不同饲喂方式和温度对长角血蜱甘肃株生物学特性的影响

在不同饲喂方式和温度条件下,观察我国北方长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)甘肃株的生活史及对其生物学特性的影响。将试验蜱分组后置于不同饲喂方式和温度下,待其发育到下一阶段,叮咬实验动物,连续调查其发育阶段的生物学特性。研究发现,完成一个世代需101 d～148 d。成年饥饿雌蜱吸血期具有两个显著特征:缓慢吸血和快速吸血;经兔体叮咬的成年雌蜱其饱血体重小于羊体。不同饲喂条件下长角血蜱饱血体重、产卵量差异极显著(P0.01);在一定温度范围内,幼蜱、若蜱的蜕变时间随温度的升高而缩短;当饱血雌蜱处于发育阶段时,产卵前期、产卵期及卵的孵化期均随着温度的升高而缩短;16℃～30℃条件下长角血蜱产卵量没有变化,利于蜱的存活;4℃以下和45℃以上饱血蜱及其后代不能存活;16℃以下蜱的发育周期延长。结果表明,长角血蜱为三宿主蜱;雄蜱可以帮助雌蜱吸血;在羊体上的吸血能力优于在兔体上的吸血能力;温度对长角血蜱的发育繁殖有影响。     

家兔抗长角血蜱免疫模型的建立及对长角血蜱成蜱生长发育的影响

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔对长角血蜱成蜱的吸血和生长发育影响显著,其抗体水平与长角血蜱成蜱在兔体的吸血周期、死亡率成正相关,与雌蜱的饱血脱落率、饱血体重成负相关。结果进一步证明,蜱的唾液腺是其主要的免疫器官之一。家兔抗体水平的持续期足以使长角血蜱完成一个世代,可以满足试验需求,是抗蜱免疫研究理想的阳性对照模型。同时,血清中特异性抗体的效价也可以作为判断动物对长角血蜱抵抗力强弱的重要指标之一。     

长角血蜱季节高峰与羊附红细胞体病、焦虫病发病关系及对长角血蜱的驱杀试验

蜱是自然界一个庞大的生物群,长角血蜱侵袭能引起羊瘙痒、消瘦、贫血、生产能力下降,还能传播羊附红细胞体病、焦虫病、炭疽病、布氏杆菌病,引起羊的大批疫病和死亡,以及危害人的身体健康,给养羊业造成极大的危害。本试验旨在本地区长角血蜱活动的季节高峰,以及长角血蜱季节高峰与羊附红细胞体、焦虫病发病高峰的关系,研究在不同季节长角血蜱易于寄生的部位,之后进行了不同药物对长角血蜱驱杀试验,筛选出以40%除癞灵+伊虫克注射液组合驱杀长角血蜱效果最好,从而为长角血蜱及羊附红细胞体病、羊焦虫病防治药物选用和用药方法上提供了科学依据。     

嗜群血蜱和长角血蜱ITS-2、COⅠ和COⅡ基因序列变异与亲缘关系分析

本研究旨在阐明长角血蜱与嗜群血蜱间的亲缘关系。采用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱基因组DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)片段、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)片段和线粒体细胞色素氧化酶亚基II基因(COⅡ)片段,并进行测序,进而分析其基因变异与系统发育。结果表明,长角血蜱和嗜群血蜱的ITS-2、COⅠ和COⅡ基因片段的大小存在差异,长角血蜱3种基因分别为361、479和647bp,嗜群血蜱基因分别为354、474和661bp。长角血蜱与嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因的相似性分别为84.2%、89.0%和88.4%。以3种基因构建的NJ进化树中,长角血蜱和嗜群血蜱均聚类。因此,认为长角血蜱和嗜群血蜱间ITS-2、COI和COII基因间变异较小,它们是血蜱属中亲缘关系较近的2个有效种,支持传统形态学的分类地位。     

长角血蜱孤雌生殖与两性生殖种群的CO I基因序列的特征性差异

长角血蜱是我国常见的一种硬蜱,在自然界存在孤雌生殖和两性生殖的种群。本研究通过对分离的长角血蜱孤雌生殖上海株、安徽株和山东株的线粒体细胞氧化酶I（COI）基因部分序列进行了测定,并与国内其他单位所测定的两性或孤雌生殖的多株长角血蜱COI基因序列进行了比对分析。结果发现,长角血蜱孤雌生殖种群与两性生殖种群的COI基因序列存在特征性差异;COI基因序列可应用于长角血蜱的孤雌生殖种群和两性生殖种群的快速鉴定。     

我国中东部地区宠物犬蜱种类及其分布调查

为了解我国宠物犬的蜱种类及分布情况,为防治提供基础资料,本研究采集了我国北京、上海、广州等20个城市122家宠物医院犬体表寄生的蜱1 550只,进行犬体寄生蜱的种类鉴定。鉴定结果表明:血红扇头蜱、长角血蜱及镰形扇头蜱是我国宠物犬主要寄生蜱类,不同发育阶段的蜱均可犬体寄生,而成蜱是主要的寄生阶段。调查结果提示,我国宠物犬蜱分布广,种类较多,由于蜱虫同样可感染人,而且携带大量蜱媒病,应引起临床兽医和公共卫生部门的关注。     

