猪瘟疫苗冻干保护剂的筛选及免疫效果评价

为了筛选耐热性能好、能提高猪瘟病毒(SFV)疫苗经口服途径免疫效果的冻干保护剂,配比不同组分的冻干保护剂与黏膜佐剂LTRG蛋白、SFV按比例混合,通过对冻干工艺的优化,制备了4种.SFV的冻干苗;口服免疫小鼠,测定血清IgG和粘膜IgA抗体效价。结果表明:试验2组即甘氨酸+明胶组和试验4组即明胶组的外观形态较好,水溶后呈现澄清的状态;试验2组和试验4组的冻干苗经口服免疫,诱导小鼠产生的IgG抗体水平显著高于SFV组、SFV+LT组及其他试验组(P0.01)。二免7 d试验2组小鼠肛试子IgA抗体显著高于其他组(P0.01),且小鼠脾脏IFN-γ和IL-4细胞因子的表达量也极显著高于其他组(P0.01)。研究初步筛选出第2组配方,即以甘氨酸和明胶配伍作为猪瘟口服疫苗冻干保护剂,为研制口服途径免疫的猪瘟疫苗奠定了基础。     

新城疫分离株与La Sota疫苗交叉免疫保护性研究

用新城疫(ND)分离强毒油佐剂灭活苗和NDV La Sota油佐剂灭活苗分别免疫带有新城疫母源抗体的雏鸡,免疫后每7d采集血清,用微量血凝抑制试验方法检测HI抗体.并于免疫后第21、28、35 d用鸡新城疫分离毒和NDV F_(48)E_9分别进行攻毒试验,结果显示,免疫鸡的HI抗体水平没有大的差异,分离毒株灭活苗对鸡新城疫强毒感染的免疫保护效力优于La Sota灭活苗.     

应用血凝抑制实验检测雏鸡新城疫病毒抗体

鸡新城疫(Newcastle Diseas)是鸡的烈性病毒性传染病,病原体系副粘朊病毒科(Paramyxovirldae)的单股RNA病毒,称之新城疫病毒(Newcastle Diseas Virus)。目前国内外均应用NDV疫苗予防本病。由于广泛使用鸡新城疫疫苗,成年母鸡不同程度地接受免疫,现已查明本病疫苗主要引起体液免疫,NDV特异抗体—方面保护母鸡,免于强毒NDV的攻击,不致发病,另一方面NDV特异抗体又可经母鸡输卵管,移行入受精卵、主要含在卵黄内。在胚胎发育期及新生雏阶段,卵黄不仅做为营养的来源,同时所含的NDV抗体亦为雏鸡所吸收,使雏鸡体内在一段时间存在NDV特异抗体。这种由母鸡被动地输给雏鸡的NDV抗体,通常又称之母源性抗体,可以在一段时间内为雏鸡提供免疫保护。这是     

益生菌与ND疫苗协同对雏鸡局部黏膜组织抗体生成细胞数量的影响

为探明益生菌能否增强新城疫(newcastle disease,ND)疫苗局部黏膜组织的免疫效果,雏鸡分别于ND疫苗免疫后第0,7,14,21天及新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)攻击7d后或死亡前,采用免疫组织化学方法测定盲肠扁桃体、哈德氏腺和十二指肠派伊尔结的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量的动态变化.结果发现:益生菌协同ND疫苗组雏鸡局部黏膜的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量分别在免疫后7d明显高于ND疫苗单独免疫雏鸡(P<0.05);NDV攻击后,益生菌ND疫苗免疫雏鸡的局部黏膜组织抗体生成细胞数量无统计学差异(P>0.05),表明益生菌是疫苗的理想佐剂之一.     

鸽新城疫HB株水佐剂灭活疫苗的制备及免疫特性

为有效控制临床中赛鸽新城疫的发生,将分离到的鸽新城疫河北毒株(HB株)灭活后制备成水佐剂疫苗,并对其物理性状、安全性、毒性、最佳免疫剂量和抗体产生时间、免疫持续期和保护效果及与鸡新城疫疫苗(LaSota株)对比效果进行检测。结果显示,使用0.10%甲醛37℃灭活16 h可彻底将病毒灭活,并且对病毒的效价影响最小;制备的水佐剂疫苗安全无毒副作用,采用0.3 mL剂量免疫雏鸽后7 d,有较低水平抗体产生,21 d抗体水平达到8.1 log2,28 d达到顶峰9.0 log2;免疫30 d后保护指数为100.0;与鸡新城疫疫苗(LaSota株)进行对比发现,制备的水佐剂疫苗攻毒保护率为100%,而鸡新城疫疫苗(LaSota株)仅为30%;制备的水佐剂疫苗在4℃条件下可保存180 d,20℃条件下可保存90 d。综上,采用鸽新城疫病毒HB株制备的水佐剂疫苗可在免疫后短时间内产生有效抗体,并且在受到强毒攻击时较鸡新城疫疫苗的保护率高。     

