山羊化脓隐秘杆菌分离鉴定及其神经氨酸酶遗传进化分析

为确诊重庆涪陵地区一山羊养殖场发生山羊皮下脓肿的病原,采集病料分离病原、进行药敏试验。通过生化试验和16S rRNA分子方法鉴定病原菌;PCR扩增分离株的神经氨酸酶基因(neuraminidase,NA),并利用细菌神经氨酸酶的隐马尔科夫模型(Pfam编号为PF13088)搜索自建的本地蛋白质组数据库,通过MEGA7.0构建系统进化树,从而分析神经氨酸酶基因在脊椎动物、寄生虫、真菌、细菌和病毒中的遗传进化特征,并利用PredictProtein进行分离株神经氨酸酶的点突变分析。结果表明,分离株的16S rRNA基因与JQ975932.1(中国新疆)株化脓隐秘杆菌序列同源性高达99.7%,结合生化特性确诊分离株为化脓隐秘杆菌;利用模型进行检索,共检索到214条神经氨酸酶氨基酸序列。神经氨酸酶遗传系统进化树显示,细菌神经氨酸酶主要集中在放线菌门中,脊椎动物的神经氨酸酶主要聚集在GroupⅠ和GroupⅡ,寄生虫的神经氨酸酶主要集中于GroupⅠ,真菌神经氨酸酶分布较广,存在GroupⅠ、GroupⅡ以及GroupⅣ中,而病毒神经氨酸酶主要分布于GroupⅠ和GroupⅡ。点突变分析表明,细菌神经氨酸酶不同位点的氨基酸突变对神经氨酸酶功能的影响不同。     

化脓隐秘杆菌的特性及化脓隐秘杆菌病的防治

化脓隐秘杆菌原称化脓棒状杆菌（Corynebacterium pyogenes）、化脓放线菌（Actinomyces pyogenes）,1997年定名为化脓隐秘杆菌（Arcanobacterium pyogenes）。该菌是隐秘杆菌属中毒力最强的病原体,是经济型家畜（牛、羊和猪）的一种条件性致病菌,也是这些动物黏膜上的一种共生体,大部分寄居在健康动物的乳房、泌尿生殖道、呼吸道和胃肠道黏膜。     

化脓隐秘杆菌的研究进展

化脓隐秘杆菌是引起家畜乳房炎、子宫内膜炎、肺炎等感染的重要病原菌之一,给养殖业带来了较大的损失。在我国,90%以上的奶牛子宫内膜炎是由病原微生物引起的,经鉴定其中23.5%微生物是化脓隐秘杆菌,因此,深入地研究和探索化脓隐秘杆菌不仅对有效防治奶牛子宫内膜炎具有指导意义,而且对控制病原菌的传播提供重要的理论依据。     

浅谈化脓隐秘杆菌的研究进展

正化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes),曾被称为化脓放线菌、化脓棒状菌,1997年重新被归类为化脓隐秘杆菌属~[1]。化脓隐秘杆菌为无芽孢、无荚膜、无鞭毛、不运动、兼性厌氧、多形性的革兰阳性菌~[2]。它对生长条件要求不高,但需在富含血液或血清的培养基中培养。化脓隐秘杆菌的生化特性是可发酵葡萄糖、麦芽糖、山梨醇,不发酵蔗糖、山梨醇、鼠李糖~[1]。化脓隐秘杆菌是一种重要的条件致病菌,其作为皮肤和黏膜生物菌群的一部分,常寄居在     

猪化脓隐秘杆菌的分离及鉴定

化脓隐秘杆菌根据16SrRNA基因序列分析结果,将其归入隐秘杆菌属,主要存在动物的黏膜上,是一种条件致病菌,可引起各种非特异性化脓性感染,部分临床症状与副猪嗜血杆菌相似;一起疑似副猪的检测过程中分离到一株优势菌株,经形态学、生化、16SrRNA鉴定、同源性比对和临床症状确定为化脓隐秘杆菌;药敏试验结果为病原菌对头孢噻呋钠、杆菌肽、卡那霉素、庆大霉素、阿米卡星、恩诺沙星高度敏感,对所选其余药物不敏感。     

化脓隐秘杆菌毒力因子的研究进展

化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)又名化脓放线菌或化脓棒状杆菌,为革兰染色阳性的短棒状杆菌,普遍存在于牛、羊、猪和其他重要经济动物的黏膜上[1],是一种条件性致病菌.化脓隐秘杆菌可在家畜间广泛传播,导致广泛多样的皮肤、内脏器官和关节的非特异性化脓性感染,如急性化脓性乳房炎、慢性脓肿性乳房炎、关节炎、心内膜炎、肝脓肿、子宫炎以及流产和不孕等,给养殖业带来较大的经济损失.     

