口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病疫苗联合免疫临床效果评估

为探索口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病疫苗联合免疫在猪场中的临床应用,研究进行了实验室和猪场临床效果评估,通过实验室对疫苗混合后的物理性状、疫苗效价变化进行探讨,证明联合免疫的可行性;分别选取40日龄的保育猪（2 500头）、后备母猪（1 000头）、经产母猪（1 000头）作为试验对象,将其分成5组（即：A、B、C、D、E组）通过检测口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病抗体效价来评估猪群的临床免疫效果。结果显示,3种疫苗联合免疫后效果不受影响,免疫副反应率比较低,猪只免疫次数以及人猪接触频率显著降低,特别是猪群进行二免后抗体效价更高,免疫持续期不受影响,此次研究结果适宜临床推广。     

六种猪口蹄疫OA二价灭活疫苗免疫效果的评估

为建立一种简便有效并适用于猪场的口蹄疫OA二价灭活疫苗质量评价模型,本研究对6个厂家的口蹄疫OA二价苗进行了146S抗原含量检测和猪群免疫实验。将1 341头仔猪随机分为6组,分别免疫A、B、C、D、E、F等6个厂家生产的猪口蹄疫OA二价灭活疫苗,并检测了首免后26 d、二免后30 d和出栏前(二免后85 d)猪群的抗体水平。试验结果表明,疫苗E和A的抗原含量超过30μg,疫苗F和D的抗原含量在20～30μg之间,疫苗B和C的抗原含量在10～20μg之间,但抗原含量和免疫抗体之间不存在直接的线性关系。根据本研究的抗体合格率和平均抗体效价计算模型,疫苗C和E诱导产生的首免、二免和出栏前的抗体反应最强、抗体效价更高。     

猪口蹄疫O型、A型二价3B蛋白表位缺失灭活疫苗不同首免日龄对免疫效果影响测定

为评价猪口蹄疫O型、A型二价3B蛋白表位缺失灭活疫苗不同首免时间对免疫效果的影响,选择二组不同日龄试验猪只进行免疫接种,接种疫苗当天采集试验猪血样测定母源抗体水平,并分别在首免和二免后不同间隔时间采集血样,分别用口蹄疫液相阻断ELISA和非结构蛋白抗体ELISA方法检测猪O型、A型口蹄疫抗体和非结构蛋白抗体水平。结果显示：40日龄首免的猪只,一免后31 d, A型和O型口蹄疫抗体阳性率分别为94.12%和100%,二免后60 d,分别为31.58%和36.84%;70日龄首免的猪只,一免后30 d, A型和O型口蹄疫抗体阳性率均为100%,二免后54 d,均为97.96%。表位缺失疫苗免疫后,两个试验猪群口蹄疫非结构蛋白抗体均为阴性。结果表明：70日龄首免的猪群,其口蹄疫O型和A型抗体阳性率较同期40日龄首免的猪群高,说明母源抗体水平低的仔猪对该疫苗的免疫应答水平更高。     

猪群O型口蹄疫抗体水平监测与免疫接种

为了解广西田东县猪群O型口蹄疫免疫抗体水平,采用液相阻断ELISA方法,对2014年1—12月采集经O型口蹄疫疫苗免疫28 d后的猪群血清进行抗体效价检测,对比不同规模不同猪群免疫效果,对比2种免疫模式的免疫合格率和抗体消长规律,确定生猪二免后抗体维持时间和三免日龄。结果:母猪、肉猪、仔猪免疫合格率分别为93.2%、75.8%和47.4%;规模场猪、散养猪免疫合率分别为81.9%和71.4%;2种免疫模式一免后30 d免疫合格率分别为59.1%、60.9%,二免后10、30、60、90 d均能达到免疫保护水平,且在二免后30 d最高,且可维持约60 d。结果提示:应加强散养户生猪的口蹄疫免疫;二次免疫合格率高于一次免疫合格率;生猪饲养周期过长,应在二免60 d后再次强化免疫,才能达到全程保护。     

