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1.
[目的]鉴定并分析转双抗虫基因(BtCry1AcAPI基因)欧美杨107杨(简称:转基因107杨)中外源基因的表达情况,并且筛选出对鳞翅目害虫美国白蛾和杨扇舟蛾具有高抗虫性的转基因107杨株系。[方法]以10个转基因107杨株系2年生田间苗为试验材料,未转基因107杨为对照(CK),进行外源基因表达测定,包括PCR检测、绝对荧光定量PCR检测和毒蛋白检测以及鳞翅目害虫抗虫性对比试验。[结果] PCR检测结果表明,10个转基因株系均检测到外源基因BtCry1AcAPI,而对照未检测到,证明BtCry1AcAPI基因已稳定插入转基因植株基因组中。荧光定量PCR检测表明,8月份PB1,PB2,PB6,PB9和PB10这5个株系BtCry1Ac基因的转录丰度较高,为1.72×108~7.91×109,PB1最高; PB3,PB7和PB8次之,为1.03×107~2.35×107; PB4和PB5与对照一样未检测到BtCry1Ac基因的转录表达。ELISA毒蛋白检测表明,Cry1Ac毒蛋白的表达量与转录丰度大小变化趋势一致,PB1最高,为665.11 ng·g-1,PB4和PB5与对照一样未检测到毒蛋白。室内饲虫试验证明,转基因107杨对美国白蛾幼虫的杀虫效果高于杨扇舟蛾幼虫。8个表达毒蛋白的转基因株系对1~6龄美国白蛾幼虫的致死率均为100%,但致死时间存在一定差异,PB1和PB2对各龄幼虫的致死时间均较短; PB1,PB2,PB6,PB9和PB10对1~4龄杨扇舟蛾幼虫的致死率均为100%,其中PB1和PB2的致死时间较短,PB3,PB7和PB8对1~2龄杨扇舟蛾幼虫的致死率为100%,对3龄和4龄的致死率最高为22.22%。综合抗虫对比试验结果,可以将8个转基因株系划分为2个抗性水平:PB1,PB2,PB6,PB9和PB10为高抗株系,对美国白蛾和杨扇舟蛾均表现高抗性; PB3,PB7和PB8为中抗株系,对杨扇舟蛾表现出中等抗性,但对美国白蛾表现出高抗性。[结论]通过对转基因107杨进行一系列分子检测及室内抗虫对比试验,证明外源基因已成功导入杨树基因组并稳定存在,并且有8个株系高效表达;抗虫试验证明转基因107杨对美国白蛾和杨扇舟蛾具有明显的抗性,筛选出的5个株系对2种害虫都具有高抗性,另外3个株系PB3,PB7和PB8对美国白蛾具有很高的抗性,而对杨扇舟蛾则表现出中低抗性。  相似文献   

2.
欧美杨107杨立木生长应变分布规律   总被引:1,自引:0,他引:1  
选取欧美杨107杨为研究材料,通过对正常生长欧美杨107杨立木表面轴向生长应变和伐倒木内部残余轴向生长应变的测定,分析表面生长应变和内部残余生长应变的分布规律.结果表明:正常木表面轴向生长应变的变化幅度范围为:-853.10--213.43με.Z2和Z5在周向上表面轴向生长应变的变化幅度较大,而Z1,Z3,Z4变化幅度相对较小;在不同树干高度研究中,表面轴向生长应变在树干基部向上与整体树干高度10%位置之间,生长压应变(即生长拉应力)随着树高增加逐渐增大,随后数值开始下降;双因素方差分析表明,不同单株和不同周向位置对表面轴向生长应变影响不显著,但不同高度对生长应变影响显著;欧美杨107杨正常木内部残余轴向生长应变变化幅度范围-1279.00~960.20με,其径向变异模式为在树干外围表现为轴向压应变(即拉应力),由树皮向里,在中心板南侧第5或6年轮和中心板北侧第4或5年轮处,轴向压应变转换为拉应变(即压应力),随后Z2和Z5在中心板南向第3年轮处出现拉应变最大值,而Z3则在中心板北向第3年轮处出现拉应变最大值,各单株在内部残余轴向生长应变径向变异的整体趋势图如开口向下的抛物线,其顶点在髓心处,其二次曲线回归方程为y(生长应变值)=815.02 X2(测试点序号)-69.345 X-1 902.403,R2=0.775***.  相似文献   

