B6-Co小鼠眼角膜组织观察及血管内皮生长因子的表达

[目的]观察血管内皮生长因子（VEGF）在遗传性角膜病小鼠（C57BL/6-cornea opacity,B6-Co）眼角膜组织中的表达情况,探讨B6-Co小鼠角膜混浊发病机制。[方法]观察比较B6-Co小鼠与正常B6小鼠在不同发育阶段（1、13、30、90d）的临床表现,并采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR法检测VEGF在角膜中的表达情况。[结果]B6-Co小鼠随着年龄的增长出现明显的角膜混浊并有大量角膜新生血管生成;免疫组化显示VEGF在不同发育阶段B6小鼠的角膜很少表达,而在B6-Co小鼠出生初期表达较少,13日龄后表达明显增强;实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA表达上调,3月龄时与1月龄相比差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]VEGF在B6-Co小鼠角膜新生血管的形成过程中起重发作用,可能是导致角膜混浊的主要因素之一。     

血管内皮生长因子在脂肪组织移植中的作用

简介了血管内皮生长因子在脂肪组织移植中的表达,促进移植脂肪组织血管生成的机制,与血管内皮祖细胞及多种因子在促进血管生成的作用;促进前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞;与瘦素在脂肪组织移植中的作用等。为血管内皮生长因子在脂肪组织移植实验及临床应用提供理论依据。     

血管内皮生长因子与胶质瘤

胶质瘤是颅内肿瘤中最常见的恶性肿瘤之一,占颅内肿瘤的30%～50%[1],而恶性肿瘤侵袭性生长是一个多步骤的复杂过程.肿瘤经过缓慢的无血管生长期后,进入血管形成期,使瘤体得到营养而生长,因而血管生成是实体肿瘤生长和侵袭的前提.血管内皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)是作用最强、特异性最高的血管形成因子之一,与胶质瘤的侵袭性有密切关系.     

血管内皮生长因子C的研究进展

1989年,Gospodarowicz等在牛垂体滤泡星状细胞体外培养液中首先提纯得到了一种具有强大促血管生成作用的细胞因子——血管内皮生长因子(VEGF)。至此,对VEGF的研究开始拉开帷幕并逐渐成为热点。随着分子生物学技术的发展,人们对VEGF的研究更加深入,发现了VEGF家族的新成员VEGF-、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E及胎盘生长因子(PIGF)。而其中血管内皮生长因子C(VEGF-C)又因其强大特异的淋巴管生成作用于近年来引起了人们的关注,国内外学者围绕VEGF-C及其与肿瘤的关系开展了大量的研究。下面就对VEGF-C在该领域的研究进展作一简要综述。     

姜黄素治疗大鼠角膜碱烧伤的实验研究

目的 观察姜黄素对大鼠角膜碱烧伤新生血管（CNV）的抑制作用和对CD11b及角膜上皮凋亡细胞表达的影响,初步探讨其治疗角膜碱烧伤的作用机制。方法 选用雄性SD大鼠24只,随机分为4组（每组6只）：A组为空白组,B组为模型组,C组为姜黄素组,D组为二甲基亚砜（DMSO）组。除空白组外,采用氢氧化钠眼内烧伤造模,并予相应干预,第3、7、10、14天裂隙灯下观察角膜CNV形态并眼前节照相记录CNV长度,计算CNV面积,进行统计学分析;通过H-E染色法观察角膜病理形态学变化;免疫组化法观察CD11b表达;TUNEL染色法检测角膜上皮细胞凋亡表达。结果 裂隙灯下观察B组和D组CNV生长旺盛,管腔粗大,C组CNV稀疏管腔细小;3 d时三组CNV面积分析差异无统计学意义(P＞0.05),7、10、14 d时CNV面积比较C组CNV面积显著降低(P＜0.05);H-E染色B组和D组角膜基质层内大量的CNV管腔和血细胞,C组基质层偶见CNV,管腔细小;A组CD11b、角膜上皮凋亡细胞在角膜仅少量表达,B组和D组CD11b在基质层新生血管内壁上高表达,角膜上皮层凋亡细胞高表达,C组CD11b低表达,角膜上皮层凋亡细胞低表达。结论 姜黄素能有效的抑制大鼠角膜碱烧伤CNV治疗角膜碱烧伤,通过下调CD11b抗炎和下调角膜上皮凋亡细胞抗凋亡发挥作用。     