不同抗原含量的口蹄疫三价灭活疫苗对犊牛机体抗体产生的影响

为了探究犊牛免疫口蹄疫三价灭活疫苗后抗体效价的变化规律,以及免疫不同抗原含量的口蹄疫三价灭活疫苗与犊牛机体产生的抗体效价水平的关系,试验选择30头新生犊牛连续检测母源抗体水平,母源抗体消失后,将30头犊牛分为A、B、C三组,分别使用抗原含量为4μg/mL、4μg/mL和6μg/mL的口蹄疫三价灭活疫苗各2 mL进行分组免疫;首次免疫21 d后,A、B、C三组分别使用抗原含量为4μg/mL、6μg/mL和6μg/mL的口蹄疫三价灭活疫苗各2 mL进行加强免疫。分别于首次免疫7,14,21,28,35,42,49,60,90,120天通过尾静脉采血,分离血清,采用液相阻断ELISA法对采集的犊牛血清进行口蹄疫O、A和AsiaⅠ型抗体效价检测。结果表明:3日龄犊牛母源O、A和AsiaⅠ型抗体效价平均值均大于1∶128,7日龄达到峰值,随着时间推移,呈现下降趋势,在90日龄降低到最低;首次免疫后第21天,A、B、C各组抗体效价平均水平相同,均为1∶128;加强免疫后7天,A组O、A和AsiaⅠ型抗体效价平均值均为1∶128,B、C组O、A和AsiaⅠ型抗体效价平均值为1∶256;A组抗体效价平均值于加强免疫后28天达到最高(O型和A型抗体为1∶512,AsiaⅠ型抗体为1∶362),而B、C两组抗体效价平均值则于加强免疫后14天达到最高(O、A和AsiaⅠ型抗体均为1∶512),抗体效价水平与青年牛相当。可见口蹄疫疫苗的首次免疫时间为90日龄时,母源抗体对疫苗免疫的影响最小;首次免疫时,疫苗中抗原含量对犊牛抗体效价的影响很小;二次免疫时增加抗原含量有助于快速提升犊牛体内的抗体效价,对抗体效价峰值的出现时间有着重要影响。     

CpG DNA对猪伪狂犬病佐剂疫苗免疫效果的影响

为了明确CpG DNA佐剂对猪伪狂犬病疫苗免疫效果的影响,本试验在猪伪狂犬病野毒阴性场随机选择了90头育肥猪(分为3组,每组30头),分别设为猪伪狂犬病疫苗+CpG DNA佐剂组(A),猪伪狂犬病疫苗组(B),间隔30 d二次免疫猪伪狂犬病疫苗组(C),比对A、B、C组猪只在首免前、二免前、二免后30 d、出栏前的猪伪狂犬病免疫抗体水平。结果显示:在合格率方面,A组与C组相当,且均优于B组;在抗体平均值方面,A组能够更快地刺激机体对猪伪狂犬病毒的免疫反应,产生保护性抗体。结论:CpG DNA佐剂对猪伪狂犬病疫苗有增效作用,且免疫抗体上升快,持续时间长。     

猪圆环病毒2型自然感染条件下的猪口蹄疫免疫效果调查

本研究对猪圆环病毒2型自然感染风险条件下的10窝98头仔猪随机分成口蹄疫常规和倍量2个免疫剂量组,另选5头成年母猪作为圆环感染阴性对照,仔猪于35日龄和65日龄进行猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫,并于首免前的28日龄、首免后21 d和二免后的29 d采血,5头成年母猪同期进行采血,分别进行PCV-2核酸、抗体和猪口蹄疫O型ELISA抗体检测。结果显示,成年母猪PCV-2核酸均为阴性,口蹄疫免疫抗体水平均达到≥1:128;2组仔猪首免后21 d和二免后29 d检测存在不同比率的PCV-2核酸阳性和抗体阳性,猪口蹄疫抗体合格率分别为69%、97.5%和13.8%、25%,提示断奶仔猪可能因感染PCV-2而影响了猪口蹄疫免疫效果。     

两种猪伪狂犬病毒基因缺失疫苗产前免疫母猪对仔猪抗体水平的影响

试验选择广东某规模化猪场怀孕母猪30头及其所产仔猪30头用进口猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(B苗)和国产猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗(A苗)进行免疫试验.结果表明:各组母猪产前10 天免疫接种后20～30 d的母猪抗体水平接近或达到峰值,其所产仔猪10～60 d获得的母体抗体恰巧达到最佳.根据母猪产仔时抗体水平及其后代母源抗体维持时间的关系,建议母猪产前20～30 d为猪伪狂犬病病毒加强免疫接种的适宜时间,仔猪60日龄为适宜的首免时间;使用B苗和A苗免疫对母猪产前免疫是必要的,有利于控制带毒母猪猪伪狂犬病病毒野毒的排放,降低感染其他猪只的机会,提高仔猪保护率.     

