球根海棠离体培养的形态发生研究

 球根海棠外植体可在同一条件下同时诱导不定芽和胚状体, 经间接途径和直接途径的体细胞胚胎发生频率均很高, 体细胞胚为单细胞起源或多细胞起源。以再生嫩叶为继代中间体, 在较高温度(28 ℃) 下诱导, 可建立高效扩繁体系。纵切芽丛继代形成大量愈伤组织, 愈伤组织继代半年后几乎完全丧失分化能力, 发生激素驯化作用, 而且愈伤组织细胞染色体数目已发生广泛变异。     

染色体加倍对红掌组培快繁特性的影响

以二倍体、三倍体和四倍体‘粉冠军红掌’幼叶为外植体,研究了染色体加倍对红掌组培快繁特性的影响。结果表明:不同倍性红掌的幼叶起始脱分化时间相近,愈伤组织诱导率差异不显著,说明染色体加倍对红掌幼叶脱分化影响不显著;染色体加倍对红掌愈伤组织增殖影响显著,在MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)培养基上,二倍体增殖率最高,四倍体次之,三倍体最低;染色体加倍对红掌愈伤组织芽分化也有显著影响,三倍体的芽分化率显著低于二倍体和四倍体,二倍体、三倍体和四倍体愈伤组织芽分化的适宜外源激素浓度分别为6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 0.2 mg·L~(-1)、6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 0.5 mg·L~(-1)和6-BA 1.0 mg·L~(-1)+KT 0.2 mg·L~(-1);染色体加倍对红掌根分化率和试管苗移栽成活率没有显著影响。上述研究结果表明,染色体加倍对红掌组培快繁效率影响显著,且不同倍性影响不同。     

多倍化兰州百合和细叶百合组培苗再生和耐非生物胁迫能力

以兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)和细叶百合(Lilium pumilum DC.Fisch.)二倍体及其同源多倍体组培苗为试材,比较离体培养不同倍性百合植株再生能力以及抗旱、抗盐碱能力的差异。结果表明:相比于二倍体,四倍体鳞片形成不定芽和体细胞胚的时间显著缩短,且再生苗形态硕大,倍性稳定。非整倍体鳞片再生能力显著降低,产生不具有胚性的愈伤组织。混倍体鳞片再生植株形态差异大,性状不稳定,诱导的体细胞胚逐渐褐化死亡。分别利用PEG-6000模拟干旱胁迫和NaHCO_3模拟盐碱胁迫,四倍体植株保持较好的适应性,二倍体植株则更为敏感。两种百合四倍体植株通过延伸根系长度并维持叶片良好的水分平衡来保持其逆境下的稳定性。     

不同倍性蝴蝶兰杂交后代的染色体倍性研究

 对不同倍性蝴蝶兰小孢子母细胞减数分裂及其杂交后代的根尖染色体数进行了检测。结果表 明,除三倍体和三倍体杂交未能产生杂交后代外,不同倍性蝴蝶兰杂交后代的倍性均出现分离。二倍体和 二倍体、二倍体和四倍体杂交均产生二倍体、三倍体和四倍体;二倍体和三倍体杂交产生二倍体、三倍体、 五倍体和非整倍体;三倍体和四倍体随正反交不同而异,三倍体@四倍体的后代倍性有三倍体、四倍体、 八倍体和非整倍体,而四倍体@三倍体的后代倍性有三倍体、四倍体、五倍体和非整倍体;四倍体和四倍 体杂交产生二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体和非整倍体。不同倍性蝴蝶兰的小孢子母细胞减数 分裂普遍存在微核、落后染色体和三分体等异常现象,导致小孢子和杂种后代的倍性出现多样性。     

大蒜茎尖愈伤组织诱导、植株分化及变异的研究

取0.1—0.2毫米大蒜茎尖接种于含2,4—D:BA一定浓度的MS培养基上,诱导愈伤组织,转移至含NAA:BA组合的MS培养基后,每块愈伤组织平均分化3.5个芽。观测40个根尖染色体压片的清晰视野,其中39个视野中的染色体为32条的四倍体,1个视野为40条的异倍体。     

