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细胞经过一系列的生长发育最终形成有受精能力的成熟卵母细胞的过程。IVM技术是随着上世纪动物胚胎体外生产 (IVP)技术的产生和发展而兴旺起来的。利用卵母细胞IVM技术已经先后在牛(1982 )、绵羊 (1985 )、山羊 (1985 )和猪 (1989)上获得试管后代[13] 。现在世界上日本、美国、英国、丹麦、新西兰和澳大利亚等许多发达国家都已成立了专门的动物胚胎体外生产公司。我国IVM的研究起步较晚 ,但发展迅速 ,已先后在小鼠 (1986 )、人 (1985 )、绵羊 (1989)、牛 (1989)、猪 (1990 )上获得了IVP后代[2 ] 。尤其在牛的IVM -IVP的研究上已接… 相似文献
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猪卵泡卵母细胞体外成熟研究现状孟庆刚李光鹏曹允考(东北农业大学动物科学系150030)1引言随着哺乳动物胚胎工程技术的发展,人们对猪卵母细胞体外成熟的研究也取得了很大的进展。关于猪卵母细胞体外成熟的理论和培养技术也日渐成熟。相信随此项技术的发展,人们... 相似文献
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本文应用细胞内微电极技术,分析测试了不同类别的猪卵母细胞,在体外成熟中不同时期的膜电位。结果表明,在体外成熟培养前,A类和B类未成熟卵母细胞的膜电位为较小的负值(-8.97+0.5,-1.55±0.6mV),C类则为较小的正值(+2.40±0.3mV)。成熟培养后,卵母细胞首先发生超极化,随着培养时间的延长,卵母细胞膜去极化并极性转化为正值。成熟卵母细胞的膜电位为正值(+26.50±1.0mV)。本文还讨论了猪卵母细胞可能的体外成熟机理。 相似文献
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猪卵母细胞体外成熟培养为胚胎体外生产、体细胞克隆等研究领域提供了大量廉价实验材料。本文就影响猪卵母细胞体外成熟的因素及其研究进展作简要综述。 相似文献
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猪卵母细胞体外成熟作为一种很重要的胚胎生物技术,具有重要的理论和实际意义。本文综述了猪卵母细胞体外成熟培养的发展历程、体外培养影响因素以及优化策略,为猪卵母细胞成熟培养提供参考依据。 相似文献
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猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟研究 总被引:27,自引:0,他引:27
本实验通过与2~6mm猪卵泡卵母细胞相对比,研究了猪2mm以下卵泡卵母细胞的体外成熟。结果如下(1)由2mm以下卵泡获得的小(直径100.29±7.9μm)、中(109.36±3.71μm)和大(118.90±2.46μm)3类卵母细胞培养48h的成熟率分别为0、22.31%和45.45%。(2)2mm以下卵泡卵母细胞的成熟率(52.63%)显著低于2~6mm卵泡卵母细胞的成熟率(80.39%)。(3)以含PFF的培养液培养2mm以下卵泡卵母细胞其成熟率(53.54%)显著高于不含PFF的对照组(22.77%)。(4)在培养的前24h加入PMSG、后24h去除PMSG,其成熟率(41.86%)与含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(50.0%)无显著差异,而显著高于前24h不加PMSG,后24h加入PMSG培养的成熟率(5.41%);也显著高于以下不含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(3.3%)。 相似文献
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猪卵泡卵母细胞体外成熟与冷冻保存 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了激素、猪卵泡液、不同类型血清对猪卵泡卵母细胞体外成熟的影响 ;比较了卵泡直径小于 2 mm、2~ 5 mm和大于 5 mm的卵母细胞体外成熟能力的差异 ,并对不同发育阶段猪卵母细胞的冷冻保存进行了研究。结果表明 :猪卵母细胞体外培养 4 8h时 ,培养的前 2 4 h培养液中加入激素 ,后 2 4 h去掉激素 ,卵母细胞的 A级成熟率 (5 1.73% )和总成熟率 (83.2 5 % )最高 ,极显著高于前 2 4 h不加激素 ,后 2 4 h添加激素培养的成熟率 (P<0 .0 1) ;也显著高于不含激素的培养液连续培养 4 8h的成熟率 (P<0 .0 5 ) ;但与添加激素连续培养 4 8h的成熟率差异不显著 (P>0 .0 5 )。