不同球孢白僵菌菌株生物学特性与其对家蚕致病力的关系(英文)

[目的]探讨球孢白僵菌菌株的生物学特性与其对家蚕致病力的关系,为家蚕白僵病的防治提供科学依据。[方法]从我国各地收集6个白僵菌杀虫剂,并以广西养蚕区采集3个僵蚕样品,对从中分离纯化的菌株进行形态观察和分子鉴定,同时对家蚕进行致病力测定,比较各菌株菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等生物学特征指标的差异。[结果]获得的9个分离菌株均为球孢白僵菌(Beauveria bassiana Vuillemin);各菌株对家蚕都有较强致病力,且致病力有一定差异;各菌株菌落生长直径、产孢量及胞外蛋白酶活性均存在较大差异,并与其对家蚕的致病力之间存在相关关系。[结论]各菌株产孢量和胞外蛋白酶活性与其对家蚕的致病力之间存在显著正相关。     

球孢白僵菌GDS菌株对小菜蛾致病力的测定

从自然感病的鳞翅目幼虫体上分离出球孢白僵菌GDS菌株,在室内用108,107,106,105个/m L共4种浓度的孢子液侵染小菜蛾3龄幼虫。结果表明,从高浓度至低浓度,受感染的小菜蛾幼虫累积校正死亡率分别为80.5%,61.0%,26.9%和17.1%。毒力回归方程y=0.631 1x+0.776 9,相关系数为0.986 9,LC50为4.68×106孢子/m L。     

球孢白僵菌不同菌株生物学特性的研究

在萨氏与虫粉两种增减基以及１％葡萄糖液和２％葡萄糖液和２％虫尸滤液两种营养液中,对４４株球孢白僵菌的菌落形态,菌丝生长、产孢量,孢子萌发情况以及孢子在不同湿度下储存一年的发芽率、抗紫外线能力和生物测定等方面进行了试验。     

球孢白僵菌MZ050724菌株对桔小实蝇的室内致病力测定

实验以桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendal)成虫、幼虫和蛹不同虫态进行室内毒力测定,利用球孢白僵菌(Beauveryia bassiana)MZ050724菌株3.6×105～3.6×108个/mL 4个分生孢子浓度对其进行室内毒力测定.在分生孢子3.6×108个/mL浓度下成虫死亡率最高达91.56%,幼虫死亡率最高达93.59%,蛹死亡率最高达78.36%;第8天的成虫LC50为2.65×105个/mL,幼虫的LC50为2.12×105个/mL,蛹的LC50为3.05×105个/mL.在3.6×105～3.6×108个/mL 4浓度处理下成虫的LT50依次为7.11 d、5.14 d、4.58 d和4.27 d,幼虫的LT50依次为7.41 d、6.46 d、5.90 d和5.13 d.蛹的LT50依次为14.01 d、7.56 d、6.62 d和6.11 d.球孢白僵菌MZ050724菌株在室内对桔小实蝇的成虫、幼虫和蛹有较强的毒力,具有良好的田间应用前景.     

球孢白僵菌tps1转基因菌株与初始菌株生物学特性比较

该文对SDAY培养基上培养的球孢白僵菌tps1转基因工程菌株与原始出发菌株各自在菌落形态,菌丝生长速度,产孢量等方面进行了综合评价。结果表明:球孢白僵菌tps1转基因工程菌株与原始出发菌株的菌落形态有一定差异。且球孢白僵菌tps1转基因菌株菌丝生长速度更快,其菌丝生长速度为(3.73±0.05)mm/d而原发菌株菌丝生长速度为(3.45±0.52)mm/d。另外,重组菌株的产孢量(0.92±0.02)×10~8个,明显低于原始出发菌株(1.12±0.17)×10~8个。     

