山茶花组织培养过程中的防外植体褐化试验

针对山茶花组织培养过程中外植体出现褐化的问题,用山茶花的嫩茎段及芽尖为外植体作不同的处理试验,以比较其减轻外植体褐化的效果。得出的结论为:黑暗条件下培养外植体、用1/1000抗坏血酸处理外植体、在培养基中加入一定比例的活性碳、在接种前再剪去一部分茎段外植体、对外植体勤转瓶这些措施在一定程度上可以减轻山茶花组培过程中外植体的褐化程度,从而提高其组培的成功率。     

桂花茎尖初代组织培养试验研究

以桂花中的盒桂品种群为试验材料,对初代培养中的外植体的取材时间、消毒方法、消毒时间,植物生长调节剂的种类及浓度水平等因子进行了探讨和初步研究。结果表明根据当地当年的气候特点结合桂花的生长物候期特点确定萌发芽的取材时间,一般在每年的2—3月份;以金桂萌发芽消毒对象,消毒时间控制在3—7min内较合适,5min最适;以茎尖作为培养对象能够获得高达86．1％的诱导率。     

红锥优树外植体褐化抑制方法研究

植物组织培养技术是红锥（Castanopsis hystrix）优树无性化推广的重要途径,但外植体诱导培养过程中的褐化现象严重影响了其高效组织培养再生体系的建立。文章通过对红锥外植体取材季节、木质化程度、灭菌处理、光照等技术要素以及防褐化剂种类等进行生长对比试验,结果表明：外植体取材季节对褐化率无显著影响;外植体木质化程度对褐化率有极显著影响（P ＜0．01）;采用75％酒精进行外植体灭菌与未采用酒精的外植体相比,褐化率增加15．0个百分点,褐化程度加剧,其中采用2 min 的新吉尔灭（1％）＋2．5 min 升汞（0．1％）两者结合进行灭菌效果较好;低温预处理外植体及暗培养均未达到抑制褐化的效果;添加防褐化剂 PVP 80 mg·L －1、VC 1．0 g·L －1均能有效抑制褐化,褐化率分别为33．3％、12．2％,且腋芽长势好。     

雷公藤组织培养中嫩叶外植体褐化的控制

以雷公藤当年生嫩叶为材料进行离体愈伤组织诱导培养,研究了不同处理对减轻外植体褐化率的影响。结果表明:初代愈伤组织诱导时选用液体培养基,能有效降低褐化率并延迟褐化发生时间;接种前后的特殊处理,如接种前在1.0 g/L PVP溶液中切割外植体,接种后在暗培养和冷藏条件下预处理,均能有效延迟褐化发生时间;转接时间缩短到3 d,能很好地保证愈伤组织的诱导效果,又在一定程度上降低褐化率;在培养基中加入低质量浓度(0.02 g/L)的硝酸银,能在保证有愈伤组织产出的前提下,降低雷公藤外植体的褐化。     

多倍体连翘外植体初代培养

为了实现多倍体连翘的快速繁殖,以多倍体连翘幼嫩叶片、茎尖、茎段为外植体,开展了初代培养的试验研究.结果表明:茎段比茎尖和叶片更适合作为多倍体连翘芽诱导的培养材料;基本培养基为MS培养基.适合腋芽诱导的培养基配方为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L.诱导产生的新芽生长迅速,而且长势较壮,有利于组织培养的进一步研究.     

植物组织培养中褐变的研究进展

褐变是植物组织培养中存在的一种常见现象，目前已成为组织培养中的一大障碍。对导致褐变产生的因素、褐变的防止措施等研究现状进行了综合评述，并从外因及内因两方面归纳了减轻褐变的方法。     

华盖木组织培养过程中PPO活性及总酚含量与褐化的关系研究

以华盖木4年生嫁接苗当年生枝为外植体,在初代培养过程中每周测定外植体的多酚氧化酶(PPO)活性及总酚含量,并统计外植体的褐化率,对华盖木初代培养过程中外植体的褐化与PPO活性及酚类物质含量的关系进行分析。结果表明:华盖木外植体的总酚含量于接种后第2周时达到最大值2.4445mg/g。此后又快速下降。接种后1周内酶活性快速增加,第1～3周,酶活性又大幅度下降,第3～4周酶活性下降速度减缓。接种后第2、3周是褐化的高发生期,第3周后褐化率的增长较慢。外植体的褐化受着PPO活性和酚类物质含量的共同影响。     

