赣南柑橘木虱体内黄龙病菌原噬菌体类型多样性的研究

柑橘黄龙病是柑橘生产中的毁灭性病害,且该病病原菌中存在噬菌体/原噬菌体。原噬菌体序列是该病病原菌基因组动态变化的关键组分,对病原菌种内多样性起重要作用。为探明赣南地区柑橘木虱体内黄龙病菌原噬菌体类型的多样性,利用2对PCR引物对分别采自赣南赣州市、寻乌、于都、定南、瑞金、南康、崇义等7个不同柑橘产区的42头柑橘木虱阳性样品进行PCR检测和测序。结果表明在赣南地区柑橘木虱体内黄龙病菌株系原噬菌体类型的存在划分为4种:单一SC1类型、单一SC2类型、没有噬菌体类型和SC1-SC2噬菌体类型。其中单一的原噬菌体类型(SC1 or SC2)检测率达67%,而2种原噬菌体共存或未检测到噬菌体类型分别占12%、21%。由此可见赣南柑橘木虱体内黄龙病菌株中单一的原噬菌体占一定优势,可能是由于2种原噬菌体在寄主中存在竞争。对赣南柑橘木虱黄龙病菌株中噬菌体/原噬菌体类型检测有助于了解该区菌株噬菌体/原噬菌体的遗传多样性,也有助于进一步的研究分析柑橘木虱的传毒机制。     

噬菌体治疗中的免疫问题探讨

随着抗生素耐药性的快速增长,噬菌体治疗被日益重视和关注,越来越多的科学家和医生开始尝试用噬菌体治疗超级细菌感染。越来越多的噬菌体用于控制动物和人的细菌感染,但对在噬菌体治疗中,噬菌体本身就是免疫原性微生物,作为外源物质进入人或动物机体后,免疫系统是如何反应的仍不清楚,本文拟对噬菌体治疗中涉及的免疫问题进行探讨,进一步阐明噬菌体治疗过程中,噬菌体与免疫系统发生的生理作用、与吞噬细胞之间的互作、噬菌体引起的体液免疫和细胞免疫反应、中和抗体对噬菌体的清除及对噬菌体治疗成效的影响。     

烟草青枯病菌噬菌体分离及其生物学特性研究

【目的】烟草青枯病是我国南方烟区发生普遍而严重的细菌病害,目前尚未有理想的化学防治药剂,筛选青枯病菌噬菌体,为作物青枯病的防治提供噬菌体资源。【方法】从江西省吉安市烟田采集土壤样本,采用双层平板培养分离方法,分离青枯菌噬菌体,进一步比较物理和化学因素对噬菌体活性的影响。【结果】从吉安烟田土壤中分离获得6个青枯菌噬菌体,编号为PTb7-1、PTb1521、PTb1553、P1Tb1556、P2Tb1556和PTb574,其生物学特性存在差异。结果显示,多个噬菌体的最适生长温度约为35℃,致死温度为55～60℃,适宜酸碱度为pH 5～9,且对紫外光、乙醚和氯仿敏感。然而,噬菌体PTb7-1只适合于酸性环境条件下生长繁殖,噬菌体P2Tb1556对紫外光和乙醚不敏感,但对氯仿敏感。【结论】烟草土壤中具有丰富的青枯菌噬菌体资源,是筛选噬菌体的材料来源。6个青枯菌噬菌体生物学特性存在差异,噬菌体P2Tb1556对紫外光和乙醚不敏感,但对氯仿敏感。     

噬菌体与宿主细菌的攻防机制

噬菌体是侵袭细菌的病毒,也是病毒中最普遍、分布最广的类群。为了防止噬菌体侵染,细菌进化出多种多样的防御机制;而为了突破这些防御机制,噬菌体也进化得到了相对应的反制策略。本文即综述了这一领域的研究进展,有助于理解噬菌体与宿主细菌的共存共进化机制,合理利用噬菌体。     

致病性鸡大肠杆菌噬菌体的分离技术

培养菌种A、B、C、Se制成悬液后与污水样品a、b、c共同培养。增殖后将混合培养液离心 ,制备裂解液 ,取上清液过滤除菌后 ,得到较纯噬菌体样品 (噬菌体的培养及分离 )。通过单层平板法鉴定是否有噬菌体的存在 (噬菌体的鉴定 )。用双层平板法纯化噬菌体 ,制成噬菌体制剂 (噬菌体的纯化 )。     

单增李斯特菌溶源性噬菌体的诱导及鉴定

利用丝裂霉素C诱导获得单增李斯特菌溶源性噬菌体,并确定其核酸类型。PCR及其扩增产物的序列测定检测原噬菌体,透射电子显微镜观察丝裂霉素C诱导获得的溶源性噬菌体颗粒,DNase I、RNase A和绿豆核酸酶分别消化噬菌体基因组,确定噬菌体的核酸类型。结果显示,38株单增李斯特菌分离株中的16株在tRNAArg位点携有原噬菌体,其中1株可诱导出噬菌体颗粒,该噬菌体为长尾噬菌体,核酸为dsDNA。噬菌体的成功诱导为噬菌体及其功能基因的开发利用奠定了基础。     