不同猪口蹄疫O型疫苗免疫效果的对比试验

为研究猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果,试验选择40~45日龄保育猪160头,随机分为两组,分别注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗,免疫后25 d采集血清、检测抗体效价。结果表明,合成肽疫苗组抗体合格率为90%,出现应激反应的比例为0;灭活疫苗组抗体合格率为75%,出现应激反应的比例为3.75%。结论:注射猪口蹄疫O型合成肽疫苗比灭活疫苗的效果好、出现应激反应的仔猪少。     

高寒牧区蕨麻猪猪瘟、口蹄疫免疫抗体消涨规律研究

本试验随机筛选出60头O型口蹄疫和猪瘟为阴性的45日龄蕨麻仔猪为试验动物,随机分成A、B、C 3组,每组20头猪,使用猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪瘟两种疫苗同步两点注射,并采用仔猪45日龄首免,首免后第155d进行第二次补免的免疫程序,在免疫后21、50、80、110、145和180d进行免疫抗体跟踪监测,探索蕨麻猪口蹄疫O型合成肽疫苗和猪瘟免疫后免疫抗体的消长规律。结果表明：A、B、C组的群体保护率都较高,未见免疫副反应,效果较好。     

口蹄疫O型、A型二价3B蛋白表位缺失灭活疫苗免疫安全性和抗体消长规律研究

为摸清口蹄疫O型、A型二价3B蛋白表位缺失灭活疫苗免疫安全性和抗体消长规律,对试验猪群进行免疫,观察其健康状况,采用口蹄疫非结构蛋白ELISA检测非结构蛋白抗体,采用液相阻断ELISA检测O型和A型口蹄疫抗体。结果显示,疫苗免疫后,猪群健康状况良好,各时间点口蹄疫非结构蛋白抗体均为阴性;免疫前、一免后29 d、61 d、95 d、123 d,二免后30 d、64 d、92 d,A型口蹄疫抗体阳性率分别为7.14%、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%,O型口蹄疫抗体阳性率分别为0、100%、100%、100%、100%、100%、100%和100%。表明该疫苗免疫猪只后,安全性好,不会诱导动物机体产生口蹄疫非结构蛋白抗体,诱导产生的高水平A型、O型口蹄疫抗体可以维持较长时间,实施一免可维持至少4个月,实施二免可维持至少3个月。     

最新4种猪口蹄疫O型灭活疫苗及O型-A型二价灭活疫苗免疫效果评估

试验选用政府招标的2家公司生产的猪口蹄疫O型灭活疫苗及猪口蹄疫O型-A型二价灭活疫苗共4种疫苗对健康仔猪按免疫程序进行试验,采用ELISA方法检测不同阶段抗体水平,以期评估不同猪口蹄疫疫苗的免疫效果。试验结果表明,2种O型疫苗免疫21 d后,其抗体阳性率就达70%,二免后抗体效价可达8log2～9log2,抗体合格率高达100%,抗体保护力持久;O型-A型二价灭活苗需2次以上免疫,才能产生较好的抗体保护力度。政府招标购买的疫苗均能产生较好的免疫效果,O型灭活苗免疫效果优于O型-A型二价灭活苗;建议口蹄疫免疫实行二次免疫,间隔28～30 d,必要时进行三免。     

三价口蹄疫灭活疫苗免疫猪后免疫效果监测

为了应对现在可能出现的A型口蹄疫疫情,本试验对口蹄疫A型、O型和亚洲1型三价灭活疫苗在猪上的使用情况进行了验证,选取了45日龄左右的仔猪36头,妊娠母猪5头,进行了疫苗免疫,并定期监测其O型、A型抗体水平,免疫后30 d仔猪O型、A型抗体水平合格率均能达到80%以上,二次免疫后可达100%,妊娠母猪免疫后O型、A型抗体水平合格率均能达到100%,所产仔猪14 d的O型抗体水平合格率也可以达到85%。     

猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗免疫抗体的检测评估

为了进一步了解猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗(多肽2700+2800+MM13)免疫效果,在吉林省选取2个规模化猪场共40头仔猪,观察注苗反应(包括过敏反应、精神状态、采食量等),并采用两种试剂盒进行抗体水平检测分析评估,掌握首免及二免后产生抗体的整体水平及合格率。结果显示,猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗接种后表现出良好的安全性,无免疫副反应;首免后30d O型及A型抗体合格率分别为100%、95%,二免后15d、45d抗体合格率均可达到100%,二免后90d、120d抗体合格率仍在95%以上。结果表明,猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗接种后能快速诱导产生高水平抗体,并且抗体持续时间长;同时也说明两种试剂盒可用于评价O型免疫抗体,而A型抗体有1种试剂盒不能用于评价,这可能与试剂盒包被的抗原类型有关。     

三种猪伪狂犬病疫苗免疫效果的比对

为了比较不同猪伪狂犬病疫苗的免疫效果,选取猪伪狂犬野毒抗体阳性场和阴性场各1个作为本次试验猪场,每个试验猪场选取40头体重相当的健康仔猪,随机分成A组、B组、C组和对照组,每组各10头。试验猪场按照各自免疫程序分别免疫A、B、C三种疫苗,对照组免疫生理盐水。在一免前1天、二免前1天和二免后28天采集所有试验仔猪血样,进行猪伪狂犬病g B抗体和g E抗体检测,观察试验组仔猪的抗体水平变化。结果表明:猪伪狂犬野毒抗体阳性场和阴性场试验仔猪一免后g B抗体均小幅下降,二免后抗体水平均明显上升,其中A疫苗g B抗体水平高于B疫苗和C疫苗。     