血管内皮生长因子研究进展

血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)是一种由各种正常细胞或肿瘤细胞合成和分泌的糖蛋白。人类医学研究证明,VEGF有两种受体——KDR/FLK-1和FLT-1。VEGF与受体结合,具有促进血管内皮细胞的增生和提高微血管对大分子物质的通透性作用。人的VEGF 基因由8个外显子构成,主要有VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF189和VEGF206等5个同型异构体。等电点的差异和肝素亲合力的差异可能是造成VEGF 生物活性差异的主要原因。     

血管内皮生长因子在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与宫颈癌生物学行为特征的关系。方法 :采用免疫组化法 (SP)检测 78例宫颈癌中 VEGF的表达 ,以 2 5例正常宫颈组织为对照。结果 :(1) VEGF在宫颈癌中的阳性表达率为 4 1.0 %(32 /78) ,明显高于对照组的 8.0 % (2 /2 5 ) (P<0 .0 1)。 (2 ) VEGF阳性表达率在宫颈癌临床分期≤ b期者 (18.6 % )明显低于≥ a期者 (6 8.6 % ) (P<0 .0 1) ;淋巴结无转移者 (30 .0 % )明显低于有转移者 (6 0 .7% ) (P<0 .0 5 ) ;并随病理分化程度 (高、中、低分化 )的降低 ,其阳性表达率显著升高 (P<0 .0 5 )。结论 :VEGF的表达与宫颈癌的浸润转移等生物学行为关系密切 ,在宫颈癌的发生发展过程中发挥着重要作用。     

利用转基因番茄表达血管内皮生长因子的研究

【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子（VEGF）的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390RVEGF,通过农杆菌菌株EHA105介导将其T-DNA区转入到番茄细胞中,再生后获得转基因番茄植株,对其进行分子和蛋白水平检测。【结果】成功构建了植物整株表达载体p1390R-VEGF,建立了高频的番茄再生培养体系;PCR检测、Southern blot和Western blot检测结果表明,VEGF基因已经转入番茄中,并成功得到了表达。【结论】得到了转基因番茄植株和果实,且VEGF蛋白有良好的抗原性。     

血管内皮生长因子对缺血性脑血管病血管生成的作用研究

血管内皮生长因子是血管特异性生长因子,有促进内皮细胞增生、转移,增加血管通透性和促进血管生成的作用.阐述了血管内皮生长因子的生物学特性和功能,以及血管内皮生长因子与缺血性脑血管病的关系.     

抑制角膜新生血管的治疗进展

正常角膜在病理状态下毛细血管由角膜缘向角膜内生长,形成角膜新生血管(corneal neovascularizaion,CNV),不但严重影响视力,也是角膜移植手术后常见的并发症.本文就近年来国内外在研究抑制角膜新生血管治疗方面的成就作一综述.     

新鲜羊膜移植术治疗眼表烧伤晚期并发症的临床研究

目的：研究新鲜羊膜移植术治疗眼表烧伤晚期并发症的可行性、手术方法和临床效果。方法：眼表烧伤晚期病例18例(18眼)，其中角膜血管翳8例，角膜溃疡7例，睑球粘连3例，采用新鲜羊膜移植治疗。手术方法：单层与多层羊膜移植或联合眼睑成形，角膜缘干细胞移植术。术后随访6～12个月。结果：18例术后植片均未见急性排斥反应，术后4～6周稳定愈合；13眼视力有不同程度提高。18眼中有17眼治愈。结论：新鲜羊膜是治疗眼表烧伤晚期并发症的有效方法。     

