四倍体西瓜低稔性胚胎发育研究

试验以二倍体自交为主要对照，四倍体与二倍体正反交为辅助对照，研究了四倍体西瓜自交低稔性的胚胎发育。通过镜检观察表明：1．四倍体西瓜自交花粉萌发率低，花粉管在柱头与花柱中生长出现异常现象，在花柱中生长缓慢，授粉后12h到达花柱基部。2．四倍体西瓜有少数结构不正常胚囊，但所占比率低于10％，不是稔性低的主要原因。3．四倍体自交双受精过程正常，但花粉管进入的胚囊数少，受精率仅35．8％。4．四倍体自交只有少数胚能正常发育，形成有活力种胚；大部分胚由于游离核或细胞化胚乳的异常解体，在原胚或球形胚阶段败育；少数胚分化到心形胚、鱼雷胚后，由于细胞化胚乳过早解体，胚停止分化而败育。     

同源四倍体西瓜的胚胎发育研究

通过石蜡切片、压片等方法观察研究同源四倍体西瓜授粉、受精和胚胎发育过程发现：（１）同源四倍体西瓜花粉萌发率低，花粉管在生长过程中出现畸形现象，生长速度缓慢，授粉后１２小时到达花柱基部，比对照二倍体西瓜慢３小时；（２）四倍体西瓜的正常发育成熟胚囊为标准８核胚囊，自交受精过程正常，但有花粉管进入的胚囊数少，仅３５．０％（对照为９７．５％）：（３）四倍体西瓜自交部分胚胎在发育过程中球形胚阶段败育，只有少部分能发育到成熟，形成有活力的种胚。以上三方面是造成同源四倍体西瓜低稔性的主要胚胎学原因。     

同源四倍体西瓜的胚胎发育研究

通过石蜡切片、压片等方法观察研究同源四倍体西瓜授粉、受精和胚胎发育过程发现：（１）同源四倍体西瓜花粉萌发率低，花粉管在生长过程中出现畸形现象，生长速度缓慢，授粉后１２小时到达花柱基部，比对照二倍体西瓜慢３小时；（２）四倍体西瓜的正常发育成熟胚囊为标准８核胚囊，自交受精过程正常，但有花粉管进入的胚囊数少，仅３５．０％（对照为９７．５％）；（３）四倍体西瓜自交部分胚胎在发育过程中球形胚阶段败育，只有少     

四倍体西瓜低稔性胚胎发育研究

试验以二倍体自交为主要对照,四倍体与二倍体正反交为辅助对照,研究了四倍体西瓜自交低稔性的胚胎发育,通过镜检观察表明,１．四倍体西瓜自交花粉萌发率低,花粉管在柱头与花主中生长出现异常现象,在花柱中生长缓慢,授娄后１２ｈ到达花柱基部。２．四倍体驻有少数结构不正常胚囊,但所占比率低于１０％,不是稔性低的主要原因。３．四倍体自交双受精过程正常,但花粉管进入的胚囊数少,受精率仅３５．８％,４．四倍体自交只有     

白菜2n配子诱导及有性多倍化创制四倍体的研究

以165份白菜(2n=2x=20)品系中筛选出的11份含2n配子较高的株系为材料,用不同浓度秋水仙素处理花蕾,诱导2n配子;以其为父本,以四倍体雄性不育系为母本进行有性多倍化杂交,从F1中筛选鉴定四倍体。结果表明:用0.20%秋水仙素5~10μL微量注射3mm的二倍体白菜花蕾,处理1次,诱导2n配子效果最好,2n配子频率达20.20%,是未经秋水仙素处理对照的3.63倍。80株杂交F1中,染色体计数显示14株为四倍体(2n=4x=40),占17.5%。与二倍体相比,有性多倍化获得的四倍体在植株形态、气孔、花器官等方面均表现巨大性,气孔密度和结实率降低。     

秋石斛同源四倍体诱导与鉴定

 为了创制秋石斛同源四倍体新种质, 以秋石斛同株异花授粉种子为材料, 用组织培养方法,通过种子非共生萌发与原球茎诱导, 在原球茎发育的原胚期, 以低浓度混合诱变剂进行多倍体诱导。结果用0.01%秋水仙素+ 5 mg·L ^{- 1}氨磺灵处理8～10 d, 四倍体(2n = 4X = 76) 诱变率达90%以上, 未发现嵌合体。与二倍体对照比较, 四倍体植株粗壮, 叶色深绿, 叶片宽厚。     

