应用酶联免疫吸附试验法鉴定几种主要马铃薯病毒

制备了PVX,PVY_o,PVY~n,PVA,PVS,PVM,PLRV和TRV等8种主要马铃薯病毒抗体的辣根过氧化物酶结合物,在检测黑龙江省马铃薯主栽品种克新一、二、三、四号等品种的植株样品1155份和800余份正在脱毒中的试管苗样品中,发现上述8种马铃薯病毒在几个主栽品种中的侵染率较高,而且大多数感病植株是由3至7种病毒复合侵染,并首次查明本省存在PVY~n和PVM病毒。对不带上述8种病毒的样品又用双向反向聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定带马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle Tuber Viroid)状况,现已获得无上述8种病毒和类病毒的种植材料。     

马铃薯病毒卷叶与生理卷叶的区别

马铃薯卷叶病毒是一种分布很广的马铃薯病毒。该病毒很容易通过块茎传播和蚜虫介体传播 ,属持久性病毒。感染卷叶病毒的马铃薯主要表现为叶片呈卷叶症状 ,植株生长受阻 ,块茎变小。在实际生产中 ,无论是大田中种植的还是试管中培育出的植株所表现出卷叶症状 ,凭目测较难确定是病毒性卷叶还是生理卷叶 ,现介绍两种较为简便的方法 ,供鉴定时使用。１．苯酚溶液测定法。配好５ｍｌ的６ %苯酚溶液 ,取被鉴定的马铃薯植株和叶片的汁液５ｍｌ,将两者混合后 ,放置５ｍｉｎ～１０ｍｉｎ,直到细胞和叶绿素残余沉淀为止 ,然后将液体倒出去 ,再加入５ｍ…     

巴西首次在马铃薯上报道番茄褪绿病毒

2011年6月,在巴西Goiás州Cristalina县的一个商业种植园中发现一些马铃薯植株的叶片特别是老叶表现叶片卷曲、脉间褪绿等症状,并且该种植园B型烟粉虱(Bemisia tabaci)发生严重。从表现症状的植株上采集4个块茎样品,用于检测马铃薯植株是否受到以下4种病毒的侵染:番茄褪绿病毒(Tomato chloro-     

西藏高原的生态条件对于马铃薯花叶型退化的影响

1959至1961年的试验结果表示,我国平原地区的马铃薯主要早熟品种“男爵”和“大名红”的已退化块茎调到海拔3800公尺的西藏日喀则地区栽培后,皱缩花叶症状逐年减轻。自然感染或人工接种马铃薯 x 和 y 病毒的盆栽植株,如果每天夜间移到温室中,就会增加花叶型退化的程度。这说明西藏的夜间低温起着保持马铃薯对花叶病毒耐病力的主要作用。     

纳米磁珠结合实时荧光RT-PCR技术检测大丽花潜隐类病毒

正大丽花潜隐类病毒(Dahlia latent viroid,DLVd)是Verhoeven et al.(2013)用Return-PAGE和s-PAGE技术从大丽花中鉴定出的一种新类病毒。根据2015年国际病毒分类委员会分类报告,DLVd为马铃薯纺锤形块茎类病毒科啤酒花矮化类病毒属成员。该病毒单独侵染时,大丽花没有明显的症状,其与马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)复合侵染时可使大丽花叶片卷曲(Tsu-     

馬鈴薯病毒性退化类型的病情記載及損失估計方法

不同类型、不同程度的病毒性退化对马铃薯产量带有不同的影响,单纯计算退化株率,不能反应退化的程度和估计产量损失。有些研究工作者,曾根据病情轻重划分若干等级,采用加衡平均的方法,计算其退化指数(或病情指数),这种方法比用退化株率较于接近实际情况;但是,由于马铃薯的病毒种类很多,症状多种多样,并且往往几种毒病同时发生,而各种毒病对马铃薯的影响也不相同。在同样的病毒退化指数下,花皺叶或卷叶比重大的病田,要比花叶型多的减产重,这就更增加了病情     

