一株海洋细菌HZBN43的鉴定

[目的]鉴定1株分离自黄海海水的细菌菌株HZBN43。[方法]采用16S rRNA技术,对细菌样品株HZBN43进行鉴定,并对其进行系统分析。[结果]通过PCR扩增获得1 521 bp的16S rRNA序列,将其与NCBI已登陆的其他同源序列进行系统分析,确定了此株海洋细菌属于芽孢杆菌属(Bacillus)。虽然与已知种Bacillus selenatarsenatis的相似性为99.79%,但系统分析表明,置信度仅为46,可能受分析序列较短所限。要将其确定到种,尚需要其他研究佐证。     

异常原料乳中一株芽胞杆菌的分离与鉴定

该试验目的在于利用16SrRNA鉴定的方法对从异常原料乳中分离提纯得到的一株细菌进行鉴定.利用基因提取试剂盒提取出菌株DNA,并利用通用引物扩增菌株的16SrRNA,测序后对序列进行比对分析.电泳结果显示16SrRNA扩增成功,条带明亮,无杂散带,条带大小约为1500bp,符合要求;在NCBI中将测序结果进行Blast...     

海洋细菌BM-1菌株的分离、筛选及初步鉴定

从连云港海域分离得到海洋细菌76株,采用平板对峙法筛选到对植物病原真菌有抑制作用的海洋细菌18株,经液体发酵后复筛有8株细菌的发酵液对供试植物病原真菌有明显的抑制作用,其中BM-1对病原菌的抑制作用最强,对所有的供试病原真菌都有较强的抑制作用。盐浓度为3%～7%时,BM-1菌株生长良好。形态观察表明,菌体细胞呈杆状,大小为0.6～0.9μm×2.0～3.5μm革兰氏阴性,无芽孢,有鞭毛可运动,好氧。在2216E培养基上形成乳黄色不透明菌落,菌落易挑取,细胞随机无规则排列。生理生化试验结果表明,菌株BM-1的淀粉水解试验呈阴性;伏普试验为阴性;甲基红试验为阴性;接触酶试验为阳性;赖氨酸和精氨酸脱羧酶试验为阴性;苯丙氨酸脱氨酶试验呈阴性;半固体琼脂穿刺试验呈阳性说明待测菌具有运动性;明胶液化试验呈阳性,硫化氢试验呈阳性;尿素酶试验呈阳性。初步认为,菌株BM-1属于假单胞菌属,该菌株特性与文献记载的假单胞菌属的种类均有明显不同,可能为假单胞菌属一变种或新种。     

一株海洋光合细菌D25的分离与鉴定

从威海近海采得的海洋沉积物中经过富集培养和分离筛选,得到一株紫色菌落的海洋光合细菌,编号为D25。利用梅里埃公司细菌鉴定系统对菌株的生理生化特征进行了检测,API 20E检测结果共有ADH、CIT等4项检测项目呈阳性,ONPG、LDC等16项检测项目呈阴性。经PCR反应得到16S rRNA基因序列,16S rRNA基因序列测定和分析结果显示该菌株为嗜硫小红卵菌(Rhodovulum sulfidophilum)。     

海洋光合细菌Rx菌株的分离鉴定与生物学特性研究

从大连金州区海湾养虾池底分离获得光合细菌Rx菌株的初筛菌株,并对其纯培养物进行了形态特征、培养特征、生理生化特征以及DNA中G+C摩尔百分比等生物学特性分析。结果表明,Rx菌株为革兰氏阴性菌,大小为(0.5～0.7)μm×(1.0～1.2)μm,单极生鞭毛,光合内膜为泡囊状,繁殖方式为二分分裂生殖;Rx菌株的纯培养物含细菌叶绿素a和球状素型类胡萝卜素,光照厌氧和黑暗好氧条件均能生长;Rx菌株生长盐度为5～100g/kg,生长pH为5.8～8.4;Rx菌株不能利用硫化物为电子供体,其生长受高浓度硫化物的抑制;能利用谷氨酸而不能利用柠檬酸钠、酒石酸为有机碳源或电子供体;盐酸硫胺素(t)、生物素(b)、p-对氨基苯甲酸(p-ABA)、烟酸(n)为Rx菌株生长的必需因子;Rx菌株DNA的G+C摩尔百分比为64.18%。根据以上特征,并参照《常见细菌系统鉴定手册》(2002)和《伯杰氏细菌系统学手册》第3卷(1989),将Rx菌株鉴定为小红卵菌属广海小红卵菌(Rhodovulumeuryhalinum)。     