猪化脓隐秘杆菌的分离鉴定

<正>化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)常引起牛、羊、猪等动物的化脓性感染,主要表现为肺炎、关节炎、心内膜炎、乳腺炎、皮下脓肿等〔1〕,给养殖业带来较大的经济损失。化脓隐秘杆菌以前被称为化脓棒状杆菌、化脓放线菌,1997年Pascual Ramos等〔2〕将该菌从放线杆菌属中重新分类为隐秘杆菌属。化脓隐秘杆菌是隐秘杆菌属中致病力最强的病原体,是经济型家畜(牛、羊和猪)的一种     

化脓隐秘杆菌溶血素的研究进展

化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)是一种条件性致病菌,可在家畜间广泛传播,常导致多种动物如牛、羊、猪和人多种器官的化脓性感染,如肺炎、关节为、心内膜炎、乳房炎、脓肿、骨髓炎及子宫炎等[1].     

某猪场支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌混合感染的病原分离鉴定及药敏试验

支气管败血波氏杆菌是引起猪萎缩性鼻炎的病原之一,化脓隐秘杆菌是一种感染牛、羊、猪等动物的机会致病菌.国内目前没有关于二者混合感染猪的报道.本研究从陕西省某猪场发病仔猪肺脏中分离出两株病原菌,经染色镜检、生化试验和16S rDNA测序鉴定,确定病原菌为支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌.采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,发...     

猪化脓隐秘杆菌的分离与鉴定

从一例肝、肺化脓性结节,脾出血性肿大的病猪体内分离到一株革兰氏阳性、细长、形态不规则的杆菌,该菌在TSA平板、普通绵羊血琼脂、巧克力平板上生长缓慢,在普通绵羊血琼脂上呈α-溶血。对该菌的16S rDNA进行PCR扩增、测序、比较,结果显示该菌与化脓隐秘杆菌的16S rDNA有99%的同源性,进一步用API生化鉴定,结果也与其相符。该菌在24~52 h内100%致死小白鼠,腹腔接种新西兰兔,接种兔72 h内死亡,表明该菌为致病性细菌。     

犊牛化脓隐秘杆菌性肺炎的病原鉴定

2007年11月,黑龙江省某农场肉牛爆发传染病,以犊牛化脓性肺炎为特征,平均发病率达58%,死亡及淘汰率达9.3%。从病死牛内脏器官分离到一种具有多形性的革兰氏阳性杆菌,把分离的菌株接种小白鼠证明具有较强的致病性,经生物学特性鉴定,以及应用PCR方法获得16S rRNA基因并进行克隆测序分析,结果证明分离的细菌是化脓隐秘杆菌。药敏试验结果表明该细菌对阿奇霉素、红霉素和四环素等药物高度敏感,应用敏感药物通过气管内注射的方式使疫情得到有效控制。     

化脓隐秘杆菌溶血素蛋白的原核表达及其溶血活性鉴定

为研究化脓隐秘杆菌致病机制及其病原学诊断方法,本研究克隆了编码化脓隐秘杆菌溶血素蛋白的plo基因,并构建重组表达质粒pET-plo,转化大肠杆菌Rosetta (DE3)感受态细胞中诱导表达.SDS-PAGE检测结果显示,表达的重组蛋白约为62 ku,western blot分析表明表达的重组蛋白可以与鼠抗化脓隐秘杆菌血清发生反应.采用重组蛋白免疫新西兰白兔制备的多克隆抗体效价达到1∶128 000,western blot和琼脂双扩散试验表明制备的多克隆抗体能够与天然PLO蛋白发生反应.溶血试验表明重组蛋白能够溶解红细胞,制备的多克隆抗体能有效中和重组蛋白的溶血活性.     

利血平对化脓隐秘杆菌大环内酯类外排基因mefA表达的影响

化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes,T.pyogenes)是一种能够引起动物和人化脓性感染的重要病原菌.随着抗生素的广泛使用,该菌已对临床常用的大环内酯类、四环素类等药物产生不同程度的耐药性.本试验拟探讨外排泵抑制剂利血平对T.pyogenes大环内酯类外排基因mefA mRNA及蛋白表达的影响,将...     

取代基对黄酮类化合物流感病毒神经氨酸酶抑制活性的影响

本试验旨在研究取代基对黄酮类化合物流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)抑制活性的影响,为黄酮类流感病毒神经氨酸酶抑制剂的研发提供理论依据。应用流感病毒神经氨酸酶活性抑制试验评价了4种黄酮类化合物对NA的抑制活性。芹菜素-7-葡萄糖苷、芹菜素具有H9N2亚型流感病毒NA抑制活性,蒙花苷、汉黄芩苷无H9N2亚型流感病毒NA抑制活性。4'位的取代羟基对于黄酮类化合物的NA抑制活性不可或缺,7位的糖苷键能增强该类化合物的NA抑制活性。     