姜四倍体离体诱导及其形态学分析

以丛生芽为材料,在离体培养条件下比较了秋水仙素不同浓度、不同处理时间诱导姜体细胞染色体加倍的效果。结果表明:以0.20%秋水仙素液体培养基处理8d的诱导效果最好,诱变率和成活率分别达到了42.86%和70.00%。根尖染色体压片检查发现,四倍体染色体数为2n=4x=44,二倍体对照为2n=2x=22。四倍体与二倍体相比表现出植株高大,茎秆变粗,叶片长、宽、厚均增大,叶片下表皮气孔密度减小,气孔和保卫细胞增大,保卫细胞内叶绿体数增加等特征,其中气孔密度及保卫细胞内的叶绿体数可作为鉴别四倍体与二倍体的重要性状。     

黑皮冬瓜同源四倍体与二倍体解剖学分析

以二倍体及同源四倍体黑皮冬瓜为试材,采用光学显微镜和扫描电镜观察,研究了花粉形态及活力、双受精及胚胎发育情况对二倍体及同源四倍体黑皮冬瓜育性和结实率的影响,以期为同源四倍体黑皮冬瓜自交低稔性机理提供参考依据。结果表明：同源四倍体黑皮冬瓜花粉粒大,异形花粉较多,畸形率达42.43%,花粉活力低,花粉管生长缓慢。同源四倍体黑皮冬瓜存在明显的胚囊解体、退化或败育现象,异常胚囊率约占40%;双受精过程延后1 d,且双受精率低;合子休眠期长,胚发育进程比二倍体晚5 d;胚胎发育过程存在较高频率的胚胎发育滞后、非正常发育的合子、大量巨型胚乳游离核及游离核或胚乳细胞在合子期到球胚期大量提前解体、退化等现象。     

从二倍体柑桔获得三倍体的研究

作者对若干柑桔单胚品种的小种子进行了研究。在授粉后120～150天用胚压片法及实生苗根端细胞染色体计数均确证,除柚子外,单胚性二倍体柑桔品种的小粒种子为三倍体[2n=27=(3x)]。这些小种子的重量约为正常发育大种子的1/3～1/8 ,其出现率依品种而异。三倍体小种子成熟早,充实饱满,发芽良好,较易成苗。利用单胚品种的小种子培育三倍体,方法简便、易于实用,为培育无核柑桔品种提供了新的途径。     

甲基胺草磷诱导大蒜多倍体的研究

以通过生理休眠的紫皮大蒜Z-006-10鳞茎茎尖为试材,利用固体培养基中添加甲基胺草磷的离体诱导方法,研究甲基胺草磷不同处理浓度和时间对紫皮大蒜体细胞染色体的诱导效果,并利用形态观察、根尖细胞染色体计数及流式细胞仪分析等方法对得到的再生植株进行倍性鉴定。试验结果表明：10 μmol?L-1甲基胺草磷处理6 d,四倍体诱导率最高,达32.87%。形态观察结果表明,得到的四倍体植株多倍体形态特征明显,与二倍体植株差异明显。根尖染色体压片观察表明,四倍体染色体数为2n=4x=32,对照为2n=2x=16。流式细胞仪倍性分析表明,四倍体体细胞DNA的相对含量是二倍体的2倍,其结果与染色体计数法鉴定结果一致。     

穿心莲四倍体的诱导及其愈伤组织对肉桂酸胁迫的响应

以不同倍性穿心莲诱导的愈伤组织为试材,采用秋水仙素对穿心莲种子进行四倍体诱导,通过在穿心莲四倍体及二倍体诱导愈伤组织培养基中添加化感自毒物质肉桂酸进行共培养的方法,研究了肉桂酸对不同倍性穿心莲愈伤组织的褐化率、细胞鲜质量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,以期为筛选穿心莲抗化感自毒物质的优良种质资源提供参考依据。结果表明:用0.05%的秋水仙素处理48h,穿心莲种子诱导成活率达89%,经过植株形态、气孔及染色体数目检测,确定了穿心莲四倍体株系PZ-1、PZ-2、PZ-3、PZ-4、PZ-5、PZ-6、PZ-7、PZ-8,其染色体数为4x=96,二倍体为2x=48。在1.00mmol·L^-1肉桂酸的愈伤组织诱导培养基中培养7d,穿心莲四倍体愈伤组织的褐化率和MDA含量较二倍体低,而愈伤组织鲜质量、SOD、POD、CAT活性较二倍体高,显示四倍体较二倍体具有对肉桂酸更强的抵御能力,其中四倍体PZ-7表现出较显著的优异性状。     