球孢白僵菌Bb01菌株的生物学特性

[目的]探索高致病白僵菌受自然环境影响条件下的生物学特性.[方法]研究外部环境条件对球孢白僵菌Bb01生长的影响及对青杨脊虎天牛幼虫致病力的影响.[结果]球孢白僵菌Bb01菌株的最适培养基为改良马丁氏培养基,菌落生长和产孢的最优培养温度为26℃,最佳湿度为100％,菌落的生长和孢子产量随着紫外线照射时间的延长而减少;球孢白僵菌Bh01对青杨脊虎天牛成虫的致病力不高,仅为16.67％;26 ～ 28℃条件下对青杨脊虎天牛幼虫的致病力最大,致死中时(LT50)分别为2.23和2.58 d,湿度在100％时致病力最大,LT50为2.57d;通过虫体传代白僵菌可增强菌株的致病力.[结论]试验结果为提高病原真菌的适应性和生产实践提供了理论依据.     

不同地理来源球孢白僵菌菌株的生物学特性

采集并分离来源于吉林省10个地区的15株野生球孢白僵菌菌株,比较了各菌株孢子萌发率、菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等指标的差异.结果表明:孢子萌发率高的菌株类型为孢子型,菌落生长迅速的菌株类型为菌丝型,介于孢子型和菌丝型菌株生物学特性之间的菌株类型为混合型;胞外蛋白酶产生水平与菌落形态特征不具相关性.筛选出菌株D4-2-1、CHL20可作为生物防治菌株.     

球孢白僵菌对扶桑绵粉蚧致病力的测定

采用点滴法测定了球孢白僵菌MZ041016菌株在2.0×105、2.0×106、2.0×107和2.0×108个/mL4个浓度的分生孢子液对扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsley)若虫和成虫的致病力。结果表明:球孢白僵菌MZ041016菌株对扶桑绵粉蚧具有很强的致病性,在分生孢子液2.0×108个/mL浓度时对若虫和成虫的致病力最强。扶桑绵粉蚧1龄、2龄、3龄若虫和雌成虫的致死中浓度分别为(2.10±0.06)×106、(2.43±0.06)×106、(3.20±0.06)×106、(3.54±0.06)×106个/mL,致死中时间分别为(4.52±0.17)、(5.34±0.51)、(6.12±0.35)、(6.48±0.32)d。     

球孢白僵菌不同菌株生物学特性及对小菜蛾的毒力研究*

 室内测定了从鳞翅目小菜蛾、斜纹夜蛾和块茎蛾罹病虫体上分离纯化的球孢白僵菌菌株DBM001,XWYE001和PTM001的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发速度，及对小菜蛾幼虫的致病力，并用时间－剂量－死亡率模型进行了分析。结果表明，各菌株在菌落生长速率上无显著差异，但各菌株的孢子萌发速率有显著差异。供试DBM001,PTM001 XWYE001三菌株对小菜蛾二龄幼虫的毒力测定结果表明：供试3菌株对于小菜蛾均具有一定的毒力，剂量效应参数分别为0.424，0.304，0.297。在10⁸孢子/mL,10⁷ 孢子/mL,10⁶孢子/mL,10⁵孢子/mL,10⁴孢子/mL的孢子悬浮液下，3菌株孢子液处理后小菜蛾的累积死亡率分别为94.0%～48.0%，76.0%～28.0%和62.0%～28.0%。3菌株处理后第3d时的LC₅₀分别为6.5×10⁷孢子/mL； 4.07×10⁷孢子/mL和2.88×10⁷孢子/mL。在10⁶孢子/mL下,3菌株对小菜蛾幼虫的致死亡中时LT₅₀依次为3.0, 4.1,3.5d。由此表明，斜纹夜蛾和马铃薯块茎蛾菌株的对小菜蛾幼虫的致死时间效应较长，均在3d以上，即球孢白僵菌不同菌株对小菜蛾种群增长的抑制作用时效差异较大，尤其是斜纹夜蛾和马铃薯块茎蛾分离株对小菜蛾的毒力发挥较慢。     