牛轮状病毒灭活疫苗的免疫原性研究

制备了牛轮状病毒甲醛灭活疫苗,以小鼠和兔子为模型检测其免疫原性。将本室分离鉴定的牛轮状病毒野毒株（CHLY株）在恒河猴肾细胞系（MA-104）上增殖,制备病毒抗原液。当病毒的感染力达到10^6 TCID50／mL以上时,甲醛灭活,并分别制备油乳佐剂疫苗和铝胶佐剂疫苗,然后免疫试验动物,检测疫苗的免疫原性。小鼠免疫试验结果表明,第2次免疫后所有免疫组均产生了高水平IgC抗体,与对照组差异极显著（P〈0．01）,油乳佐剂疫苗与铝胶佐剂疫苗免疫效果差异不显著（P〉0．05）;兔免疫试验中,免疫组母兔产下仔兔血清中含有高水平的牛轮状病毒特异性抗体,与对照组差异极显著（P〈0．01）。试验表明制备的牛轮状病毒甲醛灭活疫苗具有较好的免疫原性,免疫后可显著提高体内特异性抗体水平。     

板蓝根多糖的制备及其对鸡新城疫Lasota疫苗的免疫效果研究

[目的]研究自制的板蓝根多糖对鸡新城疫弱毒疫苗的免疫效果.[方法]将120只健康从肉仔鸡随机分为板蓝根多糖组、黄芪多糖组以及生理盐水对照组,研究板蓝根多糖对鸡新城疫Lasota疫苗的免疫增强作用.[结果]板蓝根多糖组和黄芪多糖组鸡NDV血凝抑制抗体滴度差异不显著,而板蓝根多糖组和黄芪多糖组鸡的免疫器官指数都显著高于生理盐水对照组.[结论]制备的板蓝根多糖可以用作鸡新城疫弱毒疫苗的免疫增强剂.     

鸡屎藤蒸馏物的免疫增强效果评价

在对鸡进行新城疫免疫的同时,利用鸡屎藤蒸馏物滴鼻,研究了鸡屎藤蒸馏物对雏鸡脾脏、法氏囊等免疫器官和机体抗体水平的影响。研究结果表明,鸡屎藤蒸馏物可显著促进雏鸡脾脏(P0.05)、法氏囊(P0.01)等免疫器官的发育和增长,显著提升雏鸡抗体水平(P0.01)。因此,鸡屎藤蒸馏物可显著增强鸡新城疫疫苗的免疫效果,可开发为鸡新城疫疫苗的免疫佐剂。     

不同佐剂的新城疫疫苗免疫效果的研究

为评价不同佐剂的新城疫(newcastle disease,ND)灭活疫苗对鸡的免疫效果,选用铝胶佐剂、国产油佐剂及进口油佐剂与新城疫病毒抗原混合制成疫苗,免疫雏鸡,探讨不同佐剂的疫苗对鸡的安全性、新城疫的HI抗体水平及攻毒保护率。结果表明,3种佐剂的疫苗注射部位无不良反应;28天时HI抗体分别为28.2、28.5和28.8;56天时HI抗体分别为27.4、28.8和29.2,攻毒后的保护率分别为90%、100%和100%,铝胶佐剂、国产油佐剂、进口油佐剂配制的新城疫灭活疫苗以及对照组攻毒后肛棉拭子NDV阳性率分别为10%、0、0及100%。用进口油佐剂配制的疫苗可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生的效价高、维持的时间长,其效果优于其它佐剂,有望成为ND灭活疫苗的候选佐剂。     

重组金黄色葡萄球菌肠毒素B对禽流感灭活苗的佐剂作用研究

利用大肠杆菌的原核表达体系高效表达SEB基因,获得了SEB重组蛋白(r SEB);通过优化SEB较好发挥免疫效果时的免疫剂量,选取5μg/只SEB分别协同AIV-H9/NDV二联灭活苗和AIV-H5灭活疫苗对2周龄的艾维因肉鸡进行免疫,定期测定HA抗体滴度及淋巴细胞活性以评价SEB的免疫增强效果。结果表明,SEB免疫组的NDV和AIV的HA抗体效价显著高于疫苗对照组(P0.05),r SEB中剂量组(5μg/只)佐剂效果明显(P0.05);SEB协同免疫组的淋巴细胞活性在免疫后第15天达到峰值,随后逐渐下降,至第25天与疫苗对照组相比,差异仍然显著(P0.05)。