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沙门氏菌鞭毛蛋白的提纯与鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
经半固体诱导,用M-肉汤培养沙门氏菌,离心收集细菌,将其悬浮于pH2.0溶液中,室温缓慢振荡30分钟,再经差速离心取上清液用NaOH溶液调pH至7.2左右,经硫酸铵沉淀,过Sephacry1 S-300柱,收集第一峰。电镜观察、SDS-PAGE,等电聚焦试验及ELISA试验结果均表明提纯的鞭毛蛋白纯度高。 相似文献
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本试验旨在表达并纯化鞭毛蛋白,为研究并获得高效蛋白佐剂奠定基础。用PCR扩增鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因fljB、fljB’和fliC,将扩增产物克隆至pMD19-T Simple Vector上,构建了克隆质粒pMD19-fljB、pMD19-fljB’和pMD19-fliC。克隆质粒经双酶切后将片段克隆至pET-30a中,构建原核表达质粒pET30a-fljB、pET30a-fljB’fliC和pET30a-fliC。经PCR、酶切及测序鉴定后将阳性表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达后的菌体经超声处理取上清,用Ni柱进行纯化。Western blotting证实了表达的蛋白能与豚鼠抗鞭毛蛋白血清发生特异性反应。通过优化表达条件,鞭毛蛋白fljB、fliC和fljB’fliC均以可溶性表达,纯化得到的鞭毛蛋白为后续评价其佐剂效应奠定基础。 相似文献
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沙门氏菌病(Salmonellosis),又名副伤寒(paratyphoid)是由肠杆菌科沙门氏菌属的细菌引起的畜、禽、啮齿动物和人的一种散发性传染病。本病遍及全球,特别是热带和亚热带地区更为严重。它是世界各国,尤其是发展中国家的一个十分重要的疾病。据报告,沙门氏菌引起食物中毒在美、日等国占第1~3位,其中 相似文献
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《畜牧兽医科技信息》2017,(1)
目的:对送检的疑似沙门氏菌感染的病死产蛋鸡,进行病原的分离鉴定,为该病的实验室诊断提供参考。方法:挑取送检的病死产蛋鸡肝脏组织在麦康凯琼脂上进行病原的分离培养、形态观察及生化试验。结果:从上述麦康凯琼脂上分离到一株两端钝圆、中等大小、革兰氏阴性菌,该分离菌能利用葡萄糖和麦芽糖,均既产酸又产气,但不能利用乳糖和蔗糖;MR试验和枸橼酸盐利用试验为阳性,吲哚形成试验、VP试验和脲酶试验均为阴性。结论:该送检病死产蛋鸡为沙门氏菌病。 相似文献
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吉林省某鸡场1988年从美国引进一批雏鸡,到场后当天即有发生腹泻死亡病例。经病原菌分离培养、生化和血清学试验,确诊为由哈特福德沙门氏菌(S.hartford)感染引起的副伤寒。该菌为C_1群沙门氏菌,抗原式为6,7:y:e,n,x.在国内从病鸡中检出哈特福德沙门氏菌尚属首次。 相似文献
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吉林省某鸡场1988年从美国引进一批雏鸡,到场后当天即有发生腹泻死亡病例。经的菌分离培养、生化和血清学试验,确诊为由哈特福德沙门氏菌(S.hartford)感染引起的副伤寒,该菌为C1群沙门氏菌,抗原式为6,7:y:e,n,x,在国内外病鸡中检出哈特福德沙门氏菌尚属首次。 相似文献
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雏鸡沙门氏菌的分离与鉴定 总被引:2,自引:1,他引:2
鸡的沙门氏菌病 ( Salmonellosis avian)是由某些特定血清型的沙门氏菌 ( Salmonella)所引起的一类传染病的总称 ,对养鸡生产及食品卫生具有较大危害。鸡的沙门氏菌感染多以单血清型为主。鸡伤寒沙门氏菌 ( S.gallinarum)通常引起成年鸡发生急性或慢性败血病 ,但以雏鸡死亡率为高 [1,2 ] 。鸡白痢沙门氏菌 ( S.pullorum)主要引起雏鸡、雏火鸡的白痢 [3 ] 。近年来河北卢龙、昌黎等地大面积暴发雏鸡沙门氏菌病 ,引起大批雏鸡死亡。经鉴定为鸡伤寒和鸡白痢沙门氏菌混合感染所致。1 材料与方法1 .1 材料1 .1 .1 被检材料 1 5只死雏鸡均… 相似文献