嗜群血蜱和长角血蜱ITS-2、COI和COⅡ基因序列变异与亲缘关系分析

本研究旨在阐明长角血蜱与嗜群血蜱间的亲缘关系.采用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱基因组DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)片段、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COI)片段和线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅱ基因(COⅡ)片段,并进行测序,进而分析其基因变异与系统发育.结果表明,长角血蜱和嗜群血蜱的ITS-2、COⅠ和COⅡ基因片段的大小存在差异,长角血蜱3种基因分别为361、479和647 bp,嗜群血蜱基因分别为354、474和661 bp.长角血蜱与嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因的相似性分别为84.2%、89.0%和88.4%.以3种基因构建的NJ进化树中,长角血蜱和嗜群血蜱均聚类.因此,认为长角血蜱和嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因间变异较小,它们是血蜱属中亲缘关系较近的2个有效种,支持传统形态学的分类地位.     

长角血蜱甘肃株肌钙蛋白基因P27/30的克隆和序列分析

参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株肌钙蛋白P27/30基因的核苷酸序列,设计合成一对引物,从本实验室保藏的干净长角血蜱卵中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出607 bp的肌钙蛋白基因,将其克隆于PGEM-T-Easy载体,对其进行序列分析,并推导出氨基酸序列,将这一序列与国内外已发表的长角血蜱肌钙蛋白基因进行比较分析。结果表明本实验室保藏的长角血蜱甘肃株与上述已发表的Okayama株核苷酸序列同源性为92.1%,氨基酸同源性为86%。长角血蜱甘肃株与Okayama株、四川孤雌生殖株的发育有一定差异。经RT-PCR分析表明,该基因在长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱和饥饿成蜱这几个阶段均有表达。     

甘肃省部分牛羊血液原虫传播媒介的实验研究

利用蜱传播试验,确定了甘肃省一些牛羊血液原虫的媒介和传播方式。甘肃省牛的双芽巴贝斯虫媒介为微小牛蜱。大巴贝斯虫媒介为长角血蜱。瑟氏泰 勒虫媒介为长角血蜱;绵羊无浆体的媒介为草原革蜱。微小牛蜱、长角血蜱可分别传播双芽巴贝斯虫和大巴贝斯虫,传播方式为经卵传递。将采集于甘肃文县牛体上的微小牛蜱和两当县的长角血蜱饱血雌虫孵育而来的次代幼虫分别叮咬除脾牛体后,２头牛各自感染双芽巴贝斯虫或大巴贝斯虫。将采自崇     

河北省长角血蜱的区系调查及季节动态观察

通过野外定点观察发现长角血蜱是河北省危害家畜的主要蜱种，分布于该省西部的太行山和北部的燕山地区，牛，羊是其主要宿主，该蜱以饥饿的成虫，若虫越冬，每年从３月下旬开始活动侵袭畜体，最迟１１月中旬消失，若虫在４月底到６月中旬为活动盛期，成虫在６月下旬至７月下旬为活动盛期，幼虫在８月中旬至９月下旬为活动盛期。该蜱的３个活跃期以幼虫阶段对外界和主要灭蜱剂的耐受性最低。     

图们江下游部分牧场硬蜱区系及生态特点调查

对图们江下游部分牧场黄牛体表寄生蜱调查表明，该地区的蜱有血蜱属长角血蜱（Ｈａｅｍａｐｈｙｓａｌｉｓ ｌｏｎｇｉｃｏｒｎｉｓ和硬蜱属全沟硬蜱（Ｉｘｏｄｅｓ ｐｅｒｓｕｌｃａｔｕｓ），２种蜱分别占９３．２１％和６．７７％；黄牛的感染率为１００％，感染强度为１２１￣３２７０只；在２个硬蜱生境地带２种蜱的分布基本相同。当地优势种长角血蜱在宿主体表的分布无规律性，但以宿主前躯寄生数量较多。长角血蜱的若虫、成     

长角血蜱的免疫研究进展

以长角血蜱疫苗候选抗原为例，从长角血蜱蛋白水解酶、蜱生殖和发育相关分子及RNA干扰技术、IgG结合蛋白技术几方面概述了近年来国内外有关蜱疫苗的研究现状，并展望了蜱疫苗的发展趋势。     

天津西部地区蜱种类调查

通过对天津西部地区德丰羊场波尔山羊蜱进行调查,结果表明,该地区的蜱均为硬蜱科,共分两个属两个种,即璃眼蜱属残缘璃眼蜱和血蜱属长角血蜱。两种蜱分别占8313％和16．7％,当地优势种为残缘璃眼蜱,残缘璃眼蜱在宿主的体表分布无规律性,多寄生在后躯部,以股内侧为多。长角血蜱在宿主体表分布亦无规律性,但以宿主前驱寄生数量较多,主要在耳部,颈部和腹内侧。     