小梁切除术联合羊膜植入和干扰素α-2b治疗难治性青光眼

目的 :观察小梁切除术联合同种异体羊膜植入和术眼球结膜下注射干扰素 α- 2 b治疗顽固性青光眼的疗效。方法 :对 1 3例 (1 3只眼 )顽固性青光眼行小梁切除术联合羊膜移植于巩膜床 ,分别于术时、术后 1 d、3 d、7d、1 4 d术眼球结膜下注射干扰素α- 2 b 50万单位。术后随访 6～ 1 5个月 ,平均 1 0 .5个月。观察术后阻止瘢痕性滤过泡形成的效果、降眼压作用、手术成功率及视力变化。结果 :1 3只眼中 ,形成功能性滤过泡 1 1只眼 ,无功能滤过泡 2只眼 ,术后 3个月眼压从术前的 (36.42± 5.64) mm Hg降低到 (1 5.73± 2 .99) mm Hg(t=1 1 .465 ,P<0 .0 1 )。术后1 2个月末 ,手术的成功率为 79.8% (寿命表法 )。结论 :小梁切除术联合羊膜植入与干扰素α- 2 b注射能提高成功率 ,且安全、可靠。     

RNAi对绵羊颗粒细胞体外培养过程VEGF 及其受体mRNA表达的影响

[目的]明确RNA干扰(RNAi)对绵羊颗粒细胞体外培养过程中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体mRNA表达的影响,为开展VEGF在绵羊卵母细胞体外成熟和胚胎发育过程中信号通路的相关研究打下基础.[方法]采用电穿孔技术将针对VEGF两个受体Flt-1和KDR/Flk-1的两条有效双链小RNA导入绵羊颗粒细胞内,利用实时荧光定量PCR检测体外培养绵羊颗粒细胞各培养时间VEGF、Flt-1和KDR/Flk-1 mRNA表达水平的变化.设定筛选出的Flt-1和KDR/Flk-1有效干扰片段分别为试验组Ⅰ和试验组Ⅱ,两个干扰片段共同作用为试验组Ⅲ,无效的干扰片段为对照组.[结果]绵羊颗粒细胞体外培养过程中,VEGF mRNA在各时间段的相对表达量是Flt-1 mRNA相对表达量的102倍、KDR/Flk-1 mRNA相对表达量的103倍;培养第1 d时,试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和试验组ⅢVEGF mRNA相对表达量分别为2.62×10-2、3.54×10-2和2.94×10-2,均极显著高于对照组(P<0.01,下同),3个试验组的VEGF mRNA表达量从第2 d开始降低,直到第6 d与对照组趋于一致.试验组ⅡFlt-1 mRNA相对表达量从培养第1 d的1.02×10-1逐渐降至第7 d的8.99×10-4,且一直极显著高于其他组;试验组Ⅰ和试验组Ⅲ在前3 d几乎无Flt-1 mRNA表达,随着培养时间的延长逐渐呈上升趋势,第8 d时各组趋于一致.试验组Ⅰ的KDR/Flk-1 mRNA相对表达量从第1 d开始极显著低于对照组;试验组Ⅱ和试验组Ⅲ在前3 d几乎无KDR/Flk-1 mRNA相对表达,随着培养时间的延长呈上升趋势,第9 d时各组趋于一致.[结论]两个有效干扰片段在绵羊颗粒细胞体外培养过程中起到很好的干扰作用,可改变VEGF、Flt-1及KDR mRNA的表达量,进而影响颗粒细胞相关生长信号的传输.     

VEGF、P-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达及其对侵袭和转移的影响

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、MMP-9)在乳腺良性病变及乳腺癌组织中的表达及其对侵袭和转移的影响.方法应用免疫组化SP法检测10例乳腺良性病变及29例乳腺癌组织中VEGF、MMP-2和MMP-9的表达.结果乳腺癌组织中VEGF、MMP-2和MMP-9的阳性表达率分别为79.3%(23/29),96.6%(28/29)和89.7%(26/29),与乳腺良性病变组织中VEGF、MMP-2、MMP-9的阳性表达率分别为30.0%(3/10),40.0%(4/10)和30.0%(3/10)相比较,二者的差异有显著的统计学意义(P＜0.01).VEGF、MMP-2和MMP-9的表达与乳腺癌淋巴结转移呈中度正相关.乳腺癌组织中VEGF与MMP-2、MMP-9的表达呈中度正相关,MMP-2与MMP-9的表达也呈中度正相关.结论VEGF、MMP-2及MMP-9的高表达与乳腺癌的浸润和转移密切相关,有可能成为判断乳腺癌侵袭和转移的有价值的指标.     

