抗猪瘟高免血清的制备及应用

1　抗猪瘟高免血清的制备　选取体况和健康状况一致的试验猪为供试猪进行首次免疫,将供试猪颈部肌注猪瘟兔化弱毒苗10头份/头猪,观察免疫后猪只的精神、食欲等变化。10天后耳静脉采血,Ｄｏｔ-ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒测效价达1∶80。二免猪瘟兔化弱毒苗20头份/头猪,15天后采血测效价达1∶320。三免用猪瘟野毒强毒颈部肌注1∶10脾组织悬液10ｍＬ/头,20天后采血测效价达1∶1280。器械消毒准备完成后,颈总动脉放血致死,分离血清,加入2000ｉｕ/ｍＬ双抗,0.01%硫柳汞,即制成抗猪瘟高免血清,分装于-15℃冷冻保存备用。(见表1)表1　抗猪瘟高免血清的制…     

蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果影响的试验观察

为观察蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的调节作用,选择高、中、低剂量(0.2mL/kg、0.1mL/kg、0.05mL/kg)的蟾酥注射液与猪瘟兔化弱毒疫苗联合使用作试验组,猪瘟兔化弱毒疫苗组、猪瘟兔化弱毒疫苗与盐酸左旋咪唑+黄芪多糖组、空白组作为对照。试验猪在用药前及首次用药后的7d、14d、21d、28d,通过静脉采集血液,用试剂盒检测血清中猪瘟免疫抗体效价和IL-2水平。结果显示,蟾酥注射液高、中剂量组能够显著提高接种猪瘟兔化弱毒疫苗猪的血清中抗体水平(p0.05);不同剂量蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫猪血清IL-2的产生具有不同程度的促进作用,其中蟾酥注射液高剂量组作用快,持续时间较长。本试验的结果说明蟾酥注射液是猪瘟兔化弱毒疫苗有效的免疫佐剂。综合考虑,推荐蟾酥注射液的临床应用剂量为肌内注射0.1mL/kg体重,1日2次,连用3日。     

ELISA间接法检测猪瘟抗体的研究

本文介绍了以中国株猪瘟兔化弱毒乳兔组织冻干疫苗为原料提取猪瘟抗原,以酶标葡萄球菌蛋白 A(PPA)代替酶标抗猪IgG,建立ELISA间接法检测猪瘟抗体的方法。该方法与血清兔体中和试验对73份猪血清进行检测猪瘟抗体的同步试验,结果基本一致( P >0.05)。敏感性、特异性及准确性分别为100％、92.16％及94.52％。用该方法对1528头份猪血清及36头份猪扁桃体浸出液进行猪瘟抗体测定,结果稳定,重复性好。     

应用免疫扩散试验检测猪瘟免疫抗体的研究

用原代犊牛肾单层细胞培养的牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)病毒Oregon C24V弱毒抹制备的可溶性抗原与BVD-MD阳性血清和抗猪瘟血清相反应,在48小时内即可在琼脂糖凝胶中出现明显的沉淀线;在对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫猪的血清试验中,免疫扩散试验和中和试验的结果基本一致。     

猪瘟免疫血清中和效检方法

应用血清与病毒中和法,可以检出猪瘟免疫猪与非免疫猪的区别。凡血清能中和猪瘟兔化毒(以下简称兔毒)的猪就有免疫能力,血清不能中和兔毒的猪就无免疫力。 1973年冬,我们对猪三联苗免疫猪要作猪瘟免疫期试验,为了摸索那些猪有良好的免疫能力,就采取免疫猪血清与乳兔干苗混     

猪瘟兔化弱毒的研究 Ⅱ.猪瘟兔化弱毒对猪的安全性

我们自1954年3月开始,研究猪瘟弱毒疫苗。关于猪瘟兔化弱毒(简称兔化毒)连续通过兔体430代的变化情况,及其对兔感染性的有关试验结果,已发表于第一报。本文报告兔化毒对猪的安全性试验的各项结果,试验证明连续通过兔体后,已充分减弱了它对猪的致病力,注射我国各地猪只,都极安全有效。     

IFA和IPMA方法测定猪瘟兔化弱毒病毒含量

本研究使用间接免疫荧光方法(IFA)和过氧化物酶单层试验(IPMA)测定猪瘟兔化弱毒的组织半数感染量(TCID50)。优化了两种方法的一抗使用浓度;筛选了IPMA方法中敏感、易辨识的酶作用底物。优化后的IFA和IPMA方法测定猪瘟兔化弱毒疫苗半成品和成品的TCID50,可以作为兔体感染量(RID)和猪体半数保护量(PD50)效力检验标准的补充,应用到猪瘟兔化弱毒活疫苗生产中,加强质检、质控力度。     