三峡库区山羊化脓隐秘杆菌的自然感染情况

正化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)属于隐秘杆菌属成员,是一种条件性致病菌。该菌主要寄生在牛、羊及野生反刍动物的上呼吸道、消化道等黏膜处,常与大肠杆菌、连球菌等混合感染,导致家畜发生肺炎、关节炎、皮下脓肿、流产、死胎等现象,同时也可能引起人感染致病,给人类健康带来     

牛源化脓隐秘杆菌cbpA基因的克隆及原核表达

为研究化脓隐秘杆菌(A.pyogenes) CbpA蛋白的反应原性,本研究以A.pyogenes H1j1005株为模板采用PCR方法扩增cbpA基因,并构建重组表达质粒pET-cbpA,将其转化至大肠杆菌感受态细胞Rosetta (DE53)plysS中,经IPTG诱导,用SDS-PAGE及western blot检测目的蛋白的表达情况及其反应原性.SDS-PAGE分析表明获得了约120 ku的蛋白.Western blot检测表明,CbpA蛋白可以与A.pyogenes阳性血清发生特异性反应,表明其有良好的反应原性.     

牛感染化脓隐秘杆菌引发肺炎的诊治

正化脓隐秘杆菌又称化脓棒状杆菌,是经济型家畜的一种条件性致病菌,主要寄居在动物呼吸器官、泌尿生殖器官黏膜上的一种共生体[1],在条件作用下致病,往往给养殖业造成重大经济损失。2018年10月南宁市郊某规模牛场有4头牛发病,因初期临床表现有高热、血尿、拉稀及消瘦等症状,被误诊为牛巴贝斯虫病进行治疗。12月患牛再次发病,后经临床与实验室检查确诊为化脓隐秘杆菌引发的肺炎,及时调整治疗方案,患牛明显好转,经持续用药后患牛痊愈。现将发病经过,实验室     

山羊化脓隐秘杆菌的分离鉴定与分析

通过对重庆某羊场送检病死羊只进行病原菌的分离培养、形态学鉴定、生化鉴定、药敏试验、致病性试验及16S r RNA序列分析。结果从病变组织中分离到1株革兰阳性短棒状杆菌,其对多种抗生素敏感,能够引起小鼠肝脏和肺脏发生病变,PCR扩增出长为1 434 bp的目的序列,已被Gen Bank数据库收录,序列号为KJ842125,将该序列与NCBI中公布的序列进行比对,发现所得序列与化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes,登陆编号为HQ712123)同源性高达98%,将该序列与其相关性较高菌株的16S r RNA构建系统发育进化树,与化脓隐秘杆菌聚为一簇。本研究为化脓隐秘杆菌致病机理、诊断技术和疾病控制奠定了基础。     

山羊感染牛源化脓隐秘杆菌的病理学变化

为了研究化脓隐秘杆菌感染山羊后的病理变化,试验采用分离的牛源化脓隐秘杆菌对山羊进行攻毒,采用黑龙江八一农垦大学动物科技学院病理课题组的国家发明专利的组织切片技术进行病理学观察。结果表明:山羊接种牛源化脓隐秘杆菌7 d后发生死亡,山羊接种部位皮肤坏死;胸腔积液,胸膜增厚;各个脏器肿大、出血、坏死。各个脏器间有中性粒细胞浸润及组织细胞坏死,以肺脏病变较为明显,表现为坏死性、化脓性炎。说明山羊可以作为化脓隐秘杆菌病的制备动物模型的可选动物之一。     

牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定与黔中金荞麦体外抑菌试验

为分离致病性牛源化脓隐秘杆菌并探究黔中金荞麦对该菌的体外抑制作用,本试验对采集于贵州省凯里市某养殖场疑似患牛呼吸道综合征的病死牛肺组织进行细菌分离、形态学观察、生理生化鉴定、分子生物学鉴定、药敏试验和致病性试验,并运用打孔法探究黔中金荞麦提取物对分离菌株的体外抑制效果。结果显示,分离菌株为革兰阳性短棒状杆菌,结合生理生化和PCR鉴定结果,确定该菌为化脓隐秘杆菌,系统进化树分析也显示,分离菌株与化脓隐秘杆菌的模式菌株处于同一分支;该分离菌株可致10只小鼠于24 h内全部死亡;其对头孢他啶、利福平、青霉素等7种抗菌药敏感,对环丙沙星中介,对克林霉素、左氧氟沙星、庆大霉素等8种抗菌药耐药;黔中金荞麦不同组织部位、不同处理方法的提取物对该分离菌株均具有一定抑制效果,其中地下部分70%乙醇超声30 min提取物的抑菌效果最好,抑菌圈直径为(28.13±0.25) mm,与头孢喹肟的抑菌效果相当。本试验首次从贵州地区分离到致病性牛源化脓隐秘杆菌,黔中金荞麦对该菌具有良好的体外抑制效果。本试验结果可为该肉牛养殖场疫病防控以及牛化脓隐秘杆菌感染的治疗和预防提供参考依据。