反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Fit-1 mRNA表达的影响

［目的］ 探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响。［方法］ 试验分为4组：Ⅰ组,空白对照组;Ⅱ组,脂质体组;Ⅲ组（SCON）,20 μmol/L正义寡核苷酸组;Ⅳ组（ASCON）,20 μmol/L反义寡核苷酸组。上述各组均在培养24、36、48 h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达情况的变化。［结果］VEGF mRNA在Ⅰ、Ⅱ组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长无明显变化;在Ⅲ组VEGF mRNA 表达略有降低,但与Ⅰ和Ⅱ组间无显著性差异（P＞0.05）;Ⅳ组（反义寡核苷酸组）的VEGF mRNA表达量显著下降（P＜0.05）,并且随着时间延长逐渐下降。VEGF受体FLT-1 mRNA的表达与VEGF相似。［结论］反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1的mRNA表达有下调作用。     

反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响

[目的]探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1mRNA表达的影响。[方法]试验分为4组:I组,空白对照组;II组,脂质体组;III组(SCON),20μmol/L正义寡核苷酸组;IV组(ASCON),20μmol/L反义寡核苷酸组。上述各组均在培养24、36、48h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Flt-1mRNA表达情况的变化。[结果]VEGFmRNA在I、II组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长无明显变化;在III组VEGFmRNA表达略有降低,但与I和II组间无显著性差异(P>0.05);IV组(反义寡核苷酸组)的VEGFmRNA表达量显著下降(P<0.05),并且随着时间延长逐渐下降。VEGF受体FLT-1mR-NA的表达与VEGF相似。[结论]反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1的mRNA表达有下调作用。     

反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响

[目的] 探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达的影响.[方法] 试验分为4组: I组,空白对照组;II组,脂质体组(不加寡核苷酸);III组(SCON),20 μmol/L正义寡核苷酸组;IV组(ASCON),20 μmol/L反义寡核苷酸组.上述各组均在培养24、36、48 h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Flt-1 mRNA表达情况的变化.[结果] VEGF和Flt-1熔解曲线表明扩增效果好,培养24 h, VEGF mRNA I组相对表达量为0.076 9,II组为0.076 8,III组为0.076 9,3组之间无显著性差异(P＞0.05),IV组VEGF mRNA 相对表达量下降为0.024 2,且与I、II、III组有显著性差异(P＜0.05).培养36 h,前3组相对表达量分别为0.059,0.051,0.051 4,3组之间无显著性差异(P＞0.05),第IV组为0.024 2,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).培养48 h,前3组相对表达量分别为0.061,0.055 2,0.052 1,3组之间无显著性差异(P＜0.05),第IV组为0.011 5,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).培养24 h,Flt-1 mRNA I组相对表达量为0.078 6;II组为0.078 2,III组为0.078 1, 3组之间无显著性差异(P＞0.05),IV组Flt-1 mRNA 相对表达量下降为0.025 6,且与I、II、III组有显著性差异(P＜0.05).培养36 h,前3组相对表达量分别为0.078 1,0.078 4,0.078 2,3组之间无显著性差异(P＞0.05),第IV组为0.022 8,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).培养48 h,前3组相对表达量分别为0.069 1,0.078 0,0.069 3,3组之间无显著性差异(P＞0.05),第IV组为0.021 5,与前3组比较有显著性差异(P＜0.05).可见,VEGF受体Flt-1mRNA的表达与VEGF相似.二者均在 I组、II组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长没有明显变化;在III组表达轻微下降,但与I组和II组无显著性差异(P＞0.05);IV组的表达量显著下降(P＜0.05),并且随着时间的延长至逐渐下降.[结论] 反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt-1的mRNA表达有下调作用.     