大白菜-花椰菜异源多倍体的形态、细胞及分子鉴定

 应用形态学、解剖学、细胞学及分子标记的方法对大白菜与花椰菜的异源四倍体和异源三倍体进行倍性鉴定。结果表明,异源多倍体在植株叶片、花器官和气孔等性状上较其二倍体双亲均表现出巨大性,而气孔密度和结实率则降低,其中异源四倍体比异源三倍体表现更明显。SRAP 分子标记分析表明,异源多倍体中包含了双亲的遗传信息,是双亲间真杂种。细胞学观察显示,异源四倍体的染色体数为2n = 4x = 38,异源三倍体的染色体数为2n = 3x = 29。异源多倍体的获得及鉴定为进一步创制大白菜新种质提供了材料。     

葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚珠的离体培养

为了克服葡萄二倍体品种与四倍体品种之间的交配障碍,进行了杂交胚珠的离体培养研究。发芽胚珠的取样时期集中于授粉后35～75d,其中多数以二倍体作母本的组合在授粉后55d取样的发芽率最高,以四倍体作母本的组合授粉后70d取样的发芽率最高。基本培养模式为:发育培养基-(剥胚)萌发培养基-生长培养基。用二倍体品种作母本时,所有组合均获得了培养苗,在1号培养基上培养的胚珠发芽率高于2号培养基。反交对培养基的要求有相反趋势,其中2个组合未得到培养苗。授粉后60d,直接剥出杂种胚进行培养,得到了最高发芽率。综合分析初步认为,用二倍体品种作母本比用四倍体品种作母本容易获得杂交后代。     

用四倍体夏橙花粉授粉日向夏产生无核果实

日本静冈县柑桔试验场近年来进行了柑桔有核品种产生无核果实的研究。1976～80年研究了日向夏用四倍体夏橙花粉授粉后产生的无核果实。据该场1981年研究报告,用四倍体夏橙花粉对日向夏进行授粉,座果率达57.3％。平均每果含饱满种子0.4粒,秕子19.6粒。用二倍体川野夏橙花粉进行人工和自然授粉,座果率分别为45.8％和0％,人工授粉的平均每果含饱粒种子26.7粒,秕子25粒。虽然四倍体夏橙授粉比二倍体川野夏橙授粉所结的果实日略小一些,但此略小的果实并不影响零售价格,果汁中可溶性固形物、滴定酸的含量或其它果实品质两者均无差别。 本试验日向夏与授粉树没有混栽,但比     

三倍体葡萄柚实生后代多倍体的发掘与SSR遗传鉴定

【目的】从三倍体葡萄柚自然授粉的实生后代中发掘多倍体,希望获得一批多倍体新种质,并为探索三倍体遗传规律奠定基础。【方法】秋季采摘三倍体葡萄柚成熟果实,剥取种子,MT+1 mg·L-1GA3培养基播种,待种子萌发后,用流式细胞仪快速检测其倍性,并采用SSR(simple sequence repeat)分子标记鉴定其不同倍性后代植株的来源。【结果】获得了二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体和疑似非整倍体等不同倍性的再生植株各172、52、7、1、1、18株。用13对多态性SSR引物鉴定其来源,结果表明,由二倍体可能三倍体母本所产生的1X配子与周边其他二倍体品种的花粉授粉而来,也可能由三倍体母本产生的重组型2X配子的无融合生殖而来;三倍体大部分由珠心细胞发育而来;四倍体为杂交起源的四倍体;五倍体和六倍体与母本(三倍体葡萄柚)的带型完全相同。【结论】上述活体材料的发掘为柑橘多倍体育种奠定了种质基础。     