几种内吸杀虫剂用作土壤施药对马铃薯棉蚜防治效果的比较

在印度,桃蚜Myzus Persicae Sul-zer;棉蚜Aphis gossypii Glover和豆卫矛蚜Aphis fabac Scop.是马铃薯上的重要蚜虫(Verma,1977)。而且,由于这些蚜虫吸取植物汁液,还起着病毒病传病媒介的作用,使马铃薯块茎退化而不适宜作种用(Rutaul和Misra,1979)。在印度,由于卷叶病毒和马铃薯y病毒造成的马铃薯产     

4个马铃薯品种感染马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）的症状

马铃薯纺锤块茎类病毒在中国及世界许多国家都是检疫性病害, 该病害可大幅度降低马铃薯产量和品质。根据植株及块茎的症状, 汰除感病的马铃薯种薯, 是控制PSTVd传播和危害的重要手段。本研究利用分子克隆及测序技术, 分离并鉴定了PSTVd的分离物351-17, 利用PSTVd田间接种技术, 分别接种了4个黑龙江省常用的马铃薯品种‘夏坡地’、‘克新18’、‘荷兰15’和‘尤金’, 对其侵染后第一代的株高、叶片、块茎外观和单株产量进行了调查, 结果表明：4个供试马铃薯品种感染PSTVd后均表现出了一定的症状, 其中‘克新18’在株高、叶片和块茎的症状方面最为明显, 单株产量下降显著, 表明其对PSTVd非常敏感。     

马铃薯花叶型病毒性退化问题的展望

马铃薯退化是一个很复杂的问题。当我们说病毒性退化时,我们就已经承认了有其他性质的退化,例如遗传的和生理的。病毒性退化的特征在于具有感染病毒的一定症状并且发生得较快。卷叶和花叶(后者包括皱缩、矮化,坏死斑等复合症状)是病毒性退化的两个主要类型。花叶型主要发生在南部平原地区和春季播种的条件下,正是花叶型病毒性退化成为限制我国马铃薯生产的主要因素。     

福建省福清地区马铃薯病毒病病原的分子检测

2017年调查福建福清地区马铃薯病毒病的发生情况,以明确该地区马铃薯主要病毒病原。共采集了46份疑似感染病毒的马铃薯植株,提取总RNA,利用RT-PCR技术进行分子检测,结果表明,福清地区危害马铃薯的病毒有马铃薯Y病毒Potato virus Y(PVY)、马铃薯卷叶病毒Potato leaf roll virus(PLRV)、马铃薯S病毒Potato virus S(PVS),检出率分别为56.52%、17.39%和10.87%,以PVY检出率最高,说明PVY是危害该地区马铃薯样品的主要病毒病原。通过病毒复合侵染进行分析,发现该地区存在病毒复合侵染马铃薯现象。研究结果可为福清地区马铃薯种薯的引进和病毒病害防治提供参考依据。     

马铃薯纺锤块茎类病毒的检测和防治

马铃薯纺锤块茎类病毒病(potato spindle tuber viroid,PSTVd)是一种严重为害马铃薯生产的病害,降低产量20%—30%。防治的主要措施是应用无类病毒的种薯。由于目前还没有脱掉类病毒的有效措施,只能从未被饱和侵染的群体中鉴定筛选出未被侵染的个体,再脱掉其它病毒,作为核心繁殖材料。1987年以来,利用自制的电泳设备,以往复聚丙烯酰胺凝胶电泳法(return-polyacrylamide gel electrophoresis,R-PAGE)检测类病毒,筛选出未感病的个体,再用茎尖组织培养法脱掉其它病毒。经用马铃薯卷叶病毒等8种病毒酶标抗体鉴定筛选,获得既无类病毒也无主要马铃薯病毒的克新1、2、3和4号等主栽马铃薯品种的核心种。并已提供给省内外的良种场繁殖推广。1989和1990年抽样检测克山良种场繁殖的原种、一级和二级良种,未检测到类病毒。     

脱毒马铃薯无公害栽培及主要病虫害防治

威宁县马铃薯种植面积8万hm2,年产量15亿kg,属西南地区马铃薯种薯基地之一,但因马铃薯长时间种植.感染X、Y病毒,导致品种退化,引起产量剧减.     

