、继代培养、生根培养过程中不同植物生长调节剂的筛选,建立高效茎段快繁体系。以无刺1号当年生茎段为材料,利用不同植物生长调节剂对茎段进行腋芽诱导、增殖及生根,并进行炼苗移栽。结果表明：无刺1号茎段组培的最佳时期是4-5月,最佳消毒方案是30 s 75%酒精+10 min 0.1% 升汞;适合无刺1号初代培养的培养基为MS+ 2.5 mg?L-1 6-BA+ 0.1 mg?L-1 NAA,萌芽率达90.63%;增殖培养基为MS+ 1.5 mg?L-1 6-BA+0.1 mg?L-1 NAA,增殖系数为3.94;在1/2MS+ 0.3 mg?L-1 IBA+ 20 g?L-1 蔗糖+ 0.5 g?L-1 活性炭的培养基上,无刺1号的生根率为87.30%,驯化移栽成活率达87.74%。     

‘白雪公主’草莓茎尖组培快繁体系研究

以草莓品种‘白雪公主’茎尖为外植体,以MS为基础培养基,对培养前暗处理、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁环节进行研究,并建立了其组织培养快速繁殖体系。结果表明：暗处理3 d能够促进茎尖萌发,提高萌发速度;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的诱导培养基,诱导率达82 %以上;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的增殖培养基,增殖系数为8.00;1/2 MS+蔗糖20 g/L作为生根培养基为适宜的生根培养基,培养5 d后生根率达100 %,平均生根数为10条,平均根长为5.00 cm。     

果叶两用桑大10组培快繁技术研究

利用果叶两用桑大10春季桑树的茎段进行组织培养,优化确定了大10桑树茎段在不同组培阶段适宜的培养基配方,探讨了不同发育阶段的培养条件,试验结果表明：在初级培养阶段为A9号（MS＋2．0mg／L BA＋0．5mg／L IBA）培养基,外植体的分化率达92．50％;在继代培养阶段为B8号（MS＋1．5mg／L BA＋0．5mg／L NAA）培养基,不仅桑苗生长旺盛,而且具有较高的增殖系数,增殖倍数达4倍以上;在生根培养阶段为C3号（1／2MS＋0．5mg／L NAA）培养基,试管苗生根率达100％、驯化成活率达92％。     

扁茎黄芪离体快繁及多倍体诱导

以扁茎黄芪的干燥成熟种子为外植体,研究其离体快繁技术,并在无菌繁殖条件下探索了秋水仙碱溶液不同浓度和时间处理对扁茎黄芪的诱变效应。快繁研究结果显示,扁茎黄芪的发芽培养基为MS,继代增殖最适培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均增殖系数达到4.5,平均苗高达3.5cm;生根最适培养基为1/2MS+NAA0.05mg/L,生根数为4～6条,生根率达到100%。采用浸泡法将扁茎黄芪的茎尖在0.1%,0.3%和0.5%不同秋水仙碱溶液浓度下分别处理1,2,3和4d,并对诱导处理后获得的再生植株进行染色体鉴定,得出以0.3%秋水仙碱溶液浸泡3d为诱导多倍体的最佳处理组合,诱导率达40%。     

铁线莲‘Blekitny Aniol’组织培养及再生体系建立

对铁线莲(Clematis florida‘Blekitny Aniol’)的带芽茎段进行诱导产生无菌苗,并对其叶片和茎段进行愈伤组织诱导成苗的分化研究,成功建立了铁线莲组织培养再生体系。结果表明,带芽茎段诱导腋芽最佳培养基为MS+1mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,腋芽萌发率为100.0%;茎段诱导愈伤最适宜培养基为MS+2 mg·L~(-1)6-BA+0.01mg·L~(-1)NAA,诱导率为78.3%;叶片诱导愈伤组织最适宜的培养基为MS+1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,诱导率为81.7%;愈伤组织分化的最佳培养基为1/2MS+1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,分化率可达25.0%;最适宜不定芽的增殖培养基为1/2MS+3 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,增殖倍数为4.94;筛选出最优的生根培养基组合为1/2MS+0.05 mg·L~(-1)NAA,生根率为70.2%。本研究将为铁线莲的推广应用提供参考,也为其他铁线莲属植物引种和开发利用奠定了基础。     

火龙果愈伤组织诱导及再生体系的建立

为建立稳定、快速、高效的火龙果再生体系,以金都1号火龙果不同成熟度的茎段为外植体,探讨不同激素浓度配比、培养条件等对其愈伤组织及不定芽发生的影响。结果表明: 幼芽茎段和幼嫩茎段较适宜作为火龙果的诱导外植体。诱导率明显高于成熟茎段的诱导率。幼嫩茎段诱导愈伤组织最适合的培养基是MS +TDZ 0.6 mg/L + KT 0.8 mg/L +2,4-D 1.0 mg/L,诱导率是81.7%,不定芽再生率达到36%,幼芽茎段诱导的愈伤组织培养基为MS +6BA2.0mg/L +2,4-D 1.0 mg/L,诱导率高达91.7% 愈伤组织诱导不定芽的培养基为MS+NAA 0.2mg/L+6-BA 2.0 mg/L,生根诱导最适培养基为MS+6-BA1.0mg/L     