1株产褐藻胶裂解酶海洋细菌的分离鉴定及其酶学性质

利用以褐藻胶为唯一碳源的培养基分离纯化产褐藻胶裂解酶的海洋细菌,通过形态特征、生理生化和16SrRNA基因鉴定菌株,用紫外法分析纯化酶液的pH、温度作用范围及稳定性等酶学性质.结果表明:从青岛近海分离到1株产褐藻胶裂解酶的菌株QZ-4,革兰阴性杆菌,适宜生长温度和NaCl质量浓度范围分别为15～25℃和15～60g/L;16SrRNA基因序列分析显示,该菌与交替假单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)相似性为97%,GenBank登录号为HM130919;该酶具有同时降解高古罗糖醛酸聚合物和高甘露糖醛酸聚合物的能力,其最适作用pH和温度分别为7.5和40℃,Mg2+、Na+、Fe3+、Mn2+等对酶活力有促进作用,Zn2+有抑制作用,1.0mol/L乙二胺四乙酸可完全抑制其活性;由Lineweaver-Burk(L-B)作图法求得该酶的最大反应速度(Vmax)为0.541U/mL,米氏常数(Km)为0.051mg/mL.     

鸡油菌及其伴生细菌的组织分离

１９９６－１９９７年用子实体组织分离法成功地分离获得了鸡油菌菌丝体的纯培养。文中详细介绍了其伴生细菌的组织分离法,并对鸡油菌菌丝体的培养特征进行了观察和描述。     

海洋细菌的分离、鉴定及抗烟草花叶病毒活性分析

从福建霞浦海域分离、筛选到6株对烟草花叶病毒(TMV)具有体外钝化活性的菌株,其中,菌株9和10的抑制率较高,分别达95.26%和92.18%.进一步测定2株菌对TMV的抑制增殖活性,结果表明,菌株9和10可明显抑制TMV的增殖,其抑制率分别为36.29%和35.08%.通过对2株菌的形态特征、生理生化反应及16S rDNA序列的分析,将菌株9鉴定为蜡样芽孢杆菌,菌株10鉴定为水生海洋芽孢杆菌.     

一株产黑色素海洋细菌的初步鉴定

从波罗的海近海海水中分离出1株产黑色素的海洋细菌.该菌株可利用麦芽糖、蔗糖、葡萄糖等碳源,H2S、V.P.及明胶液化试验呈阴性,酶触试验呈阳性,为革兰氏阴性细菌,经16S rDNA初步鉴定后命名为Rheinheimera sp.09BSZB-9,并对其产生的黑色素作了初步研究.     

一株海洋细菌的鉴定及其细胞死亡的研究

对从浒苔表面分离得到的1株海洋细菌--HT5进行了系统分类鍪定和细胞死亡的初步研究.根据形态学特征、培养特性和生理生化特征及16S rDNA序列同源性将HT5鉴定为Flammeovirga sp..通过生长曲线、菌体的形态变化、存活时间与温度的关系等描述了HT5在培养中茵体细胞的死亡特性,并初步推测这一特性与细菌的细胞程序性死亡有关.     

一株钾长石分解菌的分离·鉴定及系统发育

[目的]分离、筛选具高效分解钾长石能力的菌株。[方法]从采自湖南省桂东县钾长石矿区的土壤中分离、筛选分解钾长石能力较强的菌株;通过形态观察、生理生化特征检测和基于16SrRNA基因序列的系统发育分析,对分离到的菌株进行初步鉴定。[结果]分离得到一株分解钾长石能力较好的JDM1菌株,初步鉴定为圆褐固氮菌的一个菌株;在温度为30℃、摇瓶转速为200r／min的条件下培养96h后,测得该菌发酵液中钾元素含量高达135．3mg／L。[结论]菌株JDM1是一株具有较高分解钾长石性能的圆褐固氮菌。     