鄂柿1号离体叶片秋水仙素诱导和再生植株倍性鉴定

以鄂柿1号甜柿离体新梢叶片为外植体,研究了秋水仙素浓度及处理时间对诱导染色体倍性变异的影响。结果表明,0.5%秋水仙素处理4d左右,可诱导获得十二倍体再生植株,低浓度的秋水仙素不能产生加倍效应,高浓度会导致叶片死亡或严重抑制愈伤组织再生能力;与对照比较,再生变异植株叶片气孔孔径增大、密度降低,PA倍性分析叶片DNA含量为对照的2倍。因此,试验获得的倍性变异株初步确认为12倍体。     

花烛不同愈伤组织解剖结构的观察

 以花烛(Anthurium andraeanum ) ‘Jolanba’8种不同培养时期或不同激素处理的愈伤组织为材料, 通过显微观察研究了花烛离体形态发生途径和8种愈伤组织离体形态差异的解剖学特点。结果表明,花烛离体形态发生途径以间接器官(不定芽) 发生为主, 且发生于愈伤组织近表层; 同时也存在体细胞胚途径, 发生于愈伤组织表面或内部。8种愈伤组织在结节( nodule) 的类型、分生细胞的数量及分布等方面存在差异。分生细胞的数量和分布与芽的分化有较好的相关性, 愈伤组织表层分生细胞分布较多, 分化的芽也较多, 而愈伤组织内部分生细胞分布较少, 分化的芽也较少。噻二唑苯基脲( TDZ) 对分生细胞和体细胞胚有较好的诱导作用。愈伤组织的表面划痕和再次切割有利于再生芽的分化。     

葡萄组织培养的现状及展望

通过总结葡萄组织培养近二十年来的研究成果,提出了今后的重点研究领域。早期的微型繁殖和体外病毒脱除(结合热处理)技术已广泛应用于优良品种的快速繁殖,并开始在种质资源的检索保存中发挥作用。胚培养技术已应用于无核品种培育及亚属间杂种的获得。无性植株再生的品种范围近年来有所扩大,再生的频率也大大提高。从花药培养获得单倍体植株至今仅见一例。成功的花粉小孢子细胞分离和培养技术将大大提高单倍体愈伤组织(和单倍体植株)的频率。同源四倍体可以采用体外秋水仙素加倍染色体的方法获得,但这种同源四倍体预料会有目前生产上一般同源四倍体的问题。原生质体培养仍然处于愈伤组织阶段,因此体细胞融合植株尚不能获得。由于缺乏从单细胞再生植株的体系,体外选择和体外诱变目前主要采用低效率的幼枝或幼苗培养的方法。进一步的研究应集中于:从愈伤组织获得高频率的无性植株;单细胞和原生质培养;单倍体及三倍体培养。     

红龙草叶片的组织培养及其植株再生

 建立了红龙草叶片再生体系。叶片外植体在培养基MS + 6-BA 1.0 mg/L + 4-PU 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L上形成浅绿色愈伤组织, 20 d后愈伤组织诱导率达100%。约45.31%的愈伤组织在添加6-BA 1.0 mg/L和NAA 0.4 mg/L的MS培养基上分化出紫红色的不定芽, 约6%的愈伤组织在该培养基上产生出细小叶片和绿色变异幼芽。所产生的紫红色不定芽在1/2MS +NAA 0.4 mg/L的培养基上可全部生根,长成完整植株。再生植株的移栽成活率达85%以上。     

培养三倍体柑桔植株的研究

以柑桔异源四倍体体细胞杂种[哈姆林甜橙（CitrussinensisOsbeckcv．Hamlinsweetorange）＋粗柠檬（C．jambhiriLush　cv．Rough　lemon）]为父本与单胚的二倍体柑桔类型[宜昌橙（C．ichangensisSwingle）与华农本地早（C.reticulataBlancocv．Huanongbendizao）的杂交后代]杂交,通过幼胚早期离体培养,获得了113株再生植株,其中89％为三倍体,并初步筛选出了适宜的幼胚离体培养时间为授粉后80d。     