用猪瘟兔化弱毒中和试验检测猪瘟抗体时存在问题的初步探讨

中国兽药监察所于1984年在我厂进行猪瘟兔化弱毒毒种对猪的安全性试验时发现,对注射猪瘟冻干苗后21天的猪血清,用100个感染剂量的猪瘟兔化弱毒作兔体中和试验(按兽医生物药品制造及检验规程进行),检不出中和抗体。为此,我们对这一问题作了进一步的试验。现将试验结果报告如下。     

猪繁殖与呼吸综合征对猪瘟免疫效果的影响

本试验通过对三个猪场猪繁殖呼吸综合征 (PRRS)及猪瘟血清抗体的测定 ,提出PRRS可影响猪瘟的免疫效果 ;对PRRS阳性猪用猪瘟兔化弱毒疫苗加强免疫后 ,可明显提高猪瘟血清抗体水平 ,增强猪瘟的免疫效果     

猪瘟兔化弱毒的研究——Ⅲ 猪瘟兔化弱毒对猪的免疫原性

猪瘟兔化弱毒(以下简称兔化毒)在兔体已传至430代,注射家兔90％以上发生热反应。注射猪反应轻微,对妊娠母猪及仔猪的生长发育皆无不良影响,其详细结果已分别发表于前两篇报告(Ⅰ、Ⅱ)。现将兔化毒对猪的免疫原性试验结果,整理报告如下: 试验经过和结果一、兔化毒对猪最小免疫量的测定及其对兔最小感染量的关系 (一)兔化毒对猪最小免疫量的测定:在种毒继代试验过程中,曾分别采取不同代     

用猪瘟兔化弱毒中和试验法检测猪瘟抗体的探讨

由中国兽药监察所主持,有农牧渔业部南京和成都药械厂、兰州和郑州兽医生物药品厂以及黑龙江省兽药一厂参加,于84年9月在我厂进行猪瘟兔化弱毒毒种对猪的安全性试验时,发现对已注射猪瘟兔化弱毒疫苗后21天的猪只,采血分离的血清用100个感染剂量的猪瘟兔化弱毒作兔体中和试验(兽医生物药品制造及检验规程,下称规程法)时,检不出中和抗体。     

是否能在猪瘟疫区直接应用猪瘟兔化弱毒疫苗进行预防注射?

在猪瘟疫区的键康猪,为了使其迅速产生免疫力,通常是先用抗猪瘟血清进行预防注射,经10—14日,再注射猪瘟兔化弱毒疫苗。63年1月,猪瘟在我县开始大流行,为了克服抗猪瘟血清供应不足的困难,要求立即控制猪瘟流行,先在一有疫情的大队70头猪中试验证明,在猪瘟疫区,直接用猪瘟兔化弱毒疫苗预防注射,可以控制猪瘟流行,但也有些猪只会发生反应。为慎重起见,除号召防疫人员严格遵守预防注射的技术操作规程外,在保证抗猪瘟血清用于因预防注射而发生反应的猪只的前提下,推广了直接用猪瘟兔化弱     

自疫苗瓶中分离获得一株猪瘟病毒的人工接种试验

<正> 作者在某厂生产的猪瘟兔化弱毒乳兔冻干疫苗中发现有猪瘟野毒污染(编号为63疫苗毒株),经人工接种易感猪和兔体交互免疫试验,证实为猪瘟病毒,这对用乳兔生产猪瘟弱毒疫苗是一个严重的潜在危险,不可掉以轻心,故报告如下,以引起同道们的重视。     

猪瘟兔化弱毒间接免疫荧光鉴定方法的建立

为快速有效测定猪瘟疫苗病毒含量,建立了猪瘟兔化弱毒(HCLV)间接免疫荧光试验(IFA)方法,并与兔体定型热试验方法进行了初步比较。试验结果表明,以冷甲醇固定ST细胞,将所选猪瘟活疫苗检验用阳性血清1:40倍稀释、荧光二抗1:32倍稀释时,IFA检测HCLV感染的ST细胞清晰、特异,检测猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒感染细胞阴性。对不同猪瘟疫苗半成品的检测结果显示,IFA测定半数组织感染量(TCID50)与兔体定型热试验测定兔体感染量(RID)具有较好的相关性,其拟合曲线为RID/m L=2.783TCID50/m L+110107.213。     