3.
树木在生长过程中容易受到许多外界因素的干扰,如地形、风吹、雪压、相临木竞争等,使得树木偏离原有的生长状态,发生树干倾斜、弯曲、树冠偏冠等现象(Alméras et al.,2005;John et al.,2003;Yamashita et al.,2007)。在这些因素的干扰下,树木为了更好地获得生存空间必须形成一个抵御机制。立木中生长应力的存在及其分布方式是其抵御外界  相似文献   

4.
目的: 探索转多基因107杨外源基因是否稳定存在且表达,筛选对鳞翅目和鞘翅目害虫具双抗性的转基因株系,为培育转多基因抗虫杨树新品种提供有价值的参考。方法: 对107杨转Cry1Ac-Cry3A-BADH基因的3个株系(ECAA1-3)和转Cry1Ac-Cry3A-NTHK1基因的3个株系(ECAB1-3)的2年生田间苗进行PCR检测、毒蛋白含量检测和抗虫性检测。结果: PCR凝胶电泳检测证明目的基因仍在转多基因107杨的基因组中;转多基因107杨Bt毒蛋白检测证明,8月份各转基因株系均含有Cry1Ac和Cry3A毒蛋白,Cry1Ac毒蛋白含量为3.60~20.76 ng·g-1,Cry3A毒蛋白含量为3 479.66~7 230.29 ng·g-1。室内饲虫试验证明,转多基因107杨具有双抗性,对美国白蛾和柳蓝叶甲幼虫均表现出抗性,其中株系ECAB1对美国白蛾的致死率最高,为100%,株系ECAA1、ECAA2和ECAA3对美国白蛾1龄幼虫具有明显抑制其生长发育的作用;除转基因株系ECAA2外,其他株系均表现为对柳蓝叶甲高抗虫性,对1龄幼虫的致死率均达到100%,对1、2龄混龄幼虫的致死率均在85%~100%之间,对成虫致死率在66%以上。结论: 转多基因107杨各株系的外源基因仍存在且稳定表达,其抗虫性与非转基因对照相比均有显著提高,但不同转基因株系间差异显著,株系ECAA3和ECAB1对美国白蛾和柳蓝叶甲幼虫均具有较高抗虫性。  相似文献   

5.
选取正常生长和偏心生长欧美杨107杨为研究材料,测试其表面轴向生长应变,并测定应变测试位置处木材的纤维形态和干缩性质,分析应变与木材性质之间的关系.结果表明:1)随着生长应变数值的增加,正常生长立木纤维长度、胞腔径、长宽比、径向全干干缩率、弦向全干干缩率出现微弱的下降趋势,而纤维宽度、双壁厚、壁腔比、轴向全干干缩率出现微弱的上升趋势,正常生长立木生长应变与所有纤维形态指标和干缩性指标之间的相关系数均不显著;2)随着生长应变数值的增加,偏心生长立木双壁厚、长宽比、径向全干干缩率、弦向全干干缩率、轴向全干干缩率出现较快的下降趋势,而纤维宽度、胞腔径同时出现较快的上升趋势,纤维长度出现微弱的上升趋势,偏心生长立木生长应变与双壁厚、轴向全干干缩率、径向全干干缩率、弦向全干干缩率、壁腔比、弦向全干干缩率、长宽比的负相关关系显著,与腔径、纤维宽度的正相关关系显著,与纤维长度之间相关系数不显著;3)对于不含应拉木正常生长的立木,其生长应力与木材纤维形态和木材干缩性质之间关系较为微弱;对于含应拉木偏心生长的立木,由于应拉木材性与正常木之间的差别,其生长应力与多数木材纤维形态指标和木材干缩性质指标之间关系较为紧密.  相似文献   

