丹红杨愈伤组织诱导与器官再生的影响因子分析

采用正交设计,首次建立了丹红杨离体培养技术体系.结果表明:丹红杨叶片最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.20 mg/L+6-BA1.00 mg/L,诱导率为57.50%;叶柄、无芽茎段最佳胚性愈伤组织培养基诱导为MS+6-BA0.30～0.80 mg/L+ZT0.30～0.80 mg/L+NAA0.02～0.05 mg/L,诱导率为82.26%;根最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.00 mg/L+KT0.50～1.00 mg/L+NAA0.50～1.00 mg/L.胚性愈伤组织增殖最佳培养基为MS+BR0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L.胚性愈伤组织分化不定芽最佳培养基为WPM+6-BA0.20 mg/L+TDZ0.001～0.003 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.05～0.10 mg/L.     

南蛇藤愈伤组织的诱导和植株再生

以南蛇藤无菌苗子叶、上胚轴及幼根为材料,比较研究不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导、分化及植株再生。结果表明:上胚轴是诱导产生胚性愈伤组织的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5¹.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.11.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.1⁰.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.00.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.0².0mg/L)+NAA(0.1mg/L),增殖系数平均达7.05;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L,生根率达88%。     

短柄五加愈伤组织诱导及再生体系的建立

以短柄五加(Acanthopanax brachypus Harms)当年生嫩枝为材料,选择叶片、叶柄为外植体,使用6-BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行短柄五加愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽增殖培养基的最佳配方,建立短柄五加植株的再生体系。结果表明,短柄五加叶片是较适宜诱导愈伤组织的外植体,愈伤组织诱导的培养基是MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率为75.0%;愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,不定芽诱导率为100%;适宜不定芽增殖的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为5.80;同时活性炭能够有效防止愈伤组织诱导过程中的褐化问题。     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

胡杨组培快繁技术研究

利用胡杨花序轴为外植体的组织培养技术,选出最适合胡杨花序轴愈伤化的培养基为B5+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L,诱导率达98.7%;愈伤增殖培养基较适宜的为B5+6-BA1mg/L+NAA1.25mg/L和MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L;芽分化培养基中较适宜的是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L和LS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L。壮苗培养基以1/2MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L为宜,此培养基得到的苗叶色浓绿,较粗壮。而以1/2MS为基本培养基,添加1.5～2.0mg/LIBA有利于胡杨组培苗的生根。     

窄冠白杨3号组培与快繁技术研究

以窄冠白杨3号单芽茎段为实验材料,对适合芽分化、生根的培养基进行了研究,结果表明,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D4.0 mg/L,诱导芽分化最佳培养基为MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.25mg/L+IAA0.25mg/L,最佳生根培养基为MS+6-BA0.01mg/L+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。     

北五味子组织培养研究

通过对北五味子(Schisandra chinensis)不同外植体诱导愈伤组织,进行不定芽分化、生根培养基优化筛选。结果表明:选用嫩叶作为外植体诱导愈伤组织的效果较好;培养基MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+NAA2.0mg/L为不定芽的分化最佳培养基组合,分化倍数可达4.7;生根阶段最适培养基为1/4MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+活性炭0.5g/L,生根率为89.13%,平均根长为3.1cm。     

3种牡丹的胚培养及植株再生研究

以牡丹胚为外植体,研究了不同牡丹的胚在不同培养条件下,愈伤组织和丛生芽的诱导、芽的生长及生根情况。结果表明:适合牡丹无性系建立的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+Vc100mg/L;适合3种牡丹胚生长的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+CH100mg/L;适合3种牡丹丛生芽产生的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+CH100mg/L;适合3种牡丹生根的最佳培养基为1/2MS+IAA1.0mg/L+IBA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,其中,朝霞生根效果最佳,生根率可达82.35%。     

银白杨不定芽诱导与增殖分化研究

为建立优良银白杨离体快繁再生体系,培育速生高产的银白杨苗木,以西藏银白杨叶片、茎段作为不定芽诱导的初始材料,以MS为基本培养基,对不定芽诱导中产生的愈伤组织进行二次不定芽诱导,研究不同激素浓度及配比对银白杨不同材料不定芽诱导与增殖分化的影响。研究表明:6-BA∶NAA为5∶1是银白杨不定芽诱导的最优激素浓度配比,银白杨不定芽诱导的最佳培养材料为当年生带腋芽茎段;6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+KT(0.2mg/L)为愈伤组织诱导不定芽最优激素浓度组合;不定芽增殖的最优激素7浓度组合为6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.2mg/L)+KT(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L),平均增殖系数最高。综合考虑得出:MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)为银白杨不定芽诱导分化的最佳培养基,不定芽诱导的最佳材料为银白杨当年生带腋芽茎段;愈伤组织不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+KT(0.2mg/L);不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA(1.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+KT(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L),pH5.8。     

钙果4号愈伤组织的诱导和植株再生

以钙果4号的茎尖和带芽茎段为材料,接种在不同浓度激素配比的培养基中,研究愈伤组织诱导、分化及植株再生。结果表明:钙果4号芽启动培养以MS+BA0.5mg/L;愈伤组织诱导和分化以MS+BA(1.0～2.0)mg/L+NAA0.5mg/L;芽增殖以MS+6-BA(0.3～0.5mg/L)+NAA0.05mg/L最理想。添加一定浓度(0.2mg/L)的IAA生根效果均好于单独使用IBA、NAA或三者配合使用,生根率可达72.3%。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