猕猴桃溃疡病菌噬菌体的初步研究

以丁香假单胞菌猕猴桃致病变种为指示菌,从猕猴桃溃疡病病枝中分离到一株噬菌体,对该噬菌体进行了热稳定性、pH值稳定性、紫外线稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线等生物学特性的测定。结果表明:噬菌体的热稳定性较弱,在65℃下10 min内即可全部失活;在pH值4~9的范围内噬菌体均可稳定存在;紫外线下照射12 min,噬菌体几乎全部失活;噬菌体的最佳感染复数为0.1;感染指示菌的潜伏期约60 min,爆发期约70 min,烈解量为123。这是首次关于猕猴桃溃疡病菌噬菌体的报道。     

酸奶生产中的噬菌体污染

利用噬菌斑形成、产酸抑制等方法进行检测,对酸奶工厂存在的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)噬菌体和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)噬菌体进行了初步的研究。结果表明,嗜热链球菌噬菌体为烈性噬菌体,而保加利亚乳杆菌噬菌体为温和噬菌体。     

4种噬菌体对寄主青枯菌的敏感性及作用受体分析

【目的】明确不同噬菌体混合对茄劳尔氏菌(青枯菌)Ralstonia solanacearum裂解能力和对噬菌体抗性产生的影响,了解4种噬菌体的作用受体。【方法】将4种噬菌体P1556-1、P1556-2、P7-1和P1521两两混合后,比较其在青枯菌平板上产生的噬菌斑大小;噬菌体与青枯菌混合培养测定青枯菌对噬菌体的抗性;通过噬菌体与脂多糖和膜蛋白的吸附试验测定噬菌体的作用受体。【结果】噬菌体P1556-1产生的噬菌斑最大,裂解青枯菌的能力强。4种噬菌体两两混合产生的噬菌斑与单一噬菌体产生的噬菌斑大小没有显著差异,但可延缓抗噬菌体的青枯菌产生。噬菌体P1556-2可被青枯菌的脂多糖吸附,P1521能被脂多糖和膜蛋白吸附,而P1556-1和P7-1均不能与脂多糖和膜蛋白作用。【结论】不同噬菌体混合不能提高其裂解青枯菌的能力,但可以延缓抗性青枯菌的产生;不同噬菌体作用受体不同。     

噬菌体抗体库技术在水产养殖中的研究进展

噬菌体抗体库技术是将目的基因克隆到噬菌体的外壳蛋白基因组中,转染宿主菌后,使目的基因编码蛋白和外壳蛋白以融合蛋白的形式表达,呈现在噬菌体表面,通过一系列的筛选获得特异性噬菌体抗体分子.介绍了噬菌体抗体库技术在水产养殖过程中的疾病防控、水环境监测、水产品安全控制以及与抗体芯片结合研究等方面的研究进展.     

大肠杆菌glyA工程菌抗噬菌体菌株选育

[目的]该研究旨在选育具有噬菌体抗性的大肠杆菌菌株。[方法]利用噬菌体诱发及紫外耦合噬菌体诱发筛选大肠杆菌glyA工程菌的抗噬菌体菌株。[结果]从噬菌体诱发筛选到的24株抗性菌株中筛选出了20株具有稳定抗性的抗性菌株,但其中仅有1株生长势优于原始株,酶活均低于原始株;耦合法诱导得到的41株中有39株具有较好的稳定性,其中7株生长势优于原始株,2株酶活大于原始株。[结论]利用紫外耦合噬菌体诱发筛选大肠杆菌glyA工程菌的抗噬菌体菌株能得到较好的试验效果。     

蜂胶对非发酵性豆制品防腐研究

为了研究蜂胶对非发酵性豆制品防腐的效果,寻找安全有效的保鲜剂。以蜂胶对豆制品中的主要腐败细菌的抑菌作用为基础,探讨蜂胶对3株腐败细菌生长曲线的作用阶段的不同。蜂胶对3株菌的最小抑菌浓度是0.4‰。蜂胶对菌株df1的抑制主要表现在0~14 h,即延迟期到对数期;蜂胶对df2株菌的抑制表现为延迟期;蜂胶对df3株菌的抑制时间是0~16 h,即从延迟期到对数生长期。蜂胶对腐败细菌的抑制主要体现在延迟期和对数期。0.4‰蜂胶主要抑制细菌从延迟期到对数期的菌体繁殖。该研究为蜂胶作为防腐剂使用奠定了理论基础。     