6.
欧美杨107杨正常木与应拉木制浆造纸性能比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
周亮  高慧  张利萍  刘盛全 《林业科学》2012,48(5):101-107
选取直立和倾斜欧美杨107杨为研究材料,根据正交试验确定正常木和应拉木最佳制浆条件,比较正常木和应拉木的制浆造纸性能,通过提高打浆转数对应拉木纸张性能的提高进行探讨。结果表明: 正常木的最佳制浆条件为用碱量15%、最高温度164 ℃、最高温度保温时间75 min; 而应拉木最佳制浆条件为用碱量13%、最高温度160 ℃、最高温度保温时间40 min。用碱量对正常木和应拉木制浆得率和卡伯值影响的通径系数在不同水平上显著。通过对正常木和应拉木制浆造纸性能比较发现,应拉木比正常木制浆得率高、卡伯值低、纸张力学性能均低,且抗张指数和耐破指数差距较大(约2倍),而撕裂指数差距较小。正常木和应拉木之间卡伯值、制浆得率、抗张指数、耐破指数均在0.001水平上差异显著,撕裂指数在0.05水平上差异显著。结合纸张断口形貌分析认为,胶质层的存在使得应拉木纤维成纸时不容易扁平坍陷,极大地阻碍了成纸时纤维之间的结合,因此降低了纸张力学性能; 但是,由于其胶质层纤维素含量很高,因此其制浆性能优于正常木。随着打浆转数的提高,应拉木纸张力学性能增强,且接近正常木纸张水平,但过高会降低纸张力学性能。  相似文献   

7.
土壤质地与施肥对欧美杨107杨生长的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
2002年以来,我站开展了土壤类型与施肥试验,旨在通过研究为生产提供可靠的理论依据。研究表明,砂壤土较两合土和粘土更适宜107杨生长,高生长较粘土和两合土高3.98%、3.08%,胸径高12.50%、13.74%;潮土上生长最好,棕壤土生长最差。7月份施肥一次比4月和7月两次对高生长、胸径生长、材积影响效果好,施肥方式对高生长无显著影响。  相似文献   

8.
以欧美杨107杨为受体材料,利用根癌农杆菌介导法转化β-1,3-葡聚糖酶基因(BG2),经卡那霉素筛选,PCR和Southern检测显示有4个转基因阳性株系,初步证明外源目的基因已整合到107杨基因组中。离体抑菌试验表明转基因107杨(T-107杨)细胞粗提液的抑菌能力明显强于未转基因对照107杨(C-107杨)。在接种杨树溃疡病菌的培养基上培养,T-107杨长势明显强于C-107杨;T-107杨可明显抑制丙二醛(MDA)在植物体内的快速积累,其苯丙氨酸解氨酶(PAL)含量也明显高于C-107杨,PAL含量T-107杨和C-107杨都有先升后降的趋势;15天后C-107杨完全死亡,T-107杨仍能生存。试验结果表明BG2基因的表达提高了107杨对杨树溃疡病的抗性。  相似文献   

9.
以欧美杨107次生木质部为材料提取总RNA,克隆得到了一个纤维素合酶基因片段.序列分析表明:该基因序列为883bp,与Populus tremula×Populus tremuloides木质部特异性纤维素合酶基因CesAl和Populus×canescen纤维素合酶基因的相似性均达到99%,与Populus tremuloides木质部特异性纤维素合酶基因Cex43的相似性达到98%.此片段拟表达的氨基酸序列具有纤维素合酶共有的锌指结构和一个不完全的高突变区,证明此DNA片段是纤维素合酶基因的片段,构建了重组质粒,并命名为pMD20-T-CesA1.  相似文献   

10.
褚兰镇位于宿州市埇桥区东北部,处在江苏、安徽两省的接合部。根据埇桥区二类清查的数据,杨树及侧柏是该镇的主要树种,其中杨树栽植面积为18820亩,占全镇有林地面积的48.4%,杨树的活立木蓄积量为10.4803万m^3,占全镇活立木蓄积量的87.5%。目前,全镇杨树的主要品种有欧美杨107号、I-69杨、I-72杨等。欧美杨107号属黑杨派欧美杨杂交品种,树体通直、树冠窄、侧枝细,具有抗风能力较强的优良特性。  相似文献   