试管嫁接提高柑桔三倍体组培苗成苗率试验

选育三倍体类型是柑桔育种的热点之一。四倍体与二倍体杂交是获得三倍体的一条有效途径。但三倍体胚有早期败育的现象,为了获得三倍体植株,幼胚须进行早期离体培养。本实验室以异源四倍体柑桔体细胞杂种为父本与二倍体有籽品种或类型杂交,通过幼胚早期离体培养,获得了一批三倍体植株。但是,由于三倍体幼胚离体培养再生的试管苗大部分生长势很弱,生长慢,根发育不良,难以形成完整植株,即使成株,移栽成活率也较低。为了提高三倍体幼胚成苗率及移栽成活率,获得生活力强的三倍体材料,我们进行了试管微嫁接及不同时期移栽的试验。１材…     

基于体细胞胚发生的细叶百合和兰州百合多倍体诱导及鉴定

以细叶百合（Lilium pumilum DC. Fisch.）和兰州百合（Lilium davidii var. unicolor）的鳞片和胚性愈伤组织作为诱导材料,用不同浓度秋水仙素以浸泡和混培两种处理方式进行多倍体诱导。以形态学观测、根尖染色体计数、气孔观测对多倍体植株进行倍性鉴定,分别获得了19株细叶百合四倍体植株和6株兰州百合四倍体植株,最佳处理方式为0.1%秋水仙素浸泡胚性愈伤组织24 h。使用ISSR对经体细胞胚发生的二倍体和多倍体再生植株进行遗传分析,发现两种百合二倍体植株遗传较稳定,而多倍体植株均发生遗传变异,其中细叶百合和兰州百合遗传变异率分别为15.48%和9.75%。     

苹果胚乳植株的营养繁殖和染色体倍性

作者报道大果型苹果金冠、白粉皮和红玉等3个品种幼嫩胚乳培养物分化芽、苗的营养繁殖和生根所需要的条件。实验结果,虽然胚乳愈伤组织的诱导频率很高,但是只有个别的愈伤组织团块分化了芽。通过胚乳苗的营养繁殖和顺利诱导生根,同样获得了许多胚乳植株。 根尖细胞染色体检查表明:金冠、红玉胚乳植株的根尖,是由具有多种染色体数目的细胞组成的嵌合体(金冠常见为37～56个,红玉是32～58个),其中绝大部分为具有35个以上染色体的非整倍体细胞,而3倍体细胞所占比例极少。文中讨论了胚乳植株染色体倍性的不稳定性,并得出结论,试图通过苹果胚乳培养得到3倍体胚乳植株是较困难的。     

柑桔类多倍体育种研究初报

柑桔类多倍体化后,可引起变异。以四倍体来说,可在枝、叶、花、果、种子以至树形等多方面引起一系列变异。通过四倍体与二倍体种交配后,可产生三倍体种,三倍体种有一个很大优点,无核或极少核,这是培育无核种一个很可利用的途径。在正确选好四倍体和二倍体亲本进行配对下,是有可能育成具有高产、优质而种子很少或无核的良种的。柑桔类果实,由于生产的需要,很需要无核种或少核种,并且三倍体种还有较好的生势,有较好的生产作用,故柑桔类的多倍体育种渐为人们所重视。本文就作者在这方面从事柑桔多倍体育种工作,将较好地成功的诱变成四倍体的方法和二倍体柑桔四倍体化后主要经济性状的变异,予以介绍。     

蔬菜作物组织培养对染色体倍性变异的影响

近年来由于植物组织培养工作在理论研究和育种实践中的发展,常常需要检查由不同取材来源培养成植株的染色体倍性,以便有效地为育种服务。 在组织培养中,影响染色体变异的有多种因素。本试验主要通过取材来源和培养时间对染色体变异的影响进行研究。 取材来源对染色体 倍性变异的影响 本试验是以花药愈伤组织和胚状体及侧芽为材料,并将它们经组织培养后形成正常植株进行染色的细胞学观察。 一、花药愈伤组织对染色体倍性变异的影响 对白菜花药培养中产生的新鲜愈伤组织,利用铁矾-苏木精染色法,进行了细胞染色体的观察,观察了愈伤组织的203个…     

柑桔三倍体育种研究(初报)