一株产抗霉菌活性物质的海洋细菌鉴定

[目的]为了研究柄海鞘体内的微生物能否产生具有抗菌功能的活性物质。[方法]从烟台海域的柄海鞘中筛选到一株细菌,命名为N2。采用透明圈法进行抑菌试验,同时进行菌落形态、常规生理生化研究和细菌鉴定系统测试。为了进一步确定菌株N2的分类学地位,测定其16S rRNA基因序列,与相关细菌种属相应序列的同源性进行比较,并构建系统发育树。[结果]菌株N2具有抑制霉菌生长的特性;菌株N2属于革兰氏阳性菌,杆状,具有鞭毛,菌落呈乳白色,菌株N2与Bacillus属细菌的特征相似;菌株N2与枯草芽孢杆菌的亲缘关系最近,相似性达99%。[结论]菌株N2可鉴定为枯草芽孢杆菌,可以将其作为潜在的海洋有益菌应用于抗肿瘤和植物病害的防治。     

一株新属水平厌氧发酵性细菌的分离与鉴定

[目的]分离农业废弃物秸秆厌氧降解过程中重要糖类发酵性细菌,并进行生理生化特性研究及系统分类鉴定。[方法]利用亨盖特厌氧滚管技术从江西水田稻草堆腐物中分离到一株厌氧细菌NM7,基于16SrRNA基因序列分析确定该菌株的系统进化地位。[结果]菌株NM7为中温厌氧、革兰氏阴性短杆菌,能发酵多种单糖和二糖产丙酸、乙酸和少量丁酸,无氢气产生。菌株基因组DNA G＋C含量为39 mol%,16S rRNA基因序列与Paludibacter propionicigenes WB4T的同源性最高,相似性为91.6%。[结论]综合生理生化特性和系统发育分析,菌株NM7为拟杆菌门（Bacteroides）紫单胞菌科（Porphyrom onadaceae）新型菌株,代表一个新属分支,命名为Saccharibrevi-bacter Jiangxiensis,模式菌株为Saccharibrevibacter Jiangxiensis NM7T。     

一株正二十二烷降解菌的分离及鉴定

[目的]研究正二十二烷降解菌的分离及鉴定。[方法]以正二十二烷无机盐培养基为选择培养基,从南充市炼油厂曝气池的回流污泥中筛选出1株高效降解长链烷烃的菌株,命名为T2,并对其进行形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA比对以及17种药物敏感试验。[结果]T2菌株鉴定为沙雷氏菌属。在正二十二烷浓度为1%（W/V）无机盐培养基中接入1%种子液,并在30℃和180 r/min摇瓶震荡下培养6 d,正二十二烷降解率可达70%。药敏试验表明,T2菌株对链霉素、卡拉霉素、大观霉、氯霉素、氧氟沙星、庆大霉素、恩诺沙星、新霉素、阿米卡星、复方新诺明高度敏感;对环丙沙星为中度敏感;对青霉素G、氨苄青霉素、四环素、乙酰螺旋霉素、克林霉素、阿莫西林不敏感。[结论]该研究为石油污染的生物处理提供良好的微生物菌种资源。     

羽毛降解菌的分离及多样性分析

从禽肉加工厂的污泥中分离到174株能在牛奶琼脂平板产透明圈微生物菌株,其中42株具有分解羽毛的能力,从中筛选出13株具有较强羽毛降解能力的菌株,均能在48 h内将羽毛完全分解。16S rDNA的BLAST比对及系统发育树分析结果显示,8株菌为寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),1株菌为芽孢杆菌属(Bacillus),4株菌为气单胞菌属(Aeromonas)。     