11.
[目的] 细胞质内K+/Na+平衡对细胞的代谢起重要作用,同时也被认为是植物抵御盐胁迫的重要部分。[方法] 以转多基因库安托杨株系D5-21、D5-20及非转基因受体D5-0为材料,研究100 mmol·L-1 NaCl处理的不同时期(7,15,30天)各杨树株系的株高、根部干物质量、根尖离子流(Na+、K+、H+)的动态变化(利用非损伤微测技术)。[结果] 生长数据表明:与正常供水条件相比,7天盐胁迫处理后,3个株系的株高降低,但不显著;15天处理后,D5-20,D5-0株高显著降低;30天处理后,3个株系株高和根部干物质量均显著降低,D5-0,D5-21的根干物质量只有正常供水条件下的一半,说明盐胁迫严重抑制杨树根的生长;但表型变化表明盐胁迫下D5-21,D5-20植株的受害程度更小,并且株高和根部干物质量均高于D5-0。Na+流测定结果表明:7天盐胁迫处理后,各株系根尖的Na+流虽与对照相比有显著变化,但变化幅度均较小;15天盐胁迫处理后,D5-21,D5-20根尖Na+ 外排能力均是D5-0的1.8倍;30天处理后,D5-21,D5-20根尖Na+ 外排能力均是D5-0的1.6倍。K+流测定结果表明:D5-0,D5-21根尖K+ 外流流速随着胁迫时间延长而增大,D5-20则是先增大后减小,但3个株系变化趋势差异较大,30天处理时,D5-0的流速已是D5-21,D5-20的1.7倍和2.1倍。H+流测定结果表明:虽然与D5-21,D5-20一样,D5-0的H+ 内流值随着胁迫时间延长而增大,但D5-21,D5-20的增幅明显大于D5-0,30天处理时,二者的H+流速是D5-0的1.6倍和1.2倍。因此,不论是短期(7天)、中期(15天)还是长期(30天)盐胁迫处理,与非转基因株系相比,转基因株系D5-21,D5-20都具有更强的Na+外排和H+内流能力,且K+的外流幅度远低于D5-0,说明转基因株系可通过将根尖细胞质中过多的Na+主动外排、并减少根尖细胞中K+ 的损失,维持胞质中的适宜的K+/Na+,转基因株系的耐盐性提高,从而有利于转基因株系的生长积累,这将为转基因林木的耐盐性筛选提供新的参考依据。[结论] JERF36基因属于ERF类转录因子,它可激活植物中下游抗逆相关基因的表达,与植物的抗逆性密切相关,因此未来可研究盐胁迫下转多基因库安托杨中JERF36基因与Na+,K+,H+ 这3种重要离子的转运所涉及的相关基因表达的关系。  相似文献   

12.
通过对受毛栓菌侵染的欧美杨107杨木块木质素含量的测定,结合扫描电镜(SEM)观察和红外光谱(IR)分析方法,对WT-1降解欧美杨107杨木块的过程进行初步研究。结果表明: 受WT-1的侵染,杨木块木质素含量降低,其木质素降解过程呈现出慢-快-慢的规律; SEM观察结果表明, WT-1对杨木块木质素的降解由胞腔向胞间层进行,其中射线和薄壁组织最先降解,木纤维及导管次之; IR分析表明,受WT-1的侵染杨木块木质素结构发生了变化,木质素芳香核之间通过碳-碳键(-C-C-)连接的空间网状结构被破坏,木质素苯环间的羰基、CH2结构、紫丁香基和愈疮木基等侧链部分被降解,苯环骨架变化明显。  相似文献   

13.
从中国林科院引进欧美杨 1 0 7号杨无性系在内蒙古呼和浩特进行引种及繁育试验 ,连续 3年对该无性系进行遗传变异、植物学特征、生物学特性、物候、生长节律及繁育技术等方面进行了全面系统的试验和研究。结果表明 :欧美杨 1 0 7号杨苗期速生、材质好、抗寒 ,尤其是抗风折能力强 ,大大超过目前引进的欧美杨中林4 6#杨。  相似文献   