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努斯热提古力·买买提 《畜牧兽医科技信息》2012,(12):33-34
2012年3月,托克逊县某个体养鸡场10日龄的雏鸡(火鸡)突然发生一种高发病率、高死亡率的传染病.根据临床症状、病理变化、细菌分离与鉴定、致病性实验及药敏实验,确诊为鸡沙门氏菌,并且具有较强的毒力.对该菌的11种临床常用抗菌药物的药敏试验结果表明磺胺间甲氧嘧啶,卡那霉素,丁胺卡那霉素,甲砜霉素对分离菌株敏感性最好. 相似文献
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为了探究沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位阳性克隆生物学特性。用从噬菌体线性肽库及限制性库中筛选出的阳性克隆1和62分别免疫BALB/c小鼠,其高免血清对单抗de7的竞争-ELISA郊价达10^6以上,而其他血清则无抑制作用。在间接免疫荧光试验中,免疫血清均能与11株不同血清型的沙门氏菌反应,而不与大肠杆菌反应。以上结果表明,筛选获得的沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位,不仅很好地模拟了天然表位,而且具有很好的抗原性。这为该表位分子基础及模拟表位疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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川西北高原的红原、若尔盖、阿坝和松潘等县的部分地区,牦牛发生以高热和下痢为特征的急性或慢性传染病。经调查11个分场的27个发病牛群,发病率为2.76— 相似文献
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沙门氏菌鞭毛蛋白属共同抗原表位及其免疫生物学特性 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究在研制出针对沙门菌鞭毛蛋白的蛋特异性单抗基础上,应用该单抗在免疫荧光、免疫胶体金试验、SDS-PAGE和免疫转印分析中,证实鞭毛蛋白携带该菌属共同抗原表位,并定位于F27片段上。 相似文献
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采用硫酸铵盐析和Agarose-Protein G亲和层析相结合的方法,从兰狐和银黑狐血清中提取和纯化了免疫球蛋白(IgG),应用SDS-PAGE分析表明:提纯的免疫球蛋白纯度高,重链和轻链的分子量分别为45ku和21ku左右;以犬瘟热病毒(CDV)为包被抗原的间接ELISA试验结果表明:提纯的蛋白免疫小鼠分别制备的抗兰狐和银黑狐免疫球蛋白抗体作为二抗检测CDV阳性血清具有良好的生物活性。本研究制备的高纯度的兰狐和银黑狐免疫球蛋白,对今后狐源CDV等疫病血清流行病学的调查、诊断试剂盒的开发及疫苗免疫效果的评价奠定了基础。 相似文献
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沙门氏菌病(Salmonellosis)又名副伤寒(Paratyphoid),是各种动物由沙门氏菌属细菌引起疾病的总称。沙门氏菌属的血清型很多,有2500多种。绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,常侵害幼、青年动物,使之发生败血病、胃肠炎及其他组织的局部炎症。2003年2月上海某养鸽场的鸽子发病,由零星发病发展至全群。其临床症状主要表现为食量减少,口腔分泌物增多,羽毛蓬松杂乱, 相似文献
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鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
在禽类 ,沙门氏菌可引起鸡白痢、鸡伤寒和副伤寒。其中鸡白痢沙门氏菌感染往往是终生带菌的 ,感染母鸡所产的蛋 ,高达 1/ 3带菌。带菌蛋的孵化率低 ,孵出的雏鸡的成活率也低[1,2 ] 。所以 ,鸡白痢所造成的经济损失是巨大的。2 0 0 2年 8月南宁市某养鸡场有一群 8- 11日龄的雏鸡发病 ,发病率为 10 % ,死亡率为1%。经实验室的细菌分离和一系列的生化试验 ,确诊该群雏鸡感染了鸡白痢沙门氏菌。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 培养基血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板、伊红美兰平板、半固体培养基等常用培养基 ,由本室制备和保存。1.1.2 生化反应管… 相似文献