甘薯及其近缘野生种种间体细胞杂种植株的有效再生

将甘薯品种栗子香的胚性悬浮细胞原生质体和近缘野生种I.triloba的叶柄原生质体用PEG融合法融合后,培养在含有0.05mg/L2,4-D和0.5mg/L KT的改良MS液体培养基中。培养10周后,形成直径达1～2mm的小愈伤组织。将这些小愈伤组织转移到添加0.05mg/L2,4-D和0.5mg/L KT的MS培养基上,愈伤组织迅速增殖。将其中的78个愈伤组织培养在添加2.0mg/L BAP的MS培养基上,愈伤组织形成了不定根。将具有不定根的愈伤组织进一步培养在MS基本培养基上,共获得137株再生植株。过氧化物酶同工酶及RAPD分析表明,所获得的137株再生植株均为栗子香和I.triloba的种间体细胞杂种植株。     

甘薯及其近缘野生种的花药愈伤组织诱导与器官分化

以甘薯7个品种及野生种 Ipomoea leucantha(2x)的花药为外植体,在含有2,4-D2mg/L+KT2mg/L+IAA2mg/L 的 MS 培养基上,有6个品种及 I.leucantha 诱导出愈伤组织,而且频率较高。甘薯花药愈伤组织诱导率在基因型之间有差异,向阳黄品种出愈率在7个甘薯品种中最高达9.7%,而甘薯近缘二倍体野生种 I.leucantha 愈伤组织诱导频率高于六倍体甘薯,达11.9%。形成的花药愈伤组织需立即转移到愈伤组织增殖培养基中。在分化培养基上,甘薯两个品种和野生种的花药愈伤组织分化出根。I.leucantha 愈伤组织根的分化率高于甘薯品种,达18.8%。     

高淀粉专用型甘薯品种悬浮体系的建立及植株再生

利用目前四川省主推的6个高淀粉甘薯品种进行悬浮培养及有效植株再生的研究,对以MS为基础的10种胚性愈伤培养基进行分析,结果表明,茎尖分生组织培养基在添加1.8 mg/L 2,4-D、30 mg/L蔗糖的MS培养基上诱导的胚性愈伤组织最多。胚性愈伤组织在添加1.8 mg/L 2,4-D、30 mg/L蔗糖的MS培养基上进行震荡培养建立悬浮细胞系,悬浮培养40周后,进行植株再生培养,比较了3种以MS为基础的再生培养基,将直径大于1cm的大细胞团放在添加1.5 mg/L ABA、30 mg/L蔗糖的MS上获得再生植株最多,再生率为96%。     

甘薯及其近缘野生种三浅裂野牵牛(Ipmoea trifida)原生质体融合的初步研究

利用酶解法从贵州省甘薯地方品种兴义薯和二倍体近缘野生种三浅裂野牵牛(I.trifida)的无菌试管苗幼嫩叶柄中分离得到大量原生质体。用聚乙二醇(PEG)融合法融合这2个品种的原生质体,将融合原生质体培养在含有0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的改良MS培养基中。结果表明,3~5 d后融合原生质体发生第1次细胞分裂;培养12周后,形成直径达1~2 mm的小愈伤组织。将这些小愈伤组织转移到含有0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的MS培养基上,使愈伤组织增殖。     

野葛(Pueraria lobata)愈伤组织诱导及组织培养

以野葛茎尖分生组织为外植体,通过不同激素与MS培养基配比试验,筛选出野葛茎尖分生组织愈伤组织诱导与植株再生的最适培养基,建立野葛植株再生体系.试验结果表明:茎尖分生组织在MS+2,4-D 0.5 mg/L培养基上启动诱导愈伤组织,再转移到MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L继续诱导,愈伤组织诱导率高,繁殖能力旺盛.在MS+6-BA 1 mg/L培养基上愈伤组织分化率100%,生长能力较强.在MS+NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导生根率达到60%.     

菘蓝组培再生体系的建立

以菘蓝(Isatis indigotica)无菌苗的叶片和叶柄为外植体,分别接种到添加不同生长调节剂浓度的MS培养基上,研究不同生长调节剂配比对菘蓝愈伤组织诱导与分化的影响,建立菘蓝组培再生体系。结果表明,叶片是菘蓝愈伤组织形成的最佳外植体,菘蓝愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。以1/2MS培养基添加0.1 mg/L NAA可使再生植株的生根率达到92.3%。     

百合幼胚的离体培养和植株再生

为了探索百合幼胚离体培养的最佳胚性生长条件及植株再生途径,以授粉后35 d的百合幼胚为外植体,进行了幼胚胚性生长,愈伤组织的诱导,愈伤组织不定芽、不定根的分化和再生植株的移栽试验.结果表明:在含有1 mg/L IAA,1 mg/L GA3,600 mg/L CH的MS培养基上培养,蔗糖含量为6％～8％时,百合幼胚胚性生长最好,培养30 d后可以得到正常胚.在含有0.1 mg/L NAA,1 mg/L BA的MS培养基上可以形成淡绿色的愈伤组织,将这些愈伤组织转移到1/2 MS无激素的培养基上培养可以形成大量的不定芽,不定芽生根移栽后,其成活率可达90％以上.     