氮素对球孢白僵菌的影响

通过白僵菌发酵与杀虫实验表明氮素对球孢白僵菌的生长、孢子萌发、固体发酵产孢量和毒力均有一定的影响。其中硝态氮对白僵菌的生长和固体发酵产孢量有较大的促进作用,对孢子萌发的影响不大。营养条件不同白僵菌的侵染能力不同。     

球孢白僵菌对黄斑星天牛幼虫侵染研究

从黄斑星天牛幼虫僵尸上分离到的球孢白僵菌经生物学特性的测定,该菌菌丝生长的适宜温度范围是20～30℃,分生孢子萌发的适宜温度范围是24～27℃;菌丝生长和孢子萌发的最适相对湿度为100％。温度偏高和湿度较低的条件下有利于分生孢子的产生,利用该菌的分生孢子的悬浮液浸染黄斑星天牛幼虫,其侵染过程为分生孢子萌发入侵,形成筒形孢子,简形孢子萌发菌丝,菌丝向体表生长和形成分生孢子5个时期。     

不同培养液和温度诱导球孢白僵菌BF菌株产酶特性的研究

分别采用Folin-酚法和DNS法对球孢白僵菌BF菌株在不同培养液、不同温度下产蛋白酶和几丁质酶的活性进行了研究。结果表明,白僵菌在3种不同的培养液中均能产生蛋白酶和几丁质酶。30℃以下时,以明胶培养液中产蛋白酶的活性最高（28℃时为127.09 U）;30℃以上时,以虫尸粉培养液产酶活性最高（35℃时为133.51 U）;球孢白僵菌在胶体几丁质中诱导几丁质酶的效果最好,其中30℃时酶活性最高（2.91 U）;其次为虫尸粉培养液,在28℃时酶活性最高（1.44 U）;细粉几丁质培养液的诱导效果在5个温度下都是最差;温度高于30℃时,这3种培养液诱导的几丁质酶活性都非常低。     

对家蚕高毒力白僵菌菌株的筛选

白僵蚕是一种药用价值较高的中药药材,为选出人工生产白僵蚕的最佳菌株,以分离的5株白僵菌菌株为材料,以营养生长量、产孢量和致病力等生物学指标进行比较筛选。结果表明,不同菌株的各个指标均存在差异,其中B07-2营养生长量最快,产孢量最高,10 d内对家蚕的致病率为98.18%。综合比较,B07-2为生产白僵蚕的最佳接种菌株,它对家蚕的致死中时LT50为5.09 d,致死中浓度LC50为2.69×106孢子.mL-1。     

家蚕感染球孢白僵菌后4种抗菌肽基因的表达分析

【目的】阐明家蚕(Bombyxmori)抗菌肽对球孢白僵菌感染的应答模式,为揭示家蚕及鳞翅目昆虫抗真菌机制提供参考依据。【方法】利用实时荧光定量PCR检测家蚕被球孢白僵菌感染后抗菌肽基因cecropinA、gloverin2、lebocin1/2和lysozyme的表达情况,比较4种抗菌肽在家蚕脂肪体、血淋巴、马氏管和中肠中不同时间点的表达差异。【结果】经球孢白僵菌诱导后,cecropinA基因在家蚕脂肪体中的最高上调表达倍数为10.2倍,在血淋巴中的最高上调表达倍数为13.2倍,在马氏管中感染初期显著上调表达(P<0.05,下同),在中肠中感染后期显著上调表达;gloverin2基因在家蚕脂肪体中出现2次上调表达过程,最高上调表达倍数为15.7倍,在血淋巴中感染前期呈上调表达,在马氏管中略呈下调表达,中肠中的gloverin2基因在接种后16~48 h呈显著上调表达,最高上调表达倍数为6.7倍;lebocin1/2基因在家蚕脂肪体和血淋巴中的最高上调表达倍数分别为19.4和22.4倍,在马氏管中仅在接种后16 h呈显著上调表达,在中肠中则是接种后24~48 h呈显著上调表达;lysozyme基因在家蚕脂肪体中显著上调表达,在血淋巴和马氏管中感染初期也呈显著上调表达,但在中肠中的表达无明显规律。【结论】cecropinA、gloverin2、lebocin1/2和lysozyme基因在球孢白僵菌侵染家蚕的过程中均不同程度地被诱导上调表达,尤其在家蚕脂肪体和血淋巴中较明显,由此推测这4种抗菌肽在抵御球孢白僵菌的侵染过程中发挥重要作用。     