‘寒富’苹果与其同源四倍体耐盐差异研究

以含有200 mmol·L-1 NaCl的1/2 Hoagland营养液处理‘寒富’二倍体苹果及其同源四倍体幼苗8 d,分别在处理0、2、4、6和8 d时进行叶片相关生理指标及水通道蛋白相关基因表达水平的测定,比较分析两者的耐盐性差异。结果表明:盐胁迫下四倍体的形态表现优于二倍体;四倍体和二倍体的叶片相对含水量一直在下降,二倍体下降幅度大于四倍体,丙二醛含量和脯氨酸的积累随胁迫时间的延长而增加,二倍体含量始终高于四倍体;NaCl处理8 d时,二倍体的叶片相对含水量比四倍体低8%,丙二醛含量比四倍体多4.466 nmol·g-1FW,脯氨酸含量为四倍体的1.18倍;盐胁迫下两者叶片中水通道相关蛋白基因Md PIP1;1、Md PIP2;1、Md TIP1;1和Md TIP2;1的表达量均出现先下降后上升趋势,且四倍体均高于二倍体,尤其在处理24 h时差异最显著。四倍体比二倍体具有更强的耐盐性,可能与盐胁迫下四倍体相关水通道蛋白基因表达水平较高有关。     

诱导金鱼草多倍体的初步研究

本文叙述了用秋水仙素水溶液处理金鱼草种子获得多倍体的方法，以及对获得的四倍体金鱼草（2n=32）与二倍体对照苗（2n=16)进行了形态、细胞学及气孔的观察比较。试验结果表明，浓度为0.3--0.5%的溶液处理24小时诱变效果较好，诱变率可达10--11.4%。镜检发现诱变植株的染色体多为混倍体，必须将混倍体形态明显似多倍体的部位进行扦插才可获得四倍体。四倍体金鱼草的形态从子叶期到大苗的各个发育阶段均与二倍体有明显差异，表现为叶子增厚、变形，气孔增大，花瓣增厚、增大，花期晚，自花授粉不孕等。四倍体植株的花粉因减数分裂异常，全部败育，是四倍体自花授粉不孕的主要原因。     

大白菜与结球甘蓝杂交获得异源三倍体及其生殖特性的研究

 为创制大白菜—结球甘蓝异附加系、异代换系、易位系, 利用四倍体大白菜(AAAA, 2n =4x= 40) 为母本与二倍体结球甘蓝(CC, 2n = 2x = 18) 杂交, 采用蕾期去雄授粉、子房培养结合胚珠培养的方法, 获得了异源三倍体(2n =3x = 29, AAC) 杂交后代。该杂交种总体形态偏近于大白菜, 但生长势极强, 株高(开花期) 2 m; 花粉整齐度、花粉生活力都明显低于二倍体大白菜; 减数分裂行为复杂, 终变期除二价体和单价体外, 还有三价体等联会形式; 与二倍体大白菜回交的平均结籽率为3.19%。     

连翘二倍体与四倍体叶片特征比较

2009年采用秋水仙素溶液处理生长点的诱变方法和茎尖细胞染色体计数检测及流式细胞仪倍性鉴定方法首次诱导出连翘多倍体.经茎尖细胞染色体计数检测,变异植株茎尖细胞染色体数目为2n=6条,而原二倍体的染色体数目为2n= 28条,因此,变异植株(2n= 56)为四倍体.经流式细胞仪倍性分析验证,连翘四倍体体细胞DNA相对含量是...     

秋水仙素诱导三种紫薇多倍体的研究

 研究了秋水仙素处理浓度和时间对3种紫薇幼苗染色体加倍的诱导效应,通过染色体计数、流式细胞仪以及形态观察等方法进行了倍性鉴定。结果表明：秋水仙素诱导3种紫薇均得到了四倍体,0.5%～0.8%的秋水仙素处理紫薇和银薇48～96 h的变异率较高,其中以0.5%秋水仙素处理紫薇72 h的变异率最高,达54.17%。根尖染色体压片表明四倍体染色体数为：2n=4x=96,二倍体对照为：2n=2x=48。四倍体表现出叶片长、宽、厚均增大,气孔密度减小,气孔保卫细胞增大,保卫细胞内叶绿体数增加,花粉粒直径增大,花径、花瓣长、花瓣基部爪长均较二倍体明显增加,单朵花观赏价值大大提高。