食用菊花花瓣组织培养初探

研究了食用菊花花瓣组织培养过程中不同植物生长调节剂和基因型对愈伤组织诱导和植株再生的影响,结果表明:附加2,4-D2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L的MS培养基愈伤组织诱导率较高,愈伤组织只在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L培养基上诱导出不定芽。不定芽转移到无植物生长调节剂的MS培养基上,可以得到再生植株。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

野葛(Pueraria lobata)愈伤组织诱导及组织培养

以野葛茎尖分生组织为外植体,通过不同激素与MS培养基配比试验,筛选出野葛茎尖分生组织愈伤组织诱导与植株再生的最适培养基,建立野葛植株再生体系。试验结果表明:茎尖分生组织在MS 2,4-D 0.5 mg/L培养基上启动诱导愈伤组织,再转移到MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L继续诱导,愈伤组织诱导率高,繁殖能力旺盛。在MS 6-BA 1 mg/L培养基上愈伤组织分化率100%,生长能力较强。在MS NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导生根率达到60%。     

高秆野生稻(Oryza alta L.)叶片组织培养中通过胚状体获得再生植株

高秆野生稻叶片可诱导出胚性和非胚性2种愈伤组织。胚性愈伤组织在合适的分化培养基上可不断形成胚状体,进而大量获得再生植株,再生植株以绿苗为主,未见绿白嵌合苗。源于不同脱分化培养基的胚性愈伤组织具有相似的胚状体形成和植株再生能力。诱导胚性愈伤组织以N6培养基添加NAA1 mg/L、2,4-D2 mg/L和ZT0.5 mg/L效果最好,形成胚状体并分化植株以MS培养基添加NAA2 mg/L和IAA0.5 mg/L为佳。     

草莓花药愈伤组织类型与状态调控研究

在草莓花药愈伤组织诱导及继代培养过程中,主要出现了3种类型愈伤组织：I型愈伤组织表现为生长缓慢、淡绿色、块状或粒状;Ⅱ型愈伤组织表现为生长旺盛、鲜白色、松软状;Ⅲ型(胚性)愈伤组织表现为生长较旺盛、鲜黄色、松脆状。草莓花药在F NAA0．2mg／L BA2．0mg／L 水解酪蛋白300mg／L培养基上诱导的愈伤组织多为I型,I型愈伤组织在含2,4-D浓度较高(3．0mg／L)的MS培养基上培养,转变成Ⅱ型愈伤组织,Ⅱ型愈伤组织在MS 2,4-D0．5～1．0mg／L BA0．05～0．1mg/L 水解酪蛋白400mg/L 谷氨酰胺150mg/L KCl 400mg/L培养基上培养,提高了其质量,而后将质量好的Ⅱ型愈伤组织转到附加KNO3 1140mg／L的MS培养基上,培养40d后在愈伤组织块边缘出现了黄色、颗粒状愈伤组织,将此状态的愈伤组织在MS 2,4-D 1．0mg/L NAA 1．0mg/L ZT 0．2mg/L 水解酪蛋白400mg/L 谷氨酰胺150mg／L KCl 400mg／L培养基上培养获得了Ⅲ型(胚性)愈伤组织。I型愈伤组织和Ⅱ型愈伤组织不适合建立细胞悬浮系,而Ⅲ型(胚性)愈伤组织很容易建立细胞悬浮系,并诱导出大量胚状体。I型愈伤组织能再生植株．Ⅱ型愈伤组织不能再生植株,Ⅲ型(胚性)愈伤组织经状态调控成I型愈伤组织后也能再生植株。     

薄荷离体培养愈伤组织诱导与植株分化

从薄荷幼嫩茎尖诱导出愈组织,以B5为基本培养基,添加1.0mg/L NAA和0.4mg/L BA,愈伤诱导率达到90%以上。植株再生,B5培养基优于MS培养基和N6培养基。在B5培养基中添加0.1mg/L NAA和5.0mg/L BA,植株再生频率达5%。     

月季“月月红”(Rosa chinensis‘Slater’s crimson China’)愈伤组织诱导及植株再生初报

以"月月红"(R.chinensis‘Slater’s crimson China’)的嫩叶为外植体,采用MS为基本培养基,在添加不同浓度的2,4-D、TDZ、GA3和NAA上,结合不同时间的暗培养,研究"月月红"胚性愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明,2,4-D 5 mg/L暗培养20 d诱导出的愈伤组织,在MS+TDZ 1.0 mg/L+GA30.1 mg/L+NAA0.01 mg/L培养基上暗培养12 d,可以获得较好的胚性愈伤组织;胚性愈伤组织转入光照培养15 d后可形成肉眼可辨的子叶期体胚及具有不定芽和胚根的结构,20 d后可长成绿色的小植株。     