无籽性是商品柑桔的优良性状,也是我们培育柑桔新品种的主要目标之一。三倍体柑桔能产生无籽果实,并往往具有良好的品质和生活力。因此,人工培育三倍体是获得无籽柑桔的重要手段。目前培育三倍体主要通过四倍体和二倍体杂交,胚乳培养再生,以及从单胚二倍体品种的小种子直接获得自发产生的三倍体。其中以第三种方法简便实用。 我们对若干二倍体柑桔品种的种子数、胚数、小种子出现率及染色体数目作了较系统的研究,并能获得三倍体柑桔植株。本文报道三倍体育种研究的初步结果。     

桃幼胚离体培养再生植株的研究

 以中晚熟桃品种‘京艳’、‘绿化9 号’、‘ 晚蜜’和‘大久保’为试材, 初步建立了桃体细胞胚发生和增殖的三阶段程序, 即胚性愈伤组织诱导、体细胞胚发生和发育、体胚萌发成株以及次级体细胞胚的增殖。各品种体细胞胚的萌发成株率分别为73. 5 %、38. 6 %、5. 4 %和58. 2 %。用苯脲类细胞分裂素TDZ有效诱导‘京艳’的幼胚子叶直接再生植株, 再生率70 % , 平均每外植体不定芽数13. 8 个, 再生不定芽生根后获得完整植株。     

二甲戊乐灵在枣树多倍体诱变中的应用初探

以‘月光’枣为试材,研究除草剂二甲戊乐灵在枣树上的多倍体诱变效果,包括二甲戊乐灵浓度、作用时间、施用时期对愈伤组织形成、芽再生及多倍体诱变的影响等。结果表明:二甲戊乐灵明显抑制了枣愈伤组织生长和芽再生,且随着浓度(0.01%～0.1%)的升高,出愈率和单枝截面出芽数均呈逐渐下降趋势;作用时间(12～48 h)对愈伤组织生长及芽再生能力影响的差异不明显;随着施用时期(6～10 d)的推移,单枝截面出芽数增多,截枝处理10 d后施用二甲戊乐灵的出愈率、单枝截面出芽数均最高;优化后的条件下,即二甲戊乐灵浓度0.025%～0.05%,作用时间24～48 h,施用时期为愈伤组织诱导(施用4.0 mg/L TDZ+2.0 mg/L AgNO_3,12～14 h)6～10 d后,获得了80个再生芽,成功诱变出3个四倍体再生芽;与秋水仙素相比,二甲戊乐灵诱导的出芽时期晚10 d左右,出芽总数较低,但其诱导的芽变异率为3.57%,较秋水仙素诱导的高659.57%。     

‘红江橙’天然多倍体的45S rDNA荧光原位杂交分析

 以实生筛选获得的红江橙三倍体和四倍体植株及其二倍体对照为试验材料,利用荧光原位杂交（Fluorescence In situ hybridization,FISH）技术分析了不同倍性红江橙体细胞染色体上45S rDNA的分布。结果表明,红江橙二倍体体细胞中期染色体中存在3个45S rDNA杂交位点,分别位于第1对染色体的核仁组成区和第8号染色体的整个随体上;三倍体体细胞中期染色体中存在4个杂交位点,其中有三个与二倍体基本相同,另外的一个位于第3号染色体的核仁组成区;四倍体体细胞中期染色体中存在6个杂交位点,分布的位置及区域和信号的强弱均与二倍体基本相同。供试材料体细胞间期核与中期染色体中的杂交信号数及强弱程度基本相似。通过分析,提出红江橙三倍体的形成与2n雌配子的形成有关,伴随有外源基因组的重组;四倍体可能产生于珠心系细胞的直接加倍,并且伴随有染色体的断裂和易位。     

天草杂柑胚乳培养研究初报

柑橘胚乳的离体培养是获得三倍体无籽柑橘的重要途径,关于柑橘胚乳再生植株诱导的培养时有报道,研究表明柑橘胚乳培养存在愈伤组织诱导率较低,愈伤组织分化不定芽困难等现状。本文针对这一现状以天草杂柑为对象进行研究,以期找到提高柑橘胚乳再生植株诱导率的新途径,提高柑橘胚乳培养成功率。