马铃薯病毒病的危害及防治

马铃薯病毒病 (Ｐｏｔａｔｏｖｉｒｕｓ)在我国分布较广 ,为害也较严重 ,感染病毒的马铃薯 ,通过块茎积累 ,使块茎品质变劣 ,产量逐年降低 ,一般减产 2 0 %～ 5 0 % ,严重的达 80 %以上。马铃薯病毒病是一个包括多种病毒病的综合名称 ,主要包括普通花叶病、条斑花叶病、卷叶病、纤块茎病及丛枝病。1　症状与病原1.1　普通花叶病由马铃薯Ｘ病毒 (ＰｏｔａｔｏｖｉｒｕｓＸ ,简称ＰＶＸ)引起 ,大多数品种都感染此病毒 ,但有些品种不表现症状。表现的症状有轻花叶、坏死性叶斑、矮化以及植株由下向上枯死 ,块茎变小。该种病毒颗粒体为弯秆状 ,5…     

北京地区辣椒上黄瓜花叶病毒和甜菜西方黄化病毒复合侵染的分子鉴定

辣椒是我国重要的蔬菜和经济作物,受多种病毒危害。2014年在北京市顺义区调查时发现部分种植的辣椒植株上叶片大面积黄化,边缘症状明显,个别植株叶片轻微上卷。提取典型症状样品的总RNA,反转录得到cDNA,分别用黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)特异引物和马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus)通用引物进行PCR检测,CMV特异引物和马铃薯卷叶病毒属通用引物分别扩增得到约650bp和1 400bp的特异条带。测序和核苷酸序列比对表明,其分别与CMV和甜菜西方黄化病毒(Beet western yellows virus,BWYV)序列同源性最高为99%和96%。这是对我国种植的辣椒上发生的CMV和BWYV复合侵染的首次报道。     

类病毒

1971年,美国科学家迪纳发现了一种新的具侵染力的致病微生物,叫做类病毒。这种植物新病原能够为害一些有重要经济价值的植物,造成重大损失,已报导了七种植物类病毒病害。例如:在菲律宾,由类病毒引起的椰子树死亡病,曾使1,500万棵椰子树死亡。 大约在六十年前,就知道有一种马铃薯病害,会使马铃薯植株矮化,叶片卷曲、皱     

外源水杨酸对连作马铃薯生长发育及抗性生理的影响

探讨了不同浓度外源水杨酸处理对连作马铃薯幼苗生长发育、耐连作障碍、抗氧化能力以及块茎营养的影响。结果表明：5年连作导致马铃薯幼苗叶片中叶绿素含量、净光合速率、细胞膜稳定指数、渗透调节物质含量、抗氧化剂含量、抗氧化酶活性显著下降,块茎产量和硬度降低,块茎淀粉、Vc、可溶性蛋白含量下降,叶片MDA含量、活性氧水平显著增加,植株生长发育受到显著抑制;在施用外源水杨酸处理后,马铃薯幼苗的相对含水量增高,叶绿素含量、净光合速率、 根系活力和细胞膜稳定指数增强,生长得到促进,植物叶片内渗透调节物质含量、抗氧化剂含量、抗氧化酶活性提高,块茎产量、硬度以及块茎淀粉、Vc、可溶性蛋白含量增高,叶片MDA含量、活性氧水平显著降低;比较不同浓度的外源水杨酸处理,以20 μmol·L^-1和30 μmol·L^-1对促进马铃薯连作幼苗生长发育及缓解连作伤害效果最佳,其中对于连作5年的马铃薯,30 μmol·L^-1外源水杨酸处理相比于对照块茎产量相对增加64.4%,而叶片净光合速率相对增加287.0%。可见,适宜浓度的外源水杨酸处理显著减轻了连作障碍造成的伤害,促进了马铃薯植株的生长发育,提高了马铃薯块茎的产量,并改善了块茎的营养与品质。     