刺槐组培快繁体系的建立

以刺槐(Robinia pseudoacacia Linn.)成熟种子为材料获得无菌苗,以MS或1/2MS为基本培养基附加不同浓度的植物激素,分别用无菌苗的叶片、茎段和上胚轴进行愈伤组织诱导、分化,芽增殖及不定根诱导。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体为茎段和上胚轴,其最佳配方均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;茎段产生的愈伤组织分化效果最佳,其最佳配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA(0.1～0.2)mg/L;芽增殖的最佳配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,增殖系数高达15.4;生根的最佳配方为1/2MS+IAA(0.5～1.0)mg/L,生根率达100%。移栽后植株生长良好,成活率达97%。     

楸叶泡桐杂种无性系9503的组织培养技术研究

以楸叶泡桐和白花泡桐杂交无性系的枝条为外植体,开展了离体芽增殖技术,以及愈伤组织诱导、芽分化和不定芽生根等组织培养技术的研究。结果表明,增殖培养基采用MS+8mg/L6-BA+0.3mg/LNAA,不定芽的增殖倍数可达到9;利用其叶片进行愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+12mg/L6-BA+0.4mg/LNAA,诱导率高达95%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+10mg/L6-BA+0.7mg/LNAA,不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+0.5mg/LIBA+0.3mg/LNAA,生根率100%。     

芽变毛白杨组织培养初步研究

以芽变毛白杨幼嫩枝条为外植体进行愈伤组织和茎段组织培养试验研究。结果表明:芽变毛白杨诱导愈伤组织培养基为:MS 6-BA 2.0~4.0 mg/L 2,4-D 1.5~2.0 mg/L NAA 0.25 mg/L KT 2.0~4.0 mg/L 3%蔗糖,愈伤组织分化芽培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L KT 2.0 mg/L 3%蔗糖时,培养效果好。茎段培养时,适宜无根苗生长的培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.1 mg/L 3%蔗糖,生根诱导适宜的培养基为1/2MS IBA 0.5~1.0 mg/L 1.5%蔗糖。     

药食两用紫苏组织诱导及快繁体系的建立

以MS培养基为基本培养基,以紫苏的幼嫩茎尖、带叶腋芽和嫩叶为外植体,比较了不同激素及其组合对紫苏愈伤组织诱导的影响。结果表明,最佳培养基组合为:诱导培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L;再分化培养基MS+6-BA3.0mg/L;增殖培养基MS+6-BA2.0mg/L;生根培养基1/2MS+NAA0.2mg/L。     

三角梅愈伤组织诱导和植株再生

以三角梅(Bougainvillea glabra choisy.)当年生枝条为材料,比较研究不同激素配比条件下外植体愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:三角梅茎段在MS+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.05mg/L培养基上,可诱导出愈伤组织,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,经再分化可获得无性系芽,继而产生丛生芽;将高度大于3cm的增殖芽接种于添加1/2MS+IAA 1.0mg/L培养基上可诱导产生不定根,生根率高达50%。生根后移栽成活,获得完整再生植株。     

紫穗槐茎段愈伤组织诱导及再生体系的建立

以紫穗槐茎段为研究对象,确定了影响其愈伤组织诱导的关键因子、不定芽分化及生根培养的最佳条件,建立了紫穗槐稳定高频再生体系。试验结果表明：紫穗槐茎段愈伤组织的最适诱导培养基为MS＋6-BA4.0mg/L＋NAA2.0mg/L＋2,4-D0.5mg/L,诱导率为100%,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋NAA0.1mg/L＋KT2mg/L,分化率为96.2%,增殖倍数为7.3;不定芽最佳生根培养基为1/2MS＋酵母提取物0.5mg/L;再生植株移植在选用田园土、蛭石（5∶1）混合的基质上,光强3000lx,光照时间14h/d下生长,3周后成活率达85.67%。     

大花、重瓣型非洲紫罗兰组织培养技术研究

对大花、重瓣型非洲紫罗兰(Saintpaulia ionantha)的组织培养研究表明,外植体消毒以0.1%的升汞溶液浸泡5~6 min为宜;不同激素浓度对其愈伤组织诱导、愈伤组织分化、芽丛形成及根的形成有不同的影响;生长素与细胞分裂素的比例决定着愈伤及芽丛的形成;小苗在1/2MS培养基上生根最好。各培养阶段的最适培养基分别为:愈伤组织诱导MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5mg/L,芽分化及增殖培养MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,生根培养1/2MS+NAA0.1 mg/L或1/2MS+IBA0.1 mg/L。     

黑果枸杞组织培养研究

以黑果枸杞成熟种子为外植体,萌发无菌苗后诱导愈伤组织及不定芽分化获得再生植株,建立黑果枸杞组织培养体系。结果表明,MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长,诱导种子萌发成无菌苗的培养基为MS+6-BA1. 0 mg/L+GA_3 0. 5 mg/L;无菌苗脱分化形成愈伤组织适宜的培养基为MS+6-BA 1. 0 mg/L+NAA 0. 1 mg/L,诱导率80%,平均丛生芽数25株;诱导愈伤组织分化和生长适宜的培养基为MS+6-BA 0. 4 mg/L+NAA 0. 1 mg/L;适宜的生根培养基为1/2 MS+IBA 0. 3 mg/L+NAA 0. 2 mg/L.     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。