光照和漂白粉对白僵菌孢子萌发及致病力的影响

研究人工紫外光和自然光照射以及消毒剂漂白粉对白僵菌(Beauveria bassiana)孢子萌发和致病力的影响.结果表明,人工紫外光照射对裸露的白僵菌孢子有明显的杀伤作用,使孢子萌发率和对家蚕(BombyxmoriL.)的致病力明显下降,但对白僵菌原粉中的孢子杀伤力相对较弱,照射24 h后白僵菌原粉对家蚕的致死率仍达93.33％.在自然光下,喷洒到桑叶上的白僵菌孢子悬浮液随光照时间的增加对家蚕的致病力下降,自然光照射3、6、12、24、36 h后,对家蚕的致死率分别为100.00％、70.00％、79.66％、10.00％和25.00％;用白僵菌原粉喷桑树,经自然光照射0～36 h后,对家蚕的致死率为88.33％～96.67％,48h后对家蚕的致死率大幅度下降,照射48、54、78 h对家蚕的致死率分别为53.33％、31.67％和23.33％;直接置于自然光下照射的白僵菌原粉,随光照时间增加,对家蚕的致病力下降,30 h后致病力明显下降,致死率只有38.33％.有效氯浓度为1.00％和2.00％的漂白粉溶液对白僵菌孢子萌发有很强的抑制作用,72h孢子萌发率分别为1.000％和0;用有效氯浓度为2.00％的漂白粉液进行叶片和蚕体消毒处理对白僵菌孢子均有杀灭效果,使白僵菌孢子液和原粉对家蚕的致病力明显下降,但对叶片消毒比对蚕体消毒效果好.     

应用白僵菌和绿僵菌防治浙江双栉蝠蛾试验

应用高致病力球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Bals.)Vuill]B3和金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliae(Metsch.)Sorokin]Ma1291-2菌株,以不同的施菌方式防治浙江双栉蝠蛾(Bipectilus zhejiangensis Wang),统计分析2 a的防治效果。结果表明,2菌株均体现笋基灌施的防治效果较菌土撒施好,但以3月上旬进行撒施,3月中旬进行灌施(撒施+灌施)的防治效果最好。2菌株防治后第1年的退笋率无显著差异,而绿僵菌防治后第2年退笋率显著较低。以撒施+灌施防治后第1年和第2年,白僵菌B3菌株的防治效果分别为72.20%和36.76%,绿僵菌Ma1291-2菌株的防治效果分别为79.28%和48.70%。因此,2菌株均有林间应用价值,并以不同时间撒施+灌施的施菌方式防治,效果更佳。     

应用球孢白僵菌防治芒果树脊胸天牛的研究

该文报导了从自然感病的脊胸天牛虫尸上分离出球孢白僵菌株,经纯化并批量生产可湿性菌粉,应用该菌粉防治芒果树脊胸天牛．室内试验用小棉花球醮取菌悬液堵塞法和用注射器抽取菌悬液滴注法接种,并分设对照组．第７ｄ检查防治效果．结果表明,堵塞法各虫态致僵、死率为７０．６％．其中幼虫僵、死率为８７．５％,蛹、成虫僵、死率为３６．７％．滴注法各虫态僵、死率为６６．１％．其中幼虫僵、死率为８２．５％,蛹、成虫僵、死率为３３．３％．对照组分别用无菌水以同样方法试验,各虫态致僵、死率均为０．应用两种方法,中试防治在１３．３ｈｍ２２７ａ树龄芒果园中进行,防治效果为８３．７％．推广应用防治在３５．０ｈｍ２１５ａ树龄芒果园中进行,防治效果为８４．１％．