猪瘟兔化弱毒毒种保存期试验

本试验对３个代次不同冻干日期的猪瘟兔化弱毒进行了兔体最小感染量测定,并对经猪瘟兔化弱毒Ｆ４７６代毒繁殖冻干的两批猪瘟兔化弱毒Ｆ４７９代毒进行了免疫原性鉴定。结果表明,猪瘟兔化弱毒在－７０℃条件下保存１４年、１５年、２９年,其兔体最小感染量均无明显改变;繁殖的两批猪瘟兔化弱毒的最小免疫量均为１０＾－５稀释１ｍｌ,符合《兽用生物制品规程》规定。     

高致病性猪蓝耳病TJM-F92株弱毒疫苗对猪瘟、口蹄疫免疫抗体水平的影响

为探讨高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗是否干扰猪瘟、口蹄疫疫苗的免疫效果,优化猪瘟、高致病性猪蓝耳病、口蹄疫免疫程序,科学指导动物疫病防控工作,笔者于2014年10月8日—11月12日在河南省正阳县某种猪场进行了高致病性猪蓝耳病TJM-F92株弱毒疫苗对猪瘟、口蹄疫免疫抗体水平的影响试验。结果表明:高致病性猪蓝耳病(TJM-F92株)弱毒疫苗对猪瘟兔化弱毒疫苗(ST传代细胞苗)、猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株)免疫抗体水平无显著影响,三种疫苗单独或联合免疫效果都较确实。     

猪瘟单克隆抗体诊断试剂的研究

应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制出可以鉴别猪瘟兔化弱毒、猪瘟强毒、牛病毒性腹泻病毒及绵羊边界病病毒的特异性猪瘟兔化弱毒单抗及猪瘟石门系强毒单抗。用亲和层析法制成单抗酶联试剂后,可区分疫苗注射血清、强毒感染血清、混合血清和猪瘟阴性血清。用强、弱毒单抗试剂分别对强、弱毒血清测得的结果与用荧光血清中和试验所得的结果基本一致。以弱毒单抗试剂测定弱毒猪血清的结果与用兔体血清中和试验所得的结果基本相符。田间应用试验结果也表明了这些单抗试剂的鉴别能力。     

规模化猪场种猪猪瘟免疫方式和剂量的探讨

对福建某公司2010年、2011年"一刀切"免疫(一年春、秋各免疫1次,每头每次免疫剂量1.5头份猪瘟兔化弱毒脾淋苗)的4561份种猪血清样品采用HerdChek猪瘟抗体检测试剂盒进行抗体检测,评价种猪猪瘟免疫效果,保证猪瘟免疫合格率达到80%以上,为规模化猪场种猪进行猪瘟免疫提供科学依据。结果显示:2010年、2011年种猪抗体检测合格率为86.70%、84.32%,对抗体不合格种猪再一次加强免疫后抗体检测总合格率91.28%、89.74%。由此表明:种猪猪瘟全群采用"一刀切"免疫猪瘟兔化弱毒脾淋苗,可以起到良好的免疫效果。     

高免血清治疗慢性、非典型猪瘟

利用本场商品猪群中漏去势的４月龄公猪，经猪瘟兔化弱毒细胞苗强化免疫，制成猪瘟高免血清，对本场慢性、非典型猪瘟病猪进行治疗试验，治愈率达８３％以上。     

新必妥对仔猪体液免疫效果的影响

本试验选取21日龄的健康仔猪12头，随机分为3组，分别肌肉注射猪瘟兔化弱毒疫苗1头份（对照组）、猪瘟兔化弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．15mL／kg体重（试验1组）和猪瘟兔化弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．25mL／kg体重（试验2组），分别于21、60日龄各免疫1次．以研究猪脾转移因子对仔猪猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的影响。结果表明．首免后14～35d试验组的免疫效果均显著优于对照组，二免后5～15d试验2组显著优于对照组。另外，选取35日龄的健康仔猪12头，随机分为3组，分别肌肉注射猪蓝耳病弱毒疫苗1头份（对照组）、猪蓝耳病弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．15mL／kg体重（试验1组）和猪蓝耳病弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．25mL／kg体重（试验2组），以研究猪脾转移因子对仔猪蓝耳病弱毒疫苗免疫效果的影响。结果表明，免疫后14～35d试验组的免疫效果均显著优于对照组，42～60d试验2组显著优于对照组。表明猪脾转移因子对仔猪体液免疫有一定的增强作用。