灯盏花植株再生系统的筛选

近年来云南人工种植灯盏花发展迅速,但种苗生产及供给成了发展的瓶颈,为解决灯盏花种苗快繁问题,对灯盏花的愈伤组织诱导与植株再生进行研究,试验以灯盏花的叶片和叶柄作为外植体,以MS为基本培养基,研究BA和NNA不同浓度配比对愈伤组织诱导和植株再生影响.结果表明叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基为C1培养基(MS+6-BA 1.0 mg/L+NNA 1.0 mg/L),叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为C3培养基(MS+6-BA 1.0 mg/L+NNA 5.0 mg/L);来自叶柄的愈伤组织更容易诱导出再生植株,再生植株诱导培养基以B3培养基(MS+BA 1.0 mg/L+NNA 5.0 mg/L)为好.     

高羊茅成熟胚愈伤组织诱导及植株再生

[目的]优化高羊茅成熟胚的组织培养条件。[方法]以高羊茅成熟胚为外植体,MS为基本培养基,探讨不同浓度激素和激素组合对愈伤组织诱导、继代培养及植株分化的影响。[结果]添加2,4-D2.0mg/L的MS培养基中愈伤组织的诱导率最高,达63.5%;在1.0～4.0mg/L范围内,随着培养基中2,4-D浓度的降低,愈伤组织的颗粒性增强,致密性增加,含水量下降,其中MS＋2,4-D2.0mg/L为愈伤组织继代的最佳培养基;愈伤组织在含2.0mg/L6-BA和0.10mg/LNAA的MS培养基上植株分化率最高,达80.2%;将再生苗转移至不含植物生长调节剂的1/2MS培养基上进行增殖、壮苗,然后将其移栽入沙质壤土中,移栽成活率可达90%。[结论]该研究建立了高羊茅的高效再生体系。     

花生体细胞胚发生及植株再生

以花生优良品种四粒红成熟种子胚轴为外植体,诱导体细胞胚发生并获得了再生植株。将胚轴切成小段,接种于附加40 mg/L的MS培养基上诱导胚性愈伤组织,愈伤组织转移至2,4-D 20 mg/L的MS培养基上形成体细胞胚。体细胞胚发生率达到66.67%;体细胞胚在BA浓度逐渐降低的MS培养基上培养,发育成完整植株。     

不同激素对甘薯胚性细胞悬浮系植株再生的影响

以甘薯品种济薯21和徐薯18的茎尖为材料,采用不同激素配比,对甘薯胚性愈伤组织的诱导及高效植株再生进行了研究。结果表明,济薯21和徐薯18较适宜的茎尖胚性愈伤组织诱导培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.2 g/L KC l+2.0 mg/L 2,4-D和MS+2.0 mg/L 2,4-D;济薯21胚性细胞团在MS+1.0 mg/L ABA+1.0 mg/L GA3培养基上植株再生率最高,达到96%,徐薯18胚性细胞团在MS+1.0 mg/LABA培养基上的植株再生率最高,达到91%。     

苦糖果愈伤组织诱导与不定芽分化研究

[目的]建立苦糖果再生体系,保存种质资源.[方法]以苦糖果种子诱导的幼嫩茎段为外植体,接种在附加6-BA、IBA等不同浓度植物激素和营养物质的培养基上,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响.[结果]在不同的培养基、激素种类和激素浓度条件下,愈伤组织的诱导形成有很大差异.相同浓度激素条件下,以MS为基本培养基可诱导出苦糖果愈伤组织,最佳配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,诱导率为76.26％,而1/2MS培养基上无愈伤组织出现.经过愈伤组织的增殖和分化培养,最佳分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L,芽分化率达67.40％.[结论]该研究实现了苦糖果愈伤组织诱导并获得再生植株,初步建立起苦糖果植株再生体系.     

中国沙棘体细胞胚胎间接发生与植株再生

以中国沙棘组培苗茎尖为外植体,在1/4 MS基本培养基上,对愈伤组织、胚性愈伤组织及体细胞胚胎进行诱导,探讨植物生长调节剂配比对中国沙棘愈伤组织、胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生的影响。结果表明:在KT 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L的最佳组合中,暗培养20 d后,愈伤组织的诱导率达到90.10%;暗培养30 d后,胚性愈伤组织的诱导率达到77.67%;将胚性愈伤组织转移到新鲜诱导培养基上,光培养20 d,平均体细胞胚发生数达到15.48。为了得到完整的再生小植株,将胚状体转移到不含任何生长激素的体细胞胚发育及植株再生培养基上,分析了KT和白砂糖不同浓度的组合对小植株再生的影响。结果发现:WPM + KT 0.05 mg/L + 白砂糖 20 g/L + 琼脂粉 6.5 g/L + CH 0.5 g/L处理上的植株再生率达到60.30%。该研究建立起了完整的中国沙棘体细胞胚胎间接发生的再生体系。