14.
转不同抗虫基因741杨的抗虫选择性   总被引:3,自引:1,他引:3  
以转抗虫基因(BtCry3A)741杨7个株系和转双抗虫基因(BtCrylAc API)741杨2个株系为材料,从分子生物学检测、毒蛋白的表达、抗虫性检测3个方面,研究转不同Bt基因741杨对不同类型害虫的抗虫选择性.结果表明:2种Bt抗虫基因分别在转基因741杨不同株系中稳定存在.转BtCrylAc的2个株系毒蛋白含量分别为0.012 7%和0.009 9%,具高抗虫性的株系pb29的毒蛋白含量高于中等抗虫性的株系pb17.转BtCry3A基因的5个株系毒蛋白含量为0.067 8%~0.152 1%,不同株系间存在一定差异.BtCry3型的毒蛋白表达量非常高,是BtCry1型的10倍.用对鳞翅目害虫具高抗虫性和中等抗虫性的转双抗虫基因(BtCrylAc API)741杨株系叶片饲养鞘翅目害虫柳蓝叶甲,幼虫死亡率达到28.4%~42.8%,转基因株系与未转基因的对照没有明显差异.用转BtCry3A基因741杨不同株系叶片饲养柳兰叶甲幼虫,均表现出高抗虫性,死亡率在2天之内均可达到100%;而饲养杨扇舟蛾幼虫,死亡率为0~42.86%,未表现出明显抗虫性,与未转基因对照没有明显差异.  相似文献   

15.
[目的]探究转多基因欧美杨107杨中外源Bt基因是否稳定存在及表达,探索转基因107杨不同时间、不同部位Bt毒蛋白表达规律,研究多基因转化的载体结构及基因互作对外源基因表达稳定性和高效性的影响。[方法]选取1年生转Cry1Ac-Cry3A-NTHK1基因107杨3个株系(A1、A2、A3)和转Cry1Ac-Cry3A-BADH基因107杨3个株系(B1、B2、B3),通过PCR技术对转基因107杨中外源基因进行检测和验证,通过实时荧光定量PCR对Bt基因的转录丰度进行检测,利用ELISA技术对转基因107杨不同时间、不同部位毒蛋白含量进行检测。[结果]PCR检测结果显示,转基因107杨均能扩增出与阳性对照大小一致的特异性条带,阴性对照未扩增出特异性条带,证明外源基因在转基因107杨中稳定存在;实时荧光定量PCR检测结果表明,2种Bt基因在转基因107杨中均能稳定表达,Cry1Ac基因的转录丰度在2.1×104~5.1×104之间,Cry3A基因的转录丰度在2.8×106~5.6×107之间,Cry1Ac基因和Cry3A基因转录丰度无相关性;ELISA技术检测结果显示,转基因107杨中均检测到Cry1Ac和Cry3A毒蛋白存在。2种Bt基因转录丰度和毒蛋白含量无相关性,但2种Bt毒蛋白含量之间呈现出正相关关系。转2种不同载体的107杨6、7月份2种Bt毒蛋白的含量较低,8月份急剧上升,Cry1Ac毒蛋白的含量均在9月份达到峰值,Cry3A毒蛋白含量均在8月份达到峰值,10月急剧下降。8月份不同部位(上、中、下)的叶片Bt毒蛋白含量未表现出一致性规律,不同部位(上、中、下)木质部的Bt毒蛋白含量也未呈现出一致性规律。[结论]转Cry1Ac-Cry3A-NTHK1基因107杨和转Cry1Ac-Cry3A-BADH基因107杨不同株系间2种Bt基因的转录丰度存在显著差异,Cry3A基因的转录丰度显著高于Cry1Ac基因;2种Bt毒蛋白在各株系间存在显著差异,Cry1Ac毒蛋白含量极低,Cry3A毒蛋白含量极显著高于Cry1Ac,与转录水平检测结果一致。2种不同载体之间Cry1Ac基因转录丰度、毒蛋白表达模式及含量无明显差异,Cry3A基因转录丰度、毒蛋白表达模式及含量也无明显差异。在转基因107杨整个生长季中,Cry1Ac和Cry3A平均毒蛋白含量变化趋势基本一致,呈单峰模式。  相似文献   