菌草绿洲3号快繁及遗传转化体系的初步研究

以芦竹属(Arundo)菌草绿洲3号诱导的愈伤组织为材料,进行不定芽、不定根诱导以及移栽试验。以愈伤组织为受体材料,对绿洲3号的遗传转化体系进行初步研究。结果表明,不定芽最佳分化培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,不定芽诱导率为100%。不定根诱导的最适培养基为MS,不定根的诱导率为100%。在9种移栽基质中,泥炭基质中组培苗的移栽成活率最高,为100%。以绿洲3号愈伤组织预培养3 d,于农杆菌OD600值为0.1侵染10 min为宜,共培养基中添加300μmol·L~(-1)AS的条件下,共培养1 d的GUS表达率最高,为1.5%。     

野生黄花苜蓿组织培养及再生体系研究

以呼伦贝尔草原野生黄花苜蓿(Medicago falcata L.)无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,对其组织培养及再生体系进行系统的研究,以期为其下一步转基因试验提供良好的受体。结果表明:最佳愈伤诱导培养基为MS+1.5 mg·L^-1 2,4-D+0.4 mg·L^-1 6-BA+3%蔗糖+0.7%琼脂,下胚轴和子叶的最佳愈伤诱导率均可达到100%。最佳胚性愈伤形成培养基为MS+0.5 mg·L^-1 KT+0.1 mg·L^-1 NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂,胚性愈伤形成率为81.5%;最佳分化芽形成培养基为MS+0.25 mg·L^-1 KT+0.05 mg·L^-1 NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂,分化芽形成率为36.5%。最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.5%蔗糖+0.7%琼脂,生根率为93.3%。愈伤诱导结果显示,供试黄花苜蓿材料个体间组织培养再生性存在较大差异,在同一激素水平上有大约1/3植株的愈伤状态优于其他植株。     

早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立

以野生早开堇菜为材料,研究了不同外植体类型(子叶节、叶片、叶柄)和不同激素配比对其不定芽诱导、愈伤组织诱导和分化的影响,成功建立了早开堇菜组织培养植株再生体系。结果表明,1) 诱导子叶节和叶柄不定芽诱导的最适培养基为 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,叶片不适合作为直接诱导不定芽的外植体。2) 3种外植体均能诱导愈伤组织,子叶节愈伤组织诱导的时间最短,其次为叶柄,叶片最晚。子叶节和叶柄愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D,诱导率分别为98.3%和96.7%;叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L NAA,诱导率可达88.3%。3) 最适愈伤组织分化培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率为100%。4)不定芽增殖的最佳培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,增殖率为4.68。 5)再生苗移植到添加1.0 mg/L 6-BA的1/2 MS培养基上,生根率92.3%。6)组培苗移栽到珍珠岩∶河沙∶腐殖质(1∶2∶2)的混合基质时,100%成活,且植株长势好。     

多花黑麦草特高和多年生黑麦草四季高频组培再生体系的优化与建立

对在贵州地区广泛种植的多花黑麦草特高(Lolium multiflorum‘Tetragold’)和多年生黑麦草四季(L.perenne‘Four seasons’)的成熟种子进行了愈伤组织诱导及植株再生的研究,建立了两个品种的胚性愈伤组织高频诱导与再生体系。结果表明,剥去成熟种子的颖壳,切除1/3胚乳端,将特高接种于CC+7mg·L~(-1) 2,4-D+0.5mg·L~(-1) 6-BA、四季接种于CC+5mg·L~(-1) 2,4-D+0.5 mg·L~(-1) 6-BA的培养基中,在明显降低组培污染率的同时,能分别得到65.52%和63.55%的最高愈伤组织诱导率;将两个品种诱导出的愈伤组织转移在MS+0.5 mg·L~(-1) 2,4-D+0.5mg·L~(-1) 6-BA+1.25mg·L~(-1) CuSO4+1.0g·L~(-1) CH的继代培养基上,能促进质量较好的Ⅱ型胚性愈伤组织的形成;根据后续转化试验所选用的植物表达载体pCAMBIA 1300的抗性特点,30~40mg·L~(-1)的潮霉素是两个品种愈伤组织最佳的筛选剂和临界浓度;特高的胚性愈伤组织接种在MS+2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) NAA+0.1mg·L~(-1) TDZ的培养基上,可以产生86.37%的最高分化率,四季的胚性愈伤组织接种在MS+6.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.3mg·L~(-1) NAA+5.0mg·L~(-1) KT的培养基上,能得到85.40%的最高分化率;生根培养基1/2MS+0.5 mg·L~(-1)NAA+0.5mg·L~(-1) IAA能让两个品种分化出的不定芽形成100%的生根率;以腐殖土∶蛭石∶砂壤土=1∶1∶1的混合材料作为营养土,能保证组培再生苗达到99%以上的成活率。优化建立的高频组培再生体系为下一步的遗传转化奠定了基础。     

长白山单花橐吾茎尖离体培养研究

以单花橐吾(Ligularia jamesii)茎尖作为外植体进行幼芽诱导,探索单花橐吾的离体快繁途径。结果表明:在MS+6-BA(3.0 mg·L^-1)+NAA(0.3 mg·L^-1)+蔗糖(35 g·L^-1)培养基上的幼芽诱导效果最好,诱导率高达90.1%;增殖培养时在MS+6-BA(2.5 mg·L^-1)+IBA(0.1 mg·L^-1)培养基上的平均增殖系数4.9,幼芽生长健壮,可继代培养6次以上;生根培养采用1/2MS+NAA(0.5 mg·L^-1),生根率达95%,生根白色粗壮,且数量较多。