紫叶稠李组织培养过程中防止褐化的研究

以紫叶稠李腋芽为材料,研究消毒剂、消毒时间,基本培养基,植物生长调节物质质量浓度,抗褐化剂,光照强度及暗培养对其组织培养过程中褐化的影响。结果表明:70%酒精浸泡30 s、0.1%Hg Cl2消毒10 min,最适基本培养基WPM,BA 0.5 mg·L-1、NAA 0.1 mg·L-1和IBA 0.05 mg·L-1,VC 300 mg·L-1,光照强度1 500 lx,暗培养3~6 d,均能降低紫叶稠李腋芽褐化,提高诱导率,且腋芽生长良好。     

珍稀濒危植物珙桐初代培养研究

以珙桐芽体为试材,采用WPM、1/2 MS、B5三种基本培养基,附加6-BA、NAA、GA34因素3水平正交实验设计,同时研究了不同外植体消毒时间、剥离方式、芽体长度对珙桐初代培养的影响。结果表明:用75%酒精30 s+0.1%HgCl220 min消毒效果较好,外植体长度大于0.5 cm,剥离芽体至剩余鳞片叶1~2个的处理方式有利于降低污染率,最佳芽诱导的培养基配方为:WPM+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+AC 0.5 g/L。     

防止紫叶黄栌组织培养中外植体褐变的研究

文章研究了紫叶黄栌组织培养过程中,取材时期、灭菌时间、培养基中附加物种类和浓度对外植体褐变的影响。结果表明,1月取休眠枝条水插培养后抽生的嫩茎作外植体,经0.1%HgCl2灭菌2~3min,外植体褐变程度最轻。培养基中添加1.0 mg.L-1Vc可以有效抑制褐变的发生。     

核桃离体培养中外植体褐化的研究

对核桃离体培养中外植体的褐变进行了初步研究，结果表明：4月份取嫩枝茎段进行培养，效果最差，褐变死亡率高，取6月份半木质化茎段进行培养，效果较好，休眠芽次之。液体状态的培养基可以减轻外植体褐变。培养基中附加激素6-BA和IAA、GA时，外植体的褐变程度较低，外植体腋芽萌发与生长分化较好。培养基中加入硫代硫酸钠对防止外植体褐变。提高外植体萌芽率和有效新梢率有促进作用。     

丽格海棠外植体组织培养的研究

以丽格海棠的叶片、叶柄和茎段作为外植体进行组织培养,研究适宜丽格海棠组织培养的最佳外植体、不同部位外植体不定芽分生的最佳培养基、继代增殖的培养基和组培苗的生根培养基。结果表明:不同部位外植体不定芽的再生率:叶片>茎段>叶柄,叶片的最佳培养基为:MS+1mg/LTDZ+0.1mg/L2,4-D或MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ,叶柄的最佳培养基为:MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ,茎段的最佳培养基:MS+1mg/LTDZ+0.1mg/L2,4-D或MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ;不定芽继代增殖的最佳培养基为MS+2mg/L6-BA+0~0.1mg/LNAA;组培苗生根的最佳培养基比为MS+0.1~0.3mg/LIBA。     

华盖木组织培养中褐化控制研究

以木兰科濒危植物华盖木顶芽为试材,对其组织培养过程中褐化的发生及防止措施作了系统研究,结果表明:选取华盖木下部枝条顶芽为外植体,选用1/2MS为基本培养基并附加O．1～1．5 mg/L BA和0．1～1．0mg/L IBA,适当提高培养基硬度,培养初期适宜的低温处理是褐化控制的有效措施;聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、二硫苏糖醇(DTT)、抗坏血酸(VC)3种防褐化剂对褐化的抑制作用较为明显,其效果PVP>DTF>vC。     

板栗组培过程中褐变研究初探

通过研究板栗组织培养过程中愈伤组织过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性，结果表明，在板栗愈伤组织培养过程中多酚氧化酶(PPO)的活性与培养材料的褐变程度有一定的相关性，酶活性高，愈伤组织褐变严重。但过氧化物酶(POD)与褐变的关系不明显。通过在培养基中添加不同浓度的活性炭、抗坏血酸，以及培养于不同光照条件和不同培养温度，能够有效抑制多酚氧化酶的活性，减轻褐变程度，提高愈伤组织的产量和质量。     