一株硫酸盐还原菌DSRBa的分离鉴定及特性分析

从内循环厌氧反应器颗粒污泥中分离、纯化得到一株硫酸盐还原菌命名为DSRBa,经形态和基于16SrDNA序列分析,该菌株归属于脱硫弧菌属(Desulfovibrio)。分别以甲酸钠、乙醇、乳酸钠、葡萄糖等为碳源,以硫酸盐、硫代硫酸盐、亚硫酸盐、单质硫为硫源,研究了不同温度、pH及不同硫酸根浓度对该菌株的影响。结果表明,菌株最适宜生长温度为30～35℃,最佳生长pH为7.0,无需绝对严格厌氧,当溶液中氧化还原电位(ORP)≤-40mV时,该菌株能较好生长,且生长4d后使溶液内氧化还原电位值达到-380mV,随后溶液内氧化还原电位基本保持不变。当系统内乳酸钠和酵母提取物浓度分别为3.5g·L-1和1g·L-1时,硫酸根浓度在1～4.5g·L-1范围对菌株生长无明显影响,且当SO24-浓度≤3g·L-1时,菌株生长4d对硫酸根的去除率达到90%以上。     

荒漠草原植物根际溶磷细菌的分离鉴定及其溶磷能力的比较

溶磷细菌是主要的根际促生菌的类群之一,其在发展绿色农业和荒漠化防治中具有重要作用。已有的相关研究主要集中于农作物等,而对于荒漠草原植物溶磷细菌的研究尚很缺乏。该研究利用涂布划线方法、以无机磷培养基从四子王旗荒漠草原四种优势植物根际土壤中分离溶磷细菌,采用过硫酸钾消解-钼锑抗比色法检测菌株的溶磷能力。从4种优势植物兔唇冬青草、银灰旋花、蒙古黄芪和短花针茅根际土壤共分离得到42株溶磷细菌,归为五个类群19个属。其中19株（45.2%）属于放线菌纲（Actinobacteria）,5株（11.9%）属于芽孢杆菌纲（Bacilli）,16株（38.1%）属于α-变形菌纲（α-proteobacteria）,1株（2.4%）属于β-变形菌纲（β-proteobacteria）,1株（2.4%）属于γ-变形菌纲（γ-proteobacteria）。溶磷能力测定结果表明菌株GP0501、GP0506、GP0507和GP0509在42株菌种中溶磷能力最强,溶磷量分别为77.57、65.89、58.08、68.02μg/mL,都属于芽孢杆菌属（Bacillus）,具有较大的应用潜力。     

拮抗杉木致害菌Fusarium oxysporum海洋细菌3728的生物学特征及其鉴定

从南海红树林木榄(Bruguiera gymnorrhizo)根际土壤中分离到一株具有拮抗杉木致害菌尖孢镰刀菌萎蔫专化型SF2(Fusariumoxysporum f.sp.vasinfectum)活性的海洋细菌3728菌株,对分离菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征和16S rRNA基因序列进行了系统的研究。发现细菌3728与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)序列相似性最高,达到100%,在系统进化树中与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis AJ276351)处于同一分支上,结合形态和生理生化分析结果,将其鉴定为枯草芽孢杆菌。     

休闲卤豆干中腐败菌的分离鉴定

[目的]分离并鉴定休闲卤豆干中的腐败菌.[方法]以真空包装腐败变质的卤豆干为研究对象,从中分离纯化出优势微生物,通过形态学特征、生理生化试验及Sensititre微生物自动鉴定仪等方法鉴定真空包装豆腐干中腐败微生物.[结果]试验对发生腐败变质的真空包装卤豆干中微生物进行分离、纯化,得到一株主要的腐败菌,再通过形态及生理生化特征试验,结合Sensititre微生物自动鉴定仪,得出该菌株的鉴定结果为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus).[结论]研究可为休闲卤豆干的生产中更好地控制该微生物的污染提供一定的理论指导.     

具有拮抗作用的石榴内生菌的分离与鉴定

[目的]筛选对石榴枯萎病菌具有拮抗作用的内生生防菌.[方法]从采自云南蒙自的石榴叶片中分离并获得5株内生拮抗菌,通过测定其对甘薯长喙壳(Ceratocystis fimbriata)的抑菌能力筛选出1株具有高效拮抗作用的生防菌株Y2,对其进行抑菌谱测定及鉴定.[结果]经生理生化和16S rDNA序列测定表明Y2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).[结论]试验结果为石榴枯萎病的防治提供了理论依据.