载体介导噬菌体入胞及抗胞内寄生菌研究进展

为了解载体介导噬菌体入胞及抗胞内寄生菌的最新研究进展,利用文献综述法检索近年载体介导噬菌体入胞的相关文献,从功能发挥、试验技术及应用前景等方面对可应用于介导噬菌体入胞的载体进行整理讨论。结果表明：1)噬菌体作为一类能够感染和裂解细菌的病毒,其天然存在的抗菌特性使其作为抗生素替代物的研究广泛存在,但其靶向胞内寄生菌的基础研究主要集中在国外,国内鲜有报道。2)与游离噬菌体相比,以无机纳米微粒、脂质体等作为载体介导噬菌体入胞,能够防止噬菌体被宿主免疫系统清除和免受细胞内环境影响。3)脂质体因其作为载体可有效提高噬菌体入胞效率及杀菌效率,现已成为研究最广泛的噬菌体入胞载体之一。因此,本文综述近年来国内外关于载体介导噬菌体入胞及抗胞内寄生菌研究进展,详细阐述不同介导噬菌体入胞的载体特性、入胞机制以及如何提高入胞效率等方面的最新研究,并针对目前存在的问题和发展前景进行展望,以期为更有效地利用载体投递系统高效投递噬菌体解决细胞内细菌感染的实际问题提供参考与理论支撑。     

Replication of the RNA of Bacteriophage f2

Events occurring after infection of bacteria with wild-type and a temperature-sensitive mutant phage indicate that there are two enzymatic activities necessary to replicate phage RNA. One converts single strands into double strands, while the other uses double strands to svnthesize viral RNA. The mutant is deficient in the first activity, probably because the mutation is in the gene specifying the requisite enzyme. On the basis of these and other results, a model is presented for the replication of phage RNA.     

STREPTOMYCIN AS AN ANTIVIRAL AGENT: MODE OF ACTION

In host bacteria resistant to the antibiotic, streptomycin inhibits phage replication by inhibiting the process of injection. This effect is competitively reversed by certain divalent cations, polyamines, and streptidine. It is proposed that streptomycin inhibits injection by attaching to the phage DNA while it is still folded within the phage head, and in this way it prevents the unfolding which is essential for the injection process. The reversal agents probably function by displacing the antibiotic from the phage, but they also promote injection themselves.     

湖北省水稻细菌性条斑病菌与噬菌体互作关系的研究

通过对细菌夺冠滤器过滤，氯仿处理以及用稻细条病病叶组织浸提液直接分离噬菌体等方法的比较，结果表明：三者中相比之下，细菌过滤器过滤法是最为简便可靠的噬菌体分离方法，通过对湖北省10个水稻细菌性条斑病菌与20个噬菌体互作反应的研究表明：不同来源的细条病菌与不同来源的噬菌体之间，存在着亲和性的分化，根据它们相互的亲和关系，可把10个细条病菌菌株划分为6个组，把20个噬菌体划分为7个溶菌型；其中RP、RS、RT、RX、RY等5个细条病菌菌株可与所有参试的20个噬菌体发生亲和反应，据此在用噬菌体技术进行湖北省水稻细菌性条斑病的测报工作中，友谊赛些广亲和性的菌株可逡为指示菌。     

A bacteriophage specific for F- Salmonella strains

A bacteriophage is described which grows on recipient (F-) and not on donor ( Hfr, F+, or F') salmonella. The reason for this differential is unknown, since the phage attaches to all mating types, but progeny ensue only from female bacteria. Purification of this phage has been accomplished. A procedure is described for quantitatively determining either the acquisition or loss of the F agent by bacteria.     

Cell Lysis: Another Function of the Coat Protein of the Bacteriophage f2

Evidence is presented that the coat protein of bacteriophage f2 causes the lysis of infected Escherichia coli. To lyse bacteria, the coat protein produced must be of the quality to produce phage particles, although it need not be produced in amounts sufficient to give a large yield of particles. Mutants that are blocked in coat-protein synthesis, or that direct the synthesis of an imperfect coat protein, do not lyse their host bacteria. In addition to its obvious structural role and its postulated regulatory role, another, perhaps enzymatic, role has been found for the coat protein of the phage f2.     

苏芸金杆菌溶原性菌株的分离鉴定

把保藏的11株苏芸金杆菌分成两个试验菌株组,采用分群混合双层分离到4株带噬菌体的菌株 B_1,B_2,B_4,B_5,并对其溶原性做了初步观察。经单菌落传代,加热处理芽孢以消除游离噬菌体,4个菌株皆继续释放噬菌体,且对本身释放的噬菌体具免疫性,由以上特点可以确定这4个带噬菌体菌株都是溶原性菌株。应用紫外线或丝裂霉素 C 对 B_4,B_5 进行产生噬菌体的诱导效应试验,B_5 有明显的诱导效应,而 B_4 经诱导后噬菌体释放量增加不多。     

噬菌体及其内溶素的应用研究进展

抗生素的滥用使越来越多的病原菌产生抗药性,因此寻求新的抗菌素已经变得极为迫切。噬菌体以及噬菌体编码的内溶素的发现和应用,为耐药性细菌的治疗和预防开辟了新的途径。文章综述了近几年噬菌体和内溶素的研究进展及其应用。