16.
以库安托杨转多基因株系(D5-9、D5-18、D5-19、D5-20、D5-21、D5-24、D5-26)和未转化株系(对照CK)为试材,研究不同水分处理(水涝胁迫、浸渍胁迫、正常供水)对其生长及生理性状的影响。结果表明:随着胁迫的加剧,各株系株高、根系生长和生物量累积呈下降趋势,而地径生长有所增加。浸渍、水涝胁迫下对照株系的净光合速率均最低,分别为11.99、10.37 μmol·m-2·s-1,比正常供水分别减少了14.0%和25.6%;浸渍胁迫下D5-26的净光合速率最高,为13.95 μmol·m-2·s-1;水涝胁迫下D5-19的净光合速率最高为12.01 μmol·m-2·s-1。蒸腾速率、水分利用效率、气孔限制值、叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量均下降,叶绿素a的降幅小于叶绿素b,叶绿素a/b值先降后升,而气孔导度和细胞间隙CO2浓度增大。PSⅡ的实际光化学效率、电子传递速率、潜在光化学活性和最大光化学效率均降低,初始荧光产量和最大荧光产量增加。涝渍胁迫对所有供试材料的生长及光合、叶绿素荧光等生理性状均有影响,但对转多基因株系的影响明显较对照小,且株系间存在差异。以生长、光合参数和叶绿素荧光参数为指标对供试材料进行综合评价,各株系的抗涝能力从高到低的排序为:D5-26>D5-19>D5-18>D5-21>D5-9>D5-20>D5-24>CK。  相似文献   

17.
以北京沙地107欧美杨(Populus×euramericanacv.“74/76”)人工林为研究对象,采用热扩散式探针(TDP)于生长季测定杨树在1d内不同时间和不同方位的液流速率和耗水量,分析杨树水分利用的日变化规律.结果 表明:杨树树干东侧液流速率开始增大时间早于西侧ih左右,降低时间早于西侧40min,日周期耗...  相似文献   

18.
为研究转抗虫基因对根际和内源细菌群落的影响,以转抗虫基因107杨田间对比试验林为对象,采用高通量测序技术对转基因株系和对照株系根际土壤细菌、树干韧皮部和根系内生细菌群落结构组成及多样性进行对比分析。结果显示:(1)土壤样品中有效序列平均在30 000以上,杨树组织有效序列平均在300 000以上。(2)转基因株系细菌物种组成与对照株系的极其相似,酸杆菌门与变形菌门为转基因和非转基因株系根际土壤的优势菌门,占比分别为16.6%和21.9%;蓝藻菌门和变形菌门为转基因和非转基因株系韧皮部的优势菌门,所占的比率分别为54.8%和59.2%;变形菌门为转基因和非转基因株系根部的优势菌门,所占的比率分别为40.7%和58.8%。(3)转基因和非转基因株系在细菌群落的丰富度和多样性上均没有表现出明显的差异,但不同部位之间差异显著。结果表明:转基因107杨没有对根际土壤和内生细菌造成显著影响,明确了转抗虫基因107杨不同部位细菌群落特征,为转抗虫基因107杨的生物安全评价提供了有益的参考。  相似文献   

19.
以转Bt基因南林895杨树叶片饲喂杨扇舟蛾,研究Bt毒蛋白对害虫体内代谢酶的影响。结果表明:酯酶和羧酸酯酶明显受到抑制。中肠酯酶活性在取食4~48 h内持续下降,羧酸酯酶活性在前期4 h有所上升但随后持续下降。多功能氧化酶活性从24 h起,受抑而下降,但不显著。谷胱甘肽S-转移酶活性在前36 h内波动不大,48 h后显著受抑。乙酰胆碱酶的活性无明显受抑。超氧化物歧化酶活性12 h后略升高,然而在取食12~48 h活性持续下降,与之相反,过氧化物酶活性在4~48 h呈上升状态。过氧化氢酶活性在4~12 h呈下降状态,24~48 h呈上升状态。转Bt基因杨树主要通过抑制酯酶和羧酸酯酶并扰乱超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶的协调作用干扰害虫的正常生理代谢,起到杀虫作用。  相似文献   

20.
为了提高河北杨树人工林的经济效益,该研究以欧美107杨为研究对象,对密度下的欧美107杨人工林的生长情况及其经济效益进行了调查分析,结果表明:随着时间的推移,林分胸径和单株材积随着造林密度的增大而减小。在造林后开始2a内,树高随着造林密度的增大而增大,之后逐渐表现出随着林分密度的增大,林分树高逐渐减小的趋势。林分蓄积虽然到目前为止随着造林密度的增大而增大,但随着时间的推移,密度小的林分树高逐渐超过密度大的。造林后5a,密度为5m×4m的林分净收益最大,为(55779±5436)元/hm2;而1m×2m林分最小,已成为负盈利。因此,在杨树造林中建议采用5m×4m的造林密度,摒弃1m×2m的造林密度。  相似文献   

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