天津西部地区蜱种类调查

通过对天津西部地区德丰羊场波尔山羊蜱进行调查,结果表明,该地区的蜱均为硬蜱科,共分两个属两个种,即璃眼蜱属残缘璃眼蜱和血蜱属长角血蜱。两种蜱分别占8313％和16．7％,当地优势种为残缘璃眼蜱,残缘璃眼蜱在宿主的体表分布无规律性,多寄生在后躯部,以股内侧为多。长角血蜱在宿主体表分布亦无规律性,但以宿主前驱寄生数量较多,主要在耳部,颈部和腹内侧。     

长角血蜱保护性抗原基因P27/30的克隆和原核表达

采用RT—PCR技术首次从孤雌生殖长角血蜱四川株克隆到P27／30基因,扩增序列全长670bp,包含完整的开放阅读框,编码201个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为23．38ku。同源性分析表明孤雌生殖长角血蜱中国株与日本株P27／30基因同源性高达99．85％。经RT—PCR检测分析,该基因在孤雌生殖长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱、饥饿成蜱和饱血成蜱这几个阶段均有表达。将该基因亚克隆后连接到pET32a（＋）原核表达载体,转化BL21（DEa）宿主菌,经IPTG诱导可成功进行表达。表达的目的蛋白大小为24ku左右,与预期大小一致;Western-blot显示兔抗长角血蜱全虫抗体能够识别该重组表达蛋白。     

羊源长角血蜱吸血后中肠优势菌群分析

本研究采用PCR-DGGE技术分析长角血蜱的中肠菌群结构。无菌条件下采集长角血蜱中肠内容物,以细菌基因组DNA提取试剂盒提取内容物细菌总DNA,以通用引物扩增制备16S r DNA V3区,DGGE电泳分离后,切胶回收、测定序列。结果表明,长角血蜱饱血雌成蜱中肠优势菌为泛菌属、柯克斯氏体属、肠杆菌属、绿脓杆菌属、假单胞菌属、克雷伯氏菌属、欧文氏菌属,但半饱血雌成蜱和雄成蜱中肠未检测到柯克斯氏体属(Coxiella)。     

半散放麋鹿长角血蜱病的诊治

长角血蜱（Haemaphysalis Longicorni,）是属蛛形纲、蜱螨目、硬蜱科、血蜱属的一种节肢动物。分布较广泛，未成熟吸血时体小而不易引人注意。由于生活方式的多样性，它寄生于多种动物体表，对人也有侵袭，并且许多性疾病的传播媒介，对此国内早有研究。但长角血蜱寄生半散放麋鹿体表而致病死亡的情况尚未有报导，     

长须血蜱和长角血蜱在大熊猫体表发现

1985年春天,我们从四川平武大熊猫自然保护区采集到寄生于大熊猫体表的蜱近百个,经鉴定它们隶属于蜱科(Ixodidae)的2属5种,即:卵形硬蜱Ixodes ovatus、锐跗硬蜱 Ixodes acutitarsus、巨棘血蜱 Haemaphysalis megaspinosa、长须血蜱Haemaphysalis aponommoides和长角血蜱Haemaphysalis longicornis。其中巨棘血蜱为优势种。而长须血蜱和长角血蜱寄生于大熊猫体表,乃属首次发现。本文就这三种蜱的雄虫形态特征作一简单描述。 1.巨棘血蜱Haemaphysalis me gaspinosa 此蜱与褐色血蜱Haemaphysalis flava外观相近,但体带褐色且较深可资区别,雌雄两性的虫体大     

延边某地长角血蜱和全沟硬蜱体内东方泰勒虫的分子生物学检测

为调查吉林省延边地区自然生境内游离蜱携带东方泰勒虫的情况,以东方泰勒虫主要表面蛋白基因(MPSP)基因为靶基因,采用PCR方法对延边地区自然生境内的游离蜱DNA进行扩增。在长角血蜱的DNA中检测了东方泰勒虫,检出率为29%;而全沟硬蜱中没有检测到东方泰勒虫。结果表明,自然生境中的游离长角血蜱体内携带着东方泰勒虫。     

蜱源淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒的分子特征

淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic chorimeningtis virus,LCMV)是一种经鼠传播的人畜共患病毒。为明确东北地区LCMV在蜱的感染本底,2015年在吉林省采集蜱534只,其中草原革蜱占43.1%;森林革蜱38.4%;长角血蜱11.4%和全沟硬蜱7.1%。将采集蜱按蜱种及地区分组,进行宏病毒组测序,发现蜱感染LCMV。通过RT-PCR检测发现吉林省LCMV蜱感染率为3.5%,其中长角血蜱、草原革蜱、森林革蜱和全沟硬蜱感染率分别为12.2%,2.5%,4.4%和2.5%,长角血蜱携带率最高。通过全基因组测序获得LCMV全基因组序列,并对其进行遗传进化分析,结果表明东北地区蜱感染的LCMV属于基因Ⅰ型,提示蜱可能作为LCMV的传播媒介。本研究确定了东北地区蜱的LCMV感染率及基因型,为LCMV的防控监测提供科学依据。