猪繁殖与呼吸综合征两种减毒活疫苗免疫后病毒载量及抗体水平分析

为了解A、B两种商用猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗免疫猪后病毒血症及抗体水平的差异,在后备母猪场随机选择100头35日龄后备母猪,分为A、B两组,分组后猪混养14 d。试验猪50日龄时,对A组50头后备母猪免疫A疫苗(1头份/头),B组50头后备母猪免疫B疫苗(1头份/头),疫苗免疫后0、1、2、3、5、7、10、14、21、28、35 d各组猪随机采集血样10份,荧光定量PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒载量,ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。结果显示,B疫苗免疫后,试验猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒血症期持续时间更久,持续至免疫后35 d; A疫苗免疫后,试验猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒载量更高;B疫苗免疫后试验猪的N蛋白抗体水平变化趋势更稳定;B疫苗免疫后试验猪的PRRSV GP蛋白抗体水平更高。试验结果表明B疫苗的免疫效果优于A疫苗。     

两种不同猪瘟疫苗的免疫效果比较分析

试验随机选取24头30日龄(体重范围为7.5~9.0 kg)健康仔猪,16头健康后备母猪。24头小猪随机分成两组,每组12头;16头母猪随机分成两组,每组8头;各分为试验1组和试验2组。其中仔猪和母猪的试验1组接种猪瘟疫苗A,试验2组接种猪瘟疫苗B。疫苗在0 d进行首免,30 d进行二免。每头接种2 mL。仔猪试验1组和试验2组在首免后第15、30、60天各采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。母猪试验1组和试验2组在首免后第30、60天分别采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。结果表明,不管仔猪还是母猪,接种的两种猪瘟疫苗A和B的免疫效果差异不显著(P0.05),且从总体上来看,两种猪瘟疫苗免疫60 d后都能使仔猪和后备母猪获得良好的保护力。     

台州市猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫情况调查与研究

对台州市的3个区24个猪场使用猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫情况进行了调查。临床使用情况表明,与以前使用的猪O型口蹄疫浓缩苗相比,使用该苗免疫对生猪的应激小、基本无免疫副反应;疫苗质量较稳定,抗体检测结果表明,首次免疫后15天效价较低,首免后30天检测阳性率平均为75.68%,高于部颁标准70%的抗体合格率;二免后15天、30天免疫抗体阳性率分别平均为90.81%和94.59%,因此经二次免疫后抗体效价才稳定上升,免疫效果确实。     

规模猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验

为比较猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果,选择健康仔猪134头,选用猪口蹄疫O型合成肽疫苗及由政府招投标的3家公司生产的猪口蹄疫(O型Ⅱ)灭活疫苗进行免疫效果试验。经试验,134头健康仔猪在60日龄、90日龄、120日龄分别注射不同种类的疫苗,于免疫后30 d抽取血样进行抗体检测。结果表明,经二免后的抗体合格率均能达到农业部规定的抗体合格率≥70%要求,表明采用O型合成肽疫苗及不同厂家生产的O型Ⅱ灭活疫苗经二免后猪群都能产生良好的抗体保护率。     

免疫猪群口蹄疫非结构蛋白抗体与免疫剂量的关系

为了鉴别免疫猪群3ABC抗体阳性猪是免疫动物受到病毒感染引起的,还是疫苗中残留的非结构蛋白引起的,通过检测免疫动物体内的3ABC抗体和病毒感染情况,探讨3ABC抗体的出现与免疫剂量的关系。选取60日龄保育猪20头,分成A、B、C、D 4个组,分别注射猪口蹄疫O型灭活疫苗(OS/99株)1、2、4、6m L/头。每组猪分别在免疫前1 d以及免疫后3、7、14、30和60 d,采集血清和鼻咽拭子,使用口蹄疫3ABC间接ELISA检测试剂盒、口蹄疫多重RT-PCR检测试剂盒以及病毒分离试验,检测3ABC抗体和病毒感染情况,发现保育猪在低剂量(1 m L/头或2 m L/头)免疫后没有检测到非结构蛋白抗体,而高剂量(4 m L/头或6m L/头)免疫后出现非结构蛋白抗体阳性率升高,而且出现非结构蛋白抗体阳性的动物中没有检出病毒感染或病毒核酸。检测结果提示这些免疫猪群非结构蛋白抗体的形成与免疫剂量有关。