基于小RNA深度测序和RT-PCR检测侵染广东省冬种马铃薯的病毒

为明确侵染广东省冬种马铃薯的病毒种类及优势病毒,结合小RNA深度测序技术及RTPCR检测方法,对采集于广东省冬种马铃薯7个主产区的189份疑似病样进行检测分析。结果表明,经小RNA深度测序技术检测马铃薯病毒病混合样,发现存在马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)和马铃薯卷叶病毒(Potato leaf-roll virus,PLRV)3种病毒。进一步设计3种病毒的特异性引物并利用国内已报道的其它5种马铃薯病毒的特异性引物进行RT-PCR检测,发现189份马铃薯病毒病疑似病样中仅检测到PVY、PVS和PLRV这3种病毒,检出率依次为75.13%、10.05%和4.76%,且3种病毒在马铃薯上还存在复合侵染,复合侵染率为14.19%,其中PVY在各马铃薯产区均可检测到。表明侵染广东省冬种马铃薯的病毒为PVY、PVS和PLRV,其中PVY是优势病毒。     

甘肃省18种药用植物病毒病调查及2种病毒病的鉴定

2012年6月至2013年9月对甘肃省宕昌县、漳县、岷县、渭源县、陇西县、临洮县等地区种植的具有疑似病毒病症状的半夏等18种药用植物进行调查及采样。采用黄瓜花叶病毒(CMV)、苜蓿花叶病毒(AMV)、烟草花叶病毒(TMV)、番茄花叶病毒(ToMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯X病毒(PVX)、芜菁花叶病毒(TuMV)等7种双抗体夹心免疫酶联检测(DAS-ELISA)试剂盒初检, 并对CMV和ToMV采用反转录PCR(RT-PCR)方法复检, 结果表明, 半夏、掌叶大黄和红花3种药用植物受到黄瓜花叶病毒(CMV)侵染; 马兜铃、土贝母及当归3种植物受到番茄花叶病毒(ToMV)侵染; 样品中未检测到上述其他病毒种类, 其余12种病毒样品的病原尚未确定。本研究为国内首次报道CMV病毒侵染掌叶大黄、红花, ToMV病毒侵染马兜铃、当归和土贝母。此研究为防治上述病毒病提供了依据。     

腐烂茎线虫在马铃薯不同组织中的数量动态

腐烂茎线虫病是近年来我国马铃薯生产中的一种新病害, 了解腐烂茎线虫的侵染规律对该病害的预防和控制及对马铃薯产量和品质提高具有重要意义。本研究采用盆栽法, 在苗期接种腐烂茎线虫, 研究该线虫在马铃薯不同组织中的数量动态及危害程度。结果显示, 在发芽-幼苗期(播种0 ~ 75 d), 母薯先受到腐烂茎线虫侵染; 在发棵期(播种75 ~ 90 d), 母薯和匍匐茎均检测到腐烂茎线虫; 在结薯期到成熟期(播种90 ~ 105 d), 线虫开始危害新生块茎, 随着块茎膨大危害逐渐加重。在马铃薯成熟期, 症状表现最明显, 新生块茎中线虫数量最多, 可达767.67条/g。不同时期的接种试验表明, 在匍匐茎形成期(播种后70 d)接种, 马铃薯受害最为严重, 发病率达100%, 块茎中线虫密度最高, 达到99.32条/g, 且块茎鲜重最低, 为14.02 g/个。本研究结果可为马铃薯腐烂茎线虫的适时有效防治提供参考。     

马铃薯种苗复合感染病毒多重RT-PCR同步快速检测

 基于马铃薯病毒ssRNA的快速制备方法,根据马铃薯病毒CP基因序列设计PVX、PVS、PVY和PLRV特异性引物对、P1基因序列设计PVA特异性引物对,建立了多重RT PCR快速检测体系,可以同步检出复合侵染马铃薯种苗主要病毒,灵敏度比传统的ELISA至少高100倍。结合生物活性稳定剂研制的固相化检测试剂盒,已用于四川和重庆等15个县市田间与苗圃248个马铃薯显症或无症样品的实际检测,表明四川和重庆地区2~3种马铃薯病毒往往复合侵染(PVX、PVA和PVS三种病毒复合侵染或PLRV和PVY二种病毒复合侵染)。