核桃组织培养中外植体材料的初代培养研究

以3个核桃品种为试材，对初代培养中外植体的消毒方法、取材时间、培养基和外植体类型等因子对离体培养的影响进行了初步研究。结果表明：二次升汞消毒法可以提高休眠芽的消毒效果：以嫩枝茎段为外植体时适宜的取材暑期为6月，以腋芽饱满半木质化的培养效果较好；适宜的培养基类型是DKW和1/2MS，嫩枝茎段的培养效果要好于休眠芽；3个品种间离体培养特性存在差异。     

朱砂根组织培养防褐化探讨

探讨了朱砂根继代培养中抗氧化剂(维生素C、L-半胱氨酸、硫代硫酸钠)和吸附剂(活性炭、聚乙烯吡咯烷酮)对外植体褐化的影响。结果表明:培养基中添加活性炭3 g.L-1,继代周期控制在30 d之内,平均褐化率可控制在18.89%,效果最理想;培养基中添加维生素C 0.2 g.L-1也能有效控制褐化,但整体效果不如活性炭。     

不同外植体激素对引鸟花楸组培繁育的影响

通过进行不同外植体激素对引鸟花楸组培繁育的影响试验,结果表明：用于引鸟花楸组织培养的外植体,分化率最好的是顶芽,其次是腋芽、嫩枝和叶片;分化周期最短的是腋芽;污染率最低的是顶芽;褐化率最高的是嫩枝,生产中采用顶芽比较有利于提高生产率;组培苗的最适培养基为 MS ＋ BA0．5。     

油茶不同外植体灭菌条件研究

以油茶种子、茎段为外植体,采用酒精、升汞、高锰酸钾3种灭菌剂,探讨不同处理对外植体污染和种子萌发的影响。结果表明,油茶茎段较好的灭菌方法:毛刷刷洗+75%酒精10~15 s+0.1%HgCl 10~15min,污染率最低为24.5%;新萌条较好的灭菌方法:75%酒精4~7 s+0.1%HgCl 5~6 min,污染率最低为14.3%;种子灭菌的条件:0.5%KMnO40~24 h+75%酒精3~15 min+0.1%HgCl 20~40 min(不剥壳去皮),75%酒精30 s+0.1%HgCl 8 min(剥壳去皮),这2种处理污染率均较低,种子发芽率相差不大。该结果为油茶再生体系的建立奠定基础。     

大别山山核桃组培中防褐变措施的研究

以大别山山核桃为试材，对其分化生长过程中的揭化现象进行研究。经过多次试验初步表明：采用不同树龄及不同部位的茎尖，对揭变现象有着明显的不同影响；为抑制揭变及保证茎尖正常分化生长，先将茎尖接种于1／2MS 2g活性炭的培养基中．置于5℃冰箱中暗培养7d后取出，再转接于DKW 6-BA(1．0mg／L) IAA(0．01mg／L) 5mL 20％硫带硫酸钠的培养基中，置于25℃室内光照环境下培养，每隔3～5d转换1次培养基，能有效地抑制褐变，确保核桃茎尖在整个培养过程中正常分化生长。     

蝴蝶兰组织培养过程中减轻外殖体褐化的方法研究

采用表面活性剂（Tweens20）20×10^-6处理10min、70％酒精浸泡30s、0．5％的次氯酸钠溶液浸泡5min的方法消毒外殖体最佳；采用带腋芽的、抽4节的花梗为外殖体诱导率最高为90．2％，褐化系数最低9．8％；培养基中添加10mg／LAA和1000mg／LPVP抗褐化效果较好；添加了2000mg／L或1000mg／LAC的培养基褐变比对照轻；在诱导阶段蔗糖采用低浓度诱导效果较好；先采用低温（17～20℃）处理3～5d，然后转到正常温度培养，可以减轻褐化程度；增加光照强度外殖体褐变严重，黑暗培养的外殖体褐变发生推迟而且程度轻；蝴蝶兰在pH5．6时，褐化较轻。