反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Fit-1 mRNA表达的影响

[目的]探讨ghrelin对蒙古绵羊脐静脉内皮细胞的血管内皮生长因子VEGF及其受体Fit-1mRNA表达的影响。[方法]试验分为4组：Ⅰ组,空白对照组;Ⅱ组,脂质体组（不加寡核苷酸）;Ⅲ组（SCON）,20μmol／L正义寡核苷酸组;Ⅳ组（ASCON）,20μmol／L反义寡核苷酸组。上述各组均在培养24、36、48h后,采用实时荧光定量方法检测VEGF及其受体Fit-1 mRNA表达情况的变化。[结果]VEGF和Fh-1熔解曲线表明扩增效果好,培养24h,VEGFmRNAⅠ组相对表达量为0．0769,Ⅱ组为0．0768,Ⅲ组为0．0769,3组之间无显著性差异（P〉0．05）,Ⅳ组VEGFmRNA相对表达量下降为0．0242,且与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组有显著性差异（P〈0．05）。培养36h,前3组相对表达量分别为0．059,0．051,0．0514,3组之间无显著性差异（P〉0．05）,第Ⅳ组为0．0242,与前3组比较有显著性差异（P〈0．05）。培养48h,前3组相对表达量分别为0．061,0．0552,0．0521,3组之间无显著性差异（P〈0．05）,第Ⅳ组为0．0115,与前3组比较有显著性差异（P〈0．05）。培养24h,Fit—lmRNA Ⅰ组相对表达量为0．0786;Ⅱ组为0．0782,Ⅲ组为0．0781,3组之间无显著性差异（P〉0．05）,Ⅳ组Flt-1 mR—NA相对表达量下降为0．0256,且与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组有显著性差异（P〈0．05）。培养36h,前3组相对表达量分别为0．0781,0．0784,0．0782,3组之间无显著性差异（P〉0．05）,第Ⅳ组为0．0228,与前3组比较有显著性差异（P〈0．05）。培养48h,前3组相对表达量分别为0．0691,0．0780,0．0693,3组之间无显著性差异（P〉0．05）,第Ⅳ组为0．0215,与前3组比较有显著性差异（P〈0．05）。可见,VEGF受体Flt-1 mRNA的表达与VEGF相似。二者均在Ⅰ组、Ⅱ组表达量无差异,具有较高的表达量,随着时间的延长没有明显变化;在Ⅲ组表达轻微下降,但与Ⅰ组和Ⅱ组无显著性差异（P〉0．05）;Ⅳ组的表达量显著下降（P〈0．05）,并且随着时间的延长至逐渐下降。[结论]反义抑制ghrelin对VEGF及其受体Flt—1的mRNA表达有下调作用。     

低分子肝素对高脂血症性胰腺炎大鼠VEGF表达的影响

目的 研究低分子肝素对大鼠高脂血症性胰腺炎胰腺微循环的作用机制。方法 将72只健康SD大鼠随机分成假手术组、模型组和治疗组各24只,每组再随机分成四个亚组。先采用高脂饮食建立高脂血症模型,模型组和治疗组制作大鼠急性胰腺炎模型,制模成功后治疗组分别于0、6、12、18 h开始使用低分子肝素皮下注射,各亚组均间隔6 h重复皮下注射一次,每亚组均干预4次;模型组和假手术组同时间点皮下注射等量生理盐水对照。结果 大鼠胰腺血流速度模型组低于假手术组,治疗组高于模型组（P<0.05）;胰腺组织病理学评分模型组高于假手术组,治疗组低于模型组（P<0.05）;模型组各亚组胰腺血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达、VEGF mRNA表达水平均高于假手术组,而治疗组均低于模型组（P<0.05）。结论 大鼠高脂血症性胰腺炎,VEGF与微循环障碍密切相关;低分子肝素可能通过下调胰腺组织VEGF水平来改善胰腺微循环障碍,减轻胰腺组织进一步损害,且早期干预价值更大。     

血管内皮生长因子对绵羊卵母细胞体外受精及胚胎发育的影响

为了研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对绵羊卵母细胞体外成熟和成熟后卵母细胞体外受精卵的早期发育的影响,在细胞培养过程中分别在体外成熟培养液、体外受精液及体外胚胎发育液中添加5、10 ng/mL VEGF.结果显示,添加VEGF组卵母细胞的体外成熟率由对照组的80.68%提高到了86.09%和85.22%(P<0.01),成熟卵母细胞的卵裂率由69.38%提高到了75.18%和73.48%(P>0.05),5 ng/mL添加组的桑葚胚率(45.45%)和囊胚率(30.06%)极显著(P<0.01)高于对照组(37.61%;23.65%);而10 ng/mL添加组的桑葚胚率(40.25%)和囊胚率(27.80%)低于5 ng/mL添加组的,高于对照组,但差异不显著.据此认为5 ng/mL VEGF的添加量比10 ng/mL VEGF添加量能更有效的促进绵羊卵母细胞体外成熟、体外受精和胚胎早期发育.