在体外成熟培养液中 ,添加 10 % (体积分数 ) ECS的成熟率 (72 .86 % )显著高于添加 10 % (体积分数 ) NCS的成熟率(6 2 .2 1% ) (P<0 .0 5 ) ,而添加 10 % p FF则抑制卵母细胞的体外成熟。随着卵泡直径的增大 ,卵母细胞体外成熟能力逐渐增强。采用程序冷冻保存方法 ,成熟卵母细胞的成活率 (35 .5 9% )显著高于培养前 (2 4 .6 4 % )和培养 2 4 h(2 3.36 % ) (P<0 .0 5 )。培养 2 4 h(77.2 2 % )和培养成熟 (72 .81% )的卵母细胞解冻后的形态完整率均显著高于培养前(5 3.2 4 % ) (P<0 .0 5 ) 相似文献
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卵母细胞是胚胎工程和发育生物学的重要组成部分,它是体外受精、性别控制、克隆及转基因等技术成功与否的前提和关键。本文初步探讨猪卵母细胞体外成熟的影响因素。 相似文献
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猪卵巢卵母细胞的收集和体外成熟培养 总被引:8,自引:0,他引:8
实验对猪卵母细胞的采集和体外成熟培养(IVM)以及培养液进行研究。结果表明,在卵母细胞的采集过程中,机械破碎法平均每个卵巢所获得的A、B级细胞数(7.00,20.50)要显著多于抽吸法(1.48,2.73)(P<0.05)。但抽吸法中平均每个卵巢所用的时间(1.05min)却显著少于机械破碎法(15.6min)(P<0.05)。NCSU-23与TCM-199两种培养液对卵母细胞体外成熟率无显著差异(P>0.05)。添加10μg/LrpGH比20μg/LrpGH更有利于卵母细胞的成熟(71.5%,45.5%),两者差异显著(P<0.05)。 相似文献
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随着胚胎生物技术的日臻完善并逐步应用于家畜的育种和繁殖领域,人们对动物胚胎工程的认识逐渐加深,一系列更深层次的胚胎生物技术越来越受到人们的重视。20世纪80年代以来,人们在家畜卵母细胞体外培养、体外受精、 相似文献
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旨在研究RFRP-3对猪卵母细胞体外成熟的影响。本研究采用从屠宰场收集健康母猪的卵巢中挑取的GV期卵母细胞,随机分为3组,在培养基中分别添加0、10-6和10-8mol·L-1 RFRP-3培养猪卵母细胞44 h后统计各组卵母细胞的成熟率;在后续试验中将收集到的卵母细胞随机分为2组,在培养基中分别添加0和10-8 mol·L-1 RFRP-3培养猪卵母细胞44 h,观察猪卵母细胞的卵丘扩展情况并计算各组的卵丘扩展指数和各组卵母细胞的成熟率;利用qRT-PCR检测卵丘扩展因子(PTGS2、HAS2、PTX3)、卵母细胞分泌因子(GDF9、BMP15)和周期蛋白相关基因(CCNB1和CDK1)的表达变化;利用ELISA试剂盒检测MPF和cAMP的含量;采用放射免疫法检测孕酮和雌激素的浓度,每组卵母细胞量不少于100枚,每个试验重复3次。结果表明,与对照组相比,添加10-8mol·L-1 RFRP-3培养猪卵母细胞可极显著降低卵母细胞的成熟率(P<0.01);通过显微镜观察并计算卵丘扩展指数发现,试验组中卵丘扩展无明显变化(P>0.05),但卵丘扩展因子(PTGS2、HAS2、PTX3)的表达极显著下降(P<0.01);RFRP-3可以极显著降低猪卵母细胞MPF的含量(P<0.01),对cAMP的含量无显著影响(P>0.05);添加RFRP-3可促进GDF9(P<0.01)和BMP15(P<0.05)的表达,抑制CCNB1(P<0.05)和CDK1(P<0.05)的表达;同时试验组培养基中孕酮、雌激素的浓度也极显著下降(P<0.01)。综上,RFRP-3通过调控猪卵母细胞成熟相关因子和卵丘扩展因子的表达以及类固醇激素的分泌,从而抑制卵母细胞的体外成熟。本研究为阐明RFRP-3对哺乳动物卵母细胞的调控作用奠定理论基础。 相似文献
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哺乳动物卵母细胞的体外成熟 总被引:12,自引:0,他引:12
哺乳动物卵母细胞的体外成熟刘红林(南京农业大学动物科技学院,210095)范必勤(江苏省农科院牧医所)1引言哺乳动物卵母细胞移离卵泡环境,在体外能够不依赖激素自发成熟。卵母细胞的成熟过程至少需要经过周围卵丘细胞、卵母细胞核以及核外细胞质等方面的变化。... 相似文献